甲霜灵对烟草黑胫病菌细胞膜透性的影响

为阐明烟草黑胫病菌抗甲霜灵的生理机制,研究了不同浓度甲霜灵处理540 min内敏感、低抗和高抗菌株相对渗率的变化情况,结果表明:甲霜灵能损害烟草黑胫病菌的细胞膜,使膜透性不断增大;其对敏感菌株ZC002和低抗菌株10M-006细胞膜透性的影响速度和程度比较接近,都随处理浓度(0.1~100.0 μg/mL)的提高而不断增加;对高抗菌株10M-004细胞膜透性的影响速度最慢,程度最低,且随处理浓度(50.0~100.0 μg/mL)的提高而增加。高抗菌株适应甲霜灵的能力明显强于敏感菌株和低抗菌株,该适应能力随甲霜灵浓度的提高而减弱。     

烟草黑胫病菌抗甲霜灵突变体的诱导及其适合度研究

室内离体条件下采用药剂诱导法,获得了11个烟草黑胫病菌抗甲霜灵突变体;检测了所有抗药突变体的抗药稳定性及抗性水平;比较了3个低抗和1个高抗突变体的适合度。结果表明:在2~20 μg/mL范围内,抗药突变体的发生频率随甲霜灵诱导浓度的增加而提高;所有抗药突变体的抗药性都能稳定遗传;11个抗药突变体中,10个为低抗突变体(抗性水平3.55~13.9倍,平均8.60倍),1个为高抗突变体(抗性水平510倍);低抗菌株20M-001、10M-003、10M-006和高抗菌株10M-004的适合度指数分别为0.56、0.38、0.38和0.87;抗药突变体的适合度指数与抗性水平不相关。     

贵州省烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的敏感性

为了明确烟草黑胫病菌对烯酰吗啉的敏感性现状,从贵州省各地采集了47株烟草黑胫病菌株,分别测定了菌丝生长和游动孢子囊形成对烯酰吗啉的敏感性.结果表明,烯酰吗啉对烟草黑胫病菌菌丝生长和孢子囊形成的抑制基本一致,对菌丝EC50范围为0.792 6～4.232 7μg/mL,平均为2.476 8μg/mL;对孢子囊的抑制作用略强,EC50范围为0.394 5～4.625 3μg/mL,平均值为2.040 0 μg/mL.统计分析表明,烟草黑胫病菌47个菌株菌丝生长和孢子萌发对烯酰吗啉的敏感性符合正态分布,不同菌株对烯酰吗啉的敏感性有显著差异,而且菌株对烯酰吗啉的敏感性与其地理来源有一定的相关性.     

烟草黑胫病菌培养特性的研究

研究了云南烟草黑胫病菌在不同培养基、不同温度的生长情况及不同菌龄与不同诱导时间孢子囊的产生数量。结果表明,菌株在8种供试培养基中,以燕麦培养基和选择性培养基上菌落生长最好,其次为胡萝卜培养基,在番茄汁和马铃薯培养基上生长最差。同一菌株在不同培养基上产孢量不同、产生的孢子囊大小亦有所不同。05P226菌株在玉米培养基上产孢量最高;05P55菌株在燕麦培养基上产孢量最高,在番茄汁培养基上产生的孢子囊最大,而05P62菌株在燕麦培养基上产孢量最高,在烟叶汁培养基上产生的孢子囊最大。在30℃菌丝生长速率最高,其次为28℃,以35℃生长最差。供试3个菌株间生长差异显著,以05P226生长最好,05P55菌株次之,05P62生长最差。05P226、05P55菌株皆以培养14d、诱导72h产孢量最高,最适宜试验中产孢培养。     

烟草黑胫病菌对三种内吸性杀菌剂的敏感性测定

采用菌落生长速率法测定了2005年从云南、贵州、山东烟区病株上分离到的38个烟草黑胫病菌Phytophthora nicotianae var.nicotianae菌株对三种内吸性杀菌剂的敏感性。结果表明:甲霜灵、霜脲氰和乙膦铝对38个菌株的EC50值均呈单峰频次分布,分别分布在0.0867～1.6781、24.042～62.663和60.468～239.51μg/mL之间,均值分别为0.2991±0.0842、35.891±2.7823和105.73±11.154μg/mL;烟草黑胫病菌对甲霜灵、霜脲氰和乙膦铝的敏感性高,未出现敏感性下降的抗药性亚群体。敏感性频次分析结果表明:甲霜灵、霜脲氰和乙膦铝分别对组成连续单峰频次分布的34、37、37个菌株的EC50均值为0.2389±0.0292、35.167±2.4317、102.11±8.6497μg/mL,可分别作为烟草黑胫病菌对甲霜灵、霜脲氰和乙膦铝的敏感性基线。     

贵州省烟草黑胫病菌遗传多样性分析

运用RAPD分子标记技术分析了采自贵州各个地区的38个烟草黑胫病菌株的遗传多样性,探索了贵州省主要烟草种植区间的烟草黑胫病病菌的遗传分化关系.结果表明,受试38个菌株共产生65条谱带.其中多态性为59条,占90.7％.说明贵州省主要烟草种植区的烟草黑胫病病菌具有丰富的遗传多样性,不同地点烟草黑胫病病菌的遗传结构之间都有一定的差异.根据引物扩增的指纹图谱,运用UPGMA分析法,以遗传相似系数0.74,将供试38个菌株划分为9个基因型,发现除少数地区的菌株被划分为同一基因型外,其他不同地理区域的菌株基因型的划分与地理来源没有直接的相关性.     

烯酰吗啉对我国烟草黑胫病菌的毒力研究

从山东和云南烟区采集分离了20个烟草黑胫病菌Phytophthora parasitica var. nicotianae菌株,采用菌丝生长速率法测定了烯酰吗啉对这些菌株的毒力。结果表明:20个田间菌 株的EC50值在0.60~1.28 μg/mL之间,与实验室保存的敏感菌株(S)的EC50 值(0.32 μg/mL) 相比,毒力倍数在1.87~4.00之间,均属于敏感菌株。烯酰吗啉对烟草黑胫病菌孢子囊的产生有明显的抑制作用,8.00 μg/mL的烯酰吗啉对孢子囊产生的抑制率为100％。通过烯酰吗啉对烟草黑胫病菌继代培养物的毒力比较证明,烟草黑胫病菌对烯酰吗啉存在抗性风险。     

烟草黑胫病菌对农田草本植物的寄主范围

烟草黑胫病是烟草生产中的重要病害,对烟草的产量和质量均影响极大[1-2]。烟草黑胫病菌Phytophthora nicotianae var.nicotianae（Breda deHaan）Tucker是引起烟草黑胫病的唯一病原菌,以往的研究均认为,     

烟草黑胫病菌对两种保护性杀菌剂的敏感性测定

采用菌落生长速率法测定了2005年从云南、贵州、山东烟区病株上分离到的38个烟草黑胫病菌Phytophthora nicotianae Breda de haan var.nicotianae Waterhouse 菌株对两种保护性杀菌剂的敏感性。结果表明:百菌清(B)对各参试菌株的EC50值在2.33~49.47 μg/mL之间,平均值为9.35(±2.77) μg/mL;代森锰锌(Z)对各参试菌株的EC50值在3.51~82.05 μg/mL之间,平均值为10.59(±4.06) μg/mL。B及Z对除XR001外的37个菌株的EC50值分别呈连续的双峰(主峰明显)和单峰频次分布;B对构成敏感性正态频次分布主峰的30个菌株的EC50均值5.99(±0.78) μg/mL 和Z对组成连续敏感性正态频次分布的37个菌株的EC50均值8.66(±1.09) μg/mL 可分别作为烟草黑胫病菌对B及Z的敏感性基线。     

烟草黑胫病菌致病性分化和烟草品种的抗病性差异

用游动孢子浸根接种法对我国主产烟区的117个烟草黑胫病菌(Phyto-phythora parasitica var.nicotianae)致病性测定结果表明，黑胫病菌茵株问致病性存在明显差异，病情指数范围4．66—84．30，强、中和弱致病性菌株各占11．1l％、58．97％和29．91％。对国内主要的59个烟草品种经室内和大田的抗病性鉴定表明，目前尚没有抗黑胫病菌的免疫品种，但不同烟草品种抗性差异明显，其中Coker371G、NC82、K346和单育三号等品种有较强的抗病性，且室内鉴定与大田鉴定结果基本一致。     

安徽省烟草黑胫病菌的交配型及其地理分布研究

 Total 69 isolates of Phytophthora nicotianae var. nicotianae were isolated and identified from tobacco black shank samples collected from different areas of Anhui province, and mating types of the oomycete were investigated by the method of partnership culture in vitro on L-tryptophan medium with β-sitosterol. The results showed that A2 mating type was the predominant in isolates of P. nicotianae var. nicotianae, next was A₀ mating type, A₁ and other mating types were not observed. It was suggested that sexual reproduction of P. nicotianae var. nicotianae might not take place frequently, and Anhui province might not be the original center of P. nicotianae var. nicotianae. The results indicated further that mating type geographical distribution of P. nicotianae var. nicotianae in Anhui province was in line with that in China. In addition, the significance of the test results and the possible reason for A₁ mating type being absent were discussed.     

抗菌肽和几丁质酶基因提高烟草对黑胫病菌和赤星病菌的抗性研究

 通过农杆菌介导法将加信号肽修饰的人工合成杂合抗菌肽CEMA基因(SPCEMA),苜蓿防御素基因(AFP),苦瓜几丁质酶基因(CHI)以及SPCEMA-CHI、AFP-CHI、AFP-SPCEMA双价基因导入本明烟(Nicotiana benthamiana),并对转基因烟草T₀和T₁代进行了抗病性检测,比较了不同转基因植株的抗病效果。研究结果表明,转基因烟草对黑胫病菌(Phytophthora parasitica var.nicotianae)、赤星病菌(Alternaria alternata)的抗性均强于非转基因烟草,病情指数差异达极显著水平,其中转AFP-CHI双价基因烟草具有较强的抗性,与单价转基因烟草的抗性差异达显著水平。但各单价转基因以及双价转基因烟草之间对上述病菌并未表现出显著的抗病性差异。结果表明植物源的抗菌肽基因与几丁质酶基因在抗植物真菌病害中具有协同增效作用。     

北方五省(区)马铃薯晚疫病菌对甲霜灵和精甲霜灵的敏感性检测

为了明确我国不同地区马铃薯晚疫病菌对甲霜灵和精甲霜灵的抗性状况,2007-2009年从河北、黑龙江、吉林、辽宁和内蒙古马铃薯主产区采集马铃薯晚疫病菌,采用菌丝生长速率法和叶盘漂浮法测定其对甲霜灵的敏感性,采用叶盘漂浮法测定其对精甲霜灵的敏感性.结果表明:以菌丝生长速率法检测的380株晚疫病菌中和以叶盘漂浮法检测的222株晚疫病菌中对甲霜灵的抗性菌株分别占80％和73.5％;菌丝生长速率法检测结果显示,河北省对甲霜灵的抗性菌株所占频率从2007年的100％降为2008年的66.4％,2009年又回升至74.2％,而吉林和黑龙江两省对甲霜灵的抗性菌株分布频率呈上升趋势.叶盘漂浮法检测的95个菌株中对精甲霜灵的抗性菌株占54.5％,其中河北省40个菌株对精甲霜灵的中间型菌株占优势(62.5％),抗性菌株仅占34.9％,而其他4省55个菌株对精甲霜灵的抗性菌株占优势(69.1％).受检测的北方五省(区)马铃薯晚疫病菌群体中对甲霜灵和精甲霜灵的抗性菌株已占优势,马铃薯晚疫病菌已普遍对甲霜灵及精甲霜灵产生抗性.在对甲霜灵和精甲霜灵普遍产生抗性的地区,应优先选用与甲霜灵、精甲霜灵作用机理不同的药剂防治马铃薯晚疫病.     

Resistance of Phytophthora porri to metalaxyl

Metalaxyl resistance has been identified in the Phytophthora porri population in the UK. In field experiments the presence of such resistant strains reduced the level of control of leek white tip given by applications of phenylamide-containing fungicides. The level of control achieved by fungicides with alternative modes of action to the phenylamides was not affected. ©1997 SCI     

安徽省辣椒疫霉对甲霜灵的抗药性监测

为了明确安徽地区辣椒疫霉对甲霜灵的抗药性水平及抗性菌株的地理分布,2005-2006年从安徽省16个市、县采集辣椒疫病病株,经分离纯化鉴定,获得125株辣椒疫霉菌株,分别采用生长速率法和叶盘漂浮法测定其对甲霜灵的敏感性.结果表明,按照Parra & Ristaino(2001)标准,供试菌株中有79株对甲霜灵敏感,38株对甲霜灵敏感性处于中间状态,8株抗甲霜灵,即敏感菌株、中间菌株和抗性菌株分别占总体的63.2%、30.4%和6.4%.采自不同地区的菌株对甲霜灵的敏感性差异较大,其中以寿县的菌株最为敏感,EC50值最低为0.10μg/mL,平均为0.81±0.20μg/mL;而砀山、和县地区的菌株表现出一定的抗药性,平均EC50为8.32±0.19 μg/mL,最高达25.47μg/mL.抗性菌株的最高抗性倍数约为90倍.     

烟草疫霉的产孢和接种方法研究

烟草疫霉是重要的病原真菌,但在人工培养条件下难以培养、产孢以及释放游动孢子.作者对烟草疫霉培养、产孢、接种方法进行了研究.芝麻培养基、黑麦培养基、燕麦培养基可用来培养烟草疫霉,烟草疫霉在三种培养基上平均每天生长量为1.10、0.78、0.86cm;芝麻培养基、黑麦培养基为烟草疫霉产孢子囊较好的培养基,产孢能力强,分别为2.52×104、2.07×104个孢子囊/cm2.而且孢子囊释放率高,分别为43.0%、32.1%.游动孢子囊悬浮液灌根接种和注射接种都能使烟草发病,但不同的接种方法和接种浓度下,病情指数不同.     

泸州烟草黑胫病病原生理小种组成及对甲霜灵和烯酰吗啉的敏感性

烟草黑胫病(Phytophthora nicotianae)是四川省泸州烟区最为严重的病害之一,为明确泸州烟草黑胫病生理小种组成及其对甲霜灵和烯酰吗啉的敏感性,从泸州主产烟区采集样品,分离得到24株烟草黑胫病菌株;通过鉴别寄主法结合TTZ生化反应,发现24株菌株中,0号生理小种15株,占62.50%,1号生理小种9株,占37.50%。对24株菌株进行甲霜灵和烯酰吗啉的药剂敏感性检测,发现甲霜灵对24株菌株的EC50范围在0.052~0.513μg/mL之间,敏感菌株和中抗菌株分别占41.67%和58.33%,未发现高抗菌株;烯酰吗啉对24株菌株的EC50范围在0.110~1.615μg/mL之间,敏感菌株和中抗菌株分别占37.50%和62.50%,未发现高抗菌株。上述结果表明,泸州烟区烟草黑胫病菌同时存在0号生理小种和1号小种,而且该烟区的黑胫病菌已对甲霜灵和烯酰吗啉产生不同程度的抗性。