PCV3研究进展

作为已知最小动物病毒之一的单链环状DAN病毒-猪圆环病毒,最早在1974年由德国人Tischer发现。病毒粒子直径为14~17 nm,无囊膜。现已知有PCV1、PCV2两个血清型。PCV1是20世纪70年从猪肾细胞中发现的与临床疾病无关的病毒。然而PCV2为致病性病毒,并具有较强的感染性,可通过鼻液、粪便等废物,经口腔及呼吸道等途径将猪圆环病毒相关疾病(PCVAD)感染给不同年龄段的猪。     

近年来ALV-J的国内外研究进展

我国在1999年从商品化肉鸡中首次分离到J亚群禽白血病病毒(ALV-J)。目前,ALV-J可以感染我国各种类型鸡群并造成严重的危害,而至今无控制ALV-J感染的有效药物和疫苗。近年来,分子生物学技术应用在病原学研究的各个领域,病毒的相关研究在不断的发展和深入,病毒与其宿主间相互作用的机制也得以不断被认知。本文分析了近几年来国内外已发表的关于ALV-J的研究报道,内容涉及ALV-J的诊断、疫苗、受体、自噬、信号通路及抗原表位等方面,较全面的总结了ALV-J的研究成果,也对需要进一步深入研究的目标和内容提出了展望。     

近年来国内外提高奶牛产奶量的方法

近年来．饲养奶牛已成为各地农户增收致富的好项目。笔者在与本地饲养奶牛专业户座谈时了解到．部分饲养专业户所饲养的德系荷斯坦奶牛产奶量不高．其主要原因是缺乏科学的饲养管理知识．致使部分奶牛的生产性能还未发挥出来。针对生产中现存问题，笔者将近年来国内外一些提高奶牛产奶量的方法与经验，向养牛专业户介绍如下：     

近年来国内外提高奶牛产奶量的方法

近年来,饲养奶牛已成为各地农户增收致富的好项目。笔者在与本地饲养奶牛专业户座谈时了解到,部分饲养专业户所饲养的德系荷斯坦奶牛产奶量不高,其主要原因是缺乏科学的饲养管理知识,致使部分奶牛的生产性能还未发挥出来。针对生产中现存问题,笔者将近年来国内外一些提高奶牛产奶量的方法与经验,向养牛专业户介绍如下:1增加光照法据国内外科学家试验研究证实,在奶牛泌乳期的初期60d内,不需要增加饲料或改变饲料配方,让牛每d接受16h的光照,可比在冬季仅接受自然光照的奶牛多产奶达10%以上。2喂粥料据试验,给予奶牛喂粥料,比喂干湿料可提高产…     

PCV2、PCV3和PCV4三重荧光PCR鉴别检测方法的建立及应用

根据猪圆环病毒2型(porcine circovirus 2,PCV2)、猪圆环病毒3型(porcine circovirus 3,PCV3)和猪圆环病毒4型(porcine circovirus 4,PCV4)保守区域基因序列合成特异性的引物和TaqMan探针,通过优化反应条件,建立了一种可同时快速高效鉴别检测PCV2、PCV3和PCV4的三重荧光PCR方法。结果显示,所建立的三重荧光PCR方法仅对PCV2、PCV3和PCV4出现阳性扩增,与猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)、猪支原体肺炎(M.hyo)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)等猪常见病原无交叉反应;对PCV2、PCV3和PCV4的最低检出限分别为1.69×10¹,1.38×10²,1.42×10²拷贝;组内和组间试验变异系数均小于1.6%,重复性好。进一步应用所建立的PCV2、PCV3和PCV4三重荧光PCR方法对263份猪临床样品进行检测,结果检出168份PC...     

新型圆环病毒—PCV3研究进展及展望(2017)

正2015年6月,美国北卡罗来纳州一个商品猪场母猪群暴发皮炎肾病综合征(PDNS),发病期间,该场母猪死亡率较历史平均水平增加了10.2%,受胎率减少了0.6%,窝均木乃伊胎相比历史平均水平增加1.19%~([1]),流产出的木乃伊胎大小不一(图1)。临床上,感染母猪厌食,皮肤多处出现丘疹性皮炎(图2);组织结构上观察,皮肤损伤以急性坏死性皮炎为特点;肾皮质区肾小     

TaqMan-MGB多重荧光定量PCR检测PCV2、PCV3和PCV4方法的建立和应用

为建立一种可同时鉴别致病性猪圆环病毒(PCV)不同基因型的检测方法,本试验针对PCV2、PCV3和PCV4的ORF2基因保守区域设计引物和探针,将人工合成目的基因与质粒连接,构建阳性质粒PCV2-ORF2、PCV3-ORF2和PCV4-ORF2。通过优化引物浓度、探针浓度、退火温度等参数,建立PCV2、PCV3和PCV4 TaqMan-MGB多重荧光定量PCR检测方法,并验证该方法的特异性、敏感性和重复性。应用建立的方法对38份临床样品进行应用检测,对24个养猪场(户)进行流行病学调查。结果显示,建立的方法能特异性区分PCV2、PCV3和PCV4,且与其他常见猪病病原不发生交叉反应;对PCV2、PCV3和PCV4的最低检出浓度分别为1.56×10、1.28×10和1.76×10拷贝/μL;批内和批间变异系数均小于2%,重复性好;38份临床样品中PCV2、PCV3和PCV4阳性样品分别为17、3和1份,从24个养猪场(户)采集的689份样品中PCV2、PCV3和PCV4阳性率分别为33.33%、12.50%和8.33%。结果表明,本试验建立的PCV2、PCV3和PCV4 TaqMan-M...     

PCV3和PCV2双重PCR鉴别诊断方法的建立及应用

本研究根据GenBank中报道的PCV2和PCV3毒株全基因组序列,设计两对特异性引物,建立了一种多重PCR鉴别诊断方法,两种病毒的预期扩增片段分别大小分别为1 007 bp和505 bp。通过对扩增条件的优化,获得最佳的反应体系为25μL体系,最佳退火温度为56℃。该鉴别方法可以同时扩增PCV3和PCV2的特异性片段,而猪瘟病毒(CSFV)、伪狂犬病病毒(PRV)、猪繁殖障碍与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪细小病毒(PPV)、猪乙型脑炎病毒(JEV)、轮状病毒(RV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)和猪德尔塔冠状病毒的基因组及阴性对照均未扩增出任何条带。该方法对PCV3和PCV2的最低检出量均为10 ng/μL。对采自湖北省内规模化猪场的260份淋巴结样品检测。结果显示,PCV3阳性率为16.9%(44/260),PCV2阳性率为46.5%(121/260),PCV3和PCV2混合感染率为4.6%(12/260),双重PCR检测与测序分析的符合率为100%。结果表明,本研究建立了一种简便、灵敏、稳定可靠且特异性强的双重PCR鉴别诊断方法,可为临床样品中PCV3和PCV2的快速鉴别诊断及流行病学研究提供技术支持。     

PCV2和PCV3双重纳米PCR方法的建立及初步应用

本研究旨在建立一种同时检测猪圆环病毒2型（PCV2）和猪圆环病毒3型（PCV3）的双重纳米PCR（nano-dPCR）方法,同时应用该方法对PCV2和PCV3进行检测。参考GenBank中登录的PCV2和PCV3型基因序列分别设计特异性引物,对nano-dPCR的反应条件进行优化;同时考察所建立的nano-dPCR检测方法的特异性和敏感性。结果显示,所建方法的特异性和敏感性良好,对PCV2和PCV3两种病毒的最低核酸检测量分别为93.2和91.6拷贝/μL,其敏感性比普通PCR高100倍。应用该方法对送检的265份临床样本进行检测,结果显示,PCV2和PCV3在猪群中存在普遍感染,PCV3和PCV2的阳性率分别为16.6%和14.7%,混合感染阳性率为6.8%。临床样品的检测结果表明,本试验建立的nano-dPCR方法为PCV2和PCV3早期感染进行快速、敏感鉴别诊断提供了新方法。     

PCV3 Cap基因在昆虫杆状病毒中的表达与鉴定

试验旨在获得具有天然构象且反应原性良好的猪圆环病毒3型(porcine circoviurs 3,PCV3)Cap蛋白。以本实验室保存的PCV3 Cap基因为模板,设计不同引物扩增Cap基因,将其亚克隆至pEASY-Blunt载体上,验证正确后将目的基因分别克隆至杆状病毒表达载体pFastBac~(TM)上(含有双启动子),获得含有2个PCV3 Cap基因的重组质粒pFBD-P2C。将该重组质粒转化大肠杆菌DH10-Bac~(TM)感受态细胞当中,进行蓝白斑筛选,获得重组杆状质粒Bacmid P2C,利用脂质体转染至SF9细胞中进行病毒拯救,转染后72 h,收取上清病毒液,盲传3代,收取SF9细胞应用间接免疫荧光法(IFA)及Western blot检测目的蛋白是否表达。结果显示,重组质粒pFBD-P2C酶切验证正确,重组杆粒Bacmid P2C构建成功,杆状病毒中能够表达PCV3 Cap蛋白且能与His-tag抗体发生特异性反应,IFA鉴定出现特异性绿色荧光,表明成功表达了PCV3 Cap蛋白且具有反应原性,为深入开展PCV3抗体制备、新型疫苗研发奠定了基础。     

猪小环状病毒(PCV)研究进展

1973年Ilise Tischer首先发现猪小环病毒(PCV),并将其描述为一种猪肾细胞系(pk-15)的污染物.以后陆续有证据显示该病毒与断奶后全身消耗性综合征(PMWS)和仔猪先天性震颤相关.血清学调查表明,该病毒在全世界范围内广泛存在并经常和PRRS伴发存在,因此这方面研究逐渐成为热点.本文概述PCV的流行病学、发病机理、临床表现、病理变化及诊断和防治等     

近年来我国新城疫免疫研究进展

对新城疫病毒变异的研究作了简要回顾;对近年来国内学者对一些新城疫常规疫苗所作的评价,以及对新城疫各种联合疫苗的研究和多种免疫增强剂的研究作了简要介绍。近年来我国学者对新城疫基因工程疫苗的研究进行了有益的探索,并取得了可喜的进展,但距离实际应用尚远,还需继续研究才有可能成为防控新城疫的有力工具。     

近年来我国新城疫免疫研究进展

新城疫是危害我国养禽业最严重的疾病之一。近年来随着弱毒疫苗和灭活疫苗的广泛应用,新城疫的暴发流行已明显受到控制,但由于我国广大农村养鸡散户的比例很大,且饲养环境多被病毒严重污染,给新城疫的防制增加了不少困难。目前,很多地方新城疫的免疫程序还比较混乱,经常出现一些鸡群的免疫水平参差不齐,     

重组PCV3 Cap蛋白在酵母细胞中的表达与鉴定

猪圆环病毒3型（PCV3）是影响我国养猪业的重要病原之一,目前尚无商品化疫苗用于防控该病。Cap蛋白是PCV3主要的抗原蛋白。为构建高水平表达可溶性PCV3 Cap蛋白的工程菌株,对Cap蛋白NLS序列进行定点突变,构建重组表达载体pPICZαA-PCV3,经转染、酵母细胞表达以及纯化,最终获得可溶性PCV3 Cap蛋白。随后对纯化蛋白进行Western Blot验证及电镜观察。结果显示：获得的PCV Cap蛋白大小约27 kDa;电镜下观察可见均一的病毒样颗粒（VLP）,颗粒直径约18 nm。PCV3 Cap蛋白在酵母细胞中的成功表达为进一步开发Cap蛋白亚单位疫苗奠定了基础。     

猪小环状病毒（PCV）研究进展

１９７３年ＩｌｉｓｅＴｉｓｃｈｅｒ首先发现猪小环病毒（ＰＣＶ），并将其描述为一种猪肾细胞系的污染物。以后陆续有语气显示该病毒 奶后全身生综合性（ＰＭＷＳ）和仔猪先正确性震颤相关，血清学调查表明，该病毒在全世界范围内广泛存在并经常和ＰＲＲＳ伴发存在，因此这方面研究逐渐热点。本语文概述ＰＣＶ的流行病学、发病机理、临床便变化及诊断和防治等。     

PCV2的流行病学原理及其影响的最新研究进展

1 PCV2是否是猪群中的新病毒出于寻找1991年描述的猪临床疾病爆发原因的目的,结果自1998年起人们已经知道猪群中存在PCV2.这些疾病主要造成生长期仔猪的生长速度低下和断奶后期及肥育期开始时的猪高死亡率,这种病理学症状被赋予断奶后多系统衰竭综合征(postweaning multisystemic wasting syndrome)或PMWS(现在,它已被建议称作PCV2相关疾病,或PCV2-SD)之名.在1998年和2004年间,重要的流行性爆发分别发生在欧洲和亚洲,在美洲大陆则发生在2004 ～ 2007年.然而,我们有证据显示,通过回顾性研究发现至少从1962年以来就有猪感染PCV2,而至少自1985年以来一直存在感染PCV2-SD的猪.     

近年来奶牛不孕症中兽医疗法的研究进展

近年来奶牛不孕症中兽医疗法的研究进展＊何永明（西南民族学院成都６１００４１）奶牛不孕症是影响奶牛繁殖、阻碍奶牛养殖业发展的三大主要疾病之一。引起奶牛不孕症的原因很多，其中生殖器官疾病及机能异常为数不少。据前苏联、日本、瑞士及捷克斯洛伐克等国报道，其发...     

近年来我国流行性乙型脑炎研究进展

流行性乙型脑炎是一种重要的人兽共患传染病,在我国对人和猪都危害严重。本文对近年来我国在该病的病原特性、传播媒介、检测和免疫技术等方面的研究进展作一概要的综述。     

近年来我国流行性乙型脑炎研究进展

流行性乙型脑炎又称日本乙型脑炎,简称乙脑,是由日本乙型脑炎病毒（Japanese encephalitis Virus,JEV）引起的一种蚊媒性人兽共患传染病。多种动物易感,蚊是JEV的主要传播媒介,猪是该病毒在自然界最重要的贮存和增殖宿主,且可引起仔猪脑炎和种猪繁殖障碍,给养猪业造成巨大经济损失。人对JEV普遍易感,但大多数为隐性感染,少数青少年及儿童感染后发生病毒性脑炎,病死率高。