春兰无菌播种技术研究

通过对预先用0.1mol/L的NaOH预处理后的春兰种子进行无菌播种培养,发现培养基中添加了植物激素的萌发率明显高于不合有植物激素的培养基,尤以添加了6-BA的表现显著.兰花种子的生长可能受多种植物激素平衡的调控,6-BA能在一定程度上减轻抑制物质对春兰种子的抑制作用,解除种子休眠.     

影响春兰、蕙兰杂交种子无菌萌发的若干因素

对影响春兰、蕙兰杂交种子无菌萌发的因素进行了分析。结果表明:用营养液、10%次氯酸钠溶液、0.1mol/L NaOH溶液手工振荡对杂交种子进行预处理均能促进种子萌发,其中春兰杂交种子经10%次氯酸钠的预处理培养后萌发率最高,蕙兰杂交种子经营养液振荡预处理培养后萌发率最高;1/2MS基本培养基加2 g/L蛋白胨比较适宜春兰杂交种子萌发,H基本培养基加2 g/L蛋白胨培养基比较适宜蕙兰杂交种子萌发;以葡萄糖为碳源的培养基培养春兰杂交种子萌发率高于以蔗糖为碳源的培养基;培养基中添加NAA、6-BA对提高春兰杂交种子的萌发率无明显影响,但一定浓度配比的NAA、6-BA能促进蕙兰杂交种子的萌发率。     

兜兰无菌播种技术研究

以兜兰自交和杂交的果荚为材料,对不同组合果荚成熟度、暗培养时间及播种方法对兜兰种子萌发的影响进行了研究,结果表明:兜兰无菌播种以授粉120～160 d的果荚暗培养时间35～45 d较好,通过改进的浅层液体培养方法在无菌播种中的创新型应用,萌发率可达到普通播种萌发率的7.6倍。试验结果也显示基因型是影响兜兰种子萌发的重要因素。     

杂交春兰未成熟种子无菌培养的研究初报

以普通蕙兰×春兰(宋梅)、春兰(小打梅)×春兰(绿壳素)、春兰(外碟)×春兰(大富贵)组合为材料,进行了成熟和未成熟杂交种子(胚)无菌培养的研究。结果表明,未成熟种子(授粉后100 d左右)发芽率高于成熟种子,加活性碳的培养基发芽速度明显比未加活性碳的慢但发芽率高。     

春兰杂交种子无菌萌发及根状茎增殖的研究

研究了杂交塑果的成熟度、植物激素、有机添加物及培养方式对春兰杂交种子无菌萌发和根状茎增殖的影响。结果表明：成熟度为五个月的春兰杂交蒴果萌发率最高,杂交种子高萌发率和中等萌发率的比例也比较高。1/2MS＋0.3 mg/L NAA＋20g/L蔗糖＋7.0g/L琼脂和1/2MS＋1.5 g/L蛋白胨＋20g/L蔗糖＋7.0g/L琼脂的培养基配方培养根状茎的增殖系数较高,根状茎生长优良;薄层液体培养有利于根状茎的增殖。     

3种观赏石斛蒴果特征及无菌播种萌发的影响因素

针对大苞鞘石斛、肿节石斛、报春石斛在引种地进行人工辅助授粉,蒴果存在假膨现象、种子量少、种胚发育不良、无菌萌发率低等问题,对这3种石斛蒴果特征及无菌播种萌发影响因素进行研究。结果表明,大苞鞘石斛、肿节石斛、报春石斛3种观赏原球茎颜色为绿色或深绿色,石斛蒴果适宜的采摘时间为150 d;采用MS培养基,添加浓度为0.05~0.40 mg/L 6-BA和有机添加物椰汁有利于提高种子的萌发率,萌发率最高达90%,种子萌发时间缩短为8~14 d。     

春兰杂交种子非共生萌发和快速繁殖

春兰杂交种子非共生萌发即无菌播种诱导根状茎试验表明:培养基为MS+BA 0.1 mg/L+NAA0.1 mg/L+LH 5g/L+AC 1g/L时,其萌发率达到66.67%,添加水解乳蛋白可明显提高种子发芽率并促进根状茎生长,果龄8～9个月的蒴果播种萌发率较为理想;根状茎增殖分化培养基为WPM+6-BA 1.0 mg/...     

白芨种子无菌萌发特性

为探讨白芨[B．striata（Thunb．）Teichb．f．]种子无菌萌发适宜条件,采用1／2 MS、MS添加不同激素、生物添加剂,以及光暗处理进行白芨种子萌发试验。结果表明：1／2 MS＋1．0 mg／L NAA＋1．6 mg／L 6－BA有利于种子萌发;1／2 MS＋30 g／L蔗糖＋20％椰汁有利于诱导原球茎;暗培养降低白芨种子萌发率,白芨种子萌发后,其幼苗在光照条件下生长缓慢。     

金线莲的结实特性和无菌播种培养

观察金线莲的结实性情况,比较其蒴果采收期4种基本培养基、NAA与6-BA激素组合及水果添加物对金线莲无菌播种膨大率及萌发率的影响。结果表明:(1)不同杂交组合的结实率存在明显差异,结实率变化范围为0~100%;(2)蒴果在授粉后45 d采收最好,种子的膨大率、萌发率均较高;(3)不同基本培养基对金线莲种子的膨大萌发效果不同,种子在WPM培养基上的膨大萌发率最高,膨大率最高达73%,萌发率最高为79%;(4)不同生长激素组合对金线莲种子的膨大萌发影响差异显著,以1/2MS+0.5 mg/L NAA的效果最好;(5)不同水果有机添加物都对金线莲种子的膨大萌发有促进作用。     

铁皮石斛种子无菌萌发

[目的]研究铁皮石斛种子的无菌萌发方法。[方法]以改良MS+土豆熟汁液2.0%+蔗糖2.0%+琼脂0.65%+0.1 mg/L NAA为种子萌发培养基,将铁皮石斛种子播种后统计萌发率。[结果]铁皮石斛种子萌发率达90%以上,继代培养后组培苗生长正常。[结论]该研究建立了铁皮石斛种子的无菌萌发体系,为铁皮石斛实生苗的大批量生产奠定了基础。     

二氧化碳倍增对春兰叶片结构的影响

全球大气二氧化碳（CO₂）体积分数持续上升,不仅对全球气候的变迁产生重大影响,而且对植物的叶片形态结构也产生了不同程度的影响。为考察春兰Cymbidium goeringii叶片形态结构对二氧化碳体积分数倍增的响应,在人工气候箱中分别以二氧化碳体积分数370 ± 50 μL·L^-1和700 ± 50 μL·L^-1 对盆栽春兰处理2个月。结果发现,除叶长度与叶厚度没有显著变化外,春兰叶片在二氧化碳体积分数倍增条件下其叶面积、叶绿体质量分数有显著增加,但表皮细胞密度、气孔密度、气孔指数以及气孔开度却呈下降趋势,而且差异显著。图1表1参17     

春兰授粉和种胚无菌萌发研究

为提高春兰品种间授粉坐果率、缩短种子无菌萌发时间、提高萌发率,对春兰品种自交和杂交的适宜授粉时间、种子无菌萌发进行研究。结果显示最佳授粉时间为花后2~5 天。品种自交坐果率仅33.3%,品种杂交的坐果率达100%。蒴果的纵横径生长呈单“S”形曲线。成熟种子萌发时间为281~296天;授粉后130 天的未成熟种子萌发时间仅需96~99 天,萌发数量最多,为116 ~132 个/瓶。本研究使春兰从授粉到种子萌发的时间缩短8个月,且萌发率增加,节约了成本,提高了效率。     

春兰菌根真菌的筛选

地生兰组织培养存在移栽无菌苗成活率低、生长缓慢、开花迟缓、花小甚至不开花等问题,这些与缺少共生的菌根真菌有关。用分离自云南保山、大理等地野生春兰菌根中的内生真菌19个菌株接种春兰组培幼苗,经4.5个月的共生培养,兰苗叶色正常,根系生长良好。测定植物生长量,从长势有明显提高的接菌苗进行重分离及菌根的显微结构观察,确定春兰菌根的形成,并筛选出春兰的有效共生菌根真菌为CLB111,CLB113和MLX102。通过接种处理后春兰苗的鲜重增长率分别为70.6%、70.2%、68.6%,而不接菌的对照仅为45.6%,与对照差异达0.01极显著水平。结果表明这3个菌株均为春兰的菌根真菌的优良菌株.     

春兰菌根的显微结构观察

应用石蜡切片法,借助于光学显微镜观察春兰无菌组培苗、接菌组培苗的根及野生状态下的新生营养根、老根,结果表明:接菌组培苗的根及野生状态下的新生营养根、老根,其皮层组织细胞内有大量的菌丝结等兰科菌根的典型结构,而无菌组培苗的根则无菌丝、菌丝结等结构.菌根真菌自外皮层薄壁通道细胞侵入根的皮层细胞,春兰菌根是典型的地生兰菌根.     

春兰根状茎增殖与分化培养

以10种培养基进行了春兰根状茎增殖培养研究,结果表明,不同培养基对增殖率有明显影响,以White NAA 5 mg/L培养再转入1/2 MS NAA 5 mg/L培养基,可获得较高的平均生长速度,但获得的根状茎总量以2号培养基最多。春兰根状茎的最适增殖条件为:1/2 MS为基本培养基,不加或添加少量NAA,60 d为1个增殖周期;5种培养基分化培养结果表明,根状茎分化受BA浓度影响较大,当BA浓度达3 mg/L时,经45 d培养平均每g根状茎可分化出20个芽,每芽重约0.15 g。活性炭的存在会抑制分化。     

建兰种子无菌萌发技术初探

以赣南地区野生建兰蒴果为材料,研究了不同培养基对种子无菌萌发的影响以及生长素浓度对无菌芽生根的影响,并对建兰种子无菌萌发过程进行了观察。结果发现：添加外源植物生长调节剂6-BA与NAA以及适宜的蔗糖浓度都能显著提高建兰种子的萌发率,建兰种子无菌萌发最适培养基为：1/2 MS +8 g/L 琼脂粉+ 60 g/L蔗糖+2.0 mg/L NAA+ 0.4 mg/L 6-BA+1g/L活性炭;当0.8 mg/LNAA与0.4mg/L 6-BA组合时,生根率最高,在90天时最高可达80.50%;通过观察建兰种子萌发无菌芽的过程发现,建兰种子在播种后到形成根状茎分枝大约要经历250d。     

春兰ISSR-PCR反应体系的优化

以春兰为材料,对影响ISSR-PCR扩增结果的因素如模板DNA、dNTPs、MgCl2、primer、TaqDNA聚合酶的浓度及引物退火温度、反应循环数进行了探讨,确立了适合春兰ISSR-PCR分析的最佳反应体系和PCR扩增参数:在15μL反应体系中含1×buffer,0.2 mmol/L dNTPs,2.0 mmol/L MgCl2,0.2μmol/L引物,0.3 UTaqDNA聚合酶,20 ng模板DNA。PCR扩增程序:94℃预变性2.5 min;94℃变性45 s,48~58℃退火(退火温度随引物不同而定)45 s,72℃延伸2 min,35个循环;72℃延伸5 min。     

春兰SRAP-PCR反应体系的建立和优化

摘 要：【研究目的】为获得春兰的 SRAP 标记图谱,对春兰SRAP-PCR 反应体系进行了初步研究【方法】通过正交试验设计,从Mg2+、dNTPs、Taq酶、引物、模板5种因素4个水平对春兰SRAP-PCR反应体系进行优化。【结果】所建立的体系为：25μl反应体系中含有2.5mmol/L的Mg2+ ,2mmol/L的dNTP, 0.5U的Taq酶,1.2 μmol/L的引物,90 ng的模板。【结论】为春兰指纹图谱的构建奠定基础。     

春兰根状茎的增殖与分化条件优化

以春兰种子无菌萌发的根状茎为材料,采用正交设计方法,研究了春兰根状茎增殖与分化的适宜条件.结果表明,根状茎增殖适宜的培养基为1/2MS+3 mg·L-1BA+蔗糖3%+香蕉5%+琼脂0.8%,根状茎分化适宜的培养基为1/2MS+3.0mg·L-1BA+1.0mg·L-1NAA+0.8mg·L-1IBA+蔗糖3%+琼脂0.8%.使用100 g.L-1香蕉作为附加物,春兰根状茎在培养30d后重量可达初重的2.1倍.根状茎在固体培养过程中不发生褐变现象,添加活性炭能促使根状茎产生根毛类似物.