鸡新城疫、传染性支气管炎、减蛋综合征、传染性脑脊髓炎四联油佐剂灭活疫苗的研究

用NDV La Sota株、IBV M41株、EDS76V HSH23株、AEV Van Roekel株为种毒，分别接种鸡胚或鸭胚，制备各种病毒抗原液，经福尔马林灭活后，采用FIL TRON盒式超滤系统对制苗病毒抗原液进行浓缩，然后按一定比例混合，以司本80及吐温80为乳化剂，10号白油为佐剂，制成ND-IB-EDS76-AE四联灭活疫苗。对四联苗各项技术指标进行了测定，证明本疫苗安全、无任何副作用；免疫10～14d后产生免疫力；ND部分效检，攻毒100％保护，每羽份含ND效价达50～123PD50；IB部分效检，免疫21～28d后攻毒保护率达80％～100％，IBHI效价≥1：64；EDS76效检。免疫后21d HI效价≥1:128;AE效检,保护率达80%～100%。     

鸡传染性鼻炎二价油乳剂灭活疫苗的近期免疫效力检验

应用３批鸡传染性鼻炎价油乳剂灭活疫苗进行了安全性和近期免疫效力检验,安全性试验采用１５只鸡进行,胸肌注射疫苗４￣５ｍＬ／只后,逐日观察,结果鸡只食欲、精神未见异常,２周后观察,注射部位未发现明显异常和病变。用该疫苗免疫（０．５ｍＬ／ｋｗ ）后的鸡只对Ａ型高致病力菌株的攻击保护率可达１００％,对Ｃ型高致病力菌株的攻击保护率为９３．３％。采用Ｂ－ＥＬＩＳＡ和ＳＰＺＡ对鸡群的抗体水平的评估表明该疫苗可激发产生较高的抗体水平。     

“906”免疫增强剂对鸡新城疫H1抗效价的影响

实验观察了“９０６”免疫增强剂对鸡新城疫Ｈ１抗体效价的影响。结果表明，“９０６”免疫增强剂可显著鸡新城疫１系苗的免疫效果，而且在３０天内与油乳剂苗的具有相近的抗体水平。     

鸡减蛋综合症油乳剂灭活疫苗的免疫效果观察

将试验鸡分成3组,第一组、第二组和第三组鸡分别接种鸡减蛋综合症油乳剂灭活苗1ml、 1．5ml和2ml。接种疫苗后3、4、5、6、7、9、11、13、15d采取各组鸡血,检测HI抗体。接种2ml油乳剂灭 活苗的组鸡HI抗体效价上升快,效价高,但下降也非常快,较适合于紧急接种。1ml和1．5ml油乳剂 灭活苗接种鸡HI抗体效价上升较慢,产生免疫力的时间较迟,但维持高抗体水平的时间较长,适于 预防接种。     

鸡新城疫、传支（双价）二联油剂灭活苗的研究

鸡新城疫（ND）和鸡的传染性支气管炎病（IB）仍然是目前养鸡业的最大病害。国内外虽已研制出许多良好的疫苗，但由于近年来变异株和超强毒的出现以及ND和IB混感率的不断上升，现在应用的ND和IB疫苗普遍存在以下弊端：（1）疫苗毒株与当地流行毒不相吻合，免疫效果不佳；（2）ND和IB疫苗分别接种，常造成应激反应而影响免疫应答；（3）油佐剂灭活苗的免疫产生速度不够理想。为此，1996～1997年对当地鸡病进行流行病学调查，在对致病毒株分离鉴定的基础上，试图选用与本地抗原性相似的国际标准毒株作为制苗毒株，研制ND—IB（双价）二联油剂灭活疫苗。     

左旋咪唑对新城疫灭活疫苗抗体滴度的影响

为探讨免疫增强剂左旋咪唑对新城疫灭活疫苗抗体滴度的影响,将20只20日龄雏鸡,随机分成A、B、C、D四组,每组5只。分别皮下注射新城疫灭活疫苗0.5ml／羽,同时注射A组雏鸡高(0.6mg)、B组中(0.3mg)、C组低(0.15mg)剂量的左旋咪唑,对照组D不加。免疫后0d、7d、14d、21d和28d,翅下静脉采血并检测新城疫抗体滴度。结果显示：免疫前四组抗体水平基本一致,无统计学意义;免疫后7d,14d,21d,高、中、低三组抗体水平基本一致,四组的抗体水平相差均在2个滴度以内,统计分析无明显差异;免疫后28d,B组抗体水平较高。统计分析显示,对照组与高中低三组均有显著差异,但无剂量差异;在高中低 三组中,以中剂量添加最佳,抗体效价高（7.2log2）,但中剂量组与高、低二组的差异不显著。这表明,左旋咪唑的添加提高新城疫抗体滴度,并且与免疫后时间长短有关系。从趋势看,随着时间的推移,添加组的抗体水平好于对照组。     

犊牛大肠杆菌、沙门氏菌佐剂灭活疫苗的制备与临床效果观察

为有效预防铁门关地区犊牛大肠杆菌病和沙门氏菌病,提高犊牛腹泻的防治水平,利用腹泻犊牛中分离鉴定出的优势致病菌O₇₈血清型大肠杆菌、O₁₁₁血清型大肠杆菌、都柏林沙门氏菌和鼠伤寒沙门氏菌,制备氢氧化铝佐剂二联四价灭活疫苗。用上述疫苗对4组牛：A组(1日龄首免,14日龄加强免疫一次)、B组(1日龄首免,21日龄加强免疫1次)、C组(60日龄首免,74日龄加强免疫1次)、D组对照组(注射生理盐水)进行接种,采用玻片凝集试验检测血清抗体水平,并进行攻毒保护试验。结果表明：A、B、C组免疫42 d后血清抗体水平93.3%以上超过1∶32,不同组之间抗体水平无明显差异;免疫牛能抵抗90亿的O₇₈血清型大肠杆菌、O₁₁₁血清型大肠杆菌、都柏林沙门氏菌和鼠伤寒沙门菌沙门氏菌攻击。说明制备的疫苗安全可靠,且对该病有较好的预防效果。     

鸡马立克氏病二价疫苗免疫鸡的病理组织学研究

1日龄雏鸡接种鸡马立克氏病二价疫苗(SB-1+HVT)3000PFU,而后18日龄攻以MDBJ-1血毒.定期剖杀三例并观察大体或显微MD组织病变.直至98日龄,在鸡内脏和外周神经等组织中始终可见到网状细胞或淋巴细胞的轻度增生.二价疫苗与HVT冻干苗、SB-1单价苗在相同条件下进行了比较.试验结果表明,眼观病变及组织淋巴细胞增生的出现,病灶范围和病变程度,经二价疫苗免疫的鸡较其他免疫鸡表现轻微.通常二价疫苗仅仅产生长期的轻度非致瘤性组织病理变化.     

新城疫-传染性支气管炎-减蛋综合症三联油乳剂苗的研制

以ＮＤ Ｌa Sota株,呼吸道型,ＩＢ（ＲＩＢ）Ｈ１２０株或肾型ＩＢ（ＫＩＢ）ＳＮ９３０１株和ＥＤＳ ＸＮ９２０３株制苗毒株,分别经鸡胚和鸭胚增殖后甲醛灭活。灭活毒液依毒价按比例混合加入油佐剂中,乳化剂成“ＮＤ－ＲＩＢ－ＥＤＳ”和ＮＤ－ＫＩＢ－ＥＤＳ两种三联油乳剂苗。测试结果表明：三联疫苗安全性好,无毒副作用;乳化度、稳定性和通针性良好;免疫效果即,用三联苗免疫２０日龄鸡,免疫后１４、２８、５８d、ＮＤ、ＲＩＢ、ＫＩＢ、ＥＤＳ的ＨＩ抗体均可达７．０和９．２log2以上,于免疫后６０d用相应强毒攻击,８３．３％－１００％的鸡获有效保护。疫苗保护期长,常温避光１８０d和4℃左右３６０d,免疫效果与新制苗无明显差异。     

鸡传染性鼻炎二价油苗免疫鸡群抗体动态研究

应用阻断ELISA (B ELISA)、血凝抑制试验 (HI)和血清平板凝集试验 (SPA)方法 ,检测了鸡群用鸡传染性鼻炎A、C二价油乳剂灭活疫苗免疫后 0～ 390d的血清阻断ELISA、HI和平板凝集抗体消长情况 ,并绘制了相应抗体曲线。结果表明 ,鸡体按规定免疫程序免疫后 ,A型B ELISA抗体和HI抗体在测定期内一直保持比较高的水平 ,C型B ELISA抗体首免 5 0～ 180d、SPA抗体在首免后 5 0～ 60d达到高峰 ,此后抗体缓慢下降 ,但各种抗体至少可持续 390d以上。结果进一步显示了二价苗良好的免疫原性以及B ELISA和SPA较好的敏感性 ,为二价苗、各种诊断方法或其试剂盒产品的进一步应用提供了参考。     

新城疫病毒抗恶性肿瘤研究进展

新城疫病毒属于副粘病毒科Rubulavirus属禽副粘病毒-1型(APMV-1)毒株,新城疫是一种急性、热性、败血性和高度接触性传染病。新城疫病毒通过溶瘤作用、诱导肿瘤细胞凋亡和分泌细胞因子等方法选择性杀伤肿瘤细胞。目前,传统的手术、化疗、放疗等治疗模式虽然能有效治疗部分肿瘤,但并不能全面降低肿瘤的复发率和死亡率。根据国内外研究报道,对新城疫病毒的概况以及该病毒溶瘤作用、抑瘤佐剂作用等抗恶性肿瘤机制展开了综述。     

中草药复方制剂对肉鸡新城疫免疫影响研究

将210只1日龄的肉仔鸡随机分成7组,每组30只,在ND免疫过程中按每公斤体重0.2 g添加中草药复方制剂,Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别在免疫前5天、3天和免疫当天开始连续饲喂3天,Ⅳ、Ⅴ、Ⅵ组分别在免疫前5天、3天和免疫当天饲喂1天,对照组（VII组）不喂药,分别于免疫前1天和免疫后14天、21天、28天和40天翅下静脉采血检测ND抗体水平。结果表明,免疫后投药组抗体效价均高于对照组,抗体达到峰值时平均高出20.2-1.6个滴度,其中Ⅲ组与对照组差异显著（P＜0.05）,其他组与对照组差异不显著（P＞0.05）。     

蟾酥注射液对新城疫疫苗免疫效果的影响研究

为了探讨蟾酥注射液对新城疫疫苗免疫效果的影响。选取1日龄健康雏鸡240只,随机分成4组,每组60只,设试验组（低剂量组、中剂量组和高剂量组）和对照组,选择不同浓度的蟾酥注射液与新城疫疫苗联合使用作为试验组。分别在21、28、35、42、49和56日龄,通过β-微量法,检测血清中ND-HI抗体;通过MTT法,检测外周血T细胞吸光度值（OD值）;通过称量体重和免疫器官重量的方法,检测免疫器官指数。结果显示：蟾酥注射液各组与对照组比较,ND-HI抗体水平、外周血T细胞转化、胸腺指数、法氏囊指数和脾指数均有不同程度的提高。说明蟾酥注射液能够提高机体的体液免疫和细胞免疫水平,从而增强新城疫疫苗的免疫效果。     

中药紫草注射液对鸡胚接种后抗新城疫病毒的研究

为研究紫草对新城疫病毒的抑制作用。用鸡胚培养法和血凝试验,测定了4组试验中药紫草对鸡新城疫病毒的作用效果。结果显示：第Ⅰ组接种病毒尿囊液与中药紫草混合液,HA滴度0;第Ⅱ组接种病毒尿囊液与盐酸金刚烷胺混合液,HA滴度4 log2;第Ⅲ组接种病毒尿囊液与生理盐水混合液,HA滴度8 log2;第Ⅳ组不接种病毒尿囊液、不给药、HA滴度0。第Ⅰ组与第Ⅲ组差异极显著(P<0.01),第Ⅱ组与第Ⅲ组差异显著(P<0.05)。试验表明,紫草对鸡胚无毒性作用;紫草与病毒同时接种鸡胚,能完全抑制鸡新城疫病毒在鸡胚中的增殖。     

高母源抗体下蛋雏鸡新城疫最佳免疫程序探讨

通过在不同日龄和不同母源抗体水平时对具有鸡新城疫（ND）较高母源抗体的蛋雏鸡进行免疫,探讨在高母源抗体下蛋雏鸡新城疫免疫程序与免疫效果的关系。结果表明：用新城疫弱毒疫苗和油乳剂疫苗同时免疫后,免疫越早,受母源抗体干扰越大,总体免疫效果越差;当ND母源抗体降到6log2左右（大约在11～13日龄）时进行首免,隔14天进行二免,鸡体产生保护水平（6log2）以上的ND抗体最快、抗体水平上的最高、维持时间最长,总体免疫效果最好。因此,母源抗体6log2时首免,14天后二免为最佳免疫程序。     

新城疫病毒HN蛋白单克隆抗体的制备及其抗原捕捉ELISA方法的建立

为建立一种快速的新城疫病毒病原检测方法。本研究以原核表达的重组HN蛋白免疫7周龄BALB/c雌鼠,取其脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合,经间接ELISA方法筛选,成功获得了1株能稳定分泌抗新城疫病毒HN蛋白的McAb杂交瘤细胞,命名为4E8,4E8亚类鉴定为重链属于IgG2a,轻链属于κ链。以多克隆抗体作为包被抗体、单克隆抗体4E8作为检测抗体,通过双抗夹心ELISA各个反应条件的优化,建立检测新城疫病毒抗原捕捉ELISA方法。该方法对EDSV、ITLV、IBV、IBDV不发生交叉反应,其敏感性比HA试验要高4倍以上,与RT-PCR相比较,符合率、敏感性和特异性分别为95.6%、93.3%、96.1%。本研究建立的NDV AC-ELISA有良好的重复性、敏感性和特异性,可应用于新城疫病毒感染的早期诊断。