鸡源金黄色葡萄球菌耐药基因定位的研究

从北京郊区鸡场分离到１０株耐 药性金黄色葡萄球菌,对这些菌株进行质粒消除,根据质粒消除前后的耐药性检测,发现耐各种药物的抗性基因大多数位于质粒上,少部分抗性基因位于染色体上,由质粒介导的耐药基因占７２．５％,由染色体编码的抗性基因占２７．５％,说明质粒在决定对抗生素的抵抗性中起主要作用。     

乳源金黄色葡萄球菌耐药基因定位的研究

近年来,随着抗生素的广泛使用,耐药性菌株不断出现,且有逐年增长的趋势.这种耐药菌株的出现,给畜禽养殖中疾病的预防、控制及治疗带来了一定困难[1].     

“连黄”中草药添加剂对东兰乌鸡生长性能及日粮养分代谢的影响

为探讨“连黄”中草药添加剂对东兰乌鸡生长性能及日粮养分代谢率的影响,试验将1日龄东兰乌鸡480羽分为4组,每组设6个重复,每个重复20羽。其中A组喂基础日粮为对照组|B、C、D组为试验组,分别在基础日粮中添加0.25%、0.50%和1.00%的“连黄”中草药添加剂,试期70 d|饲养试验结束时,从每组中抽取24羽体重相似的试验鸡,以饲养试验相同设计,继续饲喂原日粮进行代谢试验,测定养分代谢率。结果显示：除了50 ～ 70 d之外,B组在其他各阶段的平均日增重（ADG）分别比A组提高了5.00% ～ 9.15%（P < 0.05）,70 d平均个体重也提高了4.86%（P < 0.05）|C组在36 ～ 49、1 ～ 49 d和1 ～ 70 d的ADG及70 d时平均个体重也分别高于A组5.90%、2.66%、2.68%和2.57%（P > 0.05）|36 ～ 49 d时A组的平均日采食量（ADFI）高于B组6.04%（P < 0.01）,分别高于C、D组5.12%和4.13%（P < 0.05）,且在1 ～ 49 d时A组高于C组2.86%（P < 0.05）,此外的各阶段4组试鸡之间均无明显差异（P > 0.05）|料重比（F/G）：在22 ～ 35 d和1 ～ 70 d时B组低于A组6.32%和3.41%（P < 0.05）,在36 ～ 49 d和1 ～ 49 d时低于A组11.43%和7.31%（P < 0.01）|36 ～ 49 d时C组的F/G低于A组10.15%（P < 0.05）,且在1 ～ 49 d时低于A组5.29%（P < 0.01）,其他阶段两组间均无明显差异（P > 0.05）|养分代谢：本添加剂的3种不同添加量,对日粮的DM、CP、CF、NFE、CA、Ca、P、TE等养分的代谢率均有不同程度提高,其中尤以0.25%和0.50%添加量的提高程度显著。综上所述,日粮添加0.25%的“连黄”中草药添加剂可显著提高东兰乌鸡的生长性能及主要养分代谢率。 [关键词] “连黄”中草药添加剂|东兰乌鸡|生长性能|养分代谢率     

“连黄”中草药添加剂对东兰乌鸡生长性能以及血清生化、免疫、抗氧化指标的影响

研究旨在探讨日粮添加“连黄”中草药对东兰乌鸡生长性能以及血清生化、免疫、抗氧化指标的影响。将480羽1日龄东兰乌鸡随机分为4组,每组6个重复,每个重复20羽。A组为基础日粮（对照组）;B组、C组、D组分别在基础日粮中添加0.25%、0.50%和1.00%的“连黄”中草药。试验期49 d。结果显示：与对照组相比,B组乌鸡22～35 d的平均日增重显著提高（P<0.05）,且21 d后的料重比显著降低（P<0.05）。与对照组相比,3个阶段内各试验组乌鸡血清尿素氮（BUN）含量以及49 d时各试验组乌鸡血清甘油三酯（TG）、总胆固醇（TC）含量均显著或极显著降低（P<0.05或P<0.01）,21 d时C组、D组和49 d时B组、C组乌鸡血清白蛋白（ALB）含量显著升高（P<0.05）。与对照组相比,3个阶段内各试验组乌鸡血清谷胱甘肽（GSH）含量均显著或极显著提高（P<0.05或P<0.01）,21和35 d时B组、C组乌鸡血清总超氧化物歧化酶（T-SOD）活性显著或极显著提高（P<0.05或P<0.01）。研究表明,日粮添加“连黄”...     

牛奶源金黄色葡萄球菌耐药基因分布特征的研究

研究旨在了解江苏省牛奶源金黄色葡萄球菌分离株中抗生素耐药基因的分布特征。经耐热核酸酶基因(nuc)和甲氧西林耐药决定子A基因(mec A)的PCR检测,78个牛奶源菌株中18株为耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA),60株为甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)。采用PCR方法检测了所有菌株中氨基糖苷类耐药基因aac(6')/aph(2″)、aph(3')-Ⅲ和ant(4',4″),大环内酯类耐药基因erm A、erm C和msr A,四环素类耐药基因tet M和tet K,上述8种耐药基因的检出率分别为32.1%、20.5%、41.0%、16.7%、44.9%、12.8%、29.5%和28.2%。除erm C在MSSA菌株中的检出率高于MRSA菌株之外,其余7种耐药基因的检出率均为MRSA菌株显著高于MSSA菌株。MRSA菌株携带2种及以上耐药基因的百分率较MSSA菌株高,MRSA菌株多重耐药情况更加普遍。     

复方桉叶注射剂对金黄色葡萄球菌型小鼠乳腺炎的影响

奶牛乳腺炎是造成奶牛业经济损失最大的一种疾病.本试验利用金黄色葡萄球菌人工诱发小鼠乳腺炎,研究复方桉叶注射剂对实验性乳腺炎的治疗作用.与模型组相比,在接种后24h给药组小鼠乳腺组织内细菌数均显著降低(P<0.05),给药组小鼠血清中AKP、NAGase活力显著升高(P<0.05).在接种后24h,给药组小鼠乳腺组织中AKP活力、NAGase活性、LPO活力显著降低(P<0.05),IL-2显著增高(P<0.05).本试验表明复方桉叶注射剂能抑制金黄色葡萄球菌在乳腺内的繁殖,降低其对乳腺组织的损伤,发挥对乳腺的保护作用,同时能阻止炎症时中性粒细胞的迁徙,通过刺激IL-2的产生来缓解金黄色葡萄球菌感染引起的免疫抑制,减少乳腺组织的细菌数量,减弱炎症介质对细胞和血-乳屏障完整性的损伤.     

质粒介导的喹诺酮耐药基因在动物源金黄色葡萄球菌的流行分布

为了解广东省动物源金黄色葡萄球菌耐药现状、分析耐喹诺酮类金黄色葡萄球菌耐药分子特征,本研究从2010—2011年广东33个养殖场的不同动物来源的样本中分离鉴定出46株金黄色葡萄球菌,采用二倍琼脂稀释法测定对14种抗菌药物的敏感性;采用聚合酶链式反应(PCR)检测耐喹诺酮金黄色葡萄球菌grlA、grlB、gyrA、gyrB基因在喹诺酮耐药决定区(QRDR)的突变特征、质粒介导喹诺酮类耐药(PMQR)基因(qnr、aac6′-Ib-cr、oqxA和qepA)的流行分布特征,同时还检测了β-内酰胺酶编码基因(blaCTX-M、blaCMY和blaSHV)、质粒介导金黄色葡萄球菌耐氟苯尼考的基因(cfr和fexA)和万古霉素耐药基因(vanA、vanB和vanC)。结果表明,46株金黄色葡萄球菌对克林霉素耐药率最高为67%,对环丙沙星和氟苯尼考耐药率为52%,对青霉素、氨苄西林、庆大霉素、红霉素、四环素和复方新诺明的耐药率在40%⁵0%之间,对苯唑西林和氯霉素耐药率为28%,对妥布霉素耐药率为13%,对头孢噻肟的耐药率在10%左右,有2株耐万古霉素。20株耐环丙沙星金黄色葡萄球菌的grlA和gyrA基因的QRDR发生了碱基突变并导致编码的氨基酸发生改变,GrlA氨基酸只有1种突变模式,Ser80→Phe,而GyrA氨基酸存在3种突变模式:Ser84→Leu,Ala或Phe。PMQR基因中,oqxA检出率最高(80%),其次是aac6′-Ib-cr占13%,qnrS1检出3株、qnrD检出2株。检测到2株菌株携带超广谱β-内酰胺酶编码基因blaSHV-12;23株氟苯尼考耐药菌株全部携带fexA基因,其中3株同时携带cfr基因;2株耐万古霉素菌株未检测到相关耐药基因。广东省动物源金黄色葡萄球菌多重耐药现象较为普遍,本研究首次在动物源金黄色葡萄球菌中检测到超广谱质粒编码的喹诺酮耐药基因流行分布广泛,大多数菌株同时携带2种以上质粒编码的耐药基因,提示养殖过程或治疗过程中使用任何一种药物(尤其是动物促生长剂)都可以筛选出耐药菌株。     

上海地区动物源金黄色葡萄球菌分离株mecA基因的表达及耐药性分析

为了解上海地区动物源性金黄色葡萄球菌的耐药情况,采用微量肉汤稀释法对1999年、2011—2018年(2016年除外)分离鉴定保存的78株金黄色葡萄球菌进行19种药物的药敏试验,采用头孢西丁纸片法进行耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(Methicillin-resistant staphylococcus aureus,MRSA)菌株筛选,采用聚合酶链反应(PCR)进行mecA基因检测。结果:金黄色葡萄球菌除万古霉素、利奈唑胺、夫西地酸、莫匹罗星外,均产生耐药性,多重耐药现象严重,耐药谱广;MRSA检出率为51.3%,发病样品、健康畜禽的粪便样品、环境样品中均检测到MRSA;mecA基因检出率为51.3%,MRSA中mecA基因携带率显著高于甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(Methicillin-sensitive staphylococcus aureus,MSSA)。     

金黄色葡萄球菌对大环内酯类药物的耐药性及耐药机制的研究进展

金黄色葡萄球菌是导致人和动物患病的重要病原菌之一,大环内酯类抗生素对于葡萄球菌感染所引起的疾病有很好的疗效,但是随着大环内酯类药物在临床上的应用逐年扩大,耐药性也逐年增高,尤其是耐药性交叉传播,直接威胁人类健康。本文综述了金黄色葡萄球菌对大环内酯类药物的耐药性及耐药机制,为预防和控制金黄色葡萄球菌感染提供参考。     

中药"连黄"对耐药金葡菌抑制作用的研究

随着抗生素的不断应用以及不合理用药,导致细菌的耐药性问题越来越严重。随着耐药水平的不断提高和耐药谱的不断扩大,多数病原菌对抗生素产生多重耐药性。     

中药复方制剂对大鼠耐缺氧能力的影响及其作用机制的研究

选用健康成年 Wistar大鼠 72只 ,随机分为 6组 ,分别为中药复方 I、II、III组、阳性对照组、空白对照组和正常组。给药 2周后 ,进行常压耐缺氧实验 ,测定存活时间、血清皮质酮、促肾上腺皮质激素 (ACTH)和胰岛素水平的变化以及对肾上腺皮质束状带细胞超微结构观察。结果表明 :各复方组和阳性对照组均能显著延长大鼠的常压耐缺氧时间 (P<0 .0 5 ) ,其中复方 III组作用效果最好 (P<0 .0 1) ;各复方组和阳性对照组胰岛素浓度均显著高于空白对照组 (P<0 .0 5 ) ;各复方组和阳性对照组血清皮质酮、促肾上腺皮质激素 (ACTH)浓度均显著低于空白对照组 (P<0 .0 5 ) ;各中药复方组和阳性对照组对肾上腺皮质束状带细胞具有保护作用。结果表明 ,各中药复方和阳性对照药物均能提高机体耐缺氧能力 ,减轻缺氧对机体造成的损伤。     

耐药金黄色葡萄球菌gyrA基因突变与中药耐药抑制剂的回复突变研究

探讨金黄色葡萄球菌对氟喹诺酮类的耐药与gyrA基因突变的关系及中药耐药抑制剂对gyrA基因是否具有回复突变作用,以便从分子水平初步探讨复方中药耐药抑制剂的耐药抑制分子机理。用诺氟沙星逐步诱导金黄色葡萄球菌敏感株ATCC29213,建立了MIC值为64μg/mL、128μg/mL和256μg/mL的耐药突变株;PCR扩增标准株、耐药株和中药处理的耐药株gyrA基因,产物回收纯化后送测序公司测序。gyrA基因测序结果用DNAsis软件分析表明,细菌的耐药性程度越高,碱基突变率增加;gyrA基因氨基酸序列突变分析表明,84位亲水性丝氨酸被疏水性缬氨酸取代,与细菌的高水平耐药性密切相关。中药耐药抑制剂对84位和99位氨基酸突变具有回复突变的作用。结论:中药耐药抑制剂对耐药金黄色葡萄球菌gyrA基因具有回复突变作用。     

不同中药提取物对耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的抑菌作用和逆转机制

采用(K-B)药敏纸片扩散法检测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的药物敏感性,并用二倍稀释法分别测定10种中药提取物对MRSA的最小抑菌浓度(MIC)和最小杀菌浓度(MBC),选取抑菌效果最好的中药提取物(黄芩)通过棋盘法测定其与5种常用抗生素的联合抑菌效果。观察黄芩不同亚抑菌浓度作用下对MRSA耐药性的逆转效果,并通过荧光实时定量PCR法检测耐药基因mec A在mRNA表达水平上的变化。结果表明,MRSA具有多重耐药性,10种中药提取物里黄芩的抑菌和杀菌效果最为显著,MIC和MBC均为156 mg/L,但其与5种抗生素没有显著的联合抗菌作用,在黄芩亚抑菌浓度130 mg/L作用20 h后,MRSA主要耐药基因mec A的表达量下调并恢复了对药物的相对敏感性。     

夏枯草等14味中药对金黄色葡萄球菌的体外抑菌活性

采用索氏提取,超声波和水煎煮方法提取夏枯草等14味中药的有效部位,应用二倍试管稀释法分别测定其提取物对金黄色葡萄球菌的最小抑菌浓度（MIC）和最小杀菌浓度（MBC）。结果显示,夏枯草、虎杖、何首乌、连翘、柴胡、穿心莲、地榆7味中药有效部位对金黄色葡萄球菌的抗菌活性最强,其MIC为1．953～3lI250g／L,MBC为3．90～31．25g／L;佛手、黄柏2味中药有效部位具有较强的体外抗菌活性,其MIC值为62．5g／L,MBC值为125．0g／L;大青叶、板蓝根、金银花、杜仲、白头翁5味中药有效部位的抗菌活性较差,其MIC值为125．0g／L,MBC值为250．0,≥250．0g／L。不同中药有效部位对金黄色葡萄球菌的抗菌活性有所差异,其中夏枯草、虎杖、何首乌、地榆和佛手有效部位对金黄色葡萄球菌具有较好的抗菌活性。     

柴胡皂苷a对金黄色葡萄球菌基因转录表达谱的影响

探讨柴胡皂苷a对金黄色葡萄球菌的抑菌活性,确定亚抑菌浓度的柴胡皂苷a对金黄色葡萄球菌基因转录表达谱的影响。按NCCLS推荐的试管肉汤倍比稀释法测定柴胡皂苷a对32株临床分离的金黄色葡萄球菌和标准菌株ATCC25923的最小抑菌浓度(MICs),绘制标准菌株ATCC25923的生长曲线,用定制的Affymetrix基因芯片检测1/2×MIC(4mg.L-1)柴胡皂苷a对标准菌株ATCC25923基因表达谱的影响。结果表明,柴胡皂苷a对33株金黄色葡萄球菌的MICs为1～32mg.L-1;基因表达谱分析有26个上调基因,68个下调基因,其中1个编码超氧负离子压力反应蛋白基因被大幅度地上调,13个毒力基因被诱导,并且都被抑制;这表明柴胡皂苷a对32株临床分离的金黄色葡萄球菌及标准菌株都有抑菌活性。基因芯片分析表明,柴胡皂苷a的抗菌作用能够同时影响金黄色葡萄球菌不同的途径基因。     

复方中药抗热应激效果及安全性研究

为研究复方中药“应激康”的安全性及提高热应激肉仔鸡生产性能的效果,试验选取40只小白鼠进行“应激康”安全性试验,选取18日龄AA+肉仔鸡120只进行“应激康”提高热应激肉仔鸡生产性能试验.结果“应激康”组肉鸡平均日增重达56.55 g,分别比维生素组和高温对照组提高7.80 g(P＜0.01)和10.87 g(P＜0.01),而且“应激康”组肉仔鸡未发生死亡,死淘率比高温对照组低16.67％(P＜0.01),比维生素组低10％ (P＜O.05).表明复方中药“应激康”毒副作用小,安全性高,有提高热应激肉仔鸡生产性能作用,对热应激有较好的防治作用.     

中草药连翘提取物抑制金黄色葡萄球菌α-溶血素分泌活性研究

通过乙醇回流提取获得中草药连翘粗提物,利用MIC值测定、溶血活性测定、免疫印迹、RT-PCR、LDH及live/dead等试验方法研究连翘提取物对金黄色葡萄球菌α-溶血素分泌的影响.结果表明:连翘提取物对金黄色葡萄球菌的最小抑菌质量浓度(MIC)均大于2 048 mg/L,表明连翘提取物不影响金黄色葡萄球菌生长.连翘提取物在16～128 mg/L时,抑制了金黄色葡萄球菌α-溶血素的分泌,而且这种抑制作用呈剂量依赖性.研究结果提示连翘提取物可作为一种潜在的抗金黄色葡萄球菌感染药物,可进一步开发.     

中草药复方制剂对肉鸡生产性能的影响

中草药富含氨基酸、维生素和微量元素等多种营养物质，并具有防病治病和提高生产性能等多种作用近年来，中草药饲料添加剂在畜牧业生产中正受到人们高度关注、大力开发中草药饲料添加剂对解决畜产品抗生素残留问题，提高生产效率，发展绿色畜牧业，满足人们对动物性食品越来越高的安全需求，提高我国畜禽产品在国际市场上的竞争力，具有重复意义，笔者等应用黄芪、白术、山药、白芍、陈皮、甘草配成复方制剂添加存肉鸡日粮中，研究其对肉鸡生产性能的影响。     

归芪甘草汤对小鼠免疫功能的影响

为研究归芪甘草汤对小鼠免疫功能的影响,该药液由黄芪、当归、炙甘草、熟地和党参组成,经传统水煎法获得浓度为1 g/mL药液;以环磷酰胺诱导建立小鼠免疫抑制模型,培健康小鼠和免疫抑制小鼠灌服药液;在试验第15天,应用流式细胞技术、溶血素测定法和腹腔巨噬细胞吞噬功能测定法,检测复方中药对小鼠T淋巴细胞亚群(CD4、CD8)、IgM和腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响.结果显示对免疫抑制小鼠,灌服药液和灌服蒸馏水小鼠相比较,CD4+/CD8+、IgM、吞噬功能百分率和吞噬指数差异极显著(P＜0 01);对健康小鼠,灌服药液和灌服蒸馏水小鼠相比较,CD4+ /CD8+比值差异不显著(P＞0.05),IgM值和吞噬百分率差异显著(P＜0.05),吞噬指数差异极显著(P＜0.01).表明归芪甘草汤具有增强昆明系小鼠免疫功能的作用,尤其是对免疫抑制小鼠的免疫功能增强更为显著.