斜纹夜蛾核多角体病毒研究进展

斜纹夜蛾核多角体病毒杀虫剂是一种新型的生物农药,从分子生物学、病毒流行学、对非靶标生物的毒性、工厂化生产及田间药效等方面阐述了斜纹夜蛾核多角体病毒的研究进展.     

斜纹夜蛾核型多角体病毒多角体基因的克隆

在以５种限制性内切酶对ＳＩＮＰＶ基因组作酶解分析的基础上，以ＡｃＮＰＶ多角体基因的部分编码序列作探针，对其进行Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交分析，发现ＸｂａⅠ酶切的２．９ｋｂ片段含有全部或部分ＳＩＮＰＶ多角体基因，并将该片段克隆至ｐｕｃ１８载体上。     

连续传代时感染斜纹夜蛾核多角体病毒不同分离株的毒力变化

自然界中的核多角体病毒(NPV)和颗粒体病毒(GV)普遍存在多种分离株,同种病毒不同分离株往往在致病性和作用速度上存在差异[1～3].     

斜纹夜蛾核型多角体病毒少多角体遗传突变株的鉴定

【目的】研究病毒基因感染昆虫宿主的分子机制。【方法】从自然界分离和鉴定斜纹夜蛾核型多角体病毒（Spodoptera litura multicapsid nucleopolyhedrovirus,SpltMNPV）的遗传突变株,筛选到少多角体基因突变株-SpltMNPV B型株,克隆该株的少多角体基因（fp25K）。对不同株系SpltMNPV的fp25K进行序列分析、病毒感染的细胞培养和虫体感染试验。【结果】核苷酸序列分析表明,与中国株相比,A型和C型分别发生了4个和3个核苷酸改变,但编码的氨基酸不变;B型株3′端核苷酸发生了多处缺失和一处插入,导致FP25K蛋白C端21个氨基酸改变。病毒感染的细胞培养试验表明,fp25K基因突变导致多角体明显减少的表型。虫体试验表明,感染fp25K突变的SpltMNPV B型株的宿主液化减弱。【结论】SpltMNPV B型株是一株自然的少多角体遗传突变株,该突变株可用于更深入地解析少多角体表型成因、病毒感染后虫尸降解和液化作用的分子机制。     

取食人工和天然饲料斜纹夜蛾对核多角体病毒敏感性的差异

通过室内生物测定 ,比较了取食人工饲料和天然饲料斜纹夜蛾对斜纹夜蛾核多角体病毒 (SlNPV)的敏感性。结果表明 ,从毒力来看 ,SlNPV对取食人工饲料斜纹夜蛾 3龄和 4龄幼虫的LC50 分别为 1.1× 10 8PIB/ml和2 .7× 10 8PIB/ml,对取食甘蓝叶片的LC50 分别为 6 .0× 10 8PIB/ml和 6 .4× 10 8PIB/ml,对取食大豆叶的LC50 分别为2 .4× 10 8PIB/ml和 1.9× 10 8PIB/ml,取食人工饲料斜纹夜蛾对病毒的敏感性高于取食甘蓝叶斜纹夜蛾 ,而与取食大豆叶的差异较小。从致死速度来看 ,病毒对取食大豆叶斜纹夜蛾的杀虫速度最慢。从斜纹夜蛾体重增长来看 ,取食人工饲料的体重增长最快 ,取食甘蓝叶的居中 ,取食大豆叶的体重增长最慢     

甘蓝夜蛾核型多角体病毒防治莲藕斜纹夜蛾的效果

进行甘蓝夜蛾核型多角体病毒防治莲藕斜纹夜蛾的田间药效试验,结果表明,从防治效果和施用成本综合考虑,20亿PIB·g^-1 甘蓝夜蛾核型多角体病毒 450 mL·hm^-2较好,药后 14 d 总防效为97.9%。     

斜纹夜蛾核型多角体病毒的分离及感染力测定

对福建农业大学生物技术中心采集分离的斜纹夜蛾核型多角体病毒进行了致病过程和形态大小的观察，感染力测定以及小菜蛾和菜青虫对该病毒的敏感性等方面的初步研究。     

甜菜夜蛾核多角体病毒VP39蛋白在苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒中的功能研究

【目的】构建表达甜菜夜蛾核多角体病毒（Spodoptera exigua multiple nucleopolyhedrovirus,SeMNPV） VP39蛋白的vp39假型苜蓿丫纹夜蛾核多角体病毒（Autographa californica MNPV,AcMNPV）,明确SeMNPV VP39是否能取代AcMNPV VP39在AcMNPV中行使功能,为深入探究杆状病毒的核衣壳装配机理打下理论基础。【方法】利用Bac-to-Bac杆状病毒表达载体系统在AcMNPV vp39缺失型重组bacmid （bAcvp39KO）的基础上构建携带SeMNPV vp39基因、绿色荧光蛋白基因（Enhanced green fluorescence protein,egfp）和多角体蛋白基因（Polyhedrin,polh）的重组病毒（vAcSevp39:FLAG）。利用Western blotting检测分析SeMNPV vp39在vAcSevp39:FLAG转染的草地贪夜蛾（Spodoptera frugiperda） IPLB-Sf21-AE clonal isolate 9（Sf9）细胞中的表达情况,通过荧光显微镜观察vAcSevp39:FLAG在Sf9中的感染和扩散情况,采用病毒滴度测定并绘制病毒生长曲线检测vAcSevp39:FLAG的感染性芽生型病毒粒子产量,并以电子显微镜观察vAcSevp39:FLAG转染的Sf9细胞中的形态发生情况。【结果】Western blotting检测结果表明,SeMNPV VP39能在v AcSevp39:FLAG转染的Sf9细胞中获得表达;荧光显微镜观察和病毒生长曲线测定结果表明,在vAcSevp39:FLAG转染的Sf9细胞中无感染性的芽生型病毒粒子产生,与AcMNPV vp39缺失型重组病毒（v Acvp39KO）的现象一致;电子显微镜观察发现,与vAcvp39KO不同的是,在vAcSevp39:FLAG转染的细胞中虽然未产生核衣壳,但在感染细胞的核中存在大量空的透明长管状衣壳结构,表明SeMNPV VP39能挽救vAcvp39KO的衣壳结构装配,但在AcMNPV中不具备装配核衣壳的能力。【结论】SeMNPV VP39在AcMNPV中虽能形成衣壳结构,但不能有效装配核衣壳,导致无芽生型病毒粒子和包埋型病毒粒子产生。     

斜纹夜蛾核型多角体病毒的分离及感染力测定

对福建农业大学生物技术中心采集分离的斜纹夜蛾核型多角体病毒进行了致病过程和形态大小的观察、感染力测定以及小菜蛾和菜青虫对该病毒的敏感性等方面的初步研究．斜纹夜蛾核型多角体病毒形状不规则,大小不一,直径为１．０～２．５μｍ,平均直径为１．６５μｍ．以斜纹夜蛾、小菜蛾和菜青虫为靶标害虫,对该病毒的感染力及杀虫特异性进行了测定．结果表明：在测定的浓度范围内,斜纹夜蛾幼虫感病死亡率随多角体浓度和虫龄而变化,在２５℃下,３龄幼虫的致死中浓度为１×１０５．１４ＰＩＢｍＬ－１;浓度相同时,幼虫死亡速度随龄期增大而减慢;对小菜蛾和菜青虫幼虫的致病死亡率为０．可见,此多角体病毒对斜纹夜蛾具有较高的毒力,且专化性强．     

300亿PIB/g斜纹夜蛾核多角体病毒母药的生产工艺

阐述了300亿PIB/g斜纹夜蛾核多角体病毒母药的生产工艺,包括斜纹夜蛾的人工饲养、多角体病毒的人工增殖、多角体病毒的提纯、产品的制备、加工及包装.该产品为粉剂,多角体含量为300亿PIB/g.经生物测定,当多角体病毒的接种浓度为2.0×107 PIB/mL时,斜纹夜蛾四龄幼虫的平均死亡率可达86.40％.     

斜纹夜蛾核型多角体病毒对宿主子代的弱化作用

用9.44×108 OB/mL和9.44×107OB/mL病毒液分别饲喂斜纹夜蛾(Spodoptera litura)幼虫和成虫,观察斜纹夜蛾核型多角体病毒(S1NPV)对宿主子1、2代的影响.结果表明:斜纹夜蛾4～6龄初幼虫饲毒后,F1代、F2代化蛹率分别下降了12.73％～18.59％、5.88％～10.21％,羽...     

不同化学药剂对烟青虫和斜纹夜蛾的防治效果

[目的]筛选出防治烟青虫和斜纹夜蛾的新型高效低毒化学药剂供湘南地区烟叶生产上使用。[方法]采用田间比较鉴定、室内检测分析等方法,从烟株的抗虫性、初烤烟叶外观和内在品质等方面研究了4种化学药剂的防治效果及其对烟叶生产的影响。[结果]参试的4种化学药剂中,20%氯虫苯甲酰胺乳油对烟青虫和斜纹夜蛾的防效显著,其药后7、15 d防效分别是94.77%和83.14%、89.85%和80.29%,优于化学对照药剂2.5%高效氯氟氰菊酯乳油,且对烟叶的外观和内在品质无负面影响。[结论]20%氯虫苯甲酰胺乳油可替代高效氯氟氰菊酯在烟草上推广使用。     

几种杀虫剂防治斜纹夜蛾效果试验

采用几种不同杀虫剂田间防治斜纹夜蛾,药效试验表明,百草二号水剂1500倍液、2000倍液、3000倍液对斜纹夜蛾的防治较好,药后3～7d校正死亡率分别为90%以上,80%～90%,70%～80%;辣子力对斜纹夜蛾的防治效果一般,药后3～5d校正死亡率为70%～80%,药后7d校正死亡率为80%以上;0.5%海正三令乳油对斜纹夜蛾的防治效果很好,药后3d校正死亡率达100%,药后5～7d校正死亡率为97%～80%。结果表明,百草二号水剂、海正三令乳油两种药剂对斜纹夜蛾都有很好的防治效果,可在生产上推广应用。     

斜纹夜蛾生物防治研究进展

综述了国内外斜纹夜蛾的生物防治研究进展,概括了斜纹夜蛾的主要自然天敌种类,论述了植物源提取物、性信息素、转基因技术、诱集植物、抗虫品种防治斜纹夜蛾及其应用,并讨论了生物防治存在的问题和今后持续控制斜纹夜蛾的发展趋势.     

性诱剂防治蔬菜斜纹夜蛾的研究

[目的]利用性诱剂田间防治斜纹夜蛾,提高防效,减少农药使用,降低防治成本。[方法]在田间栽培的茄子、白菜、甜瓜、豇豆上挂设性诱剂防治斜纹夜蛾,统计诱杀量、虫口密度,比较防治效果,计算防治成本。[结果]在4种蔬菜上使用性诱剂平均防效比纯化学药剂防治分别提高22.0%、30.3%、33.2%、28.7%,用药量减少2/3,降低防治成本。[结论]利用性诱剂和化学药剂防治蔬菜斜纹夜蛾比纯化学药剂防效好。     

不同密度化学信息素控制烟草斜纹夜蛾的效果

[目的]研究化学信息素控制烟草斜纹夜蛾的田间最适放置密度。[方法]分别按25.8 m×25.8 m(15.0个/hm2)、31.6 m×31.6m(22.5个/hm2)和36.5 m×36.5 m(30.0个/hm2)各放置16个诱捕器(4行×4排),同时设不低于2 hm2的空白对照,3次重复。[结果]在忽略风向的影响下,随单个诱捕器控制面积的增加,诱蛾量有所增加,但3种不同密度处理间诱蛾量差异不显著;3种放置密度均可有效控制烟田斜纹夜蛾的发生,减少农药使用,保护田间自然天敌,降低防治成本。[结论]化学信息素控制烟草斜纹夜蛾的诱捕器放置密度以31.6 m×31.6 m(22.5个/hm2)为宜。     

斜纹夜蛾性信息素的研究与应用

介绍了斜纹夜蛾性信息素的组分,阐述了性信息素的感受与调控机制和应用性信息素监测和防治斜纹夜蛾技术,分析了影响性信息素诱捕效果的因素,并展望了斜纹夜蛾性信息素今后的研究方向。