猪凝血酶的亲和层析纯化及其酶原的激活研究

采用柠檬酸钡作吸附剂，ＥＤＴＡ溶解的方法从猪血浆提取凝血酶原，建立了凝血酶原激活的简单方法。并以环氧氯丙烷活化的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ为载体。采用１－乙基－３－（３－二甲氨丙基）碳二亚胺进行肝素的固定化，将固定化肝素用于猪凝血酶的亲和层析纯化。结果表明，通过一步亲和层析将猪凝血酶粗品提纯了８．２倍，获得了比活超过１１００Ｕ／ｍｇ的凝血酶，收率为６０％。     

猪凝血酶的亲和层析纯化及其酶原的激活研究

采用柠檬酸钡作吸附剂、ＥＤＴＡ溶解的方法从猪血浆提取凝血酶原，建立了凝血酶原激活的简单方法。并以环氧氯丙烷活化的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ为载体，采用１－乙基－３－（３－二甲氨丙基）碳二亚胺进行肝素的固定化，将固定化肝素用于猪凝血酶的亲和层析纯化。结果表明，通过一步亲和层析将猪凝血酶粗品提纯了８．２倍，获得了比活超过１１００Ｕ／ｍｇ的凝血酶，收率为６０％。     

猪凝血酶的分离纯化和部分性质研究

以猪血为材料,采用等电点沉淀和７２４树脂离子交换柱层分离提纯,得凝血的,经ＣａＣｌ４激活后,通过ＤＥＡＥ－纤维素离子交换柱层析,获得比活为１２００ＩＵ／ｍｇ的凝血酶制剂,其收率为３２．１％,研究发现,ＮａＣｌ浓度对猪凝血酶活力有较大的影响,加１ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ于凝血酶溶液中,室温放置３ｈ后,活力丧失５０％。猪凝血酶的最适温度和最适ｐＨ分别是３７℃－和ｐＨ７．０。猪凝血酶在ｐＨ７．０,４０℃下放置     

猪凝血酶的分离纯化及部分性质研究

经等电点沉淀,ＤＥＡＥ离子交换纤维素柱层析和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００分子筛层析从猪血浆中纯化得到到猪凝血酶,酶比活力为２０００Ｕ／ｍｇ,纯化倍数为１００,酶活力回收为５６％,酶反应的最适ＰＨ和温度分别为７．０和３７℃,ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００层析测得酶分子量为３６０００。猪凝血酶的稳定性较差,４０℃保温２７ｈ,酶活力下降８４％。高浓度的盐对酶稳定性有较大的影响,在２ｍｏｌ＝／ＬＮａＣｌ下放置３     

猪凝血酶的分离纯化和部分性质研究

以猪血为材料,采用等电点沉淀和７２４树脂离子交换柱层析分离提纯,得凝血酶原,经ＣａＣｌ２激活后,通过ＤＥＡＥ－纤维素离子交换柱层析,获得比活为１２００ＩＵ／ｍｇ的凝血酶制剂,其收率为３２．１％。研究发现,ＮａＣｌ浓度对猪凝血酶活力有较大的影响,加１ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ于凝血酶溶液中,室温（２５℃）放置３ｈ后,活力丧失５０％。猪凝血酶的最适温度和最适ｐＨ分别是３７℃和ｐＨ７．０。猪凝血酶在ｐＨ７．０、４０℃下放置２７ｈ,活力丧失８４％。通过ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００凝胶层析,测出猪凝血酶的分子量为３０ｋｄ。     

猪凝血酶的分离纯化及部分性质研究

经等电点沉淀,DEAE离子交换纤维素柱层析和Sephadex G-100 分子筛层析从猪血浆中纯化得到猪凝血酶,酶比活力为2 000 U/m g,纯化倍数为100,酶活力回收为56% ,酶反应的最适pH 和温度分别为7.0 和37℃,SephadexG-100层析测得酶分子量为36 000。猪凝血酶的稳定性较差,40℃保温27 h, 酶活力下降84% 。高浓度的盐对酶稳定性有较大的影响,在2 m ol/LNaCl下放置3 h,酶活力下降50% 。     

聚乙二醇对七叶一枝花种子快速萌发效果的影响

为探明聚乙二醇(PEG)不同分子量及体积分数对七叶一枝花种子萌发的效果,采用不同体积分数(10%、25%、35%)和分子量(4 000、6 000、8 000、10 000)的聚乙二醇浸泡七叶一枝花种子,以蒸馏水浸泡作对照(CK),放入20℃培养箱(弱光条件)24h后,清洗种子后进行培养,并研究去掉种子部分种皮、胚乳对子叶及切去种子茎对侧芽的影响。结果表明:PEG对七叶一枝花种子的快速萌发具有促进作用,其中以25%PEG 4000促进七叶一枝花当年采集新种子的萌发效果最好,培养30d、40d、50d和60d时萌发率分别为12.61%、44.85%、64.38%和78.86%,比CK高2.88百分点、29.69百分点、17.97百分点和5.33百分点;70d时萌发率达85.71%,最长胚根长达1cm;80d时萌发率达90%以上,最长胚根达3cm。为达到较好的药用效果,建议在培养期间去掉种子部分种皮和切去生长的茎。     

凝血酶及其相关编码基因的文本挖掘分析

[目的]对凝血酶及其相关基因进行文本挖掘分析。[方法]通过PubMed以"Thrombin"AND"gene"为检索策略检索相关文献,汇集了1980年以来的该主题文献,运用MMTx对这些文献进行处理,并设计相关Java算法程序,从处理结果中提取语义类型为"Patho-logic Function"的病理功能概念和"gene or genome"基因类概念形成共句距阵,最后通过统计学软件SPSS16,对文本挖掘数据进行统计聚类分析。[结果]通过文本挖掘处理,系统的了解和归类了凝血酶编码基因与相应病理功能的关系。[结论]通过文献反查,说明该研究中的文本挖掘有效。     

凝血酶在耻骨上经膀胱前列腺摘除术中止血的效果观察

凝血酶作为止血剂，临床的效果是肯定的，但应用在耻骨上经膀胱前列腺摘除术中应用于腺窝填塞止血，少见报道，为此笔者作了观察，现将结果报道如下：１病例与方法１．１病例本组２０４例均为有症状的前列腺增生症患者，随机分为两组：（１）凝血酶组１０５例，年龄５１～...     

Research about Preparation of Porcine Thrombin

A rapid, simple, and reproducible method for the preparation of porcine thrombin was investigated.Porcine prothrombin was isolated by carrying out isoeiectric precipitation. Porcine thrombin was prepared from pro-thrombin which was activated by the prothrombinase complex containing Factor Xa, Factor V, Ca^2 and phospholipids.Factor Xa and Factor V were isolated by DEAE-cellulose chromatography respectively. They were both identified bySDS-PAGE. Yields and specific activity of porcine thrombin were 107μg per milliliter plasma and 4 U per milligram protein.     

聚乙二醇浸种对绿豆萌发过程中酚类物质及抗氧化活性的影响

本试验以绿豆为材料,用10%、20%、30%（W/V）的PEG-6000（聚乙二醇）浸种8 h,测定了绿豆萌发过程中下胚轴酚类物质、抗氧化活性的变化及PEG浸种对羟基（.OH）、超氧阴离子（O2.-）等自由基的清除作用。结果表明,总酚、类黄酮含量及抗氧化能力均随着发芽时间的延长而下降。但不同浓度PEG处理的绿豆下胚轴中酚类物质及抗氧化能力均高于对照,其中20%（W/V）浓度的PEG溶液处理效果最显著。     

光照及PEG对两种中草药种子萌发的影响

[目的]探索大黄与益母草种子萌发的条件。[方法]以益母草与大黄的种子为试材,分剐在光照与黑暗条件下培养,测定光照对种子萌发的影响;以大黄为试材,测定0．1％、0．5％、1．0％、10％、20％的PEG溶液对大黄种子萌发的影响。[结果]在光照条件下,益母草与大黄的种子萌发状况较好,萌发率、萌发指数、发芽势、活力指数均高于在黑暗培养条件下的;不同浓度的PEG对大黄种子的萌发的影响不同,PEG浓度越大,大黄种子的萌发率、萌发指数、发芽势、活力指数越低,当PEG浓度为10％时,几乎完全抑制大黄种子的萌发。[结论]益母草与大黄种子均为需光性种子;PEG抑制大黄种子的萌发,且浓度越大抑制作用越强。     

固定化金属螯合亲和膜制备及其性能研究

将纤维素滤纸经碱处理、环氧活化、配基偶联、固定化Ｃｕ＾２＋后制得了大孔纤维素亲和膜。检验了亲和膜的流速与负压、等温吸附、保存方法及使用次数等亲和膜性能指标。结果表明：普通纤维素滤纸可以制成性能优良的亲和膜色谱介质。     

解毒化瘀方对凝血酶合并缺氧诱导PC12细胞损伤ERK1/2信号通路表达的影响

目的 探讨急性缺血性中风（AIS）瘀毒病机的分子机制及解毒化瘀方对凝血酶合并缺氧损伤的保护作用。方法 （1）用凝血酶合并缺氧损伤PC12细胞,模拟急性缺血性中风的体外细胞模型。（2）将细胞分为空白组,模型组,解毒化瘀方含药血浆组和PD98059组（MEK抑制剂组）,应用荧光定量实时RT-PCR方法检测MEK1、PAR-1及ERK1/2的mRNA表达,应用免疫荧光法检测ERK1/2、P-ERK1/2的蛋白表达。结果 PCR结果提示：模型组MEK1、PAR-1及ERK1/2的mRNA表达与空白对照组相比显著升高（P<0.01）,解毒化瘀方组和PD98059组MEK1、PAR-1及ERK1/2的mRNA表达较模型组显著降低（P<0.01）,免疫荧光结果提示：解毒化瘀方组和PD98059组ERK1/2、P-ERK1/2的蛋白表达较模型组显著降低（P<0.01）。结论 解毒化瘀方以凝血酶为作用的分子靶点,能够显著降低ERK1/2信号通路在缺血性中风体外细胞模型中的表达。     

PEG对烤烟种子萌发和幼苗生理特性的影响

利用ＰＥＧ（ 聚乙二醇） 浸种处理后的烤烟种子进行发芽试验和苗床育苗试验。结果表明：用ＰＥＧ 浸种处理烤烟种子,可明显地提高种子发芽势、发芽率、种子活力以及幼苗根系活力、干重、根茎（ 干重） 比和幼苗脯氨酸含量,使幼苗长势和抗旱力增强。ＰＥＧ 浸种适宜浓度为２０ ％ 。     

PEG-6000处理对火龙果种子萌发的影响

用不同浓度的聚乙二醇(PEG-6000)对火龙果种子进行渗透胁迫处理,试验结果表明:随着PEG-6000浓度的增大,火龙果种子的发芽势、发芽率和幼苗鲜重均呈下降趋势;当PEG-6000浓度达到12.50%时,火龙果种子的发芽率低于20.00%,种子发芽后几乎不能正常生长,幼苗鲜重只有对照的1/6;当PEG-6000浓度达到15.00%时,白肉种子不能发芽;当PEG-6000浓度达到20.00%时,红肉种子不能发芽。     

水杨酸对节节麦根在水分亏缺下氧化与抗氧化反应的影响

研究分析了水杨酸(SA)对20%聚乙二醇6000(PEG6000)引起节节麦幼苗根中活性氧(ROS)水平和抗氧化酶活性的影响,结果发现,PEG能够显著提高节节麦根中超氧阴离子(O2-)、过氧化氢(H2O2)和丙二醛(MDA)的含量,明显降低超氧化物歧化酶(SOD)、抗坏血酸过氧化物酶(APX)、过氧化氢酶(CAT)和谷胱甘肽还原酶(GR)的活性;SA能明显抑制PEG诱导的MDA和O2-的积累,缓解PEG对SOD、GR和CAT活性的抑制作用,但对APX的活性没有明显影响。这表明SA可能主要通过影响SOD、GR和CAT的活性缓解了水分亏缺对节节麦造成的伤害。     

化学反应速率新概念

 化学动力学远不及化学热力学完美,作者认为基本原因之一就是长期局限于以浓度随时间的变化率来定义反应速率,因此提出了新的速率关系式：dξ/dt=-（dG)_T·p/ Adt。根据新的速率关系式可以得到新的速率方程,例如r=EG/nF。新的速率方程几乎包括了影响溶液中化学反应速率的主要因素,如物质的本性、浓度、压力、温度、电解质的电导甚至催化作用。并对几个反应的速率现象和几个反应的机理作了解释。     

等渗的NaCl与PEG胁迫对番茄幼苗蔗糖代谢的影响

为探讨NaCl胁迫与水分胁迫对番茄蔗糖秘累影响的异同,以番茄(Lycopersicon esculentum Mill.)品种辽园多丽为试材,采用营养液水培法,以50 mmol·L~(-1) NaCl及等渗的聚乙二醇(PEG-6000)为处理,研究了番茄幼曲叶片中糖含量和蔗谢代谢相关酶活性的变化.结果表明:等渗的NaCl和PEG处理均可提高番茄幼苗叶片中葡萄糖和果糖的含量,处理12d时果糖含量分别比CK提高了20.2%和32.2%;葡萄糖含量分别比CK提高了12.0%和18.9%;等渗的NaCl和PEG处理均提高了酸性转化酶活性,处理12d时分别比对照高12.34%和17.76%;PEG胁迫下番茄幼苗叶片中葡萄糖和果糖的含量及转化酶的活性高于NaCl胁迫.可见,盐胁迫和渗透胁迫下番茄叶片葡萄糖和果糖的积累主要是由于转化酶活性的提高引起的;与盐胁迫相比渗透胁迫下番茄叶片积累更多的可溶性糖,从而说明NaCl胁迫对番肺叶片糖代谢的影响主要是渗透胁迫.