家兔胚源性特异蛋白—1的分离纯化及其理化性质

经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５和ＰＡＧＥ从家兔早孕期子宫液中分离纯化了一种胚源性特异蛋白质。分析表明，该蛋白质分子量为５３８００，ＰＩ为５．８，Ｎ－末端为赖氨酸，分子中不含糖、脂成分，但富含异高氨酸、亮氨酸，缺乏半胱氨酸。     

家兔胚源性特异蛋白－1的分离纯化及其理化性质

经ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５和PＡＧＥ从家兔早孕期子宫液中分离纯化了一种胚源性特异蛋白质。分析表明，该蛋白质分子量为５３８００，ｐＩ为５．８，Ｎ－末端为赖氨酸，分子中不含糖、脂成分，但富含异亮氨酸、亮氨酸，缺乏半胱氨酸。     

乳蛋白源性生物活性肽及其潜在的生理学意义

近年来,随着多种生物活性因子在母乳中被相继发现,人们对母乳的认识已不再仅仅局限于单纯性的营养作用和抗感染免疫等方面,而逐渐发展到对母乳信息传递、代谢调节等新的研究领域。母乳中除含丰富的蛋白质等多种营养成分之外,还同时含有多种生物活性因子,如EGF、IGF、TNF等(国外畜牧科技1997 24(4)—作者注),这些生物活性多肽,由来自于母体的血液和乳腺上皮细胞合成,通过母乳传递     

分泌IgA和IgG的浆细胞在家兔鼻腔中的分布特征

分泌IgA和IgG的浆细胞是黏膜免疫系统中两种重要的效应细胞。本研究旨在探究分泌IgA和IgG的浆细胞在家兔鼻腔中的分布特征。以20只健康成年家兔为研究对象,根据硬腭褶皱和牙齿特征,依次将家兔鼻腔分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ 5段,运用组织学、免疫组织化学、图像分析及统计学方法,对分泌IgA和IgG的浆细胞在家兔鼻腔中的分布特征进行了详细的研究。免疫组化结果显示：分泌IgA和IgG的浆细胞在家兔鼻腔每段都有分布,主要弥散分布于鼻黏膜固有层中;其形态呈圆形或卵圆形,核一般位于细胞一侧,胞质丰富呈阳性反应。统计结果显示：分泌IgA和IgG的浆细胞在鼻腔不同段的分布密度由高到低依次是：鼻腔第Ⅳ段、第Ⅴ段、第Ⅲ段、第Ⅱ段、第Ⅰ段。其中分泌IgA的浆细胞在鼻腔Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ段的分布密度显著高于鼻腔Ⅰ、Ⅱ段（P<0.05）,在上颌鼻甲、鼻中隔和筛鼻甲的分布密度显著高于上鼻甲（P<0.05）;与分泌IgA的浆细胞相比,分泌IgG的浆细胞除鼻腔第Ⅳ段的分布密度显著高于鼻腔Ⅲ、Ⅴ段（P<0.05）外,其分布变化趋势基本与分泌IgA的浆细胞类似。结果证明,分泌IgA和IgG的浆细胞弥散分布于家兔每段鼻腔的鼻黏膜固有层中,有利于SIgA和IgG分子在整个鼻黏膜形成完整的保护屏障;分泌IgA和IgG的浆细胞主要分布在家兔鼻腔Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ段及上颌鼻甲、筛鼻甲和鼻中隔,提示这些区域是家兔鼻腔免疫的重要效应部位。本研究为家兔呼吸系统疾病的预防及进一步探讨家兔鼻腔免疫应答的机制提供重要的理论依据。     

旋毛虫肌幼虫分泌性蛋白P49基因的克隆与表达

通过设计、合成引物，以旋毛虫RNA为模板，用RT—PCR法扩增出旋毛虫P49序列，并进行了序列测定。将P49基因亚克隆至表达载体pET—28b中，转化大肠杆菌BL21感受态细胞，经IPTG诱导表达，作SDS—PAGE及Western blot分析。结果表明，PCR法扩增出P49序列，其大小约为960bp，将构建的重组质粒pGEM—P49进行序列测定表明其与Genbank中的P49序列具有高度的同源性。成功构建了重组表达载体pET—P49；SDS—PAGR及Western blot分析表明，表达产物分子量约为38kDa，约占菌体总蛋白的7％左右，且能被感染旋毛虫猪阳性血清所识别。     

动物源性蛋白在配合饲料中的开发利用研究

蛋白质饲料是家畜家禽的主要营养源之一,蛋白质质量好坏对畜禽机体正常生长以及繁殖有着重要影响。氨基酸含量均衡的动物源性蛋白质作为配合饲料中的蛋白源,可为畜禽提供生长与繁殖所需的氨基酸。目前,配合饲料中开发使用的动物源性蛋白质有鱼粉、肉骨粉、血粉、羽毛粉等。但动物源性蛋白质远不能满足饲料工业发展的需求。研究动物源性蛋白质的开发利用,拓展动物源性蛋白质饲料资源,对满足畜禽业发展需要,促进配合饲料工业发展具有重要意义。     

对虾饲料蛋白源开发的研究进展

近年来,鱼粉供应与水产饲料需求量之间的矛盾愈发尖锐,开发新型蛋白源替代鱼粉已成为水产行业亟须解决的问题。对虾作为重要的养殖品种,其饲料中鱼粉用量占比较大,高企的鱼粉价格给对虾配合饲料成本控制带来较大挑战。研究开发高质量鱼粉替代物对于对虾养殖业的可持续发展具有深远意义。本研究以目前研究热点较高的动物性蛋白源、植物性蛋白源和昆虫蛋白源作为综述对象,从多角度分析对虾饲料蛋白源开发的研究进展。     

家兔不同组织抗菌蛋白活性及稳定性检测

从家兔8种不同组织(包括肝脏,肾脏,心脏,肺,圆小囊,蚓突,脾脏和肾上腺)提取了具有抗菌活性的蛋白粗提物,并进行了抗菌活性和稳定性检测。试验表明,家兔不同组织抗菌蛋白粗提物对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌均有明显的抑菌活性,其中脾脏抗菌蛋白粗提物表现出最强的抑菌活性,且具有良好的耐高温和耐强酸强碱特性。     

生物降解植物源性蛋白用于断奶乳猪的初探试验

试验选取杜长大25日龄断奶仔猪88头,据体重、胎次相同或相近将其分为2组.分别喂以代乳粉和鱼粉为主要蛋白源的断奶料(对照组)和以生物降解植物源性蛋白-优补健为主要蛋白源的断奶料(试验组),经过14d的饲喂试验,结果试验组平均日采食量提高6.6%.平均日增重比对照组提高8.4%,料肉比比对照组降低1.6%,腹泻率下降79.1%,经spss8.0软件统计分析其差异显著.且试验组猪每kg增重成本比对照组低0.25元,本试验结果表明:断奶仔猪日粮用生物降解植物源性蛋白-优补健优于使用代乳粉和鱼粉作为主要蛋白源,经济效益明显.     

兔胚胎的一些与分离胚胎干细胞有关的生物学特征

为获得具有发育全能性的胚胎干细胞（ＥＳ细胞）,对３日龄、３．５日龄和４日龄家兔胚胎的形态结构和免疫组化特征进行了观察。家兔胚胎的外围,不仅有透明带,还包有一层很厚的胶膜。３日龄兔胚为桑椹胚;３．５日龄胚胎已出现囊胚腔,囊胚腔较小,扩增内细胞团（ＩＣＭ）占据囊腔的１／２～２／３;４日龄为囊胚,囊腔扩大,ＩＣＭ与囊胚腔的体积比值缩小。桑椹胚的卵裂球和３．５日龄、４日龄胚胎的ＩＣＭ,以碱性磷酸酶染色和胚胎阶段特异性细胞表面抗原－１（ＳＳＥＡ－１）免疫荧光标记均呈强阳性,说明它们是由未分化的细胞构成。因此,从保证全能性的角度考虑,３日龄、３．５日龄和４日龄的家兔胚胎,均可用于ＥＳ细胞的分离。     

兔胚胎培养液的血小板活化因子效应

将兔２细胞期或８～１６细胞期胚胎培养２４ｈ后的胚胎培养液分别注入去脾兔或去脾小鼠体内。注射后１２０ｍｉｎ内，均出现外周血中血小板数的明显减少。此现象是由于胚胎释放的某种活性物质引起的，该活性物质可能是血小板活化因子，经冷冻保存不丧失生物活性，且不存在种属差异     

小肽转运载体1的生物学特性及其功能

小肽转运载体1(PepT1)是H+/肽偶联的转运载体。该载体通过利用肠腔到肠细胞的质子梯度来转运二肽和三肽。PepT1对游离氨基酸、多肽在动物肠道内的转运调控具有重要作用。本文综述了PepT1的分类、生物学特征及功能,并探讨了影响PepT1活性调控的因素。     

兔胚胎体外培养液研究进展

兔胚胎体外培养研究受到广泛重视。传统的兔胚胎体外培养方法主要采用基础培养液 ,添加各种成分 ,如血清、生长因子、酶及其他营养成分促进胚胎发育。近年来 ,国内外学者对氨基酸、牛磺酸和亚牛磺酸等能源物质 ,胰岛素及胰岛素样因子 1、碱性成纤维细胞生长因子、血小板活化因子、血小板衍生生长因子和白血病抑制因子等多种生长因子 ,以及抗氧化剂如EDTA、过氧化氢酶、牛磺酸和超氧化物歧化酶等物质促进兔早期胚胎发育的作用进行了研究。此外 ,采用联合培养体系及体细胞条件培养液 ,模拟体内生长环境 ,来提供兔胚胎发育所需的物质条件也正成为研究热点     

1株植物乳杆菌的生物学特性及体外抑菌活性研究

【目的】试验旨在研究植物乳杆菌GX20200417-1菌株的生物学特性及体外抑菌活性,探讨其在生产中应用的可能性。【方法】将植物乳杆菌GX20200417-1菌株接种至不同pH和含不同浓度胆盐的PBS,以及人工胃肠液中,使用菌落计数分析其对酸、胆盐和人工胃肠液的耐受性。使用牛津杯法检测GX20200417-1菌株对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌及沙门氏菌的抑菌能力;通过与霉菌毒素共培养后使用ELISA方法研究GX20200417-1菌株对霉菌毒素的降解能力,并饲喂小鼠进行安全性试验。【结果】植物乳杆菌GX20200417-1菌株能够耐受pH 2.0及0.3%胆盐,并在人工胃肠液中有至少1×10⁴ CFU/mL的活菌数;GX20200417-1菌株发酵上清液对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌均有明显的抑制作用,对玉米赤霉素及黄曲霉毒素均有降解作用,但对呕吐毒素无降解作用;灌服GX20200417-1菌株后小鼠安全、无毒副作用。【结论】植物乳杆菌GX20200417-1菌株具有优良的益生特性,在畜禽生产中有一定的开发潜力。     

抗猫泛白细胞减少症病毒单克隆抗体的制备及其生物学特性鉴定

用 PEG60 0 0沉淀和蔗糖密度梯度离心从细胞培养物中纯化猫泛白细胞减少症病毒 ( FPV) ,以纯化FPV免疫 BALB/c小鼠 ,运用淋巴细胞杂交瘤技术 ,获得了 4株抗 FPV的特异性单克隆抗体 ( Mc Ab)。其腹水 Mc Ab的 ELISA效价在 1 0 - 4～ 1 0 - 5之间 ,其中 1株具有血凝抑制能力。经 ELISA阻断试验及 ELISA交叉反应性试验测定 ,这 4株 Mc Ab可与 FPV、犬细小病毒 ( CPV)和水貂肠炎病毒 ( MEV)呈特异性反应 ,因此可作为检测 FPV、CPV和 MEV共同抗原的通用试剂     

H5N1亚型禽流感病毒鸡胚分离株蚀斑克隆及生物学特性比较

建立了H5N1亚型禽流感病毒（AIV）蚀斑克隆方法，用不加中性红的营养琼脂为覆盖层，在倒置显微镜下挑斑，对3株H5N1亚型AIV鸡胚分离毒株进行了蚀斑克隆纯化，从同一鸡胚分离毒株中纯化得到了蚀斑大小和形态均存在显著差异的毒株，共获得13株蚀斑克隆纯化株。研究结果表明，当小牛血清浓度为2%时，加入终浓度50 μg/ml的胰酶可明显促进和刺激蚀斑的形成，蚀斑的直径和PFU/ml均有显著的增加。通过TCID₅₀、EID₅₀和LD₅₀测定发现，来自同一鸡胚分离株的不同蚀斑克隆纯化株中，蚀斑大、毒力强的克隆毒株占优势，而且蚀斑较大的，其毒力也较强。对得到的13株蚀斑克隆毒株的全基因组各片段序列分析表明，蚀斑克隆纯化株在HA蛋白裂解位点附近的氨基酸序列均符合高致病性通报性禽流感病毒的分子特征。     

猪圆环病毒2b型Cap蛋白多克隆抗体制备及其生物学特性分析

为了使猪圆环病毒2b型(PCV2b)Cap蛋白在猪圆环病毒病等疾病的诊断和防制方面取得更有效的应用,本试验将编码PCV2b Cap蛋白的ORF2基因克隆到原核表达载体pET-32a(+)中,并构建pET-32a-ORF2重组质粒,重组质粒转化大肠杆菌BL21受体菌后,通过IPTG诱导表达重组蛋白,将重组蛋白用镍柱进行纯化并免疫大白兔,制备兔抗PCV2b Cap蛋白的多克隆抗体。利用ELISA、Western blotting、间接免疫荧光及病毒交叉反应等试验对制备的多克隆抗体进行生物学特性检测。ELISA检测结果显示,该抗体效价可达到1:2¹⁶;Western blotting检测结果显示,该多克隆抗体可与PCV2b产生特异性的反应条带,说明其具有较好的反应活性;间接免疫荧光试验结果显示,该多克隆抗体能识别感染PK-15细胞中的PCV2b,说明该多克隆抗体具有鉴别诊断PCV2b的能力;病毒交叉试验结果显示,该多克隆抗体能与PCV2b反应,而不与猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪传染性胃肠炎病毒(TGEV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、猪轮状病毒(PRoV)、猪伪狂犬病病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)等猪源病毒发生交叉反应,表明该多克隆抗体具有高度特异性。本试验制备的抗PCV2b Cap蛋白多克隆抗体为PCV2b病原特性研究及该病的临床检测奠定基础。     

苜蓿皂甙及其生物活性

大量研究结果证明，苜蓿皂甙主要生物活性是：影响胆固醇的代谢，驱原虫。在动物养殖业中可作为新型绿色饲料添加剂。作者对苜蓿皂甙生物活性及应用进行综述。