鳕鱼皮复合肽的制备工艺研究

采用木瓜蛋白酶和风味酶构成的复合酶对鳕鱼皮蛋白进行水解,通过单因素和正交试验确定复合酶水解的最佳条件为：木瓜蛋白酶和风味酶复合比为3：1,加酶量为40 000 U/g,水解温度45℃,料液比为1：2,水解pH为6.5,水解时间为4.5 h。最佳条件下鳕鱼皮蛋白水解度可达22.45%。     

罗非鱼鱼皮胶原蛋白多肽的制备及其理化性质研究

[目的]制备罗非鱼鱼皮胶原蛋白多肽,并对其理化性质进行研究。[方法]以从罗非鱼鱼皮中提取的胶原蛋白对原料,分离制备活性肽,并测定其理化性质。[结果]利用胰蛋白酶在45℃、pH值8、加酶量5％条件下,酶解3h,进而用葡聚糖凝胶G-50通过蛋白质纯化仪进行分离,纯化得到较纯的多肽Y32。电泳得知Y32分子量为4．0456kDa;DSC820e测定Y32的变性温度为57．5℃;调节pH值测定其等电点为8．7;用氨基酸组成分析仪测定Y32氨基酸种类及其含量发现,Y32多肽中共含有19中氨基酸,其中,甘氨酸所占比例最大,符合胶原蛋白氨基酸的基本构成。[结论]为进一步开发利用罗非鱼鱼皮提供了基础资料。     

林蛙皮多肽制备及其理化性质

从林蛙皮肤中提取的小分子多肽具有诸多生物活性。以鲜活林蛙为试验材料,剥离皮肤,采用酶解法提取小分子活性多肽,并研究其理化性质。结果表明:制备的林蛙皮多肽的紫外特征吸收峰位于220 nm处,280 nm附近吸收峰较小;分子量主要分布在190~1 000 u,并且在250~540 u的分布最多,占37.47%;该混合多肽具有多种生物活性因子,尤其是抗菌肽和凋亡调控蛋白;在不同p H值缓冲溶液中都具有良好的溶解性;抑菌试验表明其对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌有不同程度的抑菌活性。证明制备的小分子混合多肽有望成为新的制剂原料。     

林蛙皮多肽凝胶制剂对兔皮肤损伤的修复作用

林蛙皮多肽是从林蛙皮中提取出的活性多肽,含有多种氨基酸和细胞因子,对皮肤修复具有重要作用,但其水溶液不利于临床使用。试验拟将提纯的林蛙皮多肽与其他皮肤调理剂制备成凝胶制剂并通过建立兔背部皮肤创伤模型来探究林蛙皮多肽凝胶制剂在兔皮肤创伤愈合中的作用。通过观察伤口红肿、出血、渗出和结痂,计算创面愈合,以及通过病理组织学变化评估林蛙皮多肽凝胶制剂的作用。结果表明:林蛙皮多肽凝胶制剂减少炎症反应,促进兔皮肤创伤愈合,提高肉芽组织中新生血管密度和成纤维细胞数量。     

自制复方中草药膏对小鼠烫伤皮肤的修复作用

将30只Balb/c小鼠随机等量分为对照组和实验组,每组各取3只小鼠作为正常对照,剩余的24只小鼠分别麻醉后,用沸水在小鼠背部烫出直径1 cm的圆形烫伤区,单笼饲喂.烫伤后1 d使用自制复方中草药膏涂抹于实验组小鼠烫伤部位,早晚各给药1次,连续给药21 d,对照组小鼠不做处理.分别在给药后7 d、14 d和21 d各取...     

HACCP在罗非鱼鱼鳞胶原蛋白多肽生产中的应用

[目的]将HACCP体系应用于罗非鱼鱼鳞胶原蛋白多肽的生产过程中,确保工业生产罗非鱼鱼鳞胶原蛋白多肽的安全性。[方法]阐述了胶原蛋白多肽的生产工艺流程,分析了各环节的潜在危害,并设定了关键限值、监控频率与措施、纠偏措施、档案记录和验证程序来监控关键点。[结果]确定原料验收、酶解提取、浓缩、喷雾干燥、磁选和内包装为关键控制点,并制定了HACCP计划表,从而在罗非鱼鱼鳞胶原蛋白生产中建立了质量安全控制体系。[结论]HACCP体系的实施降低了罗非鱼鱼鳞胶原蛋白生产中的危险因素,保障了胶原蛋白多肽的品质和食用安全。     

复合酶制备抗氧化活性核桃多肽工艺优化

以碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶复合水解核桃蛋白制备抗氧化活性多肽的工艺条件优化为对象,通过研究酶解时间、酶解温度、酶与底物浓度比及复合酶比例对核桃蛋白酶解物清除DPPH·能力的影响,并利用正交试验优化工艺条件,以提高核桃蛋白多肽对DPPH·的清除率。结果表明,酶解时间、酶解温度、酶与底物浓度比及复合酶比例对核桃蛋白酶解物清除DPPH·能力有一定影响;当木瓜蛋白酶与碱性蛋白酶复合酶解温度为45℃、时间1.5h、酶与底物浓度1500U/g、pH值7.0、复合酶比例为2∶1时,酶解物清除DPPH·的能力最强,清除率达78.7%。     

三酶复合法提取大豆多肽工艺的研究

探讨并构建了三酶复合法提取大豆多肽的新工艺.即将大豆分离蛋白经三酶复合酶解、活性炭脱色、超滤、真空浓缩和离心喷雾干燥等提取工艺,最终获得大豆多肽.其制备的关键工艺条件为①最佳复合酶解条件中性蛋白酶、木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶比例为124,pH 7.0,底物浓度4.0%,酶解时间9 h;②最佳脱色处理条件粉末活性炭用量2.0%,温度50℃,pH 3.0,吸附时间3 h;③超滤分离条件NF-1纳滤膜,压力1.0 MPa,膜通量26.0 L/(m2·h).     

秀珍菇多肽的制备及其抗氧化活性

以多肽得率为指标,酶解秀珍菇蛋白质制备多肽,通过正交试验优化制备工艺.正交试验结果表明,酶解各因素对秀珍菇多肽得率影响程度的大小为：pH>时间>温度>酶浓度;确定的最佳酶解工艺参数为：pH 11、时间1.5 h、温度55℃、碱性蛋白酶浓度6 000 U·g^-1,制备的多肽得率为70.96%;体外抗氧化能力测定结果表明：2.5 mg·mL^-1秀珍菇多肽对DPPH、ABTS⁺和羟基自由基的清除率分别为81.57%、99.81%、98.84%;SDS-PAGE检测结果表明,秀珍菇多肽的分子质量约为5.8 ku;氨基酸分析结果表明,秀珍菇多肽含有8种必需氨基酸,占氨基酸总量的43.2%.综上,在最佳酶解工艺下制备的秀珍菇多肽具有分子质量低且抗氧化能力强的特点.     

大西洋鳕鱼皮多肽体外抗氧化活性研究

[目的]探讨大西洋鳕鱼皮多肽的体外抗氧化活性。[方法]选择胰蛋白酶酶解鳕鱼皮,分别以氨基氮滴定法和DPPH自由基清除率作为筛选指标,通过正交试验,筛选出酶解的最优条件;将超滤液分成5段,分别进行DPPH自由基清除率、ABTS自由基力及亚铁离子螯合能力的体外抗氧化活性。[结果]胰蛋白酶酶解大西洋鳕鱼皮的最优条件为料液比1∶1,加酶量2 500 U/g、酶解时间4 h、温度45℃、pH 9.0。当分子量小于5 k D时,DPPH自由基清除能力、ABTS自由基清除能力和Fe2+离子螯合能力最强。[结论]经胰蛋白酶酶解,获得的大西洋鳕鱼皮多肽存在较好的抗氧化活性。     

花生种子相对分子质量17500多肽抗体制备及其应用

用一种纯化的花生种子高甲硫氨酸蛋白－相对分子质量１７５００多肽为抗原,免疫动物获得了高特异性的抗血清,以之为探针分析比较了其它几种豆科植物中们花生球蛋白Ⅱ提取物,免疫亲合反应均呈阳性,而玉米种子呈阴性反应,表明该多肽是豆科植物种子蛋白保守成分,Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ分析表明该多肽在高甲硫氨酸类型代表品种和低甲硫氨酸类型代表品种中均存在。     

抗鹅IgY抗血清制备及在ELISA中的应用

为制备鹅免疫球蛋白特异性抗体,通过主动免疫兔子制备了抗鹅ＩｇＹ抗血清,并在ＥＬＩＳＡ中比较分析了该抗血清的应用效果．结果显示,将制备的抗鹅ＩｇＹ抗血清作为二抗,当抗原包被浓度（１６μｇ／ｍＬ）和血清（１∶１６００）、抗鹅ＩｇＹ抗血清（１∶５１２００）与酶标抗体（１∶２０００）稀释到合适浓度时,在ＥＬＩＳＡ检测鹅抗体水平中呈现出良好效果,其特异性和灵敏度明显好于以兔抗鸡ＩｇＹ作为替代二抗．结果表明所制备的抗鹅ＩｇＹ抗血清在鹅相关的酶联免疫研究方法中是合格和有效的．     

改性生物炭的制备及其在环境修复中的应用

生物炭具有较大的孔隙度和比表面积,吸附能力强,在环境污染修复、土壤改良和固碳方面应用广泛。由于高温热解过程会使生物炭官能团数量减少而降低其对某些特定污染物的吸附性能,同时,由于原始生物炭存在固液分离难的问题,通过改性生物炭提高其理化性质,并应用于环境修复受到了学术界和工业界的广泛关注。然而,目前针对改性生物炭的制备及其在土壤和水体修复中的应用综述较少。本文对近年来有关改性生物炭的文献进行了系统分析,总结生物炭的改性方法,简要阐述改性生物炭在环境(土壤和水体)污染修复中的应用,并深入探讨了磁性生物炭作为吸附剂和催化剂在水污染处理中的应用现状,最后对改性生物炭的研究方向提出了展望。     

尼罗罗非鱼Lck多克隆抗体的制备及鉴定

[目的]制备及鉴定尼罗罗非鱼淋巴细胞特异性蛋白酪氨酸激酶(Lck)多克隆抗体,为深入研究罗非鱼Lck蛋白功能及其免疫机制打下基础.[方法]采用无缝克隆技术构建重组质粒pET-B2m-Lck,然后转入大肠杆菌B21(DH3)中进行诱导表达;经Ni-NTA树脂层析柱纯化后,以纯化的融合蛋白免疫日本大耳白兔制备Lck多克隆抗体,并采用Western blotting和ELISA检测多克隆抗体的特异性和免疫效价.[结果]尼罗罗非鱼Lck蛋白的亲水性均值(GRAVY)为-0.454,属于亲水性蛋白,具有较丰富且分布均匀的潜在抗原表位位点,无典型的跨膜区.经原核载体诱导表达获得的融合蛋白分子量约67.0 kD,主要以包涵体形式存在.免疫日本大耳白兔后可获得效价为1:256000的Lck多克隆抗体,且该多克隆抗体能特异性识别Lck蛋白.经Protein G亲和层析柱纯化的抗体浓度在10 mg/mL以上,纯度约95%,抗体纯化效果良好.[结论]经原核载体诱导表达获得的尼罗罗非鱼Lck融合蛋白具有良好的免疫原性,其免疫日本大耳白兔后获得的多克隆抗体具有高效价和特异性,可用于细菌感染罗非鱼后机体免疫机制的研究.     

不同方法制备罗勒挥发油及其在卷烟中的应用

为研究不同提取方法对罗勒挥发油品质的影响,考察了无溶剂微波萃取和水蒸气蒸馏对罗勒挥发油的得率、香气质量和挥发性成分的影响,并在卷烟中进行应用研究。结果表明,无溶剂微波萃取法能显著提高罗勒挥发油的得率,比水蒸气蒸馏法提高30%;2种方法制备的罗勒挥发油的主要致香成分一致,主要成分均为草蒿脑,无溶剂微波萃取罗勒挥发油的草蒿脑含量比水蒸气蒸馏法增加10%,其余成分在种类和含量上也有一定差别;罗勒挥发油在卷烟中的应用研究结果表明,无溶剂微波萃取罗勒挥发油能使烟香丰满飘逸,赋予卷烟柔和的辛香和清香,具有明显的增甜除杂作用。     

基于园林废弃物真菌菌剂的制备及应用

采用"以废治污"的理念,将以园林废弃物为基质制备的真菌菌剂应用于污染河水中,以实现固体废弃物与废水的联动处理。考察园林废弃物的含量、基质厚度和初始含水率对该菌株孢子制备的影响,并用响应面法优化制备工艺。结果表明,影响孢子产量的因子主次顺序为基质厚度、园林废弃物含量和含水率;最佳制备工艺条件为园林废弃物含量46%、基质厚度3 cm、初始含水率57%,得到的孢子数为4.75×10⁹CFU/g,该结果与回归方程预测值接近;将制备的孢子活化,并以0.50‰的接种量投加至污染河水中,曝气处理54 h后,COD、NH₃-N和TP的去除率分别达84.97%、97.07%和51.64%;连续试验表明,该菌剂能够有效地降低河水中的COD、NH₃-N和TP等污染物,且具有较高的稳定性。     

复合益生菌生物消毒剂的制备及其在肉鸭生产中的应用

【目的】研制复合益生菌生物消毒剂,探讨其对鸭舍环境、肉鸭生产性能及健康状况的影响。【方法】以枯草芽孢杆菌、乳酸杆菌、酵母菌为材料,通过3因素4水平正交试验筛选3株益生菌的最佳复配比例,据此制备复合益生菌生物消毒剂,确定其喷雾消毒周期。选取4日龄樱桃谷肉鸭600只,随机分为对照组、苯扎溴铵消毒组(试验1组)和复合益生菌生物消毒剂消毒组(试验2组),检测各组鸭舍中环境活菌数、有害气体含量、鸭生产性能、免疫功能及肠道菌群等指标。【结果】与苯扎溴铵相比,复合益生菌生物消毒剂使鸭舍NH3含量与活菌数分别下降42.21%和24.65%(P0.05),平均日增质量提高8.58%(P0.05),料肉比降低5.36%(P0.05);肉鸭脾脏指数、胸腺指数分别提高35.94%和15.41%(P0.05),盲肠乳酸杆菌数量提高7.96%(P0.05),大肠杆菌数量降低5.49%(P0.05)。【结论】复合益生菌生物消毒剂较苯扎溴铵能更好地改善鸭舍环境、提高肉鸭生产性能与免疫性能。     

酶法制备鱼骨胶原多肽螯合钙的研究

以鲽鱼骨为原料,采用酶法制备鲽鱼骨胶原多肽螯合钙,优化鲽鱼骨胶原多肽螯合钙合成工艺参数。分析pH与酶解时间对鲽鱼骨胶原多肽功能特性的影响,在单因素试验的基础上采用正交试验,以螯合率为指标,研究多肽液与骨粉酸解液体积比、pH、反应温度和反应时间对骨胶原多肽与鲽鱼骨粉酸解液螯合反应的影响。结果表明:采用碱性蛋白酶为酶制剂,pH为8,温度60℃条件下酶解1h所得的骨胶原多肽具有良好的溶解性、热稳定性和乳化性。采用体积比为3∶1的多肽液与骨粉酸解液为螯合反应液,pH 8,反应温度40℃,螯合40min得到的产品螯合率最高,为98.64%。     

氨基酸分子印迹传感器的制备及其在手性识别中的应用

【目的】通过构建分子印迹传感器对不同构型的色氨酸分子进行手性识别,探讨该传感器的手性识别能力及实际应用效果.【方法】以石墨烯为基底,利用分子印迹法制备色氨酸分子印迹传感器,探究不同pH值、沉积时间和色氨酸浓度对该传感器识别色氨酸对映体能力的影响,并通过配制不同浓度的L-色氨酸和D-色氨酸溶液,检测氧化峰电流值的差值ΔI,探究浓度与ΔI的关系.【结果】5.0 mmol/L色氨酸对映体在分子印迹传感器中的I_D/I_L为4.36,说明传感器对L-色氨酸有很好的识别能力.当电解液的pH值等于6.0,沉积时间为5 min时,所制备手性传感器性能最佳,并且ΔI与色氨酸浓度满足良好的线性关系,表明在实际应用时该传感器具有良好的准确性和灵敏度.【结论】色氨酸分子印迹传感器制作简单,检测灵敏,结果准确,为手性识别氨基酸提供了高效的方法.     

BDE-209在罗非鱼体内的代谢及其在烹饪过程中的变化

通过给罗非鱼喂食含十溴联苯醚(BDE-209)的饲料,研究了BDE-209在鱼体内的代谢产物与生物可利用性,同时研究了罗非鱼肉中多溴联苯醚(PBDEs)在烹饪过程中的变化。结果表明:BDE-209在鱼体中主要代谢产物有BDE-208、-207、-206、-154及六溴、七溴与八溴联苯醚,其中代谢产物贡献鱼肌肉PBDEs为(97±0.8)%,说明BDE-209主要以其代谢产物形式被鱼体富集,且BDE-209在罗非鱼体内的生物可利用性为(3.7±0.9)%。水煮和蒸的烹饪方式对罗非鱼体内PBDEs的摄食暴露风险的影响不显著,但高温油炸过程中BDE-209会生成降解产物,包括BDE-153、-183、-196、-197、-203、-206、-207、-208,将增加其的摄食暴露风险。因此,有机污染物的人体膳食暴露风险评估需考虑其在烹饪过程中的变化。