金黄色葡萄球菌耐药性及肠毒素分型研究

为了解从生鲜乳中分离得到的31株金黄色葡萄球菌的耐药性和肠毒素分布情况,用微量肉汤稀释法进行药敏试验,用PCR方法进行肠毒素的检测和分型。结果表明,31株金黄色葡萄球菌耐药率在50%以上的抗菌药有7种,药耐药率小于10%的有3种;敏感率大于50%的抗菌药有6种,敏感率小于10%的有5种。31株金黄色葡萄球菌毒素基因携带率为93.5%,同时携带2种及以上毒素的菌株占67.7%,有SEA基因的占38.7%,含其他传统的毒素基因类型SEB、SEC、SED和SEE基因的菌株只占40.4%,携带新发现的毒素基因SEG、SHE、SEI和SEJ的菌株占67.7%。说明本次试验中的31株金黄色葡萄球菌对6类13种抗菌药都有不同程度的耐药性,且多重耐药现象比较严重。生鲜乳中分离的金黄色葡萄球菌带毒率高,且携带新发现的肠毒素基因较多。     

牛乳金黄色葡萄球菌分离株超抗原肠毒素基因分型研究

为研究牛乳金黄色葡萄球菌 SP-3分离株携带超抗原肠毒素的基因型,设计合成了金黄色葡萄球菌超抗原肠毒素基因 SEA-SEE 及 TSST-1特异性引物,并以其固有基因 femA 和 femB 为阳性对照,以分离菌株 DNA 为模板,经 PCR 扩增菌株携带的毒素基因。结果表明,SP-3分离株和阳性对照菌株均含有femA 和 femB 基因,且牛乳分离株携带 sea、sec、sed 和 tst-14种超抗原肠毒素基因,为开展动物源超抗原毒素基因系统分型及有效防控金黄色葡萄球菌奶牛乳腺炎奠定基础。     

牛奶中金黄色葡萄球菌耐药性分析

采用药敏纸片法对奶样中分离得到的29株金黄色葡萄球菌进行耐药性分析,以了解青岛市金黄色葡萄球菌的耐药情况。结果表明:29株金黄色葡萄球菌对青霉素(72.41%)、链霉素(68.97%)、卡那霉素(62.07%)、新霉素(58.62%)和庆大霉素(58.62%)的耐药率高,为指导临床用药和耐药性及耐药性监测提供理论依据。     

金黄色葡萄球菌产肠毒素规律的初步研究

为研究金黄色葡萄球菌产毒的最佳条件和规律。依国标GB/T4789-10-2003液体透析培养法培养质控金黄色葡萄球菌,采用全自动荧光/化学发光分析仪检测金黄色葡萄球菌肠毒素,利用正交试验设计得最佳工艺,应用于质控金黄色葡萄球菌和分离菌。结果显示,质控金黄色葡萄球菌培养40 h,温度为40℃,培养室空气中氧含量为15.5%时肠毒素产量最大,单个菌落肠毒素产量为59.31 mg。表明生产工艺中产毒培养温度和振荡培养时间以及空气中氧含量对肠毒素的产量影响较大。     

应用双抗夹心ELISA对葡萄球菌肠毒素的检测与分型研究

本文应用双抗夹心ELISA方法对SEA、SEB、SEC_1、SEC_2和SED五种葡萄球菌肠毒素进行了检测与分型研究。结果表明,该法检测敏感性为 3.125～6.250ng/ml,检测食品标本的敏感性为6.25～12.50ng/ml;对27株食品标本分离菌检测结果发现,3株可以产生SET,其中1株产生SEB、2株产生SED。     

金黄色葡萄球菌肠毒素的研究进展

金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种革兰氏阳性菌,约1/3人口携带,引起常见的严重疾病.这些疾病包括食物中毒、中毒性休克综合征和非感染性疾病,这是由金黄色葡萄球菌产生的外毒素引起.截止目前,在己发现的超过20种金黄色葡萄球菌肠毒素中,SEA和SEB是最具特色的,也被视为超抗原,由于它们能与MHCⅡ类分子结合,作用于抗原呈递细胞和刺激T细胞大群体共享可变区的T细胞受体β链.本文就肠毒素的致病性、致病机制及其检测方法进行了较为深入的阐述,期望能为临床治疗和食品监控提供一定的指导意义.当前,由于金黄色葡萄球菌多重耐药菌株的出现,因而对食品的危害变得越来越严重,必须尽量降低食品中金黄色葡萄球菌的含量,并防止其在食品之间的交叉污染.     

动物源性金黄色葡萄球菌耐药性的检测

用K—B法对52株动物源性金黄色葡萄球菌进行了17种抗生素耐药性检测。结果，试验菌对16种抗生素的耐药率达19．2％～84．6％，耐药率最高的为氨苄青霉素，最低的为头孢曲松；其中对12种抗生素的耐药率在50．0％以上；在52株金黄色葡萄球菌中最少的耐2种抗生素，最多的耐15种抗生素，表明临床分离的金黄色葡萄球菌株均表现高水平耐药和多重耐药；受试菌均对万古霉素敏感。     

无毒突变肠毒素免疫对金黄色葡萄球菌乳腺感染的免疫效果研究

本研究表达并提纯了无毒诱变葡萄球菌肠毒素C与谷胱甘肽硫转移酶重组融合蛋白(GST-mSEC).用GST-mSEC作免疫抗原对小鼠进行免疫,研究其对金黄色葡萄球菌(金葡菌)经乳导管注射感染的免疫效果.试验结果表明,在小鼠乳腺感染金葡菌3 d后,免疫小鼠乳腺的眼观病理变化显著轻于未免疫的对照组,乳腺组织中的菌数也明显低于未免疫的对照组.GST-mSEC免疫小鼠可引起大量的特异性抗体产生,并对葡萄球菌超抗原刺激的炎症性细胞因子的产生具有显著的中和抑制作用.结果表明GST-mSEC融合蛋白及其诱导的特异性抗体对金葡菌引起的乳腺感染具有良好的抗感染作用.     

产肠毒素金黄色葡萄球菌显色培养基的制备

为了研究一种用于分离与鉴别产肠毒素金黄色葡萄球菌的FS显色培养基,依据产肠毒素金黄色葡萄球菌特有的耐热核酸酶和凝固酶阳性的特点,设计对产肠毒素金黄色葡萄球菌选择性培养和耐热核酸酶联合测试的FS显色培养基。应用质控菌株,对其特异性和灵敏度进行检测。结果显示:FS显色培养基对产肠毒素金黄色葡萄球菌具较好的特异性和灵敏度,特征菌落出现时间缩短至12 h。FS显色培养基对产肠毒素金黄色葡萄球菌具较好的特异性和灵敏度,具有较高的应用价值。     

鸡源金黄色葡萄球菌耐药性转移的研究

通过药敏试验及脱质粒试验选择了４株鸡源金黄色葡萄球进行了滤膜交配，结果证明，鸡源金黄色葡萄球菌之间可通过接合方式传递抗药性，转移的抗性为四环素抗性。该抗性质粒可在受体菌内以完整的复制子形式存在，其稳定性较好。转化试验证明，３９号鸡源金黄色葡萄球菌及接合筛选子“７８＋６３”的四环素抗性性质粒可以转化入经脱质粒的金黄色葡萄球菌，不能转化野外分离的金黄色葡萄球菌。     

鸡源金黄色葡萄球菌噬菌体分型的研究

本试验应用噬菌体分型的方法,对主要来源于我国京津地区葡萄球菌病鸡的207株金黄色葡萄球菌进行了分型。 应用国际金黄色葡萄球菌噬菌体分型系统分型的结果为:常规检验稀释度(R.T.D.)时分型率71.12％,其中属噬菌体第Ⅰ裂解群的最多,Ⅲ群次之,混和群和Ⅳ群(又不定群)再次之,属Ⅱ群者最少(分别占可分型总株数的48.98％,18.24％,14.12％,12.84％和5.41％)。在可分型菌株中,不同分离部位(主要为皮肤病灶、内脏和眼)的菌株均以属噬菌体裂解群Ⅰ群的居多;来源自不同日龄(主要为雏鸡、育成鸡和成鸡)的菌株也以属噬菌体裂解群Ⅰ群者居多。同时发现,鸡源金黄色葡萄球菌菌株中仅能被52A型噬菌体强烈裂解的占可分型总数的44.22％。 试验说明,自我国京津地区分离的鸡源金黄色葡萄球菌菌株与人源株有一定差异,但具有较好的同源性,文中讨论了两者间交叉感染的可能性。     

一株产肠毒素金黄色葡萄球菌致死小鼠的初步研究

目的:观察产肠毒素金黄色葡萄球菌对小鼠的致病性。方法:用一株肠毒素检测阳性的金黄色葡萄球菌(SEF101)24h肉汤培养物,每只0.5mL肌肉、腹腔或尾静脉注射染菌。结果:金黄色葡萄球菌(SEF101)24h肉汤培养物经肌肉、腹腔或尾静脉注射染菌均可致小鼠死亡,最小感染剂量为每只鼠腹腔注射菌量3.3×105CFU即可引起小鼠感染死亡,24h培养物经80℃30min灭活处理仍可致小鼠死亡,经VIDAS法检测,24h肉汤培养物均呈肠毒素阳性。结论:金黄色葡萄球菌(SEF101)24h肉汤培养物染菌量3.3×105CFU即可引起小鼠感染死亡,金黄色葡萄球菌(SEF101)为产肠毒素菌株。     

金黄色葡萄球菌融合肠毒素的纯化和免疫特性分析

本研究将金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)肠毒素(B,D,E)融合表达蛋白的包涵体经过初步纯化,免疫吉戎獭兔制备血清抗体,经ELISA和琼脂扩散试验检测表明,表达的SA融合肠毒素以不同的抗体效价证明保留了天然毒素各自的抗原性,与多种非目标菌和毒素不反应,具有较好的特异性。由此说明表达产物可诱导机体产生广谱反应特性的抗体。本试验为融合肠毒素的进一步应用,以及建立食物中毒菌广谱、快速的检测方法奠定了基础。     

生鲜牛奶中不同类型金黄色葡萄球菌污染差异性分析

[目的]了解我国部分地区生鲜牛奶中金黄色葡萄球菌肠毒素的污染状况,分析产不同类型肠毒素的金黄色葡萄球菌在不同地区的流行状况。[方法]采集三个省共6个奶牛场及挤奶站的新鲜牛奶进行金黄色葡萄球菌的分离鉴定,并对分离菌肠毒素分型。[结果]从360份生鲜牛奶中共分离到102株金黄色葡萄球菌,分离率为28.33%?;92.3%的菌株产SEA—SEJ;不同地区产各种类型肠毒素的菌株存在明显差异,湖南和内蒙分离到的产各型肠毒素菌株占比例较高。     

金黄色葡萄球菌基因分型方法研究进展

金黄色葡萄球菌是引起医院和社区感染的重要致病菌之一,也是引起奶牛乳房炎的重要致病菌。为有效控制其感染及流行,并为临床采取控制措施提供理论依据,需要对菌株进行分型。本文就金黄色葡萄球菌的基因分型方法研究进展作一综述。     

乌鲁木齐生牛乳中金黄色葡萄球菌的肠毒素检测及分离株同源性分析

探究乌鲁木齐生牛乳中金黄色葡萄球菌经典肠毒素携带情况及分离株同源性差异,为金黄色葡萄球菌的防控提供参考。对乌鲁木齐地区采集的131份生牛乳样品采用特异性选择培养基结合PCR方法分离鉴定金黄色葡萄球菌,并通过PCR方法检测金黄色葡萄球菌5种经典肠毒素(sea、seb、sec、sed、see)携带情况和根据测序结果对分离株进行同源性分析。结果显示,共分离鉴定到金黄色葡萄球菌13株,总分离率为9.92%(13/131);13株金黄色葡萄球菌经典肠毒素阳性菌株5株,阳性率为38.46%;13株金黄色葡萄球菌的同源性在93.7%～99.7%之间,遗传差异在0.3～6.6之间。研究表明,该地区生牛乳中存在一定金黄色葡萄球菌的污染,经典肠毒素阳性率较高,不同来源的分离株同源性高、差异性小。     

禽源金黄色葡萄球菌耐药性监测

从临床样品中分离鉴定得到183株金黄色葡萄球菌,采用微量肉汤稀释法监测其对24种抗菌药物的耐药性。结果表明,183株金黄色葡萄球菌对24种抗菌药物均呈现不同程度的耐药性,对常用的青霉素类、磺胺类药物及甲氧苄啶严重耐药,耐药率高达81%以上;其中检测出MRSA42株,检出率为22.95%。94.00%的金黄色葡萄球菌菌株呈现多重耐药,耐药谱型主要分布在3～8耐之间,以7耐菌株所占比例最大(15.30%),共有119种耐药谱型。     

奶牛金黄色葡萄球菌耐药性及控制技术研究进展

本文就当前奶牛养殖过程中金黄色葡萄球菌的耐药情况、对各种抗菌药物的耐药机制以及具体的控制技术进行介绍,希望能够为规范使用抗菌药物、减少细菌耐药性并且提高治疗效果提供参考。