肠溶淀粉酶的开发与评估

本研究旨在开发一种肠溶性淀粉酶并评估其效果。利用流化床技术对普通淀粉酶进行包被以制备肠溶淀粉酶。采用体外三步法评估肠溶淀粉酶的释放曲线:将肠溶淀粉酶分别在pH 7.0、3.0和7.0的缓冲液中培养5 min、1 h和2 h,模拟单胃动物的口腔/食道、胃和小肠环境。结果表明所制备的肠溶淀粉酶在口腔/食道和胃环境中高度稳定,进入小肠后能得到完全的释放。利用成年公鸡的代谢试验研究了肠溶淀粉酶与普通淀粉酶比例对表观代谢能(AME)的影响。结果发现:总酶活不变,当肠溶淀粉酶与普通淀粉酶按75:25进行饲喂时,AME的提高幅度最大(P<0.05)。本研究表明,通过对淀粉酶的肠溶化处理,并与普通淀粉酶进行合理的配比后,在口腔/食道和小肠中均能提高淀粉酶的消化率,效果优于单独使用肠溶淀粉酶或普通淀粉酶。     

口服肠溶制剂在兽药领域中的应用前景

介绍了肠溶制剂的制剂特点、肠溶制剂包衣原理、肠溶包衣材料和肠溶制剂类型等内容。结合规模化养殖场对药物饮水给药的需求,从兽用肠溶制剂的药物开发特点及近几年的国内外研究情况等两方面做以阐述,以期为兽用肠溶微丸、肠溶微囊制剂研发提供新的思路。     

酶制剂类饲料添加剂的合理应用

1．1 淀粉酶。淀粉酶主要有α-淀粉酶和糖化酶。α-淀粉酶能将淀粉大分子分解为易被吸收的中、低分子物质。糖化酶能将α-淀粉酶分解的中、低分子物质进一步水分解为葡萄糖，被动物吸收。     

盐酸沃尼妙林肠溶微丸的研制

沃尼妙林是新一代截短侧耳素(pleuromutilin)类抗生素。试验以丙烯酸树脂水分散体为肠溶包衣材料,单因素与正交试验筛选处方及工艺条件,用流化床包衣技术及挤出-滚圆法制备10%盐酸沃尼妙林肠溶微丸。研制的肠溶微丸外观、含量和释放度在加速试验条件下均保持稳定;以75~150 g/t饲料混饲给药,10%盐酸沃尼妙林肠溶微丸对猪痢疾有良好治疗效果,明显优于痢菌净。研究表明,盐酸沃尼妙林肠溶微丸质量符合药学要求,具有良好的体外肠靶向性,可用于猪肠道疾病的防制。     

耐高温α-淀粉酶的研究进展

α-淀粉酶（α-amylase）广泛地存在于动植物和微生物中,它是一种内切葡萄糖苷酶,是目前最重要的工业酶制剂之一.当今广泛使用的酶制剂始于1906年,人类发现了用于液化淀粉生产乙醇的细菌淀粉酶,首先应用于工业的α-淀粉酶来自于真菌.由于一些细菌α-淀粉酶具有耐高温、耐酸、耐碱等特性，更符合工业生产中的某些极端条件，因此，目前在需高温的发酵等工业中使用最为广泛的是细菌α-淀粉酶，尤其是来自杆菌（如解淀粉芽孢杆菌和地衣芽孢杆菌）的耐高温α-淀粉酶已占据相当大的市场。     

低温α-淀粉酶对饲料淀粉酶解及肉鸡生长性能的影响

试验研究了低温α-淀粉酶对饲料中淀粉的酶解及肉鸡生长性能的影响。酶解试验模拟胃、小肠两步消化,分析低温α-淀粉酶对饲料中还原糖释放的影响。动物试验选用600只1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡,随机分为4组,对照组饲喂基础日粮,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别在基础日粮中添加100、150和200 g/t低温α-淀粉酶,试验期为42 d。结果:1低温α-淀粉酶提高了饲料在胃消化阶段1、2 h(P0.05)和小肠消化阶段2、4 h(P=0.093)的还原糖生成量。2日粮添加100 g/t低温α-淀粉酶显著提高了42日龄肉鸡体重、后期平均日增重(P0.05);低温α-淀粉酶降低了前期(P=0.071)、后期(P0.05)和全期(P0.05)料重比。结论:在本试验条件下,低温α-淀粉酶提高了饲料中还原糖在胃消化阶段的释放量;肉鸡日粮中添加低温α-淀粉酶可以改善生长性能,添加量以100 g/t为宜。     

两燕麦品种种子萌发中淀粉酶活性变化的研究

对2个燕麦Avena sativa品种种子萌发初期的含水量进行了测定,并应用DNS法测定了燕麦种子萌发过程中的淀粉酶活性变化,比较了不同时间段内2个品种种子的α-淀粉酶、β-淀粉酶以及总酶活性的变化趋势。结果表明:2个品种的每克干物质吸水量没有明显的差异;燕麦干种子中α-淀粉酶活性接近于0,β-淀粉酶活性代表了淀粉酶的总活性,两者在种子吸水过程中不会发生明显的变化;萌发启动后,α-淀粉酶和β-淀粉酶的活性随之逐渐开始增强,并在78~96 h内达到最大值,随着贮藏淀粉大量减少,2种淀粉酶的活性也随之下降。“青海444”燕麦的α-淀粉酶活性、β-淀粉酶活性以及总淀粉酶活性均高于“青引一号”燕麦品种。     

人工饲料育和桑叶育家蚕消化酶基因表达差异研究

α-淀粉酶、麦芽糖酶、脂肪酶和类胰蛋白酶与家蚕中肠对营养物质的消化密切相关。运用荧光定量PCR技术,对人工饲料育与桑叶育家蚕中肠中这4种消化酶基因在4、5龄期的表达情况进行了测试。结果表明,人工饲料育与桑叶育家蚕中4种消化酶的表达均存在较大差异,特别是人工饲料育家蚕5龄期的脂肪酶和类胰蛋白酶基因的表达量极显著低于桑叶育家蚕中的表达量,这可能影响到家蚕对营养物质的消化吸收、生长发育和抗病性。     

外源α-淀粉酶对21日龄肉鸡消化器官发育、肠道内源酶活性的影响

选用1日龄AA肉鸡440羽,随机分成4组,每组5个重复,分别饲喂基础日粮（对照组）和在基础日粮中添加1 000 U/kg（250 mg/kg）、3 000 U/kg（750 mg/kg）9、000 U/kg（2 250 mg/kg）微生物α-淀粉酶的试验日粮,研究添加不同剂量外源α-淀粉酶对肉鸡消化器官发育和内源酶活性变化的影响。结果表明：添加淀粉酶能降低肉鸡21日龄肝脏、肌胃、前肠相对重量和前肠相对长度（P〉0.05）,并提高了肉鸡前肠内容物淀粉酶、总蛋白酶（P〈0.05）和胰蛋白酶（P〈0.05）活性,但未影响脂肪酶活性,高剂量（2 250 mg/kg）添加组的总蛋白酶（P〈0.05）和淀粉酶活性呈下降趋势;肉鸡空肠黏膜DNA、RNA浓度及蔗糖酶、麦芽糖酶活性未受淀粉酶水平（250 mg/kg和750mg/kg）影响,但高剂量（2 250 mg/kg）降低了蔗糖酶和麦芽糖酶活性（P〈0.05）。     

外源α -淀粉酶对21日龄肉鸡消化器官发育、肠道内源酶活性的影响

选用1日龄AA肉鸡440羽，随机分成4组，每组5个重复，分别饲喂基础日粮（对照组）和在基础日粮中分别添加1000LU／kg（250mg／kg）、3000LU／kg（750mg／kg）、9000LU／kg（2250mg／kg）微生物α-淀粉酶的试验日粮，研究添加不同剂量外源α-淀粉酶对肉鸡消化器官发育和内源酶活。性变化的影响。结果表曝添加淀粉酶不同程度地降低了肉鸡肝脏、肌胃、前肠相对重量和前肠相对长度（P〉0．05）；不同程度地提高了肉鸡前肠内容物淀粉酶、总蛋白酶（P〈0．05）和胰蛋白酶（P〈0．05）活性，但未影响脂肪酶活性，而且高剂量（2250mg／kg）添加组的总蛋白酶（P〈0．05）和淀粉酶活性有下降趋势：肉鸡空肠黏膜DNA、RNA浓度及蔗糖酶、麦芽糖酶活性未受低剂量淀粉酶水平影响，但高剂量降低了蔗糖酶和麦芽糖酶活性（P〈0．05）。     

日粮曲霉菌提取物中α-淀粉酶活性对育肥牛生产性能和胴体品质的影响

我们用3个试验去研究日粮曲霉菌提取物中-淀粉酶活性对肥育牛生产性能和胴体品质的影响。在试验1中,按照完全随机区组设计,120头杂交公牛被用来评价粗饲料来源(紫花苜蓿,棉仔饼)和每千克干物质添加950DU的α-淀粉酶对肥育牛生产性能的影响。试验结果表明:粗饲料和α-淀粉酶互作对胴体品质有显著影响(P<0.05)。饲喂棉仔饼试验组,添加α-淀粉酶可提高28~112 d的平均日增重(ADG),并且在其它阶段也趋向提高ADG(P<0.15)。在最初的28 d,ADG的增加和干物质摄入量(DMI)、饲料转化效率有关,但随着饲喂时间的延长,ADG主要同DMI增加相关。在两种来源的粗饲料中,添加α-淀粉酶可提高肉牛背最长肌的眼肌面积(LM)。在试验2中,96个杂交母牛按照完全随机区组设计,同时采用2×3因素处理评估玉米加工方式(干玉米粉,玉米浆)和α-淀粉酶添加量(580或160 DU/kg,DM)的影响。在饲喂最初的28d,不同加工方式的玉米中添加α-淀粉酶可提高DMI(P=0.05)和ADG(P=0.03)以及胴体修整的ADG(P=0.04)。每千克干物质添加580 DUα-淀粉酶后,背最长肌的面积最大(二次效应,P=0.04),但产量等级最低(二次效应,P=0.02)。在试验3中,56头杂交公牛按照完全随机区组设计,研究当ADG不变(通过限制DMI达到),添加930 DU/kgα-淀粉酶对其生产性能的影响。当DMI被限制时,α-淀粉酶的添加不影响肉牛生产性能。因此,我们得出结论:育肥牛日粮中添加α-淀粉酶可提高DMI,从而导致ADG的增加;更进一步的研究将去探讨它的作用模式以及和日粮成分的相互效应。     

固体分散技术——一种新型兽药制剂技术

固体分散技术是固体分散在固体中的新技术，通常是将一种难溶性药物以分子、胶态、微晶或无定形态分散在另一种水溶性材料或分散的难溶性、肠溶性材料中呈固体分散体（soliddispersion）。固体分散技术是上世纪６０年代初开始发展起来的新技术，研究表明应用固体分散技术，可显著改善难溶性药物的溶解度、溶出速率及生物利用度。近年来，采用水溶性聚合物、脂溶性材料、脂质材料等为载体制备固体分散技术，成为缓释和控释制剂，大大扩展了固体分散技术的应用范围。固体分散体作为中间剂型，可以根据需要制成胶囊剂、片剂、滴丸剂、软膏剂、…     

柞蚕丝素/丁二醇多孔材料的制备及性能测试

为了降低柞蚕丝素多孔支架材料的水溶性,采用硫氰酸锂(LiSCN)溶液溶解柞蚕丝素纤维得到再生柞蚕丝素蛋白溶液,加入一定量的1,4-丁二醇溶液后,利用冷冻干燥方法制备出平均孔径380～1 050μm、孔隙率82%～92%的柞蚕丝素/丁二醇多孔支架材料。用扫描电子显微镜观察柞蚕丝素/丁二醇多孔材料的内部孔呈长梭形,在大孔孔壁上分布着一些小孔,孔与孔之间相互贯通,且孔壁表面粗糙,有凸起的纳米颗粒与纳米纤维附着在孔壁上。采用X-射线衍射法、红外光谱法对柞蚕丝素/丁二醇多孔材料的结构进行表征,并测定丝素蛋白溶失率,结果表明:纯柞蚕丝素蛋白形成的多孔材料主要以α-螺旋结构为主,其蛋白溶失率达到30%左右;加入1,4-丁二醇后,柞蚕丝素蛋白的聚集态结构逐渐向β-折叠结构转变,材料的溶失率也随之减小。对柞蚕丝素/丁二醇多孔材料的压缩性能测试显示其具有一定的力学性能,当多孔材料压缩30%时,丝素蛋白质量浓度为20 mg/mL的多孔材料的压缩应力可以达到16.5 kPa,且随着丝素蛋白质量浓度的提高,材料的压缩强度逐渐增大。试验结果显示,采用冷冻干燥方法制备的柞蚕丝素/丁二醇多孔支架材料,具有溶失率低、孔径可控、孔隙率高及力学性能好的特点。     

低温α-淀粉酶饲喂肉鸡对生产性能的影响

本试验研究了低温α-淀粉酶饲喂肉鸡对其生产性能的影响。试验选用600只1日龄爱拔益加(AA)肉仔鸡,随机分为4组,对照组饲喂基础日粮,试验1组、2组、3组分别在基础日粮中添加100 g/t、150 g/t和200 g/t低温α-淀粉酶,试验期42 d。试验结果表明:1)日粮添加100 g/t低温α-淀粉酶显著提高了42日龄肉鸡体重、后期平均日增重(P0.05);低温α-淀粉酶降低了前期(P=0.071)、后期(P0.05)和全期(P0.05)料重比。在本试验条件下,肉鸡日粮中添加低温α-淀粉酶可以改善生产性能,添加量以100 g/t为宜。     

α-淀粉酶产生菌的分离筛选与诱变选育

从土样、水样和面样中分离产α-淀粉酶的芽胞杆菌,对3个样品进行淀粉平板分离和革兰氏染色、芽胞染色,选出产α-淀粉酶芽胞杆菌10株(土样4株、面样3株、水样3株).同时测得其水解圈直径与菌落直径的比值,均在1.9～2.6之间,通过产淀粉酶液体培养基发酵产酶,采用比色法测定发酵液中α-淀粉酶活力均在4.8～5.7 g/mL之间.以筛选出产酶活力较高的菌株为出发菌株,进行紫外线诱变选育,经过大量筛选得到优良菌株,在适宜条件下经过发酵其α-淀粉酶活力可达9.6～13.0g/mL,较出发菌株酶活力提高了69.9%～129.5%.     

淀粉酶组合对肉鸡生产性能、肠道形态和屠宰性能的影响

试验旨在研究α-1,4-淀粉酶、普鲁兰酶和糖化酶组合对肉鸡生长性能、肠道形态和屠宰性能的影响。选取1 960羽1日龄健康罗斯308肉仔鸡,随机分为7个处理,每个处理4个重复,每个重复70羽。对照组饲喂基础饲粮,试验1组在基础饲粮中添加1 800 IU/kgα-1,4-淀粉酶,试验2组在基础饲粮中添加180 IU/kg普鲁兰酶,试验3组在基础饲粮中添加135 000 IU/kg糖化酶,试验4组在基础饲粮中添加1 800 IU/kgα-1,4-淀粉酶+135 000 IU/kg糖化酶,试验5组在基础饲粮中添加1 800 IU/kgα-1,4-淀粉酶+180 IU/kg的普鲁兰酶,试验6组在基础饲粮中添加1 800 IU/kgα-1,4-淀粉酶+135 000 IU/kg糖化酶+180 IU/kg普鲁兰酶。结果表明:与对照组相比,试验6组1～21日龄和22～42日龄阶段末重、日增重显著提高(P0.05),22～42日龄阶段试验1、2、3、4、6组耗料增重比(FCR)显著下降(P0.05);试验3组空肠绒毛高度/隐窝深度(VH/CD)显著高于对照组(P0.05)和试验1组(P0.05);试验1、4组回肠VH/CD显著高于对照组(P0.05);各组间屠宰性能差异不显著。试验结果表明,α-1,4-淀粉酶、糖化酶和普鲁兰酶在肉鸡体内存在互作效应,α-1,4-淀粉酶、糖化酶和普鲁兰酶组合添加对肉鸡的促生长效果优于单一类型淀粉酶。     

α-淀粉酶的应用及研究现状

α-淀粉酶分布十分广泛,遍及微生物至高等植物。其国际酶学分类编号为EC．3．2．1．1,作用于淀粉时从淀粉分子的内部随机切开α-1,4糖苷键,生成糊精和还原糖,由于产物的末端残基碳原子构型为α构型,故称α-淀粉酶。现在α-淀粉酶泛指能够从淀粉分子内部随机切开α-1,4糖苷键,起液化作用的一类酶。     

几种饲料添加剂在养殖业中的应用

1酶制剂近年来,我国酶制剂产品不断增加,质量不断提高,目前已开发出α-淀粉酶、β-淀粉酶、蛋白酶、脂肪酶、纤维素酶、果胶酶、β-葡聚糖酶、甘露糖酶、植酸酶等上百个产品。目前最常用的酶制剂饲料添加剂分为两大类,一类是以降解多糖和生物大分子物质为主,主要包括蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、糖化酶、纤维素酶、木聚糖酶、甘露聚糖酶。     

DSC测不同条件下玉米粉糊化特性及建立淀粉糊化度测定方法的探讨

本试验采用差示扫描量热仪(DSC),研究不同升温速率、α-淀粉酶添加量及膨化玉米比例下玉米粉糊化特性变化,并建立运用DSC技术研究淀粉糊化度。结果表明:升温速率对糊化起始温度影响不大,总平均起始温度在66.37℃左右,而峰值温度、结束温度、峰面积、峰高指数及热焓值随升温速率有显著增大;α-淀粉酶添加组与全玉米粉相比,糊化参数均显著增大。α-淀粉酶添加比例升高,起始温度、峰值温度先升高后略有降低,α-淀粉酶添加量比1∶25时,峰面积、热焓值显著增大;膨化玉米比例下降,糊化温度参数波动不大,但峰面积、热焓值极显著的增大。建立热焓值与膨化玉米回归方程,相关性显著(R2=0.9825)。即DSC分析技术可作为研究玉米淀粉糊化度测定的运用。     

耐酸性高温α-淀粉酶的诱变筛选及表达菌株的构建

利用化学诱变剂亚硝酸钠对地衣芽孢杆菌(Bacillus licheniformis)中高温α-淀粉酶基因amy进行体外诱变,通过定向筛选获得一个耐酸性高温α-淀粉酶突变体,其一级序列含有3个突变位点:第288位的亮氨酸突变为天冬氨酸,第289位的组氨酸突变为酪氨酸,第320位的丙氨酸突变为丝氨酸。克隆突变体基因amyM并构建地衣芽孢杆菌表达质粒pGJ103-amyM,将其转入已敲除内源α-淀粉酶基因的地衣芽孢杆菌中获得表达耐酸性高温α-淀粉酶的基因工程菌B.licheniformis AMYM。B.licheniformis AMYM所产新型耐酸性高温α-淀粉酶的最适反应pH为5.2,较野生型降低1.2个单位,且最适反应温度95℃。5 L发酵罐内,B.licheniformis AMYM发酵酶活最高可达19 000 U/m L,具有良好的工业应用前景。