菊黄东方鲀鱼精蛋白提取工艺优化研究

为研究河鲀鱼精蛋白的制备工艺,以菊黄东方鲀(Takifugu Flavidus)精巢为原料,以鱼精蛋白提取率为指标,通过单因素试验研究NaCl溶液的pH、硫酸浓度、硫酸用量、提取温度、提取时间以及乙醇用量等单因素对鱼精蛋白提取率的影响,在此基础上,采用响应面法优化鱼精蛋白的提取工艺条件。结果显示,采用响应面法优化获得河鲀鱼精蛋白的最佳提取工艺条件为:NaCl溶液pH 8.5,硫酸浓度0.6 mol/L,硫酸用量4.0倍沉淀体积,提取温度45℃,提取时间2.4 h,乙醇用量4.0倍沉淀体积,此时鱼精蛋白提取率达到19.07%。研究表明,响应面法对河鲀鱼精蛋白提取条件的优化方案合理可行,可为河鲀精巢的开发利用提供参考依据。     

鱿鱼鱼精蛋白的提取工艺优化研究

通过单因素和正交试验研究了鱿鱼精巢提取鱿鱼鱼精蛋白的优化工艺,并对优化工艺提取的鱿鱼鱼精蛋白进行了分析.结果表明,最佳提取工艺为硫酸浓度0.3M、硫酸用量为3倍、提取次数2次、冷乙醇用量为3倍;该条件下,鱿鱼鱼精蛋白的得率为3.42％,蛋白质含量达93％,且氨基酸组成齐全,碱性氨基酸占26.20％,其中精氨酸占9.61％,Tricine-SDS-PAGE电泳结果分析表明其组成成分比较复杂.     

盐度对寄主暗纹东方鲀(Takifugu obscurus)存活影响及其对车轮虫的杀灭作用

为防治河鲀车轮虫病,分别设置0、2.5、5.0、7.5、10.0、12.5、15.0、17.5、20.0、25.0、30.0、35.0和40.0共13个盐度梯度,对暗纹东方鲀进行了浸浴实验。结果显示,盐度为15以下,对暗纹东方鲀的存活没有影响;盐度为0、2.5、5.0时,4 d内车轮虫的数量没有减少反而有增加趋势;盐度7.5作用4 d,盐度10.0作用3.5 d,盐度12.5作用3 d,杀虫率可达95%以上;盐度15.0作用32 h,盐度17.5作用24 h,盐度20.0作用10 h,盐度25.0作用4 h,盐度30.0作用1.5 h,盐度35.0作用1 h,盐度40.0作用0.5 h,对车轮虫的杀虫率均可达100%。应用SPSS软件,对杀虫盐度和时间进行拟合曲线方程分析,其数学模型为对数曲线方程y=34.19-5.55lnx。另外,车轮虫在暗纹东方鲀体表的复活试验显示,用提高盐度的方法杀灭暗纹东方鲀体表车轮虫后,再恢复到正常养殖盐度5.0的情况下,暗纹东方鲀的体表车轮虫病不再复发,说明盐度7.5以上能治疗暗纹东方鲀的车轮虫病。结合提高盐度治疗暗纹东方鲀车轮虫病的生产性试验结果,建议以盐度为7.5–15.0作为治疗暗纹东方鲀体表车轮虫的适宜盐度。     

盐度对寄主暗纹东方鲀(Takifugu obscurus)存活影响及其对车轮虫的杀灭作用

为防治河鲀车轮虫病,分别设置0、2.5、5.0、7.5、10.0、12.5、15.0、17.5、20.0、25.0、30.0、35.0和40.0共13个盐度梯度,对暗纹东方鲀进行了浸浴实验。结果显示,盐度为15以下,对暗纹东方鲀的存活没有影响;盐度为0、2.5、5.0时,4 d内车轮虫的数量没有减少反而有增加趋势;盐度7.5作用4 d,盐度10.0作用3.5 d,盐度12.5作用3 d,杀虫率可达95%以上;盐度15.0作用32 h,盐度17.5作用24 h,盐度20.0作用10 h,盐度25.0作用4 h,盐度30.0作用1.5 h,盐度35.0作用1 h,盐度40.0作用0.5 h,对车轮虫的杀虫率均可达100%。应用SPSS软件,对杀虫盐度和时间进行拟合曲线方程分析,其数学模型为对数曲线方程y=34.19-5.55lnx。另外,车轮虫在暗纹东方鲀体表的复活试验显示,用提高盐度的方法杀灭暗纹东方鲀体表车轮虫后,再恢复到正常养殖盐度5.0的情况下,暗纹东方鲀的体表车轮虫病不再复发,说明盐度7.5以上能治疗暗纹东方鲀的车轮虫病。结合提高盐度治疗暗纹东方鲀车轮虫病的生产性试验结果,建议以盐度为7.5–15.0作为治疗暗纹东方鲀体表车轮虫的适宜盐度。     

暗纹东方鲀基因组DNA提取及生长激素基因Exon4扩增

以暗纹东方鲀的肌肉、尾鳍为样品,对基因组DNA的提取进行了初步研究,从尾鳍中提取的DNA质量较好。新鲜组织、无水乙醇处理的尾鳍样品得到的DNA完全满足后续实验的开展;而从10%福尔马林溶液处理的尾鳍样品中提取的DNA得率太低,10μg/mL以下。运用巢式PCR成功扩增了暗纹东方鲀生长激素基因外显子4,为下一步的SNPs检测以及克隆测序创造了必要条件。     

暗纹东方鲀乌仔培育的试验

<正>随着渔业科技进步,暗纹东方鲀的人工繁殖及育苗技术取得了重大进展,从而解决了暗纹东方鲀规模化、产业化发展的技术瓶颈,而暗纹东方鲀的乌仔培育就成了提高人工养殖成活率的重要一环,笔者2013年在姜堰区特种水产养殖场进行了暗纹东方鲀的乌仔培育试验,取得了较高的成活率,现将养殖技术总结如下。1池塘条件试验池塘为姜堰区特种水产养殖场原亲鳖塘一口,面积为12.5×667 m2,塘深2.5 m,水源为无污     

暗纹东方鲀养殖关键技术浅析

<正>暗纹东方鲀俗称"河豚",其肉质鲜美,但含剧烈神经性麻痹毒素。暗纹东方鲀属海江生殖洄游鱼类,是我国长江下游地区重要的渔业资源。随着环境变化以及人类活动的影响,野生的暗纹东方鲀资源日渐稀少,江苏省扬中市水产技术研究所从1995年起开展了暗纹东方鲀的人工繁殖和养殖技术研究。目前,人工养殖的暗纹东方鲀已经全面取代了野生的暗纹东方鲀成为了食用鱼源。本文所要探讨的便是人工养殖暗纹东方鲀的一些关键技术。     

非离子氨氮和亚硝酸盐氮对暗纹东方鲀稚鱼的急性毒性试验

在水温21~23℃,pH 8.2~8.5,溶解氧6.00~7.50mg/L的条件下,采用半静水法研究了非离子氨氮和亚硝酸盐氮对全长(1.6±0.2)cm、体质量为(0.11±0.05)g的暗纹东方鲀稚鱼的急性毒性效应。试验结果表明,暗纹东方鲀稚鱼受到非离子氨氮和亚硝酸盐氮胁迫后,先后出现鱼体体色变白、扭曲、侧游、失去平衡、昏迷等中毒症状。随着非离子氨氮和亚硝酸盐氮质量浓度的提高和胁迫时间的延长,暗纹东方鲀稚鱼死亡率逐渐升高,存在明显的剂量效应和时间效应关系。非离子氨氮和亚硝酸盐氮对暗纹东方鲀稚鱼96h半致死质量浓度分别为0.46mg/L(95%置信限0.34~0.64mg/L)和290.12mg/L(95%置信限255.16~329.87mg/L),安全质量浓度分别为0.046 mg/L和29.01mg/L。非离子氨氮和亚硝酸盐氮对暗纹东方鲀稚鱼具有一定毒性,且非离子氨氮毒性大于亚硝酸盐氮毒性。     

暗纹东方鲀鱼皮胶原蛋白的提取及其特性

为增加暗纹东方鲀附加值,考察不同处理方法对提取暗纹东方鲀鱼皮胶原蛋白的影响,实验以暗纹东方鲀鱼皮为对象,通过热水法、酸法和胃蛋白酶、木瓜蛋白酶、无花果蛋白酶处理鱼皮提取胶原蛋白。通过对不同胶原蛋白的提取率、氨基酸组成、傅里叶红外光谱(FTIR)、紫外光谱(UV)、扫描电镜、十二烷基硫酸钠—聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)进行研究,对暗纹东方鲀鱼皮胶原蛋白特性进行表征和比较。结果显示,用胃蛋白酶得到的胶原蛋白提取率最高;氨基酸组成相似但含量不同;3种酶制备的胶原蛋白中,脯氨酸含量显著低于酸和热水制备的胶原蛋白;FTIR扫描结果表明,5种处理方法得到的胶原蛋白都存在Amide A、Amide B、AmideⅠ、AmideⅡ和AmideⅢ,均保持了胶原蛋白三螺旋结构;紫外光谱显示在235 nm左右有强吸收峰,结合FTIR确定其为典型的胶原蛋白,经过SDS-PAGE分析,确定暗纹东方鲀鱼皮胶原蛋白为Ⅰ型胶原蛋白。酸法和胃蛋白酶较好地保留了胶原蛋白的β、α1和α2链,木瓜蛋白酶作用化学键比其他酶广泛,得到小分子量的胶原蛋白分子;扫描电镜结果显示,酸法提取的胶原蛋白最适合应用在生物医学材料上运载药物。由此可见,不同处理方法提取的胶原蛋白理化特性存在一定差异,不同的酶制备的胶原蛋白分子量分布会产生明显差别,可根据研究需要选用不同处理方法开发胶原蛋白产品。     

暗纹东方鲀早繁与当年养成技术研究

<正>暗纹东方鲀是我国长江下游地区重要的渔业资源,和鲥鱼、刀鱼并称“长江三鲜”。每当清明前后,暗纹东方鲀的生殖群体溯河洄游入长江,其肉质细嫩、滋味鲜美、营养价值高,深受长江中下游地区老百姓喜爱。随着暗纹东方鲀产业的不断延伸,全年供应商品鱼及加工产品成为新的趋势,笔者根据自己的繁殖、养殖实践,总结出了一套适合暗纹东方鲀繁殖及养殖技术,以期为暗纹东方鲀产业化发展提供支持。     

正交试验优选诃子醇提工艺研究

采用4因素3水平正交设计实验,并建立以紫外分光光度法(UV)测诃子中没食子酸的含量方法,对影响诃子中没食子酸提取工艺的因素进行了系统考察。结果发现,以没食子酸得率作为考察指标,影响提取率的主次因素为:D(提取次数)>B(料液比)>A(提取浓度)>C(提取时间),最佳提取工艺条件为:60%乙醇浓度,提取时间90min,料液比12mL/g,提取次数为3次。     

鱿鱼加工副产物综合利用研究进展

综述了近年来国内外利用鱿鱼皮、内脏、软骨、墨汁、鱼眼、精巢等副产物为原料开发胶原蛋白、鱼油、核酸、酶、软骨素、透明质酸、鱼精蛋白等一系列生化制品的研发状况,展望了几种鱿鱼副产物的应用前景和发展趋势.     

High zinc in the erythrocyte plasma membranes of common carp Cyprinus carpio

ABSTRACT:   The distribution of zinc (Zn) concentration in the blood and erythrocytes of common carp, grass carp, silver carp and tilapia was studied. It was found that in whole blood, the average Zn concentrations in these four species of fish (approx. 6–14 μg/[ml whole blood]) were relatively similar to those in other species of fish and mammals. However, the mean Zn concentration in the erythrocytes of common carp is approximately two times higher than the other three species of fish (approx. 5 vs approx. 2 μg/[ml whole blood]). It was found that approximately 70% of the Zn in the common carp whole blood came from its erythrocytes. In addition, approximately 43% of the Zn in the erythrocytes of common carp was found to be located on its outer plasma membranes. When an antibody against a 43 kDa Zn-binding protein, isolated from the digestive tract tissue of common carp, was used, significant quantities of the protein were shown to be present on the erythrocyte plasma membranes of common carp by an indirect immunofluorescent staining. High Zn on the outer plasma membrane of the common carp erythrocyte most probably comes from the 43 kDa Zn-binding protein.     

庆丰霉素防治草、青鱼粘细菌烂鳃病的试验

本文介绍了用庆丰霉素防治草、青鱼粘细菌烂鳃病的试验结果。试验表明，防治草、青鱼烂鳃病，以采用投喂口服为宜。治疗药量为每100斤成鱼每天投喂庆丰霉素(固体)半斤(含250万单位)，连投三天，有效率达96％；每100斤夏花鱼种，每天投喂1斤(含500万单位)，连投4天，有效率为72．7％。预防的投药方式和治疗剂量相同，唯应在该病流行季节之前投喂，夏花鱼种以连投7天为宜。试验表明，成鱼投药组死亡率为1．7％，对照组死亡率达27％；夏花鱼种投药组死亡率为15．7％，对照组死亡率为40．3％。     

四种常见鱼卵对丝氨酸蛋白酶抑制活性的比较

选择胰蛋白酶、弹性蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、胰凝乳蛋白酶及其特异底物,建立比色法检测,对沙塘鳢、鲫鱼、草鱼、乌鳢鱼卵的丝氨酸蛋白酶抑制活性进行了比较。试验结果表明,胰蛋白酶抑制活性依次为乌鳢草鱼沙塘鳢鲫鱼;弹性蛋白酶抑制活性依次为沙塘鳢鲫鱼草鱼乌鳢;枯草杆菌蛋白酶抑制活性依次为沙塘鳢鲫鱼草鱼乌鳢,胰凝乳蛋白酶活性只受乌鳢抑制。研究表明这可能与抑制剂P1位点的残基种类有关。此外还对鱼卵中的抑制剂成分进行热稳定性与酸碱稳定性的检测,结果表明其具有很强的热稳定与酸碱稳定性。     

Physical-Chemical Properties of Collagens from Skin,Scale, and Bone of Grass Carp (Ctenopharyngodon idellus)

In order to study the similarities and differences of physical-chemical properties of collagens from different parts of the fish body, acid-soluble collagens and pepsin-soluble collagens were isolated from skin, scale, and bone of grass carp (Ctenopharyngodon idellus), with yields ranging from 0.7 to 25.5% on the basis of dry weight. The content of acid-soluble collagen in skin and scale was much higher than that in bone according to the data of extraction yield. Collagens from grass carp have similar amino acid composition, protein patterns, and sequences of primary structure. Thermal transition temperatures of collagens from different parts of grass carp body decreased in the order of bone > skin > scale. The pepsin-soluble collagens showed more resistance to collagenase, compared to acid-soluble collagens extracted from the same part of the grass carp body. All grass carp collagens did not induce a significant cytotoxic effect according to the results of in vitro cytotoxicity test.     

草鱼内脏鱼油乙醇提取研究及其脂舫酸组成分析

对无水乙醇提取草鱼内脏鱼油工艺进行了研究,并分析了鱼油的基本理化性质和脂肪酸组成,主要研究了料液比对鱼油提取率的影响。无水乙醇提取草鱼内脏鱼油的工艺为:料液比(w:v)1:8,提取温度55℃,提取时间3小时。在此工艺条件下,粗鱼油提取率为87.6%。粗鱼油经85%磷酸脱胶、4%NaOH脱酸、活性白土脱色后,鱼油呈浅黄色透明状,酸价、过氧化值较低;经冬化处理后的鱼油中不饱和脂肪酸含量约为81.5%。     

Evaluation of antibacterial activity and innate immune components in skin mucus of Indian major carp,Cirrhinus mrigala

The present work has been undertaken to analyse the antibacterial activity and innate immune components in the skin mucus of Indian major carp, Cirrhinus mrigala. Skin mucus was extracted separately in triple‐distilled water (TDW), 3% acetic acid (3% AA) or 0.1% trifluoroacetic acid (1% TFA). All mucus extracts exhibited different spectrum of the antibacterial activity against different groups of pathogenic bacteria. Protein profiling by polyacrylamide gel electrophoresis revealed a series of protein bands in the TDW extract, four major protein bands in the AA extract and two protein bands in the TFA extract. Tandem mass spectrometry analysis of distinct protein bands identified potential innate immune factors – histone H2A, histone H3, histone H4, haemoglobin, cofilin and nucleoside diphosphate kinase in the TDW extract, and ubiquitin and histone H2B isoforms in acidic extracts of skin mucus of C. mrigala. The presence of these innate immune molecules suggests that skin mucus play an important role in the protection of the fish against microbial invasion.     

敌百虫对泥鳅、鲤鱼的急性毒性试验

以渔用双效速溶敌百虫为试验药物,对泥鳅、鲤鱼进行急性毒性试验。在不同的浓度组药物作用下,泥鳅1mg/L、2mg/L、4mg/L、8mg/L、16mg/L试验,半致死浓度3.4mg/L,安全浓度0.34mg/L;鲤鱼0.1mg/L、0.2mg/L、0.5mg/L、1mg/L、2mg/L、5mg/L试验,半致死浓度1.5mg/L,安全浓度0.15mg/L。每间隔2h观察、记录试验鱼的自然状况、死亡尾数、体色、呼吸状况及活动状况;同时,测定水体温度、气温、pH值及水体溶氧量。试验验证了敌百虫对泥鳅、鲤鱼的毒副作用较强,敌百虫对泥鳅的最低致死浓度为2mg/L,对鲤鱼的最低致死浓度为1mg/L,说明泥鳅比鲤鱼的抗药性强。中毒症状主要表现为焦躁不安、上下窜动、呼吸减弱、鱼体弯曲、翻肚且倒挂于水中的神经中毒现象;检查可见,鳃丝淤血、鳍部充血、眼球突出、嘴大张。