植物离体组织细胞染色体加倍技术在育种中的应用

简要论述了植物离体组织细胞染色体加倍（相对于整体植染色体加倍）技术的优点,染色体加倍时的选材、秋水仙素溶液的浓度和处理时间对染色体加倍的影响,以及多倍体的早期辩认方法和最后鉴定技术,最后论及染色体加倍技术在植物育种中的应用的发展前景。     

白杨染色体加倍技术研究及三倍体育种（Ⅳ）：加倍体白杨生理特…

该文对中体白杨（ＴＢＴ－７）和二倍体杨（ＴＢＤ）以及其父本（ＴＢ１１）、母本（ＴＢ０１）、欧洲山杨三倍等植株的主要特性进行了比较研究，结果表明：白杨加倍体植株的叶组织有机物相对含量明显高于其它株系，如：蛋白质相对含量比二倍体对照株（ＴＢＤ）提高３５．７％，比父本（ＴＢ１１）提高３２．５％，ＤＮＡ相对含量比ＴＢＤ提高３％，比ＴＢ１１提高４１．８％，叶绿素相对含量比ＴＢＤ提高１５．６％，比ＴＢ１１提高     

秋水仙碱处理油菜离体小孢子的染色体加倍效应

用秋水仙碱对52份甘蓝型油菜品系（种）和它们的杂种离体小孢子的单倍体二倍化技术进行了研究。从花药中分离出的单核晚期小孢子接种在含10－800mg/L秋水仙碱的NLN液体培养基中处理16－90h后转入无秋水仙碱的相同培养基诱导胚状体。结果表明，用10mg/L秋水仙碱处理小孢子48h，10份材料的双单倍体植株变幅为37.10%-90.12%，平均为65.44%。50mg/L处理48h的8份材料是48.72%-97.81%，平均88.86%。100－800mg/L处理16－48h的试验，多数加倍率在90％－100％之间。但该处理药用量大，费用高，而且对小孢子毒性大，胚状体再生率低。试验还表明，秋水仙碱处理小孢子诱导的二倍体植株所产生的花一般均能结籽，带有不孕花的嵌合植株极少。用秋水碱处理水孢子再生的植株的根或芽所产生的二倍体植株多是可孕和不孕花共生的嵌合植株，自交后产生的单株种子很少，难以达到遗传和育种所需的群体量。     

甘蓝型油菜基因型对离体小孢子染色体加倍的反应

采用秋水仙碱处理甘蓝型油菜不同基因型的离体小孢子,研究了小孢子再生植株的染色体加倍特性 及其与基因型的关系。将发育到单核晚期一双核早期的小孢子分别接种于含10、20、50、100 mg／L秋水仙碱的 NLN液体培养基中处理24 h或48 h进行染色体加倍,然后将处理过的小孢子转接于不含秋水仙碱的相同培 养基中诱导胚状体。21种基因型小孢子再生植株中双单倍体比率为23．94％～99．42％。方差分析的结果表 明,基因型相似的品系和杂种之间染色体加倍率差异不显著,基因型不同的一些品系和杂种间差异显著。由 此说明,基因型对秋水仙碱处理离体小孢子诱导染色体加倍的反应不同。     

染色体易位和倍数体技术在西瓜育种上的应用

应用染色体工程技术培育少籽、无籽西瓜是一条有效的途径。通过对染色体易位技术的研究，提出了用＾６０Ｃｏγ辐射的适合辐射剂量，种子辐照剂量以３０－５０ｋＲ为宜，花粉辐照剂量１－１０ｋＲ均可采用，找出了Ｍ１花粉可育率＜５５％可作为易位杂合体初选指标。文章还提出了提高三倍体西瓜种子制造技术和提高三倍体西瓜种子发芽率的处理方法。利用染色体技术培养出易位少籽西瓜组合易红１号、易红５号和无籽西瓜组合粤蜜１号、粤     

秋水仙素对金达苜蓿染色体加倍效果的影响

【目的】获得金达苜蓿四倍体的纯合体,为不同倍性苜蓿遗传特性研究及不同倍性间实现基因的流动奠定基础。【方法】以金达苜蓿(Medicago sativa L.cv.Jinda)种子(2n=16)为材料,利用秋水仙素结合组织培养,研究了秋水仙素不同质量浓度(0.02,0.07,0.12mg/mL)、不同处理时间(1,3,7d)对金达苜蓿愈伤组织诱导效果及染色体加倍效果的影响,并从形态学和根尖染色体观察对变异株进行倍性鉴定。【结果】秋水仙素质量浓度和处理时间2个因素对金达苜蓿诱变效果均有一定程度的影响,随着秋水仙素质量浓度的升高、处理时间的延长,愈伤组织的诱导率和分化率均下降,成苗率则规律不明显,其中0.07mg/mL秋水仙素处理3d的诱导效果最好,愈伤组织的诱导率达到60.5%,愈伤组织分化率为33.63%,诱变幼苗成苗率为24.1%。倍性鉴定结果表明,获得的变异植株为四倍体与二倍体的混倍体。【结论】0.07mg/mL秋水仙素处理3d是获得多倍体变异幼苗的最佳条件,获得了四倍体和二倍体的混倍体。     

氟乐灵在辣椒离体组织染色体加倍上的应用研究

[目的]为摸索一条更有效、更简便、更经济的辣椒四倍体诱导途径。[方法]以辣椒品种兴蔬201为试材,采用辣椒子叶离体组织培养技术,将分化出来的丛生芽使用抗微管除草剂氟乐灵（Trifluralin）进行辣椒四倍体的诱导试验。[结果]当氟乐灵使用浓度为10、50、100mg/L,处理时间为12、24、48h时,所有供试材料均出现明显的根尖加粗现象。利用根尖压片和保卫细胞气孔面积分析发现,当氟乐灵使用浓度为50mg/L,处理时间为24h时,获得的加倍效果最好,诱导率达到26.5%。[结论]利用氟乐灵处理辣椒离体组织可能成为获得四倍体辣椒的有效途径之一。     

西瓜离体快速繁殖的研究

对有籽和无籽西瓜进行离体快速繁殖的研究。结果表明，种子去壳，消毒后于1/8MS培养获得无菌苗，取其子叶于MS BA2.0mg/L培养基中培养15d，诱导不定芽有较好的效果；不定芽的增殖及生长以选用MS BA1.0mg/L IBA1.0mg/L AD80mg/L的效果最好，15d后其繁殖系数达3.1。生根培养以MS NAA0.5mg/L较好，生根率达100%。     

小麦花培苗染色体加倍技术研究

<正>自从20世纪70年代利用花药培养技术获得大量花粉单倍体以来,花培技术的应用潜力已日益显示出来[1]。花粉单倍体加倍后的二倍体(DH)在植物育种、突变、玻璃质选择、分子制图和植物改良方面具有广阔的应用前景[2～3]。花培育种的目的就是要获得加倍的双倍体植株以及选育出综合性状稳定的优良品种(系)。目前报道的     

小果型西瓜离体诱导四倍体的初步研究

[目的]为小果型西瓜三倍体的育种奠定基础。[方法]以二倍体小果型西瓜优良自交系MH-39-1的子叶为外植体进行离体诱导四倍体的研究。[结果]100 mg/L秋水仙素处理子叶的不定芽分化率达66.7%,平均分化不定芽6.7个。400 mg/L秋水仙素处理的四倍体诱导率为20.0%。秋水仙素处理12 h的不定芽分化率为83.3%,处理48 h的不定芽分化率为16.7%。秋水仙素处理24~36 h的四倍体诱导率为16.7%。4.0 mg/L 6-BA处理的不定芽分化率为83.3%,1.0 mg/L 6-BA处理的不定芽分化率为58.3%。再生芽在4种生根培养基上的生根率均在90%以上,在不添加植物生长调节剂的培养基上再生苗的平均生根数仅为6.5条,添加NAA的培养基上再生苗的平均生根数在10条以上,但根短而粗。[结论]初步确定秋水仙素离体诱导小果型西瓜四倍体的适宜浓度和处理时间为400mg/L和24 h。     

棉花单倍体植株染色体加倍研究

使用０．３％～０．５％的秋水仙素水溶液在遮荫保湿条件下，浸渍棉花单倍体侧芽２４ｈ，或将２０μｌ处理液一次性注入侧芽基部，均能获得较好的加倍效果，但注射法比较经济、方便。上述两种方法的加倍成功率可达４０％以上     

四倍体和二倍体西瓜离体组织诱导与耐盐筛选研究

通过离体组织加倍创造四倍体种质是一种快速产生多倍体的方法,为了确认获得的材料为四倍体变异,进行有效的倍性鉴定是不可缺少的。利用二倍体和四倍体西瓜的耐盐性差异,选取生长一致的二倍体和四倍体西瓜子叶再生的不定芽丛,接于含有0、8、10、12、14、16、18、20和22g/L NaCl的芽诱导培养基中,盐处理30d后,统计盐害情况和生长状况,并对四倍体西瓜子叶不定芽丛进行分离和筛选,筛选出西瓜离体组织培养过程中最适宜分离二倍体和四倍体西瓜不定芽的盐质量浓度。结果表明:当NaCl质量浓度在14~16g/L时,可以作为有效分离西瓜二倍体和四倍体,从而最终筛选出大量的能够正常生长发育的四倍体的最适盐质量浓度范围。该研究在西瓜离体组织加倍创造四倍体新种质的技术体系中,可以在早期简单有效地鉴定和筛选西瓜四倍体,加快多倍体西瓜的育种进程。     

西瓜炭疽病菌离体叶片接种鉴定技术

西瓜炭疽病是由瓜类炭疽病菌引起的一种真菌性病害,严重影响西瓜产量和品质。目前西瓜炭疽病抗性鉴定的方法主要是苗期喷雾法,本研究采用离体叶片接种鉴定的方法(点滴法)对12份西瓜种质材料进行炭疽病抗性鉴定。具体方法为配置好孢子浓度为1×10⁶的长岭西瓜炭疽病菌液,采取西瓜植株的第四片真叶置于铺好湿润吸水纸的塑料盒中,利用微量移液器将10 μL菌液点滴在叶面上,盖上透明塑料盖,置于温度为25 ℃,湿度为90%的光照培养箱中,保持黑暗48 h后给予正常的光照,5 d后调查发病情况。利用平均病斑直径及发病率进行鉴定评价,共获得长岭西瓜炭疽病菌免疫材料1份(PI368509)、抗病材料1份(PI278038)及中抗材料1份(Sun sweet)。与喷雾法接种鉴定相比,离体叶片接种鉴定具有不损伤植株、节省菌液、接种标准一致、不会产生病原菌扩散的优点。     

西瓜染色体研究进展

该文从染色体制片技术、核型分析、原位杂交和倍性鉴定等方面系统总结了国内外关于西瓜染色体的研究进展,并对今后的研究方向进行了展望,以期为西瓜细胞遗传学和染色体工程的研究提供基础。     

离体培养技术在果树育种中的应用

本文综述了植物离体培养技术在果树杂交育种、远缘杂交育种、染色体倍性育种、诱变育种、抗病育种、种质资源保存、缩短育种周期等方面的应用研究进展,并讨论一些与上述内容有关的问题。     

不同加倍方法处理玉米单倍体的加倍效果研究

以不同基因型玉米材料诱导产生的单倍体幼苗为材料,在2~3叶期用0.06%浓度的秋水仙素配以2.0%的二甲基亚砜（DMSO）通过浸根、滴注心叶和针刺生长点3种不同的方法对单倍体进行人工化学加倍,并对不同加倍方法的加倍率和致死率进行方差分析和多重比较。结果表明,针刺生长点的方法加倍效果最好。平均加倍率为23%,结实率为21.4%,致死率为16.3%。与其他2种化学加倍方法比较,不仅加倍率显著提高,而且所用的秋水仙素剂量更低。     

氟乐灵诱导南瓜染色体加倍初步研究

以南瓜为试材,通过不同浓度的氟乐灵和秋水仙素进行倍性诱导处理.结果表明,浓度为180 μmol·L-1的氟乐灵具有较好的加倍效果,可以有效代替秋水仙素.和秋水仙素相比,氟乐灵使用的浓度低,价格低廉,效果好,且毒性小,对人和环境比较安全.并用流式细胞仪对南瓜诱导的幼苗进行了倍性分析鉴定.     

氟乐灵诱导西葫芦染色体加倍研究

[研究目的]该试验利用氟乐灵对西葫芦染色体进行诱导加倍研究.[方法]方法1:浸种法利用0.001%、0.005%、0.01%的氟乐灵溶液浸泡露白的西葫芦种子,浸种时间为4h、6h和8h,通过根尖压片染色体计数法检测诱导率;方法2:生长点滴液法以0.001%、0.003%、0.005%和0.01%的氟乐灵对不同品种西葫芦幼苗进行生长点滴液处理,每天17:00-18:00滴液一次,共滴6d,通过保卫细胞叶绿体计数法检测诱导率.[结果]结果显示:浸种法以浓度0.01%氟乐灵浸种6小时诱导效果最好,诱导率为25.6%;生长点滴液法以浓度0.005%的诱导效果最好,诱导率为20%;品种"京葫1号"、"长青1号"和杂交组合2-9×1604-1的四倍体诱导率分别为26.7%、20%和10%.[结论]氟乐灵可以诱导西葫芦染色体加倍,不同基因型西葫芦对氟乐灵的敏感性有差异.     

秋水仙素诱导薄荷染色体加倍技术研究

对秋水仙素诱导薄荷染色体加倍技术进行研究,以期筛选出诱导薄荷染色体加倍的最适体系,获得染色体加倍的变异植株。以秋水仙素为诱变剂对带有腋芽的薄荷茎段进行处理,结合流式细胞检测、根尖染色体数目观察等方法对变异植株的倍性进行鉴定,比较秋水仙素不同浓度与处理时间的诱变效果。结果显示,用100 mg/L的秋水仙素处理带有腋芽的薄荷茎段1 d,诱变效果最好,诱变率可达33%。通过流式细胞检测、根尖染色体数目观察等方法鉴定获得多倍体植株10个,与亲本植株相比,其植株形态主要表现为叶厚、茎秆粗、锯齿较深,生长速度缓慢;有8个植株挥发油含量提高,其中最高含量达到2.21%,为亲本植株（1.12%）的1.97倍。本研究通过秋水仙素诱导成功获得染色体加倍的薄荷植株,为薄荷的品种改良和选育提供了可靠的理论依据。     

春小麦花粉植株的壮苗及染色体加倍技术研究

研究了春小麦花粉植株的壮苗及染色体加倍技术。结果表明:延长低温处理时间可大幅度提高春小麦花粉植株的自然加倍率;用1/2MS培养基取代MS培养基、并控制每日光照12h,可将无根苗控制在3%以下,弱苗控制在5%以下。