鼻咽癌中EB病毒的原位杂交检测

目的：在分子水平探讨ＥＢＶ在鼻咽癌发生发展中的作用。方法：采用ＥＢＶ ｅｎｃｏｄｅｄ ｓｍａｌｌ ＲＮＡ（ＥＢＥＲ）原位杂交对２８例鼻咽癌和７例慢性鼻咽炎组织进行了检测。结果：２８例鼻咽癌组织中有２３例阳性，７例慢性鼻咽炎均是阴性。鼻咽高分化鳞癌、低分化鳞癌和未分化癌均存在ＥＢ病毒感染，不同分化程度的肿瘤组织间ＥＢＥＲ阳性率差异无显著性（Ｐ〉０．０５）。结论：在鼻咽癌的发生中ＥＢＶ感染起非常重要作     

EB病毒感染体外培养人胚鼻咽上皮细胞对c—myc和p53表达的 …

目的：观察体外培养人胚鼻咽上皮（ＨＥＮＥ）被ＥＢ病毒（ＥＢＶ）感染后，ｃ－ｍｙｃ和ｐ５３表达的变化，以探讨ＥＢＶ和这些癌基因在鼻咽癌发生发展中可能起的作用，方法：体外培养的人胚鼻咽上皮用ＥＢＶ或ＥＢＶ加ＴＰＡ感染（简称Ｅ和ＥＴ组）分别用抗体补体免疫法（ＡＣＩＦ）和碱性磷酸酶抗碱性磷酸酶法（ＡＰＡＡＰ）检测ＥＢＶ核抗原（ＥＢＮＡ）及癌基因ｃ－ｍｙｃ和ｐ５３的表达。结果：体外培养１０例人胚鼻咽上皮细胞     

人鼻咽上皮裸小鼠移植及诱癌实验中的EB病毒DNA检测

人鼻咽组织移植于２０只裸小鼠，分三组再分别多次以ＥＢＶ（７头）、ＥＢＶ＋ＴＰＡ（５头）或生理盐水（对照８头）皮下注射，诱癌后处死，将移植物作常规病理切片观察，并同时提取ＤＮＡ为模板，以ＥＢ病毒ＢａｍＨＩＷ片段特异性引物作ＰＣＲ检测ＥＢ病毒。结果显示：ＥＢＶ组与ＥＢＶ＋ＴＰＡ组中，７只可见鼻咽组织移植物发生癌前或癌变（原位癌、早期浸润癌各１只），而对照组均未见上述改变，两组比较差别有显著意义（０．０１＜Ｐ＜０．０５）；无形态变化的受试动物中ＩＢ病毒阳性２只，阴性１１只；有癌前病变和癌变的动物中，阳性５只，阴性２只，两组差别有显著性（０．０１＜Ｐ＜０．０５），提示观察到的病变与ＥＨ病毒感染有关。     

EBV感染对人鼻咽癌细胞株形态参数和DNA含量的影响

目的：观察ＥＢＶ体外感染对不同分化不同分化状态鼻咽癌细胞株形态参数和ＤＮＡ含量的影响。方法：应用ＰＣＲ法检测ＥＢＶ基因、免疫组化和图像分析仪分别检测了ＥＢＶ和ＥＢＶ＋ＴＰＡ对ＣＮＥ－１和ＣＮＥ－２Ｚ细胞Ｃｋｐａｎ表达及形态参数和ＤＮＡ含量的影响。结果：（１）ＥＢＶ在体外可感染ＣＮＥ－１细胞；（２）ＥＢＶ感染ＣＮＥ－１细胞使其Ｃｋｐａｎ表达降低，胞面积籴小和核浆比升高及ＤＮＡ含量明显减少（Ｐ〈０．０     

EBV—LMP对人高分化鼻咽癌细胞株（CNE1）体外增殖能力的影响

目的：探讨ＥＢＶ－ＬＭＰ对人高分化鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１增殖能力的影响。方法：以人高分化鼻咽癌细胞株（ＣＮＥ１）为对象,采用电穿孔基因转染技术,将重组ＥＢＶ－ＬＭＰ表达质粒转染ＣＮＥ１细胞。以载体质粒转染及ＣＮＥ１细胞为对照。用细胞体外增殖实验、细胞软琼脂克隆形成率测定、流式细胞仪测定各细胞周期和细胞ＰＣＮＡ的检测,观察细胞增殖能力的变化。结果：体外细胞增殖实验,Ａ比值实验组（２．８６±０．１２）显     

乙型肝炎与戊型肝炎病毒重叠感染者血清HBV标记物结果分析

目的：观察乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）与戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）重叠感染对ＨＢＶ复制的影响。方法：以血清ＨＢｓＡｇ和抗ＨＥＶ均阳性患者３６例作为重叠组,以单纯ＨＢＶ感染患者３６例作为对照组。两组病例抗ＨＡＶ－ＩｇＭ和抗ＨＣＶ均为阴性。采用ＥＬＩＳＡ法测定两组的ＨＢＶ－Ｍ。结果：重叠组血清ＨＢｅＡｇ的阳性率明显低于对照组（Ｐ＜０．００１）,抗ＨＢｅ阳性率明显高于对照组（Ｐ＜０．０５）。结论：ＨＢＶ与ＨＥＶ重叠感染后,ＨＢＶ的复制受到一定程度的抑制     

乙型肝炎与戊型肝炎病毒重叠感染者血清HBV标记物结果分析

目的：观察乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）与戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）重叠感染对ＨＢＶ复制的影响。方法：以血清ＨＢｓＡｇ和抗ＨＥＶ均阳性患者３６例作为重叠组,以单纯ＨＢＶ感染患者３６例作为对照组。两组病例抗ＨＡＶ－ＩｇＭ和抗ＨＣＶ均为阴性。采用ＥＬＩＳＡ法测定两组的ＨＢＶ－Ｍ。结果：重叠组血清ＨＢｓＡｇ的阳性率明显低于对照组（Ｐ〈０．００１）,抗ＨＢｅ阳性率明显高于对照组（Ｐ〈０．０５）。结论：ＨＢＶ与ＨＥＶ重     

硝苯地平控释片治疗无痛性心肌缺血对左心功能的影响

硝苯地平（２０ｍｇ，ｑ１２ｈ×３ｗｋ）治疗无痛性心肌缺血２３例（男１５例，女８例，年龄５５±９．４ａ），对左心功能和ＲＡＡ检测结果显示：治疗后ＨＲ、ＳＢＰ、ＤＢＰ和ＭＡＰ均降低，以ＤＢＰ和ＭＡＰ降低显著（Ｐ＜０．０５）；缺血型ＳＴ段明显改善（Ｐ＜０．０１）；核素心功能ＬＶＥＦ、ＳＶ、ＥＲ和ＲＣＯ均升高（Ｐ＜０．０５～０．０１）；血浆ＰＲＡ和ＡｎｇⅡ降低明显（Ｐ＜０．０５）。表明该药有良好的降压和改善左心功能效应。     

鼻咽炎和鼻咽癌细胞中CD147、Fascin蛋白表达

目的探讨鼻咽炎和鼻咽癌细胞中CD147、Fascin蛋白表达的意义。方法用免疫组化SP法检测25例鼻咽黏膜慢性炎和30例鼻咽癌细胞中CD147和Fascin蛋白的表达。结果在鼻咽黏膜慢性炎和鼻咽癌细胞中,CD147蛋白阳性表达率分别为24.0%（6/25）和76.7%（23/30）,组间差异有显著统计学意义（P〈0.01）;Fascin蛋白阳性表达率分别为16.0%（4/25）和93.3%（28/30）,组间差异有显著统计学意义（P〈0.01）;30例鼻咽癌中CD147与Fascin蛋白表达呈正相关（P〈0.05）。结论鼻咽癌细胞中均有CD147和Fascin蛋白过表达,可能协同参与鼻咽癌的侵袭、转移过程。     

EBV-LMP对人高分化鼻咽癌细胞株(CNE1)体外增殖能力的影响

目的：探讨ＥＢＶ－ＬＭＰ对人高分化鼻咽癌细胞株ＣＮＥ１增殖能力的影响。方法：以人高分化鼻咽癌细胞株（ＣＮＥ１）为对象,采用电穿孔基因转染技术,将重组ＥＢＶ－ＬＭＰ表达质粒转染ＣＮＥ１细胞。以载体质粒转染及ＣＮＥ１细胞为对照。用细胞体外增殖实验、细胞软琼脂克隆形成率测定、流式细胞仪测定各细胞周期和细胞ＰＣＮＡ的检测,观察细胞增殖能力的变化。结果：体外细胞增殖实验,Ａ比值实验组（２．８６±０．１２）显著高于空白组（１．６２±０．０５）及阴性对照组（１．３８±０．０３）（Ｐ＜０．０１）;实验组细胞软琼脂克隆形成率（２５．２％）显著高于空白组（１１．２％）及阴性对照组（１３．４％）（Ｐ＜０．０１）;ＦＣＭ法测定细胞周期,实验组Ｓ期细胞（３４．９％）高于空白组（２６．２％）及阴性对照组（３０．８％）;ＰＣＮＡ免疫组化染色,实验组细胞ＰＣＮＡ阳性率（８４．６％）明显高于空白组（６１．１％）及阴性对照组（６７．２％）（Ｐ＜０．０１）。结论：ＥＢＶ－ＬＭＰ对ＣＮＥ１细胞体外增殖能力有明显的促进作用,提示ＬＭＰ在ＮＰＣ细胞演进过程中可能起重要作用     

鼻咽良恶性病变中EBV-LMP1、CyclinB1、P34cdc2和Survivin的表达及意义

目的探讨P34cdc2、CyclinB1和Survivin在鼻咽粘膜慢性炎、鼻咽癌和颈部淋巴结转移灶中的表达及意义,并分析与EBV-LMP1表达的相互关系.方法应用免疫组化检测30例鼻咽粘膜慢性炎、30例鼻咽癌和30例鼻咽癌颈部淋巴结转移灶中LMP1、P34cdc2、CyclinB1和Survivin的表达.结果LMP1、P34cdc2、CyclinB1和Survivin在鼻咽粘膜慢性炎中的阳性率分别为20.0%(6/30)、10.0%(3/30)、10.0%(3/30)和3.3%(1/30);在鼻咽癌中的阳性率分别为63.3%(19/30)、73.3%(22/30)、50.0%(15/30)和36.7(11/30),与鼻咽粘膜慢性炎比较差异均有显著性(P＜0.01);在鼻咽癌颈部淋巴结转移灶中的阳性率分别为70.0%(21/30)、80.0%(24/30)、76.7%(23/30)和43.3%(13/30),与鼻咽粘膜慢性炎比较差异均有显著性(P＜0.01),与鼻咽癌相比较均有所增高,但仅CyclinB1有统计学意义(P＜0.05).在鼻咽癌及其颈部淋巴结转移灶中,LMP1与P34cdc2和CyclinB1的表达均有显著相关性(分别P＜0.01,P＜0.05).结论鼻咽癌中存在P34cdc2、CyclinB1和Survivin蛋白过表达,LMP1与P34cdc2和CyclinB1可能协同致病.     

鼻咽癌细胞株CNE1转染EB病毒潜伏膜蛋白1(LMP1)后对放射敏感性的影响

目的：研究EB病参LMP1对鼻咽癌高分化细胞株CNE1放射敏感性的影响。方法：用电转染技术将带有EB病毒LMP1基因的真核表达质粒导入鼻咽癌高分化细胞株CNEl，用免疫组化法及Western blot检测LMPl的表达；LMP1对CNEl细胞放射敏感性的影响采用^60钴治疗仪照射后集落形成实验进行观察。结果：CNE1细胞抹转染LMP1基因后LMPl蛋白呈阳性表达，对照放射敏感性比未转染株的细胞存活事低(P＜0．01)。结论：LMPl能增加鼻咽癌细胞的放射敏感性，这种作用可能与LMP1的促细胞转化，抑分化有关。     

鼻咽癌及淋巴结转移灶组织中EB病毒LMP1与MMP-2、MMP-9的表达及其相关性的研究

目的：探讨基质金属蛋白酶2、9(MMP-2、MMP-9)在鼻咽癌及其淋巴结转移灶组织中的表达、意义及与EB病毒潜伏膜蛋白1(LMPl)的相关关系。方法：应用免疫组化(SP法)检测LMPl和MMP-2、MMP-9在人鼻咽粘膜慢性炎(30例)、鼻咽癌(30例)和鼻咽癌颈部淋巴结转移灶(24例)组织中的表达。结果：鼻咽癌和鼻咽癌颈部淋巴结转移灶组织中LMPl和MMP-2、MMP-9的阳性率明显高于鼻咽粘膜慢性炎。在鼻咽癌及鼻咽癌颈部淋巴结转移灶标本中还发现癌巢周边的成纤维细胞、癌周浸润的单核细胞、淋巴细胞以及血管内皮细胞中也有MMP-2和MMP-9的表达。Spearman相关分析显示，在鼻咽癌组织中LMPl与MMP-2、MMP-9的表达无相关性；而在鼻咽癌颈部淋巴结转移灶组织中，LMPl的表达与MMP-2、MMP-9的表达呈中度正相关。结论：MMP-2、MMP-9在鼻咽癌细胞突破基底膜向外扩散及转移中起到重要作用；在鼻咽癌淋巴结转移灶中LMPl与MMP-2、MMP-9的表达呈正相关；LMPl可能参与鼻咽部疾病的恶性转化和癌细胞的浸润转移。     

人鼻咽上皮及鼻咽癌组织角蛋白的免疫组化研究

用抗角蛋白抗体免疫组化ABC法,对28例人鼻咽上皮(包括鳞状上皮及柱状上皮)和75例分化程度不同的鼻咽癌细胞进行了角蛋白检测。结果全部为阳性表达,其中鼻咽上皮表层细胞染色强度明显,基底层细胞染色较弱,两者之间有明显差别(P<0.01);鼻咽癌细胞以高分化鳞癌表达最强,未分化癌表达最弱,高、低,未分化鼻咽癌细胞之间的角蛋白表达有显著性差异(P<0.005),表明角蛋白表达与分化有关。     

鼻咽癌患者与不同IgA/VCA抗体滴度者外周血单个核细胞对EB病毒感染的早期免疫反应

本文用本室建立的EB病毒(EBV)体外感染外周血单个核细胞(PBMC)早期反应综合检测观察系统,测定了鼻咽癌(NPC)患者、IgA/VCA高滴度者、低滴度和阴性者3组人的PBMC体外感染EBV的早期免疫反应。发现在EBV感染PBMC早期,NPC组的EBNA阳性细胞数、~3H-TdR掺入量和免疫球蛋白(IgG、IgG、IgG)分泌量最低,IgA/VCA低滴度和阴性组最高,两组间所有指标差异均有显著或非常显著性,而IgA/VCA高滴度组的多数指标与NPC组接近.结果表明,在EBV体外感染PBMC所引起的早期免疫反应中,NPC患体者和IgA/VCA高滴度者EBV活化的B细胞功能较IgA/VCA低滴度和阴性者降低.这对了解NPC发生发展过程中EBV感染活化B细胞的功能在体内外变化的关系方面具有一定意义.     

应用抑制消减杂交技术克隆鼻咽癌转移调控基因

目的：分离并鉴定高低转移表型不同的人鼻咽癌细胞株差异表达cDNA序列,了解鼻咽癌转移抑制基因或具有抑制活性的核苷酸序列。方法：以具有高低转移潜能不同的人鼻咽癌细胞株为研究对象,应用抑制消减杂交技术（suppression subtractive hybridization,SSH）和T／A克隆法构建差异表达cDNA消减文库,对差异表达的cDNA进行测序和生物信息学分析。结果：成功构建人鼻咽癌细胞克隆株差异表达cDNA消减文库,从随机测序10个克隆中获得6个在低转移鼻咽癌细胞株中高表达cDNA序列,它们都与已知的人类基因片段具有高度同源性。结论：应用抑制消减杂交技术,从一对具有高低转移表型差异的鼻咽癌细胞株中获得6条可能与肿瘤转移抑制相关的cDNA序列,它们可能在维持肿瘤细胞的稳定和抑制肿瘤转移中起重要作用。     

金槐米槲皮素对人鼻咽癌细胞的干预作用研究

[目的]探讨金槐米槲皮素对人鼻咽癌CNE2细胞的干预作用。[方法]通过微波辅助提取法从桂北金槐米中提取槲皮素并纯化,用浓度20、40、60和80μmol/L的槲皮素作用于人鼻咽癌细胞CNE2;分别在24、48和72 h后,采用MTT法初步检测人鼻咽癌细胞被抑制的情况,用流式细胞术分析其细胞周期和凋亡率、光学显微镜观察细胞形态学变化。[结果]从槐米中提取的槲皮素对鼻咽癌细胞有明显的抑制作用,且呈浓度、时间明显的依赖性,药物干预作用的最适浓度为60μmol/L,药物干预后形态学观察的最适宜时间为48 h。细胞周期分析显示,槲皮素能阻滞鼻咽癌细胞于G1期。[结论]从桂北金槐米中提取的槲皮素对人鼻咽癌细胞有较强的干预作用。     

686例鼻咽癌的CT分析

目的：通过分析鼻咽癌的ＣＴ表现，提高对鼻咽癌放疗前后的认为。方法：对６８６例病理证实的鼻咽癌，全部做鼻咽部ＣＴ横断扫描，并详细分析所得资料。结果：鼻咽癌放疗前后的ＣＴ表现，主要有鼻咽癌以及周围软组织改变、淋巴结肿大、颅底骨质增生硬化、颅内直接侵犯、颅内转移、副鼻窦及乳突炎症。结论：ＣＴ检查可以较好地显示鼻咽癌放疗前后的表现，辅助放疗的定位及定量，也有利于病例的追踪。