家蚕腸液蛋白酶和血液H_2O_2酶活性的品种间差异

自八十年代起,浙江省逐步推广了数对新蚕品种,对增加蚕茧产量,提高茧丝质量起了积极作用。然而,对这些新蚕品种体内各种酶的活性,未曾作过调查。为此,本试验试图通过家蚕肠液蛋白酶和血液H_2O_2酶活性的测定,探明各蚕品种间存在的差异,为     

镉胁迫下裸燕麦幼苗对外源H_2O_2的生理响应

镉(Cd)是生物毒性最强的污染物之一,为探讨外源信号分子H_2O_2对Cd胁迫下裸燕麦生理响应的调节作用,采用珍珠岩栽培,以裸燕麦品种"定莜6号"为材料。试验设4个处理:1)叶面喷施蒸馏水,根部浇灌营养液(对照);2)叶面喷施5 mmol·L~(-1) H_2O_2溶液,根部浇灌营养液;3)叶面喷施蒸馏水,根部浇灌含有50 mg·L~(-1) Cd~(2+)的营养液;4)叶面喷施5 mmol·L~(-1) H_2O_2溶液,根部浇灌含有50 mg·L~(-1) Cd~(2+)的营养液。研究外源H_2O_2对Cd胁迫下裸燕麦幼苗生长、活性氧代谢、光合参数和碳同化关键酶活性的影响。结果表明:喷施H_2O_2显著缓解了Cd胁迫下裸燕麦幼苗根长、株高、鲜重和干重的下降程度,降低了Cd胁迫下裸燕麦幼苗叶片中超氧阴离子、H_2O_2、丙二醛和抗坏血酸含量及过氧化氢酶活性,提高了超氧化物歧化酶和抗坏血酸过氧化物酶活性及谷胱甘肽、类黄酮、总酚和原花青素含量,而对过氧化物酶活性的影响不大。另外,喷施H_2O_2对Cd胁迫下裸燕麦叶片中叶绿素a、叶绿素b含量及叶绿素a/b、气孔导度和蒸腾速率无显著影响,但提高了类胡萝卜素含量、净光合速率及核酮糖1, 5-二磷酸羧化酶、景天庚酮糖1, 7-二磷酸酯酶和果糖1, 6-二磷酸醛缩酶和转酮醇酶活性,降低了胞间CO_2浓度。上述结果表明,外源H_2O_2能够通过调控活性氧清除系统降低Cd胁迫诱导的氧化损伤,并提高碳同化关键酶活性,减轻Cd胁迫对光合作用的抑制,从而缓解Cd对裸燕麦幼苗生长的抑制,增强裸燕麦对Cd胁迫的耐性。     

不同生育期多年生黑麦草光合作用与H_2O_2含量的关系

为了研究不同品种黑麦草在生长发育过程中光合作用的变化规律,本试验利用Li-6400光合仪测定多年生黑麦草(Lolium Perenne L.)钻石(Dimond)、卓越(Eminent)、百盛(Bison)、多福(Tove)在孕穗期、初花期和盛花期光合特性,并同期测定H_2O_2含量。结果表明,多年生黑麦草在盛花期净光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)、气孔导度(Gs)、胞间CO_2浓度(Ci)显著低于孕穗期(P0.05)。孕穗期的Pn、Gs、Ci显著低于初花期(P0.05)。H_2O_2含量在不同花期也存在显著差异(P0.05),其中品种百盛初花期比孕穗期H_2O_2含量升高了34.13%,盛花期比孕穗期H_2O_2含量升高了48.92%,盛花期比初花期H_2O_2含量升高了11.03%。通过相关性分析发现,黑麦草孕穗期H_2O_2含量与Gs呈显著正相关(r=0.650,P0.05),与Tr呈极显著正相关(r=0.860,P0.01),与Ci呈极显著正相关(r=0.740,P0.01);初花期H_2O_2含量与Tr呈显著正相关(r=0.570,P0.05),与Pn呈极显著正相关(r=0.810,P0.01);盛花期H_2O_2含量与Ci呈显著负相关(r=-0.490,P0.05)。多年生黑麦草光合作用与氧化胁迫呈正比。     

牛死精中芳香族L-氨基酸氧化酶的位置与公牛间按照氧化酶活性确定死精的百分比差异

牛死精中大部分(94％)芳香族L-氨基酸氧化酶活性发现于牛精尾部制剂中。该酶柠是从浸于檬酸钠溶液的精子中释放出来,而不是在磷酸钠或氯化钠溶液中释放出来,在磷酸钠溶液或柠檬酸钠溶液中,该酶的活性没有明显差异(9.6微升O_2/小时和11.2微升O_2/小时),射出的精子活性与死亡精子百分率呈显著相关(r=0.954,P<0.01)。但在刚采集的新鲜附睾精子中没有发现这种关系。然而死亡的附睾精子表明,其氧化酶活性(10.1微升O_2/小时)与死亡的射出精子活性(9.2微升O_2/小时)相似。总之,精子死亡发生在壶腹部或在射精时,或者两者并而有之。同时公牛间死精百分率的差异是公牛间壶腹部状况在射精时体况或者两者中任何一种差异的结果。     

猪的单核细胞和多形核白细胞产生的过氧化氢:包括应用Phorbol-My-ryslate-Acetate(PMA)试剂对其快速测定法

单核细胞(MN)和多形核白细胞(PMN)一类的吞噬细胞同许多种细菌、颗粒等刺激物接触时,均能释放出过氧化氢(H_2O_2)。据此,从所产生的 H_2O_2活性可判断猪的抵抗力。本研究的目的是,寻求一种测定 H_2O_2活性的快速方法,并探明产生 H_2O_2的潜力与抵抗力间的关系。首先,作者检查了包括由 MN 和 PMN产生 H_2O_2的能力和条件;其次,作者检查了血沉中棕黄色层的白细胞为产生 H_2O_2所需要     

家蚕血液、消化液中酸性核糖核酸酶和天冬酰胺酶活性的初步研究

测定了家蚕夏芳、长灰A和大造各品种血液、消化液中酸性核糖核酸酶及家蚕秋白、夏芳、长灰A和大造各品种天冬酰胺酶性变化。结果表明：各品种血液、消化液中酸性核糖核酸酶、天冬酰胺酶活性变化随发育呈现较强的规律性，血液中，4龄第3d、5龄第3d这两种酶均出现峰值，4龄眠前活性较低，消化液中，5龄第3d这两种酶活性均较高，不同品种这两种酶活性峰值出现时间有差异；各品种血液中酸性核糖核酸酶、天冬酰胺酶性均明显高于相应品种消化液中这两种酶活性；各品种之间血液、消化液中这两种酶活性有明显差异。     

磁处理对微粒子感染家蚕过氧化氢代谢的影响

<正>家蚕微粒子病是严重危害家蚕的主要病害之一,其病原体是一种原生动物(Nosemabombycis).近年来人们开始重视微粒子(Nb)感染对家蚕生理生化的影响,如对肠液蛋白酶活性、中肠碱性磷酸酶活性和血淋巴蛋白质含量的影响等等.大量研究表明,活性氧尤其是H_2O_2参与了生物体多种疾病的致病过程,清除活性氧的超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)等活性与生物抗病、抗逆能力密切相关.前文结果表明,家蚕H_2O_2的代谢随着其生长发育呈现了规律性变化.已有研究结果表明,适当强度、适     

钩吻素子对H_2O_2诱导的IPEC-J2细胞氧化应激和凋亡的影响

目的:探讨钩吻素子(koumine)对H_2O_2诱导的猪肠道上皮细胞(IPEC-J2)损伤的保护作用及其机制。方法:通过MTT法检测koumine对IPEC-J2细胞增殖的影响,并用H_2O_2诱导IPEC-J2细胞建立细胞损伤模型,通过MTT和LDH比色法检测分析koumine保护IPEC-J2细胞免受H_2O_2损伤的效果;生化方法检测丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性;蛋白免疫印迹(western blot)技术检测凋亡相关蛋白bax和bcl-2的表达情况;用流式细胞仪检测氧自由基(ROS)释放量和细胞凋亡率。结果:检测浓度范围内koumine对IPEC-J2细胞没有毒性;koumine可以通过调控IPEC-J2细胞中SOD活性、LDH漏出率、MDA水平和ROS的产生,保护H_2O_2对IPEC-J2细胞的氧化损伤,抑制H_2O_2引起的IPEC-J2细胞凋亡;koumine在抑制H_2O_2引起的细胞凋亡过程中,减少了促凋亡蛋白Bax表达,增加了抑凋亡蛋白Bcl-2表达,使得Bax/Bcl-2的比值在药物作用时随剂量的增加逐渐降低。结论:koumine能够保护IPEC-J2细胞对抗H_2O_2诱导的氧化损伤,具有一定的时间和剂量依赖关系,其作用机制与抑制细胞凋亡有关。     

家蚕SOD的品种间差异研究

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳和酶活性染色，分析了115个家蚕品种及遗传系统的血液SOD同工酶的酶谱。结果：不同品种及遗传系统间的酶谱存在着显差异。家蚕血液SOD在大部分供试品种及遗传系统中都能看到5条酶带，少数只能见到2条弱带，酶带最多达8条。品种及遗传系统间酶带的宽度及染色程度亦存在着明显的差异。     

草原红牛血液酶活性与生产性能相关及回归分析

酶是机体细胞内外物质代谢和能量代谢的重要催化剂,可反映体内代谢水平和动物的遗传特性.由于动物在品种、性别、生长阶段、生理状态和群体间的酶学指标上存在差异,通过研究血液酶活性与家畜生产状能的关系,希望找到能预测生产性能的生化指标.     

家蚕消化液蛋白质分解酶活性及同功酶的研究

试验采用Casein-Folin和SDS-PAGE方法对49个家蚕品种的幼虫消化液蛋白质分解酶活性和同功酶进行了研究,结果:(1)蛋白质分解酶的活性在中国系统、日本系统、殴洲系统之间差异不显著,品种间则差异显著。(2)蛋白质分解酶的同功酶酶谱在系统间有差异,各品种具有不同特征的酶谱。(3)F_1的蛋白质分解酶的活性量为两亲本的平均值,且杂种F_1的酶带其两亲本的酶带均具有。(4)品种间蛋白质分解酶的活性与同功酶酶谱表现有一致的倾向。     

利用乳过氧化氢酶体系保鲜生牛乳的试验研究

正牛奶中的天然抗菌活性体系——乳过氧化物酶体系的抗菌活性主要是以乳过氧化物酶(LP)作为催化剂,通过H_2O_2氧化SCN~-生成具有抗菌活性的OSCN~-,以激活本身的过氧化物酶形成天然的抗菌活性体系,从而达到抗菌目的。虽然牛乳中也含有少-     

氟化物对不同抗性家蚕品种的GST和AChE酶活性影响及雌雄个体间的酶活性差异

为了探明家蚕的耐氟性机制以及耐氟性在不同性别蚕体间的差异,以家蚕耐氟品种T6和氟化物敏感品种734为材料,自5龄起蚕开始分雌雄喂食清水和200 mg/kg NaF溶液浸泡后的桑叶,检测幼虫中肠谷胱甘肽-S-转移酶(GST)和头部乙酰胆碱酯酶(AChE)的活性变化。添食氟化物后耐氟和敏感家蚕品种5龄幼虫中肠的GST活力随添氟时间的变化趋势与对照组比较一致,且与对照组相比酶活性均呈增高趋势;敏感品种734添氟组5龄雌蚕的GST平均活力为雄蚕的1.486倍,耐氟品种T6添氟组5龄雌蚕的GST平均活力为雄蚕的1.529倍。敏感品种734对照组5龄幼虫在试验第3天头部的AChE酶活性显著升高,但添氟组雄蚕在试验第2天AChE酶活性即显著升高,而雌蚕的AChE酶活性在整个5龄试验期均呈平缓下降趋势;耐氟品种T6添氟组5龄雌、雄幼虫的AChE活力与对照组差异不大,酶活力随添氟时间的变化趋势也与对照组较为一致,均在第3天出现最低值;2个品种添氟组AChE酶活性的性别差异与GST相反,即雄蚕的AChE平均活力大于雌蚕。推测氟化物处理后耐氟家蚕品种仍然能够保持AChE酶活性水平,从而呈现对氟化物的耐受性;2种类型解毒酶活力在雌雄家蚕间的差异可能暗示同一品种雄蚕的耐氟能力较多涉及靶标抗性,而雌蚕的耐氟能力较多依赖于代谢抗性。     

奶牛乳清H_2O_2水平的检测及意义评价

为了探索奶牛乳清H_2O_2水平及其意义,在南宁市某奶牛场随机选取122头泌乳奶牛分4次采集乳样,记录奶牛临床健康情况、检测乳汁体细胞数(SCC),分离乳清并检测H_2O_2含量,分析乳清H_2O_2含量与奶牛疾病、乳品质量的关系。结果显示:疾病组奶牛乳清H_2O_2平均含量显著高于健康组奶牛(P0.05);乳汁SCC与乳清H_2O_2含量极显著正相关(r=0.729,P0.001);乳优组乳清H_2O_2含量显著低于乳差组(P0.05)。提示:乳清H_2O_2可作为判断乳品质量和临床检测奶牛乳房炎等疾病辅助诊断指标。     

影响家蚕中肠碱性磷酸酶活性的若干因素

研究了影响家蚕中肠碱性磷酸酶活性的若干因素,在供试的蚕品种间,酶的活性差异显著,且与茧质成绩呈正相关;NPV与CPV对中肠碱性磷酸酶活性的影响不同,即CPV感染明显降低了此酶的活性,而NPV则无其影响;苏云金杆菌感染直接破坏中肠组织,引起酶活性的陡降;各种化学物质中以Mg2+对中肠碱性磷酸酶的激活作用最明显,体外条件下维生素C,Ca2-,柠檬酸,Cl-对酶有抑制作用。     

外源H_2O_2活化家蚕滞育性卵的研究

为进一步探讨H_2O_2与家蚕滞育的关系,研究了外源H_2O_2 活化家蚕滞育性卵的处理方法。发现H_2O_2 的浓度、处理时期和处理时间对活化效果有重要影响,提出了产于连纸的家蚕滞育性卵在产后2 4h(2 5℃)用6 %H_2O_2于4 7℃下处理30min可有效活化家蚕滞育性卵,孵化率达到96 % ;盐酸处理可有效活化经H_2O_2处理不能孵化的滞育性蚕种,表明盐酸和H_2O_2在活化家蚕滞育性卵上有协同作用。     

离体干旱胁迫下三种紫花苜蓿相关生理指标的测定

在离体干旱胁迫下,以3 个紫花苜蓿品种叶片为材料,测定了叶片相对含水量、过氧化氢酶、过氧化物酶和超氧化物歧化酶活性4个生理指标,并说明它们与抗旱性的关系。结果表明:(1)抗旱能力由强到弱分别为Prime、陇东苜蓿和河西苜蓿;(2)离体72 h叶片的相对保水率可以简便地反应苜蓿品种间抗旱性强弱;(3)CAT和SOD活性在离体72 h时间内,均呈现一致的下降趋势,POD活性的变化规律与CAT和SOD不同,72 h品种间3种酶活性存在显著性差异(P<0.05),0~72 h 酶活性的存有率可以反应苜蓿的抗旱性强弱,酶活性存有率高,抗旱性强,反之则弱。     

H_2O_2对流行性乙型脑炎的灭活效果研究

流行性乙型脑炎是由日本脑炎病毒引起的,在自然界中主要以猪为宿主,经蚊为主的虫媒传播的一种人兽共患的嗜神经性急性传染病。疫苗免疫是防控易感猪群乙型脑炎的主要措施,但国内尚无商品化猪流行性乙型脑炎灭活疫苗。灭活剂是影响灭活疫苗效果一个重要因素,研究通过先观察过氧化氢酶催化分解H_2O_2的效果,然后利用TCID_(50)方法结合PT-PCR方法检测H_2O_2对JEV灭活效果。结果显示当过氧化氢酶终浓度达到400 U/mL时,能够将3%H_2O_2分解完全3%H_2O_2灭活JEV 4 h能够灭活完全为以后评价JEV灭活苗的免疫效果提供数据支撑。     

微粒子感染对家蚕过氧化氢代谢的影响

本文探讨了100万N.b/(mm)~3感染五龄起蚕对家蚕过氧化氢代谢的影响,结果表明:①N.b感染后H_2O_2:水平后期显著增加,SOD活性差异不显著,CAT活性显著升高;②硒处理组添食N.b后H_2O_2水平与单纯添食N.b相似,SOD活性在第5、第7天显著升高,CAT活性第2、4、5天显著增加;③磁处理组添食N.b后与单纯添食N.b相比,H_2O_2含量初期显著升高,但从第5天开始显著降低而与对照接近,SOD活性初期显著降低,中后期与单纯N.b处理接近,CAT活性第6、7、9三天显著下降.N.b感染对家蚕H_2O_22代谢的最显著影响是CAT活性上升.     

非依赖硒型谷胱甘肽过氧化物酶的测定

谷胱甘肽过氧化物酶是机体的重要抗氧化酶,按其组成可分为依硒型谷胱甘肽过氧化物酶(Se—GSH—Px)和非依赖硒型谷胱甘肽过氧化物酶(Non Se—GSHPx)之分。两型酶催化作用的一个重要区别在于对过氧化物有特殊的选择性。以过氧化氢(H_2O_2)为底物时可催化