应用酶联免疫吸附试验（ELISA）诊断牛东毕吸虫病的初步研究

本试验探索了使用ＥＬＩＳＡ诊断牛东毕吸虫病的方法，并对７８份阴性血清，５５份阳性血清进行了检测。试验结果表明，阳性符合率达９３．７％，阴性符合率达９８．４％。与ＩＨＡ等方法的比较表明，ＥＬＩＳＡ检出率最高．     

应用酶联免疫吸附试验诊断牛东毕吸虫病的初步研究

本试验探索了使用ＥＬＩＳＡ诊断牛东毕吸虫病的方法，并对７８份阴性血清，５５份阳性血清进行了检测。试验结果表明，阳性符合率达９８．７％，阴性符合率达９８．４％。与ＩＨＡ等方法的比较表明，ＥＬＩＳＡ检出率最高。     

用SPA—ELISA检测牛结核乳清抗体的研究

从用牛ＰＰＤ皮试阳性奶牛中采取１８头份牛乳，不稀释，做ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ检测，进行了ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ条件优选工作，建立了检测牛乳清中结核抗体的ＥＬＩＳＡ工作程序。检测结果表明：１８份ＰＰＤ皮试阳性牛乳，经ＳＰＡ－ＥＳＩＳＡ检测阳性为１５份，阴性为３份，结果附合率为８３．３３％。     

抗猪细小病毒单克隆抗体在猪细小病毒病诊断上的应用

用淋巴细胞杂交瘤技术，研制出的抗猪细小病毒单克隆抗体，采用酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）方法，对本地区所采得的３０８份猪血清进行检测，阳性检出率达６６．６％，其中２０－３５日龄仔猪阳性检出率在８０％以上；４５日龄仔猪阳性检出率为７５．５％；屠宰猪阳性检出率５５．２％。选择７０份被检血清用已建立的检测猪细小病毒抗体的ＥＬＩＳＡ试验与传统的ＨＩ试验进行比较，其敏感性较高，ＥＬＩＳＡ检出阳性率为８５．７     

Dot-ELISA快速检测鱼类运动性气单胞菌的研究

制备了引起常见鱼病的６株运动性气单胞菌的兔抗血清，建立了检测运动性气单胞菌的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法。该法能检出含１０７菌细胞／ｍＬ的菌悬液及１０个菌细胞／ｍＬ增菌２０ｈ的培养物，与运动性气单胞菌群内的菌株，均呈现明显的阳性反应，不与鲁克耶尔森氏菌、荧光假单胞菌、鳗弧菌等１０株对照菌发生影响检测结果的交叉反应。应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ与常规分离法分别对人工感染的４０份样本进行检测，其阳性数分别为３３和３４，两法符合率为９７％。经Ｘ２检验表明，两法检测结果间有显著意义的一致性（Ｐ＜０．０５），但前者可在２４ｈ内报告结果。应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ又对８株鱼源菌检定，结果与细菌学检查相符。Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法具有快速、敏感、特异、实用的优点，可用于引起常见鱼病的运动性气单胞菌群的检测。     

Dot—ElISA联检牛羊捻转血矛线虫和肝片吸虫病的研究

应用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ联检１４２００头牛羊捻转血柔线虫和肝片吸虫病抗体，其中５５头羊与剖检捻转血柔线虫和肝片吸虫体的比较，其阳性符合率均达１００％，并可测出自然感染１￣２条以上的捻转血柔线虫和肝片吸虫病抗体；３７３头血检阳性的牛羊与粪检的比较，其捻转血柔线虫和肝片吸虫病的阳性符合率分别达９２．７９％和９５．１５％，初步认为该法可用于牛羊推迟转血柔线虫和肝片吸虫病的联检。     

牛羊四种寄生虫病联合诊治技术的研究与应用

首次建立的酶标ＳＰＡＤｏｔ－ＥＬＩＳＡ联检牛羊血矛线虫、血吸虫、伊氏锥虫和肝片吸虫病技术，已在浙江、四川、湖北、安徽等省６２个县市试用５６万余头，据５０个县市对其中１９４９０头份与酶标ＳＰＡＤｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测牛羊血吸虫、伊氏锥虫和肝片吸虫病技术进行比较结果胛联与三联法，其血吸虫病、伊氏锥虫病和肝片吸虫病阳性符合率依次达９９．１３％，９９．０５％和９９．２１％。同时，对四联法血清学阳笥的４６６０     

应用ABC－ELISA和SPA－ELISA检测狂犬病疫苗免疫犬后血清中的抗体水平

本文报道应用ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ和ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ检测狂犬病疫苗免疫犬后血清中抗体的效价，比较研究了两种方法的特异性，敏感性和重复性，结果显示两种方法均适用于检测狂犬病血清抗体水平。ＡＢＣ－ＥＬＩＳＡ较ＳＰＡ－ＥＬＩＳＡ敏感性高４倍，前者的阳性检出率（１００％）高于后者（９２．８％）。     

Dot-ELISA方法检测鸡肠梭菌抗毒素的研究

将肠梭菌培养液过滤除菌，滤液经硫酸铵沉淀，再经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００柱层析，收集毒素峰洗脱液，浓缩后制成毒素纯化抗原。用混合纤维素酯微孔滤膜为固相载体，制成检测肠梭菌抗毒素的快速诊断膜。用Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检查１０份肠梭菌高免鸡血清均呈阳性反应，１５份鸡巴氏杆菌阳性血清、１０份鸡波氏杆菌阳性血清、１５份鸡大肠杆菌阳性血清、１０份鸡葡萄球菌阳性血清及３０份健康鸡血清均为阴性。鸡肠梭菌阳性血清均可被特异性抗原阻断。Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ与常规间接ＥＬＩＳＡ差异不显著（Ｐ＞００５），两者的总符合率为９５００％。     

用双夹心法ELISA检测兔轮状病毒的研究

建立了检测兔轮状病毒抗原的夹心法ＥＬＩＳＡ（ＤＳ－ＥＬＩＳＡ）。用此法检测了６７份兔腹泻粪便样品和腹泻死亡兔肠内容物样品。轮状病毒（ＲＶ）阳性检出率（３１．３４％）明显高于双抗体夹心法ＥＬＳＡ（２５．３７％）和对流免疫电泳（１６．４１％）。经阻断试验和重复性试验，证明了ＤＳ－ＥＬＩＳＡ具有特异性强和重复性好等优点。     

应用变态反应方法诊断鹿结核病的研究

利用牛型新，旧结核菌素（ＰＰＤ，ＯＴ），禽型旧结核菌素（ＯＴ）为变应原，采用变态反应点眼法进行了鹿结核病的诊断研究。结果表明：变应原以牛型ＯＴ为最好，其敏感性高于禽型ＯＴ，检出率高于牛型ＰＤＤ；一次二回点眼的阳性率可达９２．３３％，且较一次一回的检出率高４４．６％；判定最佳时间为３，６，９ｈ。用牛型ＯＴ一次二回点眼法抽检了１１个鹿场２４５０余头成年鹿，其阳性率最高者为９９．８％，最低者为１．１％，     

山东部分地区猪瘟与蓝耳病的流行病学调查

[目的]对山东部分地区进行猪瘟与蓝耳病的流行病学调查。[方法]采取血清学检测方法和问卷调查的方式,对山东6个地区养殖场的猪瘟(CFS)与蓝耳病(PRRS)感染情况进行流行病学调查,同时进行现场临床调查和病例剖检。[结果]在检测的598份病猪血清中,有463份为阳性,感染率为77.42%,其中377份为CFSV感染,感染率为63.04%;274份为PRRSV感染,感染率为45.82%;188份为PRRSV和CFSV混合感染,感染率为31.44%。在198份问卷调查中,44个兽医站、112个村级兽医和42个养殖场确定了CSF与PRRS的存在,并且通过现场临床调查和剖检诊断,进一步证实了2种疾病的存在。[结论]CSF和PRRS仍然是危害山东养猪业发展的主要疾病,应加强对该种病的防控工作。     

猪乙型脑炎新型协同凝集试验与酶联免疫吸附试验(ELISA)方法的比较

用新型SPA(Staphylococcal Protein A)协同凝集试验对88份猪血清进行了乙型脑炎病毒(JEV)抗体检测,并与酶联免疫吸附试验(ELISA)进行了对比,两种方法检测结果为:ELISA检测阳性率为62.5%(55/88),SPA阳性率为68.18%(60/88),二者阳性符合率为90.0%(54/60),总符合率为86.3%(76/88).对8份SPF猪血清进行检测,两种方法检测结果均为阴性.结果表明,SPA与ELISA检测乙型脑炎结果符合,前者更为简便和实用.     

酶联免疫吸附试验检测姜片虫感染者血清抗体

超声粉碎制备姜片吸虫成虫冷浸抗原,以1:3500工作浓度包被酶标板;采用Kato—Katz氏定透法普查姜片吸虫病,对虫卵阳性者用ELISA法测定血清抗体,同时测定健康居民的血清和其他吸虫病患者血清,以评价ELISA法检测姜片虫病血清抗体的敏感性、特异性和交叉反应性。按常规ELISA方法操作,目视与酶标仪判断结果。普查2 189人中姜片吸虫卵阳性者168例;168例中165例ELISA阳性,ELISA与Kato—Katz氏定透法的阳性符合率98.21％;健康居民血清147份,阳性6份,阳性率4.08％;与血吸虫病交叉阳性为9.38％,肺吸虫病交叉阳性为5.36％。应用此法检测姜片虫感染者血清抗体具有敏感性高、特异性强和交叉反应率低等特点,可代替粪检法广泛用于姜片吸虫感染的检测。     

副猪嗜血杆菌OMP5基因的克隆、表达及间接ELISA检测方法的建立

 【目的】利用表达纯化的副猪嗜血杆菌（Haemophilus Parasuis,HPS）外膜蛋白P5（outer-membrane protein P5,OMP5）,建立检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA 检测方法。【方法】克隆扩增HPS OMP5基因,并将OMP5基因与原核表达载体 pET-32a(+)连接,通过PCR、双酶切及测序鉴定后,将阳性重组质粒转化入受体菌BL21（DE3）,经IPTG诱导表达。亲和层析法纯化蛋白,尿素梯度透析复性,Western blot鉴定表达产物。将超声破碎抗原和复性蛋白分别按不同浓度包被酶标板,通过方阵滴定法确定最佳抗原包被浓度及血清稀释度,并对其它条件进行优化,最终建立检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA方法。【结果】利用克隆表达的HPS OMP5蛋白做抗原,通过方阵滴定法确定蛋白最佳包被浓度为 1:400,血清的最佳稀释度为1:160。用建立的间接ELISA 方法检测317份未进行HPS免疫的健康猪血清,结果检出72份阳性,检出率为22.71%,与广东地区发病猪中的HPS分离率24%接近。同时,用该方法与用超声破碎抗原建立的ELISA方法同时检测了78份血清样品,结果,该法检出27份阳性,检出率为34.62%,后者则检出31份阳性,检出率为39.74%,二者符合率为71.79%。【结论】本研究利用重组表达的OMP5蛋白作为抗原建立的检测副猪嗜血杆菌抗体的间接ELISA 方法,特异性好、重复性好,检出率与HPS临床分离率接近,可用于副猪嗜血杆菌的临床检测、流行病学调查和免疫监控。     

TTC和ELISA法检测纯牛奶中抗菌药物残留比较

采用TTC法、ELISA检测法对随机抽取的50份纯牛奶样品进行抗生素残留分析.TTC法测出抗菌药物阳性率为16%;ELISA法测出抗菌药物阳性率为20%,其中四环素残留阳性率为5%,链霉素残留阳性率为15%,青霉素残留阳性率为8%,磺胺二甲嘧啶检测全部为阴性,二者结果基本一致.结果显示,部分牛奶中有抗菌药物残留.     

市售消毒纯牛奶中抗菌药物残留的检测

为了解北京市售消毒纯牛奶中抗菌药物残留情况,随机采购此牛奶50份,分别采用TTC法、微生物检测法和酶标免疫分析法对样品进行抗生素残留检测,以农业部2001年发布的"无公害食品"牛奶中不得检出抗生素为判定标准.TTC法检测出4份阳性,3份可疑,阳性率为8%,可疑率为6%;微生物法检测出青霉素类残留阳性5份,阳性率为10%.酶标免疫分析法检测出四环素类阳性4份,阳性率为8%;链霉素残留阳性11份,阳性率为22%;磺胺二甲嘧啶检测结果全部为阴性.调查结果显示市售消毒纯牛奶中有部分存在抗菌药物残留.     

辽宁地区鸡乙型肝炎的血清流行病学调查

应用酶联免疫吸附试验（ELISA）对辽宁地区鸡血清标本进行了乙型肝炎表面抗原（HBsAg）、乙型肝炎表面抗体（HBsAb）、乙型肝炎e抗原（HBeAg）和乙型肝炎核心抗体（HBcAb）的血清流行病学调查。结果显示：鸡HBsAg阳性率为9．09％；HBsAb阳性率为5．88％HBeAg、HBcAb阳性率为0。     

四种检测猪的繁殖与呼吸综合征病毒血清抗体方法的比较

本试验利用猪的繁殖与呼吸综合征病毒美洲株和上海分离株 Ｓ Ｈ１ 建立了 Ｉ Ｆ、 Ｉ Ｐ Ｍ Ａ 和 Ｄｏｔ － Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ三种抗体检测方法, 对１２０ 份随机抽样猪血清检测表明, 美洲株抗原组 Ｉ Ｆ Ａ 的阳性率为３０ ．８ ％ 、 Ｉ Ｐ Ｍ Ａ 的阳性率为３０ ％ 、 Ｄｏｔ － Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 的阳性率为３２ ．５ ％ , Ｓ Ｈ１ 分离株抗原组 Ｉ Ｆ Ａ 的阳性率为３７ ．５ ％ 、 Ｉ Ｐ Ｍ Ａ 阳性率为３７ ．５ ％ 、 Ｄｏｔ － Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 的阳性率为４０ ％ 。进口 Ｅ Ｌ Ｉ Ｓ Ａ 试剂盒的检测阳性率为２６ ．７ ％ 。     

酶联免疫吸附试验诊断鹿结核病

本文报告了应用酶联免疫吸附试验诊断鹿结核病的中所进行的抗原筛选、各要素最适稀度、最适作用条件以及所选用抗原的特异性和敏感性等诸方面较系统地研究过程和方法，结果表明，５种抗原在荻取方法，特异性和敏感性的比较中，以ＰＰＤ为最佳，从而建立了以ＰＰＤ为抗原的ＥＬＩＳＡ检测鹿结核病的血清学诊断程序，通过对１２６８头鹿ＥＬＩＳＡ检测结果与变态反结果对比证明：两种诊断方法的阳性符合率为８２％，二者不能互相代替，