绵羊繁殖性状相关基因的研究进展

绵羊的繁殖特性已成为绵羊生产的一个重要研究方向,对绵羊繁殖力进行遗传改良是提升中国绵羊生产水平的必由之路,母羊的年产羔能力主要受单胎产羔数和季节性发情的影响。本研究对影响产羔能力的排卵数和季节性发情相关基因及miRNA的研究进行了简要的综述,并对全基因组比较在繁殖性状相关QTL检测中的应用进行了展望。     

绵羊同期发情技术应用效果探析

通过对东乡、广河和会宁等养羊大县的养殖场引进的常年发情的湖羊、小尾寒羊和季节性发情的本地滩羊等品种多批次的应用同期发情技术开展生产试验,研究常温人工授精及同期发情技术的应用效果。结果表明：(1)湖羊、小尾寒羊同期发情率达到96%、95%;利用人工授精技术对同期发情母羊配种,情期受胎率分别达到82%、80%,批次生产空胎率控制在2%以下,产羔率分别达到203%、227%,应用效果明显;季节性发情本地品种滩羊在非发情期同期发情技术应用效果差,同期率在20%以下,在发情期应用同期发情技术配种,同期率达到91%、情期受胎率达到75%、产羔率达到77.5%,应用效果尚可;(2)在不同品种与湖羊和小尾寒羊杂交后代中,小尾寒羊表现的杂交优势更为明显,其杂交羔羊初生重、断奶重和6月龄重均高于湖羊,最佳杂交组合为澳洲白×小尾寒羊。研究认为,具有常年发情特性的湖羊、小尾寒羊在规模羊场应用同期发情技术开展批次化节律生产效果明显,可大力推广应用;季节性发情的滩羊、高山细毛羊等绵羊品种在繁殖季应用同期发情技术效果较明显,在非繁殖季技术应用效果差,不推荐应用。     

新疆乌鲁木齐市犬布鲁氏菌病流行病学调查

为了解新疆乌鲁木齐市犬布鲁氏菌病流行特征,分析犬感染风险因素,初步掌握养犬人员对布鲁氏菌病的认知程度和行为特点,从而提出合理的预防对策和控制措施,采用流行病学横断面研究方法,通过估计流行率计算抽样数量,然后随机抽样,采用IELISA方法检测光滑型和粗糙型犬布鲁氏菌,同时结合调查问卷,获得乌鲁木齐市犬布鲁氏菌病流行率、感染风险因素和养犬人员对布鲁氏菌病认知情况,并对调查结果采用SPSS和Excel软件进行数据统计分析。结果显示:乌鲁木齐市犬布鲁氏菌病总流行率为25.5%(95%CI:20.9%~30.1%),且犬种和牛羊种并存,公共卫生威胁严重;从不同群体看,牧区流行率最高,为41.5%(95%CI:31.0%~52.0%);外购、散养、常接触牛羊、喂生肉、不处理犬粪便等行为是乌鲁木齐市犬布鲁氏菌感染的潜在风险因素,其中\"常接触牛羊\"(OR=1.97,95%CI:1.47~15.35)、\"喂生肉\"(OR=5.06,95%CI:1.69~20.74)是主要风险因素;乌鲁木齐市养犬人员对布鲁氏菌病的认知程度低,个人防护意识差。因此,应加强对犬感染牛羊种布鲁氏菌的公共卫生防控,减少犬与牛羊的直接接触,不喂生肉,定期开展犬布鲁氏菌病专项检测,同时加强宣传,提高养犬人员的布鲁氏菌病认知度。     

江西省种猪群伪狂犬病血清学横断面研究

为了解江西省种猪群伪狂犬病(PR)的流行情况,寻找狂犬病毒(PRV)感染的潜在风险因素,开展了本次横断面研究。按照估计流行率的抽样策略,随机抽取73个种猪场,根据猪场养殖规模将其分为3种类型,分别进行抽样,然后采用PRV g E-ELISA抗体检测试剂盒进行抗体检测。同时,根据73个种猪场的详细地址,描绘猪场的空间分布图,并对其开展问卷调查,对问卷中涉及的风险因素进行单因素分析,筛选出P0.2的变量,将其导入多因素Logistic回归模型,用倒推法选择变量,进行回归分析。结果发现:江西省种猪群PR的群流行率为28.63%(95%CI:18.26%~38.99%),个体流行率为9.37%(95%CI:8.98%~9.77%);PR阳性猪场多分布于江西省中部的上饶、抚州、鹰潭、宜春等县市;与PR感染相关的2个风险因素是场区周围3 km范围内是否有其他猪场(OR=4.766,P=0.020)和养殖场主是否愿意开展PR净化(OR=0.054,P=0.014)。依据研究结果,建议加强对养殖场主的培训与宣传,使其认识到PR净化的重要性,并掌握PR防控与净化的专业技术。     

河南省平顶山市奶牛布鲁氏菌病流行率及场间传播风险横断面研究

为估算河南省平顶山市奶牛布鲁氏菌病的流行率,分析可能的场间传播风险因素,对该地区68个奶牛养殖场（户）进行流行病学调查。采用虎红平板凝集和试管凝集试验垂直检测方法,估计的奶牛布鲁氏菌病群体表观流行率（AP）为11.76%,个体AP为2.22%（95%CI,1.97%~2.49%）,真实表观流行率（TP）为0.28%（95%CI,0.12%~0.50%）。Logistic回归分析表明,场区没有有效隔离、不能自繁自养、调入奶牛没有隔离栏舍是奶牛布鲁氏菌病场间传播的潜在风险因素。建立的回归模型拟合度较好（P=0.05）,ROC曲线面积为0.871（95%CI,0.817~0.964）,预测概率较好。结果表明,平顶山市奶牛布鲁氏菌病流行率较低,整体控制效果良好,但存在一些潜在场间传播风险因素,需要加强防范,并应持续开展净化工作。本研究可为该地区奶牛布鲁氏菌病防控策略改进及净化示范区工作推进提供数据支持。     

氯前列醇诱导夏河牦牛同期发情辅助繁殖

[目的]研究探讨氯前列醇诱导牦牛同期发情的效果。[方法]选择夏河县桑科种羊场母牦牛为试验牛,采用氯前列醇注射液诱导牦牛同期发情。通过统计阶段发情率及产犊率来判断生殖激素不同处理方式对牦牛辅助繁殖的影响。[结果]首次氯前列醇注射液肌注2 mL处理后,牦牛发情率及产犊率大于第2次氯前列醇注射液肌注3.2 mL处理及第3次氯前列醇注射液肌注3.2 mL处理。[结论]通过氯前列醇处理牦牛同期发情,提高首次处理的发情率可有效提高整体产犊率,生殖激素调控藏区牦牛同期发情来提高牦牛繁育率。     

绵羊季节性发情性状核心基因和关键lncRNA的筛选与分析

旨在筛选与季节性发情相关的核心基因和长链非编码RNA(long non-coding RNA;lncRNA)。本研究选取2~3岁空怀的中国美利奴羊和湖羊母羊(乏情期、发情期和发情间期各3只);采集卵巢组织样本;采用RNA-seq技术筛选差异表达的基因(differentially expressed genes, DEGs)和lncRNAs;并通过GO、KEGG富集分析、PPI分析及ceRNA网络构建鉴定与繁殖性能相关的核心基因和lncRNAs。结果;构建了6个不同生理状态下的RNA文库;筛选得到1 495个差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)和454个差异表达lncRNAs;其中共性DEGs和lncRNAs分别为313个和435个;特有DEGs和lncRNAs分别为1 182个和19个。GO和KEGG富集分析显示;共性DEGs在细胞分裂和细胞周期等方面显著富集;而差异表达的lncRNAs靶基因富集于细胞内信号转导及负调控RNA聚合酶Ⅱ启动子转录等。特有DEGs在细胞迁移的正向调节中富集;lncRNAs的靶基因集中于细胞间粘附和整合素介导的信号通路等。通过PPI筛选出19个核心基因;主要富集在卵母细胞减数分裂和细胞周期信号通路。聚类分析结果显示;核心基因在乏情期表达量较高。ceRNA网络进一步揭示基因在细胞周期等信号通路的富集。RT-qPCR验证结果与高通量测序一致。筛选出19个核心基因和28个lncRNAs;并发现42个lncRNA-miRNA-mRNA靶向关系;为理解绵羊季节性繁殖的分子机制提供了潜在调控靶点。     

绵羊季节性发情性状核心基因和关键lncRNA的筛选与分析

旨在筛选与季节性发情相关的核心基因和长链非编码RNA(long non-coding RNA;lncRNA)。本研究选取2~3岁空怀的中国美利奴羊和湖羊母羊(乏情期、发情期和发情间期各3只);采集卵巢组织样本;采用RNA-seq技术筛选差异表达的基因(differentially expressed genes, DEGs)和lncRNAs;并通过GO、KEGG富集分析、PPI分析及ceRNA网络构建鉴定与繁殖性能相关的核心基因和lncRNAs。结果;构建了6个不同生理状态下的RNA文库;筛选得到1 495个差异表达基因(differentially expressed genes, DEGs)和454个差异表达lncRNAs;其中共性DEGs和lncRNAs分别为313个和435个;特有DEGs和lncRNAs分别为1 182个和19个。GO和KEGG富集分析显示;共性DEGs在细胞分裂和细胞周期等方面显著富集;而差异表达的lncRNAs靶基因富集于细胞内信号转导及负调控RNA聚合酶Ⅱ启动子转录等。特有DEGs在细胞迁移的正向调节中富集;lncRNAs的靶基因集中于细胞间粘附和整合素介导的信号通路等。通过PPI筛选出19个核心基因;主要富集在卵母细胞减数分裂和细胞周期信号通路。聚类分析结果显示;核心基因在乏情期表达量较高。ceRNA网络进一步揭示基因在细胞周期等信号通路的富集。RT-qPCR验证结果与高通量测序一致。筛选出19个核心基因和28个lncRNAs;并发现42个lncRNA-miRNA-mRNA靶向关系;为理解绵羊季节性繁殖的分子机制提供了潜在调控靶点。     

光照与药物对母兔同期发情影响的研究

为了研究光照与药物控制同期发情对母兔窝产仔数的影响,试验选用150日龄体质相近的父母代伊拉母兔80只,随机分为2组,每组40只。试验组连续7d人工光照后人工授精繁殖;对照组自然光照,注射孕马血清促性腺激素（PMSG）后人工授精繁殖。结果表明：经168d,2种方法对母兔窝产仔数影响不大,经t检验,平均窝产仔数和平均窝产活仔数差异不显著（P〉0．05）,说明光照控制母兔同期发情技术完全能应用到商品肉兔的繁殖生产中。     

AANAT基因在滩羊不同繁殖时期卵巢中的转录差异及DNA甲基化程度分析

试验旨在检测5-羟色胺-N-乙酰基转移酶(AANAT)基因在绵羊休情季节和繁殖季节(卵泡期和黄体期)卵巢组织中的转录差异,并分析转录差异是否由DNA甲基化修饰程度改变所导致。试验采用自然环境条件和饲养管理一致,且体重差异在0.5 kg范围内的空怀母滩羊作为试验动物,采集其休情期、卵泡期和黄体期(每个时期3只)的卵巢组织,采用SYBR染料法进行实时荧光定量PCR检测AANAT基因在滩羊不同繁殖时期卵巢组织中的转录水平。随后针对转录水平有差异的两个时期(休情期和卵泡期)的样本,利用MethPrimer 2.0在线软件预测AANAT基因启动子区和第一外显子区的CpG岛;用重亚硫酸盐测序法(BSP法)检测AANAT基因启动子区及第一外显子区的甲基化程度。试验结果显示,滩羊休情期卵巢组织中AANAT基因转录水平显著低于卵泡期的AANAT基因转录水平(P<0.05),休情期与黄体期滩羊卵巢组织中AANAT基因的转录水平差异不显著(P>0.05)。滩羊卵巢组织中AANAT基因启动子区上存在着一个长度为173 bp的CpG岛,第一外显子区存在着一个长度为118 bp的CG岛。然而,两个甲基化岛区内的单个CpG位点甲基化程度在滩羊休情期和卵泡期之间均不存在显著差异,暗示AANAT基因的表达受甲基化修饰外的因素调控。本研究结果可为进一步探讨AANAT基因在季节性发情和卵泡成熟中的功能提供参考资料。     

小尾寒羊高繁殖力和常年发情内分泌机理的研究

本研究对5只小尾寒羊成年母羊以及相同条件下的5只细毛羊成年母羊用导管法采血,用放射免疫分析法测定血浆中FSH和LH浓度.试情公羊爬跨法鉴定结果表明,小尾寒羊具有显著的非季节性发情特性.小尾寒羊各月份、4个季节和全年的血浆FSH和LH浓度均极显著高于(P＜0.0001)低繁殖力和季节性发情的细毛羊.小尾寒羊发情期血浆FSH和LH的基础浓度、峰值、谷值、排卵前峰值均显著高于(P＜0.05～P＜0.0001)细毛羊的.发情期间小尾寒羊和细毛羊FSH分泌呈现2个明显的峰,第一个峰与排卵前LH峰并存,第二个FSH峰出现在发情后1d.小尾寒羊FSH二次峰均值极显著高于(P＜0.01)细毛羊的.本研究结果提示FSH和LH基因可作为小尾寒羊高繁殖力的候选基因来加以研究.     

猪繁殖和呼吸系统综合征病毒的分子生物学研究进展

本文综述近年来有关猪繁殖和呼吸系统综合征病毒分子生物学方面的研究概况,内容涉及病毒基因组、蛋白及其变异,尤其对欧洲株和美洲株基因组和蛋白结构方面的不同进行了比较。     

家畜定时输精技术研究进展与应用现状

随着人工授精技术在畜牧业中的广泛应用,优秀种公畜的利用率得到了极大提高。而人工授精成功的关键是输精的准确性和及时性,因此如何准确预测排卵时间及输精时间是提高人工授精效果的重要途径,也是当前畜牧工作者高度关注的问题。家畜的发情排卵受到体内生殖激素的精密调控,定时输精技术就是在利用生殖激素进行同期发情、同期排卵的基础上,通过调控母畜的发情和排卵来确定人工输精的最佳时间,以期达到提高家畜繁殖性能、减少发情鉴定工作量和促进养殖场批次化管理的目的。作者综述了家畜定时输精的原理及当前的应用现状,同时对其发展前景进行了展望,以期为畜牧业繁殖新技术的研究和应用提供参考依据。     

不同绵羊品种褪黑激素的季节性及昼夜变化规律研究

系统研究了小尾寒羊、同羊、滩羊血液褪黑激素在春分、夏至、秋分时的昼夜变化规律,发现绵羊血液中褪黑激素存在着明显的季节性变化,在春分和秋分时平均含量相对较低,在夏至时明显升高。在夏至和秋分时,小尾寒羊和同羊血液中褪黑激素比滩羊低,在春分时,小尾寒羊褪黑激素比同羊和滩羊高。     

广东省仔猪病毒性腹泻横断面研究

[目的]估计广东省规模化猪场仔猪病毒性腹泻(PVD)的群体流行率,分析PVD发生的风险因素。[方法]2013年12月—2014年3月,对广东省197个规模化猪场进行调查和横断面分析研究。[结果]调查发现:广东省规模化猪场的PVD场流行率为48.55%(95%CI:42.27%~56.21%)。PVD流行与猪场规模(OR=1.340,P=0.020)、外来人员进入生产区(OR=4.740,P=0.007)、距县级以上公路距离(OR=0.389,P=0.008)、病死猪无害化处理与否(OR=0.244,P=0.035)有关联。多元logistic回归分析发现:参观者进入生产区(OR=5.003,95%CI:1.555~16.096,P=0.007)是发生PVD的风险因素;免疫猪流行性腹泻和传染性胃肠炎(PED+TGE)二联灭活疫苗(OR=2.012,95%CI:1.035~3.912,P=0.039)、未进行病死猪无害化处理(OR=0.306,95%CI:0.080~1.175,P=0.084)、距县级以上公路距离过近(OR=0.530,95%CI:0.080~1.175,P=0.090)可能是混杂因素。[结论]本研究弄清了广东省规模化猪场PVD的场流行率,确定了参观者进入生产区是发生PVD的风险因素,提示生物安全措施对PVD控制的重要性。     

2018年山东省淄博市小反刍兽疫免疫效果评估

为科学评估淄博市小反刍兽疫免疫效果,2018年6月采用横断面研究方法,对淄博市部分规模养殖场和自然村（散养户）的小反刍兽疫免疫情况进行评估。采用两阶段随机抽样方法结合部分便利抽样,共采集44个规模养殖场和81个自然村的2 350份羊血清样品,经检测发现,规模场群体合格率为95.45%（42/44）,自然村群体合格率为91.36%（74/81）,个体免疫抗体合格数为2 220份,个体合格率为94.47%,均高于国家和山东省的最低要求。评估结果表明,淄博市的小反刍兽疫总体免疫效果良好。     

AANAT基因在滩羊不同繁殖时期卵巢中的转录差异及DNA甲基化程度分析

试验旨在检测5-羟色胺-N-乙酰基转移酶（AANAT）基因在绵羊休情季节和繁殖季节（卵泡期和黄体期）卵巢组织中的转录差异,并分析转录差异是否由DNA甲基化修饰程度改变所导致。试验采用自然环境条件和饲养管理一致,且体重差异在0.5 kg范围内的空怀母滩羊作为试验动物,采集其休情期、卵泡期和黄体期（每个时期3只）的卵巢组织,采用SYBR染料法进行实时荧光定量PCR检测AANAT基因在滩羊不同繁殖时期卵巢组织中的转录水平。随后针对转录水平有差异的两个时期（休情期和卵泡期）的样本,利用MethPrimer 2.0在线软件预测AANAT基因启动子区和第一外显子区的CpG岛;用重亚硫酸盐测序法（BSP法）检测AANAT基因启动子区及第一外显子区的甲基化程度。试验结果显示,滩羊休情期卵巢组织中AANAT基因转录水平显著低于卵泡期的AANAT基因转录水平（P<0.05）,休情期与黄体期滩羊卵巢组织中AANAT基因的转录水平差异不显著（P>0.05）。滩羊卵巢组织中AANAT基因启动子区上存在着一个长度为173 bp的CpG岛,第一外显子区存在着一个长度为118 bp的CG岛。然而,两个甲基化岛区内的单个CpG位点甲基化程度在滩羊休情期和卵泡期之间均不存在显著差异,暗示AANAT基因的表达受甲基化修饰外的因素调控。本研究结果可为进一步探讨AANAT基因在季节性发情和卵泡成熟中的功能提供参考资料。