冬凌草试管苗茎尖玻璃化法超低温保存及植株再生研究

对冬凌草[Rabdosia rubescens(Hemsl.)Hara.]试管苗茎尖进行了玻璃化法超低温保存及植株再生研究。结果表明:1～2cm嫩梢在培养基MS+0.5mol/L蔗糖上培养3d,切取2～3mm茎尖,室温(20℃)下装载液(60%PVS2)过渡30min,0℃下玻璃化液(PVS2)处理45min,投入液氮保存1d后,40℃水浴化冻,1.2mol/L蔗糖的MS培养基洗涤20min,接种于6-BA0.8mg/L、IAA0.05mg/L的MS培养基上,暗处理1周后转到正常光下,成活率达到86%,再生植株生长和分化正常。     

枣子叶再生植株研究

以枣树‘雄性不育3号’未成熟胚的子叶为材料,建立了枣子叶再生植株体系。子叶愈伤诱导培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂3.3 g/L,愈伤诱导率达到40%。从愈伤组织诱导不定芽的培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂3.3 g/L+TDZ 1.5 mg/L,不定芽发生率为88.9%,不定芽数量与愈伤数量之比为3.5。生根培养基为MS+蔗糖30 g/L+琼脂3.0 g/L+IBA 1.0 mg/L,生根率达到33.3%。此外,培养温度显著影响玻璃化苗的生长。在24℃条件下培养30 d,仅有9.7%的玻璃化苗向正常植株转化,而在20℃培养条件下的玻璃化率仅为6.7%。附加30~80 g/L蔗糖的不同培养基上,玻璃化苗向正常苗转化情况无显著差异。     

提高花椰菜游离小孢子胚胎植株再生率研究

以花椰菜小孢子球型胚胎为供试材料,进行提高球型胚胎植株再生率研究。结果表明:球型胚胎成活率与胚胎的日龄、培养基的水分状况和添加活性炭有关。20 d的球型胚胎转移到MS+6-BA 0.5 mg/L+NAA 1.0 mg/L+琼脂7 g/L+活性炭100 mg/L时,胚胎成活并形成愈伤组织的频率最高。激素组合6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.1 mg/L最适宜花椰菜胚胎愈伤组织分化出再生植株,分化率达到100%,平均每块愈伤组织胚芽分化数量达到6.52个。     

花椰菜再生体系的优化

以子叶和上胚轴为外植体,研究了不同激素浓度下花椰菜离体培养的再生体系.结果表明,上胚轴作为外植体时不定芽分化率较高,在不加IAA或添加0.5 mg/L IAA的培养基上均能达到100%,最佳诱导培养基为MS+1.0 mg/L 6-BA+0.5 mg/L IAA.子叶作为外植体时不定芽分化率低,最高为40%.     

大豆顶芽和子叶节组织培养再生成苗的研究

以大豆品种小黑豆的顶芽作外植体,研究了激素、基本培养基对愈伤组织诱导及植株再生的影响.B_5+2,4-D0.5mg/L+KT0.1mg/L 作诱导培养基,愈伤组织诱导率达92.4%;愈伤组织在 MS+6-BA1mg/L+KT0.5mg/L+ZT0.5mg/L 的培养基上,分化频率47.2%.以子叶节为外植体,通过附加外源的6-BA 刺激子叶节处潜在的分生细胞,使其不断分裂,结果子叶节膨大增粗.切下子叶节培养,结果每个子叶节最高能分化出11棵正常的苗.     

花椰菜种株的组培快繁技术探讨

以花椰菜雄性不育系的种株为材料,进行组培快繁技术研究,建立花椰菜种株组培快繁技术体系.试验结果表明：花椰菜的薹茎段是母株组培快繁的理想外植株,其不定芽分化率高达90％;适宜不定芽分化的培养基为MS＋6-BA 2 mg/L＋ NAA 0.1 mg/L;再生植株通过田间生产鉴定与实生母株相比,植株性状、花球性状、育性等都表现完全一致.     

花椰菜高效再生体系建立及农杆菌介导的遗传转化研究

以栽培品种"银峰80天"的下胚轴与子叶为外植体,建立花椰菜高效组织再生体系,并研究卡那霉素浓度、侵染时间和共培养时间等因素对花椰菜愈伤组织分化的影响。结果表明:以MS+TDZ 0.2 mg/L+NAA0.1mg/L作为分化培养基时,下胚轴的分化频率达88.9%,子叶的分化频率达97.6%;农杆菌介导花椰菜遗传转化时,OD600=0.4,下胚轴和子叶的侵染时间为1 min,下胚轴和子叶分别共培养1 d和3 d后进行筛选,有利于花椰菜再生芽的分化获得抗性苗。     

培养基对当归愈伤组织的诱导及分化影响研究

以当归种子为材料,研究激素组合、培养基对当归愈伤组织的诱导及植株再生的影响。结果表明:适宜当归愈伤组织的诱导培养基为H+0.5 mg/L 2,4-D,出愈率达到97.92%。继代增殖最佳培养基为H+0.5 mg/L2,4-D+1.0 mg/L IAA。诱导丛生芽的最佳培养基为1/2MS+0.5 mg/L 6-BA+1.0 mg/L NAA+0.5 mg/L ZT,最高诱导率为90.3%。适合无根苗生根的培养基为1/2MS+0.5 mg/L IAA,生根率达35.5%。     

西瓜试管玻璃苗的成因及防止

试管苗玻璃化现象是西瓜基因转化过程中试管苗继代培养的一大障碍。采用白炽灯光源,在2000～4000lx光照强度下光照12～14h,在培养基中提高糖和琼脂的浓度,添加适量的钙离子,细胞分裂素6-BA含量不超过6mg/L,生长素IAA用量控制在0.5mg/L,对克服西瓜试管苗玻璃化现象有明显的效果。     

英国薰衣草叶片再生体系的建立

为开展薰衣草转基因研究工作,本试验以英国薰衣草（Lavandula angustifolia Mill.）为材料,建立了以叶片为外植体的不定芽再生体系.研究了叶片消毒时间、生理状态、不同浓度6-BA 0.5,1.0,1.5,2.0 mg/L和不同浓度IAA 0,0.5,1.0 mg/L等因素对叶片再生的影响,结果表明：以顶部成熟叶片为外植体,经0.1%升汞消毒2 min后置于分化培养基1/3MS ＋6-BA 1.0 mg/L上,15 d后芽分化率达80.0%以上.待小芽长至1～2 cm后将其转到1/2MS ＋IAA1.0 mg/L培养基上生根,得到完整再生植株.