培养方法对土壤可培养细菌多样性的影响

提高土壤微生物的可培养性,获得纯培养微生物菌株,是微生物生态学研究的基础。采用三种培养基对土壤细菌进行分时段计数,以细菌通用引物扩增细菌16S rDNA片段,用限制性内切酶HhaI酶切PCR产物,对酶切图谱进行分型,研究不同培养方法对土壤细菌多样性和可培养的影响。结果表明,LB、CSEA、W SA培养基192 h后每g干土获得的细菌数量分别为14.84×107、10.27×107和6.91×107CFU,但微生物多样性指数以W SA为最高,LB多样性指数最低;三种培养基培养的细菌菌群有一定的相似性,LB和CSEA培养基间的Jaccard指数为57.69%,LB和W SA培养基之间为53.13%,而CSEA和W SA培养基的相似性指数达66.67%;16S rDNA测序结果表明,所获得的土壤细菌优势种群在分类方面主要属于γ-和β-变形杆菌以及放线菌亚门,其中某些OTUs中的16S rDNA序列与Burkholderiaceae bacterium、Rhodococcus和Mycobac-terium属具有较高的同源性,推测其细胞能够分泌复苏促进因子,有效地提高土壤细菌的可培养性。     

番茄内生拮抗细菌的分离鉴定及培养条件研究

针对番茄生产上灰霉病和叶霉病两大瘸害,为寻找安全、高效无污染的生防菌株及其最佳培养条件,本试验采用组织分离法从健康的番茄植株中分离出642个内生细菌菌株,并采用平板对峙法筛选出对番茄灰霉病菌和叶霉病菌拮抗作用强且稳定的两个菌株Thyy1和Jcxy8。通过形态学观察及生理生化特征测定,初步鉴定Jcxy8属环状芽孢杆菌（Bacillus circulans）,菌株Thhy1属枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。内生拮抗细菌在以豆饼粉为原料的6号培养基中生长速度快,发酵滤液对两种病原菌的抑制作用强。培养基初始pH值、培养时间、温度、通气量等对菌株生长及其抗菌物质的分泌有明显影响。以豆饼粉培养基、初始pH6．7、培养时问48h、温度30qc、并尽量增大培养通气量为菌株的最佳培养条件。     

玉米粉细菌发酵生产L-乳酸的研究

以玉米粉为细菌L-乳酸发酵的主要原料,不仅可以提高玉米的利用价值,而且可以降低L-乳酸的生产成本。将玉米粉经过双酶法得到的玉米糖化液为L-乳酸发酵的主要碳源,寻求适合细菌TL-2发酵生产L-乳酸的氮源及其合适的添加量。比较了几种不同平板培养基TL-2的生长情况,得出小肽-3可作为乳酸发酵培养基的有机氮源;在最初发酵培养基的基础上,改变其有机氮源及其含量,由发酵试验得,同样产酸量时,以10 g/L小肽-3为唯一氮源的发酵液的颜色最浅;并在此基础上,利用响应面分析法,得出初糖浓度：小肽-3为15.5∶1,摇床     

Bacillus subtilis S37沼液发酵物对棉花生长产量及根际土壤生物学特性的影响

研究了沼液与生防菌配比发酵液滴施对棉花产量及根际土壤微生物(细菌、真菌和放线菌)数量及酶(过氧化氢酶、脲酶、蔗糖酶和蛋白酶)活性的影响。土壤中真菌、细菌、放线菌分别采用马丁氏培养基、NA培养基和高氏一号培养基来测量;过氧化氢酶采用高锰酸钾容量法,脲酶采用NH4+释放量法,蔗糖酶采用3.5-二硝基水杨酸法,蛋白酶采用茚三酮比色法。结果表明:随着滴灌次数的增加,不同处理的棉花根际土壤中微生物数量和酶活性均呈先升后降的变化趋势,沼液生防菌发酵液、沼液和生防菌单独发酵液处理后棉花产量比对照分别增加44.16%、5.62%和7.42%。沼液生防菌发酵液比生防拮抗菌单一施用能最大程度改善土壤质量,并提高了棉花根际微生物数量和土壤酶的活性,增加棉花产量。     

饮用矿泉水细菌试验法的研究

<正> 矿泉水的细菌学研究主要有对霍乱、伤寒等病原菌的杀菌作用研究;浴用矿泉水中一般细菌数,大肠杆菌群等污染状况的有关公共卫生学方面的调查研究;以及矿泉水中栖息生物(嗜热菌)的研究。近年来,矿泉水除用于洗浴外,其饮疗效果也引起了人们的关心和重视。本研究以饮用为目的,对矿泉水中的微量元素砷、铜、氟、铅、汞进行了实地调查。但是由于尚无统一的细菌试验法,而确定了1986年日本环境厅法令中的细菌试验法。     

木糖氧化无色杆菌反硝化亚种细菌的分离鉴定及其菲降解特性研究

利用选择性富集培养及升华法,从石油污染的土壤中分离到2株菲降解细菌,它们在以菲为唯一碳源的培养基上生长良好。应用BIOLOG细菌鉴定系统和分子生物学方法对两株细菌进行鉴定,两株菌分别为坚强芽孢杆菌(Bacillus.firmus)和木糖氧化无色杆菌反硝化亚种(Achromobacter.xylosoxidanssub.sp.denitrificans),两株菌均具有邻苯二酚氧化酶活性。两株细菌在液体培养条件下都表现较强降解菲的能力,液体培养60.h约90%的加入菲被降解。通过测定液体培养基中菲浓度和菌体密度变化发现,菌株降解菲的量与其生长密度相关;随着菌体浓度(吸光度)的增加,代谢底物菲的浓度明显降低,两株菌混合使用能够大幅度提高降解菲的能力。     

K_3解磷菌的解磷机理及其对缓冲容量的响应

以对磷酸三钙具有高效溶解作用且对玉米苗生长有促生效果的假单胞菌K3为模式菌株,采用NBRIP液体培养基研究了解磷菌K3的解磷机制及缓冲容量对其解磷量的影响。结果表明,解磷菌K3液体摇瓶培养7 d后,培养液中水溶性磷从6.54μg/mL增加至655.23μg/mL,pH从7.00降至3.99。高效液相色谱测定发现,K3菌液中的主要代谢产物为苹果酸、乳酸和草酸,浓度分别为47.39 mmol/L、25.67 mmol/L和1.89 mmol/L。人工模拟K3菌株产生的有机酸及调节培养基不同pH值对磷酸三钙溶解度影响的试验表明,有机酸的螯合作用是解磷细菌K3菌株解磷的主要机理,而调节培养基pH对解磷的作用有限。液体摇瓶和土培试验结果显示,土壤缓冲容量对K3解磷菌的解磷效应有显著的抑制作用。     

K3解磷菌的解磷机理及其对缓冲容量的响应

以对磷酸三钙具有高效溶解作用且对玉米苗生长有促生效果的假单胞菌K3为模式菌株,采用NBRIP液体培养基研究了解磷菌K3的解磷机制及缓冲容量对其解磷量的影响。结果表明,解磷菌K3液体摇瓶培养7 d后,培养液中水溶性磷从6.54 μg/mL增加至655.23 μg/mL,pH从7.00降至3.99。高效液相色谱测定发现,K3菌液中的主要代谢产物为苹果酸、乳酸和草酸,浓度分别为47.39 mmol/L、25.67 mmol/L和1.89 mmol/L。人工模拟K3菌株产生的有机酸及调节培养基不同pH值对磷酸三钙溶解度影响的试验表明,有机酸的螯合作用是解磷细菌K3菌株解磷的主要机理,而调节培养基pH对解磷的作用有限。液体摇瓶和土培试验结果显示,土壤缓冲容量对K3解磷菌的解磷效应有显著的抑制作用。     

车前草根际土壤细菌的筛选鉴定与功能初探

从车前草(Plantago asiatica L.)根际土壤中筛选发现潜在的具有活硒能力、抑镉能力或二者能力兼之的细菌菌株。首先,采用稀释涂布平板法从车前草根际土壤中分离纯化出耐硒耐镉细菌;将分离得到的耐硒耐镉细菌进行16S rRNA基因鉴定;然后,利用土壤固体培养基对细菌进行培养,并用氢化物发生原子荧光光谱法和电感耦合等离子体发射光谱法分别测定不同细菌对应土壤的有效硒和有效镉,计算出菌株活硒率和抑镉率;最后,初步评价菌株对土壤硒或镉活化或抑制的能力。试验结果从车前草根际土壤中分离鉴定二级细菌8株,其中活硒率超过100%的菌株有CQC-3、CQC-8、CQC-11、CQC-12,抑镉率超过20%的菌株有CQC-7、CQC-8、CQC-12、CQC-13,活硒抑镉能力兼具的菌株有CQC-8和CQC-12,此研究结果为后续解决土壤和植物硒镉伴生问题、活硒抑镉机理研究和菌剂的开发提供基础资料。     

貓尾草根际细菌的主要类型及其在不同生长年代中各个生长发育阶段根际的细菌数量的变化

作者应用Теппер氏法,利用营养培养基,研究(豸苗)尾草的根际细菌,经菌种检定后碓定有下述几个类型:(i)萤光细菌,以 pseudomo-nasfluorescens 篇典型代表;(ii)反硝化细菌,