孔雀石绿在凡纳滨对虾体内的残留与消除规律

研究了不同养殖环境下孔雀石绿在凡纳滨对虾（Litopenaeu svannamei）体内的残留和消除规律。试验对虾刚0．20mg·L^-1。的孔雀石绿溶液药浴2h后转移至室内或室外水泥池中用盐度为28的海水养殖,采用高效液相色谱一串联质谱法（LC／MS／MS）测定对虾头部和肌肉中的有色孔雀石绿（MG）及其代谢产物无色孔雀石绿（LMG）的残留量。结果表明,药浴2h时对虾体内孔雀石绿的残留量达到峰值,转入清水养殖168h,2种环境养殖对虾体内的孔雀石绿残留量均降低至检测限以下,孔雀石绿在对虾体内的消除速率是室外环境养殖的快于室内环境养殖,对虾头部快于肌肉组织,且MG的消除快于LMG。     

恩诺沙星在凡纳滨对虾体内和体外肝微粒体中的代谢产物比较分析

采用超高效液相色谱-四级杆-飞行时间质谱(UPLC/Q-TOF MS)对恩诺沙星在凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)体内和体外肝胰腺微粒体孵育下的代谢产物进行定性分析。体内试验为凡纳滨对虾口灌30 mg.kg-1恩诺沙星,24 h后采集血浆用于代谢产物分析。体外试验为在含有肝微粒体的NADPH体系中加入恩诺沙星(100μM)进行孵育,检测孵育液中的代谢产物;肝胰腺采集自未给药的凡纳滨对虾,超速离心法制备而得。凡纳滨对虾血淋巴中除以恩诺沙星原形药物为主外,还可检测到少量的N-去乙基代谢产物环丙沙星、环丙沙星哌嗪环开环代谢物及其同分异构体;而在肝胰腺微粒体体外孵育体系中除检测到原形药物外,只有少量的N-去乙基代谢物环丙沙星。无论是体内还是体外,代谢产物生成量都很少,但环丙沙星是主要代谢产物。推测恩诺沙星在凡纳滨对虾体内的代谢反应主要是脱乙基反应和加氢还原反应,而在体外肝胰腺微粒体恩诺沙星代谢的反应主要是脱乙基反应。     

中草药对凡纳滨对虾生长、免疫功能的影响

以凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）为实验对象,基础饵料中分别添加不同水平的中草药（0％、1．0％、2．0％）,结果表明,添加不同剂量的中草药能显著提高凡纳滨对虾的增重率和增长率,显著地降低对虾的饵料系数,对凡纳滨对虾的成活率有极显著提高．能极显著提高对虾血清中溶菌酶和SOD活性,能显著提高ACP活性,极显著提高对虾对溶藻弧菌的免疫保护率。     

复方中草药对凡纳滨对虾热应激蛋白70基因表达的影响

为了研究复方中草药对凡纳滨对虾热应激蛋白70基因mRNA表达的影响,试验凡纳滨对虾随机分为2组,第1组喂食基础饵料辅以1％的复方中草药,第2组喂食基础饵料作为对照。采用逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）对2组凡纳滨对虾的肝组织进行HSP70基因的mRNA表达检测,并以18SrRNA为内参照进行基因表达水平的半定量分析,结果显示第1组的凡纳滨对虾的肝组织HSP70基因的mRNA的表达显著高于第2组（P〈0．05）,说明复方中草药可提高凡纳滨对虾HsP70基因mRNA的表达量。     

酵母水解物对低盐胁迫凡纳滨对虾非特异性免疫及抗氧化能力的影响

本实验旨在研究饲料中添加酵母水解物对凡纳滨对虾在低盐度胁迫条件下非特异性免疫和抗氧化能力的影响。选取凡纳滨对虾[初始体质量（15.82±0.08）g],平均分为2组,对照组投喂基础饲料（Y0）,实验组投喂添加了3%酵母水解物的实验饲料（Y3）,在室内养殖15d后分别放入盐度为4‰（S4）和28‰（S28）的水体中进行盐度胁迫实验,每组6个重复,每个重复30尾虾（根据饲料和盐度不同组合,分组命名为Y0S4、Y0S28、Y0S3、Y0S28）。结果表明：饲料中添加3%酵母水解物对凡纳滨对虾血清酚氧化酶（PO）、总一氧化氮合成酶（TNOS）活性没有显著影响,但低盐度胁迫1h时,Y3S4组PO、TNOS活性显著高于Y0S4组;盐度因素对PO、TNOS活性产生显著影响,低盐度胁迫1h时,S28组PO、TNOS活性显著高于S4;饲料中添加3%酵母水解物显著提高了凡纳滨对虾肝胰腺超氧化物歧化酶（SOD）活性;盐度因素对酸性磷酸酶（ACP）活性产生了显著影响,S28组ACP活性显著高于S4。由此可见,在饲料中添加酵母水解物能够提高凡纳滨对虾肝胰腺SOD活性,提高对虾的抗氧化能力;在遭遇低盐度胁迫时,对虾能迅速恢复PO、TNOS活性至正常水平,从而提高凡纳滨对虾的抵抗不良环境的能力。     

Ca^2＋、Mg^2＋对凡纳滨对虾存活及生长的影响

通过单因子静态急性毒性试验和正交设计法,研究水环境中Ca~(2 )、Mg~(2 )、Ca~(2 ) Mg~(2 )总量及Ca~(2 )/Mg~(2 )比值对凡纳滨对虾存活及生长的影响。结果表明:(1)凡纳滨对虾48h的Ca~(2 )的LC_50为407.38mg·L~(-1)、Mg~(2 )的LC_(50)为741.31mg·L~(-1)。(2)在Ca~(2 )/Mg~(2 )比值为1:10时,对凡纳滨对虾生存没有影响;(3)凡纳滨对虾的生长与Ca~(2 )浓度有密切关系,其值过高或过低均会影响凡纳滨对虾的生长;在Ca~(2 )/Mg~(2 )比值为1:3时,凡纳滨对虾生长和存活率随着Ca~(2 ) Mg~(2 )质量浓度的增加而上升,但达到一定质量浓度后,又随着Ca~(2 ) Mg~(2 )质量浓度的继续增加而下降。     

氨氮胁迫前后凡纳滨对虾组织中抗氧化酶和脂质过氧化产物的分布

为了弄清抗氧化酶、脂质过氧化产物在凡纳滨对虾体内分布特点，以及离子氨氮胁迫后这些指标在该对虾体内的变化情况，选择了南方有代表性的凡纳滨对虾（6．322±0．221g），分别测定了氨氮胁迫前后体内抗氧化酶SOD、CAT、GSH—Px和GSH、MDA的分布特点，丰富和发展了对虾的自由基和抗氧化防御理论，为外源抗氧化剂在对虾饵料中应用打下了基础。试验结果表明，肝胰腺和血清是凡纳滨对虾对氨氮造成胁迫的敏感组织，各项抗氧化酶、总抗氧化能力、组织GSH含量以及MDA含量可作为衡量凡纳滨对虾氧化应激状态的指标。     

枯草芽孢杆菌对水质及凡纳滨对虾幼体免疫指标影响的研究

研究了不同浓度的枯草芽孢杆菌（Bacillus substilis）对养殖环境水质和凡纳滨对虾（Penaeus vannamei）幼体抗病力相关酶活性的影响。结果表明,枯草芽孢杆菌能显著（P〈0．05）降低化学需氧量（COD）和氨氮（NH3-N）含量,抑制亚硝酸氮（NO2-N）的产生;当枯草芽孢杆菌投放浓度为1．25×10^4cfu·mL^-1时,水体中COD、NH3-N和NO2-N含量均值比对照组分别降低了65．30％、59．70％和88．64％;20d后测定对虾的碱性磷酸酶（AKP）、过氧化物酶（POD）、酚氧化酶（PO）、超氧化物歧化酶（SOD）、抗菌和溶菌活力,各值相对于对照组分别提高了3．67、1．64、0．45、3．06、2．57和1．14倍;成活率比对照组提高了10％,增重率是对照组的2．44倍。因此,一定浓度的枯草芽孢杆菌能改善凡纳滨对虾幼体的养殖水质进而提高凡纳滨对虾幼体的抗病力。     

凡纳滨对虾捕食藻钩虾能力探究

研究了体长为4～7em的凡纳滨对虾对体长为2～17mm的藻钩虾的捕食能力,结果表明：凡纳滨对虾捕食藻钩虾的能力随着对虾体长的增长而增加。体长4cm的凡纳滨对虾不能捕食13—17mm的藻钩虾,而主要捕食2～7mm的藻钩虾,其在凡纳滨对虾日摄食量（干重）中所占比例达80％以上。5~7cm的凡纳滨对虾可捕食2～17mm的藻钩虾。随凡纳滨对虾体长增加,捕食大规格藻钩虾的比例也增加。     

浙江省平湖市养殖凡纳滨对虾主要疾病调查分析及综合防治试验

凡纳滨对虾（Litopenaeus vannamei）又称凡纳对虾、南美白对虾,原产于中美洲。由于凡纳滨对虾对盐度有广泛的适应性,生长迅速、抗病力强,迅速成为当前养殖总产量最高的内陆养殖甲壳类品种。近年来,内陆养殖凡纳滨对虾也不同程度地受到各种病害的危害,成为该产业发展的主要障碍。为摸清内陆养殖凡纳滨对虾的主要发病情况,建立有效的综合防治技术,我们在2005-2006年期间对浙江省平湖市内陆养殖的凡纳滨对虾进行了病害调查工作,     

蒽对脊尾白虾存活、免疫和能量分配的影响

以脊尾白虾(Exopalaemon carinicauda)为试验对象,探讨了蒽对脊尾白虾存活、免疫和能量分配的影响。将同一批亲虾繁殖的幼虾放在试验室暂养7 d,挑选健康活泼和规格相似的幼虾作为试验对象,推算蒽对脊尾白虾的半致死浓度和安全浓度。试验设置8个浓度梯度,每个处理设3个重复。在试验过程中,每个水族箱加入5只白虾,经试验计算蒽对脊尾白虾24、48、72和96 h半致死浓度分别为21.53、16.31、11.76和9.06 mg/L,安全浓度为2.81 mg/L。在安全浓度下胁迫192 h,测定血清酚氧化酶和超氧化物歧化酶的活性,发现蒽对脊尾白虾免疫有着一定程度的抑制作用。随后在安全浓度下试验21 d,设两个处理,每个处理设3个重复,每个重复投放10只白虾,待试验结束后,选取白虾的肌肉部分进行能量分配测定,计算出蛋白含量、脂肪含量、糖元含量和肌肉的总能量储备以及对应能量分配的变化,结果发现对照组与处理组总能量储备相差240.67 mJ·mg^-1(湿重),能量消耗相差252 mJ·mg^-1(湿重),细胞能量分配相差11.33 mJ·mg^-1·h^-1(湿重)。以上结果表明,蒽明显影响脊尾白虾的存活、免疫和代谢。     

饱食投喂频率对子二代中华鲟稚鱼生长及胃肠排空的影响

为探计不同饱食投喂频率对子二代中华鲟(Acipenser sinensis)的影响,选择子二代中华鲟(0.15±0.02)g稚鱼在水温(18.0±0.5)℃的不同饱食投喂频率(2、3、4次/d)条件下,测定其生长及胃肠排空特征,并用线性、指数和平方根模型对其胃肠排空数据进行拟合。结果显示:(1)饱食投喂频率的增加显著降低了实验鱼的摄食率(FR),但对增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、肥满度(CF)、肝体比(HSI)、脏体比(VSI)等指标未产生显著影响;(2)随着饱食投喂频率的增加,实验鱼的体长、体质量变异系数显著降低,生长离散程度明显减小;(3)饱食投喂频率对子二代中华鲟稚鱼的胃、肠排空特征未产生影响,但对胃、肠排空最优模型的选择产生了影响;2、3和4次/d组胃排空最优模型依次为平方根模型(Y 0.5=2.253-0.077t)、平方根模型(Y 0.5=2.12-0.081t)和指数模型(Y=5.001 e-0.225t);(4)3种模型均不适于拟合实验鱼肠排空过程的全部数据,但可拟合t≥T后的肠排空数据(T为肠内容物比率达到最大值的时间);2、3和4次/d组肠排空的最优拟合模型分别为平方根模型(Y 0.5=1.904-0.056t,t≥10)、指数模型(Y=3.383 e-0.076t,t≥8)和指数模型(Y=3.090 e-0.077t,t≥6);(5)随着饱食投喂频率的增大,子二代中华鲟稚鱼的胃、肠排空速度也逐渐递增,2、3和4次/d组胃排空率依次为0.077%/h、0.081%/h和0.225%/h,其肠排空率依次为0.056%/h、0.076%/h和0.077%/h。     

河口区室内幼虾养殖循环水处理技术与模式

利用臭氧与生物滤器循环水处理系统进行室内南美白对虾幼虾养殖。试验期间,按48～72h间隔以臭氧处理养虾循环水2h、曝气2～4h。水处理期间,暂停处理池、养虾池间水循环,过滤系统持续运转。53d中,水处理系统有效控制养殖水质化学指标与微生物指标均在合适范围内,各指标平均值为:NH3-Nt0.41mg·L-1,NO-2-N0.057mg·L-1,COD10.12mg·L-1,氧化还原电位379mV,浑浊度0.6NTU,细菌总数10200cell·mL-1,弧菌数6cell·mL-1;同时获得较高的幼虾成活率(78.3%～80.2%)。根据试验结果与河口水特点,提出了河口区室内养虾循环水处理模式。     

呋喃西林及其代谢物氨基脲的伏安检测方法

以石墨烯基电极为工作电极,研究了呋喃西林(NF)和氨基脲(SEM)的伏安检测方法。循环伏安(CV)扫速0.10 V/s时,在醋酸-醋酸钠缓冲溶液(pH 6.0)中NF发生不可逆氧化还原,过程受吸附控制。缓冲溶液种类、pH值、富集时间等优化情况下,NF的还原峰电流(ipc)与其浓度在20.0-80.0 nmol/L范围内呈线性关系,检测限为12.0 nmol/L(S/N=3)。CV扫速为0.10 V/s时,在pH4.1的醋酸-醋酸钠缓冲溶液中SEM也发生吸附控制的不可逆氧化还原。优化条件下,SEM的氧化峰电流(ipa)与其浓度在1.3-39.9μmol/L范围内呈线性关系,检测限为0.2μmol/L。优化条件下,NF和SEM可以顺序测定,检测限分别为71.0 nmol/L和0.3μmol/L,平均回收率分别为87%和90%。应用于测定淡水渔业水样中二者残留量,得到了较满意的结果。     

Acute and Chronic Effects of Nitrite on White Shrimp, Litopenaeus vannamei, Cultured in Low-Salinity Brackish Water

The marine white shrimp Litopenaeus vannamei is widely cultured. Recently, farmers have begun to culture this shrimp in low-salinity brackish water (< 6 g/L). The intensification of shrimp culture often results in occurrences of elevated nitrite concentration during the growing season. Nitrite is toxic to shrimp and exposure to high concentrations may cause retarded growth and mortalities. The current study was aimed at investigating the acute and chronic toxicity of nitrite to L. vannamei grown in low-salinity (2 g/L) brackish water. Studies of the 96-h EC50 and LC50 values of nitrite were performed to determine the acute toxicity, and an aquarium growth study (2 d post exposure to elevated nitrite concentrations) was conducted to evaluate the chronic effects of nitrite on shrimp production. The 96-h EC50 and LC50 values for juvenile L. vannamei grown in water of 2 g/L salinity was about 9 mg/L NO₂-N, suggesting a safe concentration for shrimp production in ponds to be less than 0.45 mgIL NO₂-N. Exposing shrimp to nitrite concentration of 4 mg/L for 2 d reduced their growth but did not affect their survival.     

The Effects of Water Exchange on Production of Metapenaeus macleayi and Water Quality in Experimental Pools

Two experiments in 4 m diameter, plastic lined pools were conducted nt two densities, 20 shrimp/ m² and 47 shrimp/m², to determine the effects of water exchange rate on the production of the penaeid shrimp Metapenaeus macleayi (Haswell) and on water quality variables. Water exchange rates ranged from 0–40%/d for the 9 wk low density experiment and 0–20%/d for the 8 wk high density experiment. With the exception of mass mortality after prawns escaped from one pool (0% water exchange) on the last day of the high density experiment, shrimp performance indices (survival, weight gain, biomass gain and food conversion ratio) were not significantly affected by water exchange rate. During both experiments water exchange significantly reduced the concentrations of phosphorus and plant pigments (chlorophyll a, b and c and pheophytin) but had no significant effect on pH or the concentration of ammonia or nitrite plus nitrate. Data from this study suggest that while production ponds should not be managed for extended periods without water exchange, simply increasing daily water exchange rates may not necessarily increase shrimp growth or survival. Water exchange can reduce nutrient concentrations and phytoplankton densities but most of the reduction occurs at water exchange rates of between 0–5%/d.     

Dietary folic acid requirement determined for grass shrimp, Penaeus monodon

A feeding trial was conducted to determine the dietary folic acid requirement of juvenile grass shrimp, Penaeus monodon. Purified basal diets were formulated using vitamin-free casein as the protein source. Graded levels (0, 1, 2, 5, 10, 15, 30, and 60 mg folic acid/kg diet) of folic acid were added to the basal diet, resulting in eight dietary treatments in the experiment. Each diet was fed to three replicate groups of shrimp initially averaging 0.79±0.01 g for 8 weeks. Shrimp fed diets supplemented with 2 mg folic acid/kg diet had greater (P<0.05) weight gain and hepatopancreatic folic acid concentrations than shrimp fed the unsupplemented control diet. Feed efficiency (FE) was highest in shrimp fed the diets supplemented with 2 mg folic acid/kg diet, followed by the groups fed 1 mg/kg, then the control group. Hepatosomatic index (HSI) was highest in shrimp fed the control diet, followed by 1 mg folic acid/kg and lowest in shrimp fed diets supplemented with 2 mg folic acid/kg. Weight gain percentage, hepatopancreatic folic acid concentration and hepatosomatic index of the shrimp analyzed by broken-line regression indicated that the adequate dietary folic acid concentration in growing P. monodon is 1.9–2.1 mg/kg diet.     

海水和饲料中Pb在凡纳滨对虾体内的富集与释放特性

为获知海水和饲料中重金属Pb与凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)各组织间的富集与释放特性,应用生物富集双箱动力学模型,模拟凡纳滨对虾分别在海水中Pb浓度为0.0015 mg/L(B0)、0.0080 mg/L(B1)、0.0466 mg/L(B2)和0.2302 mg/L(B3),饲料中Pb浓度为2.089 mg/kg(A0)、2.750 mg/kg(A1)、6.103 mg/kg(A2)和14.520 mg/kg(A3)的驯养过程中,其肝胰腺、外骨骼和肌肉对Pb的生物富集与释放特性,为Pb在凡纳滨对虾体内的分布、富集和迁移提供理论依据,为其安全生产提供指导意义。同时通过非线性拟合得到凡纳滨对虾对海水和饲料中Pb的富集速率常数K1、排出速率常数K2、生物富集系数BCF、生物半衰期B_(1/2),富集平衡时生物体内Pb含量CAmax等动力学参数。结果显示:(1)投喂任一浓度饲料时,B0、B1、B2组凡纳滨对虾肌肉、外骨骼和肝胰腺组织中Pb含量均小于限量值0.5 mg/kg,而在B3海水浓度中,随着投喂饲料浓度的增大,各组织中Pb累积量高于限量值(0.5 mg/kg)的时间出现得越来越早;肝胰腺中Pb的释放速率高于肌肉和外骨骼的释放速率。(2)用SPSS18.0对饲料Pb含量、海水浓度、富集时间进行三因素重复测量方差分析显示,饲料浓度、海水浓度和富集时间对凡纳滨对虾各组织中Pb的富集含量出现显著性差异[除了饲料浓度对凡纳滨对虾外骨骼组织中Pb富集主效应达到边缘显著(F=2.351,P=0.071)],且饲料、海水及时间交互效应分析显示,三者交互作用显著。(3)用SPSS18.0对不同组织中Pb的富集含量、饲料浓度、海水浓度和富集时间进行多元回归分析,结果显示:在凡纳滨对虾各组织间Pb富集过程中,海水中Pb浓度的贡献率大于饲料中Pb浓度的贡献率。(4)达到平衡状态下,投喂A0饲料浓度,生长在B0~B3组海水中,凡纳滨对虾肌肉组织中Pb含量为0.128~2.981 mg/kg,肝胰腺组织中Pb含量为0.399~4.765 mg/kg;生物学半衰期(B_(1/2))范围分别为5~7 d和3~7 d。投喂A2饲料浓度,生长在B0~B3组海水中,凡纳滨对虾肌肉组织中Pb含量为0.380~1.000 mg/kg,肝胰腺组织中Pb含量为0.288~5.355 mg/kg;生物学半衰期(B_(1/2))范围分别为2~7 d和2~5 d。理论平衡浓度下,肝胰腺组织中含量均大于肌肉。     

Density and Water Exchange-Dependent Growth and Survival of Litopenaeus setiferus Postlarvae

This present study was designed to investigate the effects of stocking density and water exchange on the growth rate, survival and performance index of L. setiferus postlarvae under controlled laboratory conditions. The experiment was done with postlarvae (PL10 to PL40) at densities of 50, 150, 250 and 350 shrimp/m² and various different water exchanges rate per day (0, 6, 12 and 18%). The maximum growth rate was obtained for shrimp with 12% water exchange per day at all densities. A reduction of the maximum growth rate was observed in relation to density with the highest values in shrimp stocked in a density of 50 and 150 shrimp/m² (mean value of 0.53 mg/d) and the lowest in shrimp stocked in a density of 350 shrimp/m² (0.24 mg/d). The multiple regression equation obtained to relate performance index (growth rate* survival : PI), shrimp density (X₁) and water exchange (X₂) was: PI = 0.31 + (0.001) X₁+ 0.039 X₂+ 2.28 × 10⁻⁶ X₁²+ (−0.0017) X₂²+ (0.000026)X₁X₂, R ²= 0.78; P > 0.03. According to this equation the optimum shrimp density-water exchange comhination was between 5 to 12% of water exchange at stocking density of between 50 and 150 shrimp/m². Salinity, ammonia-N and nitrite-N increased according to the time spent in tanks without water exchange. With no (0%) water exchange, water quality parameters measured were outside the optimum for L. setiferus postlarvae. The use of optimum density and water exchange in a nursery system for L. setiferus with optimum variables established is proposed.     

正交试验优化天然虾青素的提取工艺研究

研究了负压空化法提取虾壳中虾青素的各项工艺条件对虾青素提取效果的影响,通过正交试验确定了负压空化法提取最佳工艺参数为提取溶剂是浓度80%的乙醇溶液,提取时间为35min,料液比为1：20,通气量为0.2m^3·h^-1。同时将负压空化法与常用破壁提取方法的提取效果和效率进行了比较,综合结果表明,负压空化法优越于其它方法,是一种能够适应工业生产的新型提取方法。