HPLC-ELSD法测定山银花中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量

[目的]为了建立高效液相色谱-蒸发光散射检测(HPLC-ELSD)法测定山银花中绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的含量的方法.[方法]采用ZORBAX SB-C18柱(4.6 mm×250 mm,5μm),以乙腈(A)-0.1％甲酸(B)为流动相梯度洗脱,以蒸发光散射检测器检测绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙.[结果]绿原酸、灰毡毛忍冬皂苷乙、川续断皂苷乙的回归方程分别在3.00-6.40,4.24-9.33,0.40-2.00 μg的质量范围内线性关系良好,R2分别为0.999,0.993,0.999.[结论]该方法操作简便、结果准确,专属性强,分离效果和重现性好,可有效缩短总分析时间.为较全面控制山银花药材的质量控制提供了简便可靠的方法.     

遵义山银花灰毡毛忍冬种子育苗技术

灰毡毛忍冬是遵义重要的道地中药材之一,花、叶用途范围广泛。因其种植经济效益好,种植面积逐年增加,导致优质种苗市场需求缺口大。相对于传统生产中扦插苗和嫁接苗,种子苗具有长势旺盛、抗性强、产量高、寿命长等优点。为遵义山银花灰毡毛忍冬的生产种植提供参考,从山银花留种株标记、种子采集及处理、苗圃选择及整理、种植管理、田间管理等方面介绍山银花灰毡毛忍冬种子育苗技术。     

大孔树脂HP-20和HP-SS分离纯化山银花中灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙

[目的]建立快速从山银花中分离灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的方法.[方法]利用HP-20大孔树脂富集山银花皂苷,HP-SS树脂从总皂苷分离其中主要皂苷成分灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙.[结果]确定了HP-20大孔树脂富集山银花皂苷的工艺,以浓度为4.8 mg/ml的2 BV样品溶液上样,吸附流速1.5 BV/h,解吸的乙醇浓度为60％,解吸体积3BV,解吸流速为1.5 BV/h.HP-SS树脂柱层析中,采用2 BV的水、10％、20％、30％,4 BV的40％、2 BV的50％的乙醇洗脱,控制流速在0.5BV/h.其中40％、50％乙醇洗脱部分分别获得两个单体化合物,通过13C与1H-NMR鉴定确定其分别为灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙单体成分.[结论]大孔树脂HP-20与HP-SS相结合,实现了两步快速从山银花中分离灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的目标.     

灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬叶显微特征比较研究

目的 为灰毡毛忍冬及其变异株、忍冬的鉴别和种质选育资源的开发利用提供依据。方法 采用性状鉴别和显微鉴别的方法从叶片外部形态和内部构造进行对比研究,探究灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬叶的异同点。结果 灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬叶在外部形态（叶形、叶大小）和内部构造（毛茸、气孔指数等）均存在差异,其中灰毡毛忍冬与其变异株间差异相对较小,灰毡毛忍冬及其变异株与忍冬差异较大。结论 灰毡毛忍冬、灰毡毛忍冬变异株、忍冬叶外部形态和内部显微特征存在差异,可为三者鉴别提供参考。     

灰毡毛忍冬生产技术规程

按照《中药材生产质量管理规范》的要求,从范围、规范性引用文件、产地环境、生产技术、病虫害防治、采收加工、分级与包装、生产档案等方面,制定灰毡毛忍冬生产技术规程,以期为灰毡毛忍冬的规范化种植提供依据。     

灰毡毛忍冬生产技术规程

按照《中药材生产质量管理规范》的要求,从范围、规范性引用文件、产地环境、生产技术、病虫害防治、采收加工、分级与包装、生产档案等方面,制定灰毡毛忍冬生产技术规程,以期为灰毡毛忍冬的规范化种植提供依据。     

灰毡毛忍冬与丝瓜套种立体种植模式研究

[目的]研究灰毡毛忍冬栽培品种"湘蕾一号"(Lonicera macranthoides Hand.-Mazz.)与丝瓜[Luffa cylindrica(L.)Roem.]套种的立体种植模式。[方法]设1个试验组和1个对照组。试验组中灰毡毛忍冬与丝瓜利用大棚棚架进行套种,灰毡毛忍冬株行距为1.5 m×2.0 m,丝瓜栽种于棚架两侧,株距0.3 m;对照组单独种植灰毡毛忍冬,株行距为1.5 m×2.0 m。[结果]套种丝瓜明显促进灰毡毛忍冬的生长,试验组比对照组叶长增加了28.2%,叶宽增加了29.1%,花冠长增加了58.9%,千花蕾鲜重增加了59.1%,绿原酸含量增加了26.0%,鲜花产量增加了36.4%,由于增加了丝瓜收入,最终收益试验组比对照组增加了92.0%。[结论]综上所述,利用废弃的大棚设施,灰毡毛忍冬和丝瓜实施立体套种,不仅产量得到了提高,还大幅度增加了种植效益,最终效益可达12.766 5万元/hm2。     

秀山灰毡毛忍冬中绿原酸、提取工艺的研究

[目的]优选灰毡毛忍冬中绿原酸的最佳提取工艺。[方法]以浸膏得率和绿原酸含量为考察指标,采用L9(34)正交试验方法优选重庆秀山灰毡毛忍冬水提工艺,并采用UV和HPLC测定绿原酸的含量。[结果]以总浸膏得率为指标:15倍水量、提取2次、提取温度85℃、每次30 min;以绿原酸为指标:15倍水量提取2次、提取温度80℃、每次30 min。[结论]该工艺简便、快捷稳定,可为灰毡毛忍冬质量控制提供实验依据。     

优选秀山灰毡毛忍冬醇提取工艺研究

目的：优选灰毡毛忍冬的最佳提取工艺．方法：以浸膏得率和绿原酸含量为考察指标,采用L9（3^4）正交试验方法优选重庆秀山灰毡毛忍冬醇提取工艺,并采用UV和HPLC测定绿原酸的含量．结果：（1）以总浸膏得率为指标：10倍醇量、提取2次、提取温度75℃、提取时间30min;（2）以绿原酸为指标：10倍醇量、提取2次、提取温度75℃、提取时间45min．结论：该工艺简便、快捷稳定,可为灰毡毛忍冬质量控制提供实验依据．     

优选秀山灰毡毛忍冬醇提取工艺研究

目的:优选灰毡毛忍冬的最佳提取工艺.方法:以浸膏得率和绿原酸含量为考察指标,采用L9(34)正交试验方法优选重庆秀山灰毡毛忍冬醇提取工艺,并采用UV和HPLC测定绿原酸的含量.结果:(1)以总浸膏得率为指标:10倍醇量、提取2次、提取温度75℃,提取时间30 min;(2)以绿原酸为指标:10倍醇量、提取2次、提取温度75℃、提取时间45 min.结论:该工艺简便、快捷稳定,可为灰毡毛忍冬质量控制提供实验依据.     

灰毡毛忍冬开花特性及繁育系统的研究

本试验对灰毡毛忍冬开花进程和昆虫访花特性进行了观察,采用离体培养法测定了花粉活力,用联苯胺-过氧化氢法和套袋测定柱头可授性,运用杂交指数、花粉-胚珠比、套袋实验对灰毡毛忍冬繁育系统进行研究.结果表明,灰毡毛忍冬群体花期约30 d,单株花期约16 d,单花花期2～3d.灰毡毛忍冬开花前12 h至开花后36 h柱头可授性强,而花粉活力以开花当天正午时最高.灰毡毛忍冬传粉昆虫以膜翅目和鳞翅目昆虫为主,它们的活动对灰毡毛忍冬的传粉起到了重要的作用.杂交指数OCI=4,判断繁育系统为异交,部分自交亲和,需要传粉者;花粉-胚珠比P/O约为664.4,繁育系统为兼性异交;套袋实验测定自交结实率3.03％,异花授粉结实率为79.17％,繁育系统为异花授粉.灰毡毛忍冬繁育系统为异交,部分自交亲和,异花授粉需要传粉者.     

金银花灰毡毛忍冬组培快繁技术研究

利用金银花灰毡毛忍冬春季的茎段进行组织培养,筛选出了灰毡毛忍冬不同组培阶段适宜的培养基配方,结果认为:在初级培养阶段为A9号(MS+0.10 mg/LBA+0.10 mg/LIBA)培养基,外植体的分化率达92.50%;在继代培养阶段为B8号(MS+1.50 mg/LBA+0.05mg/L NAA)培养基,不仅灰毡毛忍冬苗生长旺盛,而且具有较高的增殖系数,增殖倍数达4倍以上;在生根培养阶段为C3号(1/2MS+1.50mg/L NAA)培养基,试管苗生根率达95%、驯化成活率达92%以上。     

重庆主产地灰毡毛忍冬枝叶中总黄酮的含量测定

目的: 测定重庆主产地不同年龄灰毡毛忍冬枝叶中总黄酮的含量. 方法: 采用紫外分光光度计测定法. 结果: 灰毡毛忍冬叶片和枝条都含有较多的黄酮类物质, 其中含量变化为叶片大于枝条, 嫩叶大于老叶. 不同年龄灰毡毛忍冬叶片之间和枝条之间存在着显著性差异. 而不同个体之间的总黄酮含量也有一定的差异. 结论: 灰毡毛忍冬叶片和枝条都有很好的开发利用价值.     

灰毡毛忍冬产业现状及发展对策

总结了灰毡毛忍冬产业现状,指出了产业发展中存在的问题,提出了促进灰毡毛忍冬产业发展的具体措施,以促进灰毡毛产业发展。     

超声波对灰毡毛忍冬种子萌发能力的影响

研究超声波的处理时间、温度、功率对灰毡毛忍冬(Lonicera macrathoides Hand.-Mazz.)种子萌发能力的影响,寻找其超声波处理的最佳组合,为提高灰毡毛忍冬种子的发芽势和发芽率提供理论依据。在适宜的温度、湿度和充足的氧气条件下,进行常规的种子萌发试验,统计灰毡毛种子在不同组合的超声波处理时间、温度、功率条件下的发芽势和发芽率。灰毡毛忍冬种子经适当的超声波处理,可以提高其发芽势和发芽率,正交试验发现10 min、40℃、40 W的超声波处理条件最适宜于灰毡毛忍冬种子的萌发。超声波可以打破灰毡毛忍冬种子的休眠,提高其发芽势和发芽率。     

灰毡毛忍冬嫩枝扦插繁殖技术优化试验

采用正交试验研究方法,进行灰毡毛忍冬嫩枝扦插繁殖技术优化试验,结果表明:生长调节剂的种类、浓度、处理时间、基质类型对灰毡毛忍冬嫩枝扦插的生根质量有明显影响,各因素的适宜水平分别为NAA+IBA((1∶1)、400mg/kg、40min、珍珠岩∶菌包(1∶1),该组合生根质量平均Q值为47.26,为灰毡毛忍冬嫩枝扦插处理的适宜方法。     

灰毡毛忍冬愈伤组织诱导和增殖的研究

将灰毡毛忍冬茎段和叶片接种在MS培养基中,并在培养基中添加不同浓度的生长素2,4-D,6-BA,NAA,以此探讨茎段和叶片2种外植体在不同浓度的生长素组合中愈伤组织的诱导和增殖情况。结果表明:叶片诱导愈伤组织的效果比茎段好,并且叶片和茎段诱导愈伤组织的最佳培养基均为MS 2,4-D 1.0 mg/L 6-BA 0.5 mg/L,愈伤组织增殖培养的最佳培养基为MS 6-BA1.5 mg/L NAA 0.5 mg/L。     

缺素对灰毡毛忍冬生长及生理指标的影响

通过营养液砂培试验,探讨了灰毡毛忍冬在氮、磷、钾缺乏条件下植株生长变化以及生理指标的改变。结果表明,缺素处理对灰毡毛忍冬植株生长影响显著,在各种缺素条件下灰毡毛忍冬生物量均明显降低,NR活性高低为:全营养液>缺氮>缺钾>缺磷>对照;根系活力高低为:缺磷>全营养液>对照>缺钾>缺氮;营养液处理的灰毡毛忍冬叶片与三种缺素处理下Chla及chl含量差异达到极显著水平。     

山银花皂苷提取条件优化研究

首次建立山银花中灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的最佳提取工艺。采用单因素试验和正交试验考察提取溶剂浓度、提取时间、提取温度、料液比对灰毡毛忍冬皂苷乙和川续断皂苷乙的影响。结果表明,两种皂苷的最佳提取工艺条件如下:以浓度为90%的乙醇溶液作为提取剂,回流时间为120 min,料液比为1∶10(m∶V),回流温度为80℃,该条件下灰毡毛忍冬皂苷乙与川续断皂苷乙的总提取率可达到7.9%。