牛奶中青霉素残留的酶免疫法检测的研究

本文介绍了氨苄青霉素残留检测,通过选题拟在获得氨苄青霉素的单克隆抗体以及多抗血清,以期探讨其残留检测的灵敏、快速、方便的检测方法,为科学研究与实际应用提供资料。     

农产品中青霉素残留检测技术研究进展

青霉素是一类通过破坏细菌细胞壁合成,从而起到遏制细菌繁殖作用的抗生素,在畜牧业和医疗中应用广泛.然而青霉素的不合理使用,会危害人体健康以及破坏环境,因此亟待研究快速检测青霉素含量的技术方法.目前,青霉素残留主要检测方法为微生物法、仪器分析法和免疫分析法.基于受体技术的分析法灵敏度高、原料获得周期短以及操作简便,近年来在β-内酰胺类抗生素残留检测中具有重要意义.     

牛奶中阿莫西林残留检测方法的研究

以人工合成的AMX-OVA为检测抗原、AMX标准品为竞争半抗原,建立间接竞争ELISA检测方法.该方法的最低检测量为3.926 ng/ml,回归方程为y = -18.921x + 94.578(r2 = 0.991 3),在0.5～2 000 ng/ml范围内样品添加平均回收率为91.45%.结果表明,该方法可用于阿莫西林药物残留筛选检测.     

牛奶中抗生素残留的检测分析

抗生素能破坏人体肠道内的细菌平衡甚至使人发生过敏反应导致发热或过敏性休克。牛奶中的抗生素残留日趋受到社会各界的广泛关注。本研究用ELISA法对牛奶样品进行筛选,然后用HPLC法进行定量检测,依据检测结果对牛奶中抗生素的残留现状、来源及危害性等方面进行了分析。     

牛奶抗生素残留检测方法研究进展

近年来,不断出现的食品安全问题引起了人们的重视,凸显了食品安全方面存在的一些漏洞。牛奶作为一种营养丰富、价格低廉的食品,其安全问题几乎牵涉到每一个人,而抗生素残留问题是牛奶安全问题中比较严重的一个。如何快速准确地检测牛奶中是否存在抗生素残留很重要。主要综述了检测牛奶中抗生素残留的不同方法及各自的特点。     

微生物显色法快速检测水产品中恩诺沙星残留

针对水产品中恩诺沙星残留,通过筛选药物敏感菌株和显色剂,建立了一种基于显色反应来判断结果的微生物检测方法.以腾黄八叠球菌(Sarcina ureae)为指示菌株,以氯化三苯四氮唑显色为显色剂,阳性样品呈肉眼可辨的红色,阴性样品呈无色,最低检测限可达50 μg/kg.经酶联免疫法(最低检测限可达12 μg/kg,回收率在74.25%～93.38%之间)和高效液相色谱法(最低检测限可达5.0 μg/kg,回收率在78.20%～91.27%之间)验证,该方法准确、可靠.不同于传统的方法,该方法更为快速、便捷、易于结果判定,是对现有检测方法的一种有益的补充和完善,极其适合在生产、销售、流通等非实验室条件下作为初筛方法使用.     

牛奶中抗生素残留的简易检测

1检测原理 当牛奶中含有抗生素时，标准菌株嗜热链球菌的生长受到抑制，不能将指示剂2，3，5-氯化三苯基四氮唑（简称TTC）还原，生成红色化合物。反之，当牛奶中不存在抗生素时，加入的标准菌株，就会大量生长繁殖，将TTC还原为红色化合物。其红色的强度与细菌的数量成正比。[第一段]     

青霉素结合蛋白在残留检测中的应用研究

近年来,青霉素结合蛋白在青霉素残留检测技术上的应用已成为一个趋势,克服了其他青霉素残留检测技术的一些不足。因此全面了解和关注青霉素结合蛋白的研究进展十分必要。文中通过阅读近10年相关文献,对青霉素结合蛋白的发现分类、研究方法及在食品安全检测中的应用进行了综述。     

应用MTT法检测兔腹腔巨噬细胞的增殖效应

应用ＭＴＴ法检测兔腹腔巨细胞的增殖效应。结果表明：免疫增殖组兔吸光值（ＯＤ）为９．４３４±０．０３２，刺激指数（ＳＩ）为３．５９±０．２７，增长指数（ＧＩ）为２．６５±０．４３，对照组兔ＯＤ为０．２２５±０．０３３，ＳＩ为１．８７±０．２８，ＧＩ为１．１４±０．１０，两组差异明显。拟提示此法可以作为检测巨噬细胞免疫力的方法之一。     

牛奶和鸡蛋中抗生素残留规律研究

[目的]了解新疆地区奶牛和蛋鸡生产中常用抗生素类药物在牛奶和鸡蛋中的残留情况.[方法]按照新疆地区奶牛和蛋鸡生产中抗生素类药物的使用方法及剂量进行投放,采集牛奶及鸡蛋样品进行检测.[结果]青霉素钾在牛奶中的残留规律为停药1 d>5 d>3 d;头孢噻呋钠在牛奶中的残留规律为停药3 d>1 d>5 d;链霉素在牛奶中的残留规律为停药1 d>3 d>5 d;长效土霉素在牛奶中的残留量在停药1～11 d一直维持在175 μg/kg左右;停药1和3 d,酒石酸泰乐菌素在鸡蛋中的残留量为2 μg/kg左右;头孢噻呋钠在鸡蛋中的残留规律为停药7 d>5 d>3 d>1 d;环丙沙星在鸡蛋中的残留规律为停药11 d>7 d>5 d>1 d>3 d.[结论]除了长效土霉素外,其他药物在休药期内的残留量均低于中国和欧共体(EEC)规定的标准残留限量.     

打顶留叶数对烤烟产量、质量及焦油释放量的影响

[目的]研究打顶留叶数对丹东烟区烤烟产量、质量和焦油释放量的影响,为优质低焦油烟叶生产提供理论依据。[方法]通过安排留叶20片,18片(对照),16片3个处理的田间试验,调查分析在正常打顶时期不同留叶数对烤烟产质量及焦油释放量的影响。[结果]结果显示,打顶留叶20片时烟株农艺性状得到改善,田间发病情况较轻,产量、产值均高于对照,内在化学成分较协调,但烟气焦油释放量高。[结论]打顶留叶20片为较适宜处理,此时化学成分协调,经济效益更佳。     

高效液相色谱-串联质谱法测定动物肺组织中青霉素G和青霉素V

[目的]建立一种动物肺组织中青霉素G和青霉素V的高效液相色谱-电喷雾-三重四极杆质谱检测方法。[方法]样品中青霉素经磷酸二氢钠溶液提取,加正己烷去除脂肪后过SPE柱,乙腈洗脱,氮气吹干后用乙腈-水(1∶1,V/V)定容至1 ml,过膜后采用AgilentEclipse Plus C18柱高效液相色谱分离,电喷雾串联质谱法检测,负离子模式下多反应监测,标准曲线法定量。[结果]加标水平为5.0、10.0和20.0μg/kg时,回收率在73.58%～101.18%,相对标准偏差为3.00%～8.82%,仪器检出限为0.1μg/L,方法的定量限均为5.0μg/kg。[结论]该方法快速、灵敏、操作简单、准确性高,可满足对动物肺组织中青霉素G和青霉素V残留的定量分析要求。     

MTT法测定8种中草药体外抗肝癌细胞SMMC-7721活性

［目的］建立一套适合于实验室高效、快速的体外抗肝癌活性物质筛选模型。［方法］通过MTT法,对芸香草、半边莲、蜜蒙花、甘草、地榆、柴胡、旱芹和莪术等8种中草药体外抗肝癌细胞SMMC7721的活性进行初测;描绘肿瘤细胞生长曲线,倒置显微镜观察细胞不同阶段的生长状况。［结果］受活性物质作用细胞尽管仍然贴壁,但萎缩,边缘清晰化,与生长状况良好的细胞形态有明显区别;浓度为1.0~1.5mg/ml的甘草乙醇浸提液（ESCG）、莪术乙醇浸提液（ESCC）和柴胡乙醇浸提液（ESCB）对体外培养的肝癌细胞SMMC7721有较强的抑制增殖作用,抑制率分别为51.6%、48.5%和52.9%,且抑制作用随着浓度的增加而加强。［结论］MTT法筛选可作为重要抗肿瘤的1个基本筛选模型。     

MTT法测定8种中草药体外抗肝癌细胞SMMC-7721活性

[目的]建立一套适合于实验室的高效、快速的体外抗肝癌活性物质筛选模型.[方法]首先,选用乙醇为溶剂对芸香草、半边莲、蜜蒙花、甘草、地榆、柴胡、旱芹和莪术8种中草药植物材料进行浸提.然后通过MTT法对8种中草药体外抗肝癌细胞SMMC-7721的活性进行仞测.试验采用二甲基亚砜(DMSO)与甘氨酸-NaOH缓冲液作为溶剂,消除剩余培养基对吸光值的影响.为确保细胞株最大吸收峰位置不变,酶标仪采用570 nm波长测定OD值.为验证筛选出的3种物质对癌细胞的抑制作用,以活性物质浓度为横坐标,细胞生长抑制率为纵坐标,描绘肿瘤细胞生长曲线,倒置显微镜观察细胞不同阶段的生长状况.[结果]倒置显微镜下观察3种细胞阶段的形态:正常状态下,细胞的透明度大、折光性强、轮廓不清;当细胞受污染时,折光性变弱,胞质中常出现空泡、脂滴、颗粒样物质,细胞之间空隙加大,细胞变得不规则,失去原有特点;而受活性物质作用细胞尽管仍然贴壁,但其萎缩,边缘清晰化;三者之间存在一定区别.MTT法培养板定性检测显示,柴胡、莪术、甘草细胞培养孔内的液体颜色都较浅且比较均匀,可见,它们对细胞生长具有明显的抑制作用.而半边莲培养孔内液体颜色深浅不一.还有一些培养孔内液体颜色较深,如卤地菌、蜜蒙花、地榆和旱芹,表明它们对细胞生长没有明显的抑制作用.进一步定量计算表明,浓度为1.0～1.5 mg/ml的甘草乙醇浸提液(ESCG)、莪术乙醇浸提液(ESCC)和柴胡乙醇浸提液(ESCB)对体外培养的肝癌细胞SMMC-7721有较强的抑制增殖作用,抑制率分别为51.6%、48.5%和52.9%.甘草、柴胡和莪术3种物质的抑制作用曲线结果也验证了它们对细胞生长有明显的抑制作用,并且抑制程度与浓度呈正相关.[结论]MTT法筛选可作为重要抗肿瘤的1个基本筛选模型.     

MTT法测定8种中草药体外抗肝癌细胞SMMC-7721活性（摘要）

[目的]建立一套适合于实验室的高效、快速的体外抗肝癌活性物质筛选模型。[方法]首先,选用乙醇为溶剂对芸香草、半边莲、蜜蒙花、甘草、地榆、柴胡、旱芹和莪术8种中草药植物材料进行浸提。然后通过MTT法对8种中草药体外抗肝癌细胞SMMC-7721的活性进行初测。试验采用二甲基亚砜（DMSO）与甘氨酸-NaOH缓冲液作为溶剂,消除剩余培养基对吸光值的影响。为确保细胞株最大吸收峰位置不变,酶标仪采用570 nm波长测定OD值。为验证筛选出的3种物质对癌细胞的抑制作用,以活性物质浓度为横坐标,细胞生长抑制率为纵坐标,描绘肿瘤细胞生长曲线,倒置显微镜观察细胞不同阶段的生长状况。[结果]倒置显微镜下观察3种细胞阶段的形态：正常状态下,细胞的透明度大、折光性强、轮廓不清;当细胞受污染时,折光性变弱,胞质中常出现空泡、脂滴、颗粒样物质,细胞之间空隙加大,细胞变得不规则,失去原有特点;而受活性物质作用细胞尽管仍然贴壁,但其萎缩,边缘清晰化;三者之间存在一定区别。MTT法培养板定性检测显示,柴胡、莪术、甘草细胞培养孔内的液体颜色都较浅且比较均匀,可见,它们对细胞生长具有明显的抑制作用。而半边莲培养孔内液体颜色深浅不一。还有一些培养孔内液体颜色较深,如卤地菌、蜜蒙花、地榆和旱芹,表明它们对细胞生长没有明显的抑制作用。进一步定量计算表明,浓度为1.0～1.5 mg/ml的甘草乙醇浸提液（ESCG）、莪术乙醇浸提液（ESCC）和柴胡乙醇浸提液（ESCB）对体外培养的肝癌细胞SMMC-7721有较强的抑制增殖作用,抑制率分别为51.6%、48.5%和52.9%。甘草、柴胡和莪术3种物质的抑制作用曲线结果也验证了它们对细胞生长有明显的抑制作用,并且抑制程度与浓度呈正相关。[结论]MTT法筛选可作为重要抗肿瘤的1个基本筛选模型。     

MTT法测定棉酚对多浪羊淋巴细胞生长的影响

通过MTT法测定棉酚对多浪羊淋巴细胞生长的影响,确定棉酚对多浪羊淋巴细胞产生影响的最短作用时间和最低浓度,用于指导生产实践.从新疆多浪羊外周血分离淋巴细胞,将其加入10 mL的RPMI-1640中,均匀加入96孔细胞培养板中,于CO2培养箱中37℃培养12h后,分别以不同浓度(5、10、15、20、25、30、35 μmol/L)的棉酚进行作用,作用时间分别为1、2、3、4、5、6h,加入MTT培养4h,加入DMSO溶液终止反应,用酶联免疫检测仪于490 nm处检测各孔的吸光值.结果表明,随着棉酚作用浓度及作用时间的递增,多浪羊淋巴细胞活性在逐渐下降,说明棉酚对多浪羊的淋巴细胞活性有明显的抑制作用.     

MTT法在木醋杆菌活力检测中的应用

[目的]采用MTT法测定木醋杆菌静置培养时的活力,旨在探索一种快速检测木醋杆菌生长及繁殖的方法。[方法]以木醋杆菌为研究对象,探讨MTT法用于细菌计数的可行性及测量细菌数量的范围,并研究反应时间、MTT的用量、离心力等试验条件对MTT法的测定效果的影响。[结果]木醋杆菌活菌数在3.90×105～1.25×107cfu/ml范围内测出的OD570值与细菌浓度呈良好的正相关,且MTT法最优的试验条件是离心力7 000 g、孵育时间4 h,MTT添加量30μl,测量前用DMSO溶解。[结论]MTT法可快速、方便的检测木醋杆菌活力。     

MTT比色法检测孕牛淋巴细胞转化的效果

选择３０头妊娠奶牛，根据妊娠阶段不同分为妊娠前期（小于１００ｄ）、妊娠中期（１００—２００ｄ）和妊娠后期（大于２００ｄ）３组，应用ＭＴＴ比色法测定妊娠母牛的外周血淋巴细胞转化能力．结果是妊娠母牛淋巴刺激指数明显低于未妊娠牛（Ｐ＜０．０５），不同妊娠天数之间差异不显著（Ｐ＞０．０５）．这就说明妊娠时母体的细胞免疫功能是下降的     

青霉素对枯草芽孢杆菌破壁效果研究

[目的]研究枯草芽孢杆菌生长期添加青霉素时的破壁效果。[方法]为使细菌释放出细胞内的有效活性物质,采用青霉素干扰微生物细胞壁形成的方法,研究不同的青霉素添加量对细胞的破壁效果。[结果]通过检测破壁前后菌体光密度变化值得出,在枯草芽孢杆菌的生长期,青霉素添加量对菌体光密度的变化有明显影响,青霉素添加量为25 mg/kg,作用时间4 h,温度30℃时,光密度变化值（ΔOD）最高,达0.695,说明此时破壁效果最佳。[结论]青霉素对细胞具有一定的破壁效果,推测根据需要可以适量添加青霉素,使细菌释放出细胞内的物质。     

原料乳中抗生素的检测及其对酸乳发酵的影响

研究了产酸抑制试验中嗜热链球菌不同菌株、保加利亚乳杆菌、混合发酵剂对青霉素的灵敏度,以及改变发酵剂接种量对抗生素残留判断的影响,结果表明:不同菌株对青霉素的敏感性存在一定差异,加大发酵剂接种量会导致对抗生素残留检测结果的误判;低浓度抗生素残留原料乳在使用直投式发酵剂时,抗生素残留对酸乳发酵时间、粘度、乳清析出、产品口感等均有一定影响,因此,在生产上应避免由于抗生素检测误判造成的产品质量缺陷。