中草药日本鸢尾内生真菌的分离及其初步鉴定

目的 分析日本鸢尾（Iris japonica）内生真菌的类群分布。方法 通过菌落形态特征、显微镜下的孢子观察及基于ITS序列分析的分子生物学鉴定分析日本鸢尾各部位内生真菌的类群组成。结果 从日本鸢尾的根茎叶中共分离得到5种内生真菌。根中分离得到的内生真菌为橘青霉（Penicillium citrinum）、尖孢镰刀菌（Fusarium oxysporum）,茎中为小新壳梭孢菌（Neofusicoccum parvum）,叶中为橘青霉（Penicillium citrinum）、肉色隔孢伏革菌（Peniophora incarnata）、首都叶点霉（Phyllosticta capitalensis）。结论 自日本鸢尾分离获得5种内生真菌,其分布具有一定的组织特异性,可为药用植物内生真菌的开发和利用提供一定基础。     

防腐剂对水生鸢尾组培苗内生菌抑制作用的研究

在水生鸢尾组培苗继代培养中,通常接种后10 d左右开始在增殖苗周围不断出现明显或不明显的细菌菌落.推断在水生鸢尾继代培养中不断表现出的污染为内生菌污染.当组培苗基数达到一定量时,如需快速繁殖,通过在培养基中增加抗生素抑制污染已不能实现.通过试验,发现在培养基中加入苯甲酸钠、山梨酸钾两种食品防腐剂,不仅起到抑制菌生长的作用,而且在培养基灭菌中能耐高温高压.进一步试验表明,在培养基中加入一定量的苯甲酸钠对内生菌的抑制作用优于山梨酸钾,但苯甲酸钠的浓度不应超过0.5%,否则会影响水生鸢尾苗的增殖.     

沙棘内生菌的分离与初步鉴定

植物内生菌广泛存在于各种植物中,在与宿主的协同进化过程中形成了两者的互惠共生关系。通过对采集的野生沙棘健康的根、茎、叶进行组织分离共计获得内生真菌327株,分别归属于链格孢属、青霉属、根霉属、芽枝霉属、毛壳菌属、曲霉菌属、盘多毛孢属、向基孢属、枝顶孢属、头孢霉属等10个真菌属,内生菌表现出丰富生物多样性。从组织分离以及对内生真菌初步鉴定的结果看一些物种还具有组织专化性。     

山药内生菌的分离及菌种鉴定研究

[目的和方法]分别采用5种培养基对山药根根中的内生菌进行分离,得到了10株内生菌,通过形态学分析其为4种微生物,16S rRNA比对分析确定其分属为欧文氏菌属(Erwinia)和芽孢杆菌属(Bacillus),未发现放线菌和真菌.[结果]表明山药内生菌极为单调.其中,能在山药浸出液培养基中大量产生多糖的菌株SS2的16S rRNA与模式菌株Erwinia pyrifoliae Ep1/96~T 最大同源性为97.1;.[结论]极有可能为新种.     

苜蓿内生菌中高效AHL降解菌的筛选和鉴定

从中国新疆、内蒙古和墨西哥等地分离苜蓿内生菌133株,平板筛选到8株细菌具有N-酰基高丝氨酸内酯(N-Acyl-L-homoserinelactone,AHL)降解活性,其中活性较强的菌株有r-12、r-9和R1.5.对8株AHL降解菌做AHL唯一碳源试验,结果发现菌株S35和N46在液体AHL唯一碳源培养基中生长情况较好,D600 nm分别为0.415和0.386,菌株r-9的生长情况最差,D600 nm为0.015.菌株R1.5还具有耐高温、耐盐碱、能分解无机磷、在无氮培养基上生长等优点.经细菌形态学观察、生理生化试验以及16S rDNA序列分析,初步确定菌株R1.5为1株地衣芽孢杆菌.     

油茶内生拮抗菌的筛选与鉴定

[目的]通过对湖南长沙地区油茶内生拮抗菌的筛选,为油茶根腐病、叶枯病、炭疽病及软腐病的生物防治提供理论依据。[方法]采用研磨法从健康油茶根、茎、叶组织中分离出内生菌,通过平板对峙试验筛选出对油茶根腐病、叶枯病、炭疽病及软腐病都具有拮抗活性的内生菌,并进行形态观察和16S r DNA序列分析。[结果]不同组织内生细菌数量不同,根中内生细菌的数量最多,其次为茎,叶中最少。菌株J-3-1对油茶根腐病菌、叶枯病菌、炭疽病菌及软腐病菌均有拮抗活性,其抑菌圈半径分别为12.5、16.8、13.5、13.4 mm。16S r DNA相似性为99%。[结论]通过对该菌株进行形态观察及16S r DNA序列分析,鉴定其为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。     

德国鸢尾的组织培养试验

取德国鸢尾驯化种的茎尖外植体块,接种于不同激素配比的基本培养基上.结果表明,不定芽诱导最佳培养基为MS BA 0.5mg·L-1 NAA 0.2;不定芽增殖最佳培养基为MS BA 1.0 NAA 0.1;不定根诱导最佳培养基为1/2MS NAA 1.0;试管苗炼苗最佳基质配比为泥炭:珍珠岩=7:3,成活率达85%以上.     

香附子内生菌的分离鉴定及活性检测

从药用植物香附子中分离出4种内生菌,经初步鉴定分别归属于曲霉属(代号为XFf06.1、XEf06.2),固氮菌属(XFb)和链霉菌属(XFa).对这些内生菌发酵产物提取液活性进行测定,结果表明:其发酵产物均有稳定的抑菌活性,其中链霉菌XFa对枯草芽孢杆菌的抑菌率特别强,XFf06.1菌的发酵液提取物对苹果腐烂病原菌的抑菌率高达96.3%.     

路易斯安娜鸢尾阿卡迪亚的组培快繁试验

以路易斯安娜鸢尾阿卡迪亚(Louisianairis hybridsAcadia)的试管苗为材料,应用正交试验法研究不同植物激素及其配比对试管苗生长与增殖生长的影响。结果表明,适合阿卡迪亚试管苗生长阶段的培养基为MS+6-BA2.0 mg.L-1+NAA0.5 mg.L-1+GA30.05 mg.L-1;适合阿卡迪亚增殖生长的培养基为MS+6-BA1.5mg.L-1+NAA0.3 mg.L-1+GA30.1 mg.L-1。     

茄类内生菌的分离及拮抗细菌的筛选(英文)

[Objective] The aim of this study was to isolate the endophyte of three solanaceae fruits and vegetables such as tomato, pepper and eggplant, to screen and identify the bacterial wilt antagonistic bacteria. [Method] According to the lapping liquid culture method, the endophyte of three plants was isolated by the selective medium and purified by the plate streaking method, so the purified endophyte was screened by the hyphal pieces confront culture method. Furthermore, the screened antagonistic and endophyteic bacteria was identified and classified through culture characteristics of isolates and morphological features of thallus, Gram stain as well as physiological and biochemical reactions. [Result] Fifty-three endophytic bacteria, fifty-three endophytic fungi and forty-four endophytic actinomycetes were separated from the endophyte of three plants. The screened fourteen endophytic bacteria with strong antagonistic effect on the bacterial wilt were classified to Bacillus, Escherichia, Klebsiella, Agromonas, Erwinia and Curto Bacterium respectively. Especially, Bacillus was the dominant species, which had the strongest antagonistic effect on the bacterial wilt. [Conclusion] This study provides an effective way for biological control of the bacterial wilt in solanaceae.     

茄类内生菌的分离及拮抗细菌的筛选

1材料与方法 1．1植株及病原菌 健康的番茄、辣椒及茄子植株,采自茂名市郊区菜园;茄科雷尔氏菌（Ralstonia solanacearum）由茂名学院生物技术与食品工程实验中心分离得到。     

茄类内生菌的分离及拮抗细菌的筛选

[目的]分离番茄、辣椒和茄子3种茄科果蔬的内生菌,并对青枯病拮抗细菌进行筛选与鉴定。[方法]采用研磨液培养法,利用选择培养基对3种植株进行内生菌分离,并采用平板划线法纯化,及菌块对峙培养法对已纯化的内生菌进行筛选。根据分离菌的培养特性及菌体形态特征、革兰氏染色及生化反应等,对筛选出来的内生拮抗细菌进行鉴定归属。[结果]3种植株内生菌分离,共得到53株内生细菌、53株内生真菌、44株内生放线菌。筛选出14株青枯病菌有强拮抗性的内生细菌,分属为芽孢杆菌属、埃希氏菌属、克雷伯氏菌属、土壤单胞菌属、欧文氏菌属、短小杆菌属,其中芽孢杆菌为优势种群,而且芽孢杆菌属菌株对青枯病菌的拮抗作用最强。[结论]提供了探索生物防治茄科植物青枯病的有效途径。     

小白菜内生菌的分离及菌核菌拮抗菌的筛选

利用选择培养基对茂名市郊区种植的成熟小白菜植株进行内生茵分离,共得到3株内生细菌、5株内生真菌、2株内生放线茵.细菌分属芽孢杆菌属、埃希氏菌属、黄色杆菌属,真菌主要为曲霉属、毛霉属,放线菌分属链霉菌属和诺卡茵属.利用平板对峙培养法筛选出2株内生放线茵及1株内生细菌对植物茵核病菌有强拮抗作用.     

人参内生菌的分离及拮抗菌株的筛选

利用研磨法和组织块法对我国吉林省5个不同地区来源的健康人参植株分别进行了内生细菌和内生真菌的分离,并采用菌体初筛和发酵液复筛相结合的方法,筛选了对6种人参主要病害病原菌具有抑菌活性的内生菌株.结果显示:在人参根、茎、叶不同器官中共分离获得152株内生细菌和46株内生真菌,初筛后得到对2种以上病原菌有抑菌活性的内生细菌16株,内生真菌3株,复筛后对4种以上病原菌具有抑菌活性的内生细菌2株,内生真菌1株,还发现了对灰霉病菌具有明显抑制作用的菌株3株.     

榆紫叶甲病原菌分离及生防菌的筛选与鉴定

[目的]探寻防治榆紫叶甲病的生防菌株。[方法]从榆紫叶甲虫体上分离菌株后进行培养,并对室内饲养的榆紫叶甲各龄幼虫进行致病性试验。[结果]从感病榆紫叶甲成虫虫体上分离到18个菌株,其中12个菌株具有几丁质和蛋白质降解活性。5个菌株对1~2龄幼虫表现出不同程度的致病力,在接种后1~3 d幼虫开始死亡,处理后7 d幼虫的累积死亡率为21.2%~46.8%,其中YJA-03和YJA-10菌株的累积死亡率30.0%。YJA-03菌株为革兰氏阳性菌,经过形态学、生理生化特性和PCR扩增鉴定确定它属于短杆菌属(Exiguobacterium)。YJA-10菌株为革兰氏阴性菌,经鉴定其属于Glutamicibacter属。[结论]YJA-03和YJA-10菌株可用作防治榆紫叶甲病的生防菌。     

乐果降解菌的分离、筛选和鉴定

 筛选高效的有机磷农药乐果的降解菌。采集福建省福农生化有限公司排污口,沟口及草坪土壤进行乐果降解菌的分离鉴定。经含乐果的培养基分离培养、脂肪酸鉴定,总共得到17个属23株细菌,对这些菌通过消解试验进行复筛,得到4株对乐果有较好降解能力的菌株,沙门氏菌、阴沟肠杆菌、铜绿假单胞菌和枯草芽孢杆菌,在乐果浓度为1000mg/L时,48h的降解率分别为27.3%、26.6%、22.9%和18.1%。对乐果有降解作用的菌株存在种类多样性的特点。     

富油脂微藻的分离筛选与鉴定

为从中国江河、海水等水体中筛选油脂含量较高的微藻,采集了青岛海水、武汉南湖水的水样,分离了12株微藻。对微藻的油脂含量进行了测定,其中油脂含量最高的微藻为H2-1,油脂含量达到56.25%细胞干重,其次是BQ6,油脂含量为31.43%。BQ1、BQ2、BQ4、BQ6油脂含量也较高,达29%左右。PCR扩增获得微藻18S r DNA的部分片段,序列测定后,进行BLAST同源性分析。结果表明,QS1、QS2、QS3、BQ1、BQ2、BQ3、BQ4、BQ5、BQ6、H1-1、H2-2均属于小球藻属(Chlorella spp.),H2-1属于胶网藻属(Dictyosphaerium sp.)。该研究将为中国生物能源的生产和开发提供优良的藻种资源。     

人参锈腐病生防细菌的分离筛选与鉴定

从吉林和辽宁两省不同人参种植区土壤中分离出836株细菌,从中筛选出10株对人参锈腐病菌(Cylindrocarpon destructans)具有明显抑制作用的拮抗菌株。选择抑菌效果最好的菌株BS015(抑菌圈直径22.8mm),对人参几种常见病原菌进行抑菌谱试验。结果表明:菌株BS015对人参根腐病菌(Fusarium solani)、人参菌核病菌(Sclerotinia schinseng)、人参黑斑病菌(Alternaria panax)均有较好的抑菌效果,对人参立枯病菌(Rhizoc-tonia solani)抑制效果不明显。通过对其形态特征、生理生化及16S rDNA序列分析研究,菌株BS015为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。     

大豆内生菌的分离及菌核病拮抗菌的筛选

为筛选大豆菌核病菌的有效拮抗菌株,利用组织表面消毒法从大豆不同生育期的根、茎、叶和种子中分离内生菌。结果表明:共分离得到113株细菌和49株真菌。利用平板对峙培养法筛选出42株(细菌25株、真菌17株)对大豆菌核病菌有拮抗效果的内生菌株,其中18株对大豆菌核病菌菌丝生长有良好的抑制作用。