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相似文献
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1.
利用家蚕浓棱病毒感染蚕中肠组织,建立了一种快速、简便、高效的浓棱病毒DNA的制备方法。将感染蚕的中肠组织研磨后,10000g离心10min,上清液经过细菌过滤器过滤,滤液直接用蛋白酶K消化,再用酚/氯仿抽提,即可南效获得家蚕浓核病毒DNA。  相似文献   

2.
植物DNA的抽提是植物分子生物学研究最基本的实验,所提取DNA质量的好坏直接影响着分子操作.以往所用的DNA提取方法大多需要用酚、氯仿和巯基乙醇等试剂,而这些试剂均对人体有毒,必须在通风柜中操作.而且酚、氯仿等试剂对DNA有很强的损伤作用,影响所提DNA的完整性,也影响研究结果.为此,经过长期实践,我们探索出一种快速微量植物DNA抽提方法,该方法不用酚和氯仿等试剂,对人体无毒害作用,步骤少,无需在通风柜中操作,简单易行.所提DNA纯度和得率高,适合酶切和PCR操作.  相似文献   

3.
一种少量提取植物组织DNA的快速方法   总被引:12,自引:0,他引:12  
为了从植物组织中快速提取核酸,从多种DNA提取方法中遴选出2种基本方法。通过优化基本方法的操作步骤、试剂用量与作用时间,建立了一种改良的DNA快速提取方法。在此方法中,用氯仿代替液氮或提取液进行植物组织研磨,之后加入提取液抽提DNA,并用氯仿-异戊醇反复抽提,可显著降低蛋白质含量;通过应用RNA酶可获得纯度较高的DNA。该方法的特点是在室温下即可进行简便操作,快速(提取核酸的过程仅需30min),污染器皿少,实用性强,提取物产量高,纯度好。  相似文献   

4.
DNA提取方法与植物种类的效应比较   总被引:23,自引:1,他引:22  
本文以普通小麦、紫麦、玉米为材料,比较了4种改良法提取材料DNA的效果。结果表明用4种不同的方法提取的DNA其纯度均符合导入外源DNA的质量标准;不同的植物采取不同的提取方法,DNA的提取率不同。植物种类与提取方法互作效应的方差分析表现为极显著。  相似文献   

5.
植物总DNA和核DNA提取及其纯度的研究   总被引:18,自引:1,他引:18  
采用氯仿-异戊醇-RNA酶法及其改良法从小麦、燕麦黄化苗和大豆胚轴中提取植物总DNA和核DNA,结果表明:DNA纯度A260/A280≥1.80,A260/A230≥2,00,DNA片段为50Kb左右,均符合DNA分子育种的要求。  相似文献   

6.
植物DNA快速高效提取方法研究   总被引:15,自引:0,他引:15  
  相似文献   

7.
快速提取烟草DNA的方法   总被引:7,自引:0,他引:7  
利用快速、简易,适于烟草的DNA提取方法。可以获得较纯净、高产率、大分子量的DNA,以满足植物分子育种的要求。  相似文献   

8.
1种快速提取转基因冰草基因组DNA的方法   总被引:1,自引:0,他引:1  
本文介绍了1种改良SDS法提取转基因冰草基因组DNA的方法。该方法具有快捷、高效、经济等特点,所提取的DNA纯度符合分子生物学操作要求,可用于转基因冰草植株的PCR检测及Southern检测等。  相似文献   

9.
利用家蚕浓核病毒感染蚕中肠组织,建立了一种快速、简便、高效的浓核病毒DNA的制备方法.将感染蚕的中肠组织研磨后,10000 g离心10 min,上清液经过细菌过滤器过滤,滤液直接用蛋白酶K消化,再用酚/氯仿抽提,即可高效获得家蚕浓核病毒DNA.  相似文献   

10.
几种提取植物DNA方法的比较   总被引:12,自引:4,他引:8  
以玉米和草的叶片为材料,分别用CTAB,SDS和尿素法提取基因组DNA,通过紫外分光光度法、琼脂糖凝胶电泳、蒽酮比色法对所提DNA的产量、质量和糖含量进行了检测比较,并对鲜样采取了不同的干燥处理。试验结果表明,鲜样和硅胶干燥的叶片提取的DNA无降解或降解很少,45℃烘干样也能提取到大量的高分子DNA,自然干燥样的提取效果因植物材料而异。  相似文献   

11.
In the study,we present a fast,simple and inexpensive protocol for isolating chloroplast and mitochondrial DNA from one rapeseed leaf tissue sample.The chloroplast and mitochondria were separated from ...  相似文献   

12.
Isolation of high-quality mitochondrial DNA(mtDNA) is an important premise for researching molecular mechanisms in cytoplasmic male sterility of cabbage(Brassica oleracea L.var.capitata). An efficient protocol for separation and purification of mitochondria and extraction of mitochondrial DNA(mtDNA) from etiolated tissues of cabbage was developed. We took a method combined mannitol density gradient with differential centrifugation, selected appropriate rotational speed, extended DNase I treating time and changed mitochondria cracking condition. The results showed that the extracted mitochondria in this protocol had complete structure, appeared to ellipsoid and had not been contaminated with other impurities under the Jannus Green B staining. The isolated mitochondrial DNA had high purity and yield through detecting the optical density, nuclear specific primer PCR and agarose gel electrophoresis. The results indicated that mitochondrial DNA extracted by this protocol had high quality and enabled to be used in futher genetic studies.  相似文献   

13.
一种改进的致病疫霉基因组DNA提取方法   总被引:1,自引:0,他引:1  
采用改良的CTAB法对富含多糖的致病疫霉基因组DNA进行提取。所得到的DNA样品经紫外分光光度计和琼脂糖凝胶电泳检测,结果表明:改良的CTAB法能够有效去除多糖杂质的干扰,提取的DNA纯度高,质量好,能满足进一步分析的要求。  相似文献   

14.
[目的]研究植物基因组DNA提取方法,为从植物组织中快速提取基因组DNA提供指导。[方法]在已发表的植物基因组DNA提取方法基础上,对SDS提取法的操作步骤、试剂用量及作用时间进行了优化。[结果]初步建立了一种广泛适用于各类植物及植物多种组织器官的基因组DNA提取方法。所提取的基因组DNA质量较好,满足下一步操作的要求。[结论]该研究结果为植物基因组DNA的快速提取提供了指导方法。  相似文献   

15.
植物种子DNA快速提取新方法   总被引:2,自引:0,他引:2  
本研究提出了一种提取植物种子DNA的快速、简便、有效的新方法。基本过程包括选取饱满植物种子3-5粒并研成细粉.用提取缓冲液提取、离心分离、异丙醇沉淀、TE缓冲液保存得到的DNA。结果表明:所获得的DNA浓度和质量均较高.经扩增与琼脂糖凝胶电泳后得到了非常清晰的DNA谱带,特别适合序列特征扩增区段(Sequence-Characterize Amplified Region,SCAR)检测。  相似文献   

16.
一种简捷的同时提取植物总DNA和总RNA的方法   总被引:6,自引:0,他引:6  
 在热酚法的基础上 ,经多次实践改进 ,得出一种简单、快速的可以从绿色植物组织和种子中同时提取植物总 DNA和总 RNA的方法 ,所提取的总 DNA和总 RNA质量好 ,不降解 ,简化了热酚法的许多步骤 ,简单易行 ,试材少至 6 0 m g,多达 5 g以上都适用 ,是一种简单、方便、快速的提取方法  相似文献   

17.
将尾叶桉(Eucalyptus urophylla)叶片在液氮中研磨成粉,先用含山梨醇、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、牛血清白蛋白、聚乙二醇和亚精胺的提取缓冲液使总核酸沉淀,同时去除了大部分次生代谢物质。然后用山梨醇、月桂酰肌氨酸钠进一步裂解细胞,释放核酸。再用CTAB与核酸结合成复合物溶于高盐溶液。用氯仿/异戊醇除蛋白质后,离心得含总核酸的上清液。运用钙盐分步沉淀法,先在上清液中加入1/10体积的10%氯化钙溶液,使DNA与Ca2+结合成DNA钙盐。向溶液中加入1/5体积的乙醇,使DNA钙盐形成沉淀析出,离心得DNA后,再增大乙醇浓度使RNA钙盐沉淀。得到的DNA和RNA用非变性琼脂糖凝胶进行质量检测,可得完整的RNA和DNA条带。此法经济、快捷,可同时得到DNA和RNA。  相似文献   

18.
景天科植物基因组DNA的高效提取方法   总被引:2,自引:2,他引:0  
采用CTAB法,低浓度的乙醇与NaCl沉淀DNA,再用正丁醇进一步萃取多糖,建立了景天科特种植物的DNA提取方法,获得的DNA经琼脂糖电泳和紫外分析仪检测,浓度和质量均较高。用线粒体nad7基因的特异引物对该法提取的大花红景天DNA进行扩增,获得了长为791bp片段的目标序列。结果表明:该法有利于去除景天科植物材料中多糖、多酚类和RNA等物质,获得的高质量基因组DNA完全可以满足各种分子生物学研究的要求。  相似文献   

19.
王文斗  段英俊  那冬晨 《安徽农业科学》2013,(24):9913-9913,9923
[目的]改进植物总DNA的提取方法.[方法]采用2种研磨方式进行植物DNA提取效果的比较.[结果]2种研磨方式所得DNA质量都较高,可用于后续分子生物学研究;采用研磨缓冲液提取的DNA得率高于液氮研磨.[结论]该方法降低了DNA的提取成本,是一种经济实用的DNA提取方法.  相似文献   

20.
一种快速提取甘薯基因组DNA方案的建立   总被引:3,自引:0,他引:3  
建立了一种小量快速提取甘薯基因组DNA的方法。用该法以甘薯幼叶为实验材料,用小量快速法提取甘薯基因组DNA。提取的DNA经酶切、琼脂糖凝胶电泳检测,结果表明DNA质量较好,所提取的DNA可用于RAPD、AFLP等技术。此方法具有提取速度快、利于规模化提取、DNA质量好和经济实用等优点,为甘薯及其它相关植物基因组DNA的提取提供了一种快速、简便的途径。  相似文献   

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