文蛤蛋白酶解条件的优化及酶解产物体外抗氧化活性的分析

为了制备抗氧化活性多肽,利用风味蛋白酶和木瓜蛋白酶双酶复合的方式水解文蛤蛋白,在单因素实验结果的基础上,选取液料比、酶解温度和酶解pH为影响因子,应用Box-Benhnken中心组合设计原理进行三因素三水平实验设计,以文蛤蛋白的水解度(DH%)为响应值,运用响应面(RSM)法对双酶复合水解条件进行优化,并分析了酶解产物的体外抗氧化活性。结果表明：双酶复合酶解的最优酶解条件为水解时间4 h,酶添加量3%,双酶复合比（风味蛋白酶:木瓜蛋白酶）2:1,液固比3.25:1,温度51℃,pH 6.9,在此条件下文蛤蛋白水解度为36.11%,酶解产物清除DPPH和?OH自由基的IC50值分别为2.61、3.47 mg/mL,表现出较强的体外抗氧化活性,因此,可以利用优化后的酶解条件水解文蛤蛋白制备抗氧化多肽。     

双酶法对大豆浓缩蛋白限制性酶解及其功能性质研究

为改善大豆浓缩蛋白（SPC）的功能性,使其更好地应用于各项领域,利用Alcalase和Flavourzyme 2种蛋白酶对SPC进行酶解。结果发现,在温度60℃,Alcalase酶活力1000 U/g,pH值8.0的条件下,持续酶解50 min,得到水解度3.02%的一次酶解产物,并在此酶解产物的基础上用Flavourzyme控制酶活力100 U/g,温度50℃和pH值6.0的条件下,酶解1 h,得到氨基氮含量为0.036%的二次酶解产物。通过SDS-PAGE分析发现,Alcalase酶解之后, SPC的α亚基和β亚基都基本被酶解,α'亚基未全部酶解; Flavourzyme酶解后,α'亚基全部被酶解,并且2种酶修饰产物集中在31.0 kDa以下。比较2种酶解产物与未被酶解产品的功能性（溶解性、保水性、吸油性和乳化性）变化,结果发现经双酶酶解后SPC的溶解性有很大程度的提高,保水率、吸油率和乳化活性均有一定程度的提高。     

海马抗氧化活性肽制备工艺研究

旨在建立海马寡肽的制备工艺,探究寡肽的抗氧化活性。采用酶解法将海马原料制备成海马蛋白酶解肽,将游离氨基酸含量、DPPH·清除率及还原力作为考核指标,在获得制备海马酶解寡肽的最佳蛋白酶的基础上,选取酶添加量、pH、酶解温度及时间为因素,通过单因素和正交试验设计制备海马蛋白酶解肽,对其酶解工艺进行优化。最终获得海马抗氧化活性肽的最佳工艺条件为:风味蛋白酶添加量6000 U/g,酶解温度45℃,酶解时间9 h;在此工艺条件下,酶解产物的游离氨基酸含量为4.198 mg/m L,DPPH·清除率为92.758%,还原力为1.091。试验获得制备海马抗氧化活性肽最优酶解工艺,为进一步研发成保健食品提供坚实的基础。     

复合酶法制备玉米活性肽及其功能特性的研究

采用碱性蛋白酶和胃蛋白酶制备玉米活性肽,以水解度为指标,分别对酶解温度、酶解时间、加酶量及pH值4个因素进行单因素试验及正交试验分析,确定双酶水解的最佳酶解条件。结果表明,碱性蛋白酶水解最佳条件为酶解温度60℃,酶解时间为1.5 h,加酶量为0.128 g,pH值为11,水解度为13.63%;胃蛋白酶水解最佳条件为酶解温度60℃,酶解时间为1.5 h,加酶量为0.008 g,pH值为2.1,水解度为22.12%;双酶水解后水解度可达29.88%;玉米肽对自由基清除率达25.62%。     

超声辅助酶解茶渣蛋白制备抗氧化活性肽

利用食源蛋白制备具有抗氧化能力的天然活性肽是当前的研究热点。为了优化超声辅助酶解茶渣蛋白制备抗氧化活性肽工艺,本研究以茶渣为原料,以酶解液DPPH清除率为指标,在单因素逐级优化基础上,选定酶解pH值、温度、时间、加酶量进行4因素3水平正交试验设计和分析。结果表明,碱性蛋白酶较好,在p H值为7.5、温度50℃、时间20 min、加酶量为400 U/g、超声功率为105 W的优化条件下酶解,酶解液对DPPH清除率达为85.36%,比对照活性提高了为31.87%。可见,在本试验条件下低功率超声能有效提高碱性蛋白酶酶解茶渣蛋白效率,增加抗氧化活性肽得率,为开辟茶渣高值化利用的新途径提供实验依据。     

酶法水解牦牛血制备蛋白多肽粉的技术研究

摘 要：[目的][方法]利用中性蛋白酶将牦牛血红蛋白水解,探讨各因素对中性蛋白酶水解牦牛血红蛋白的影响以及水解度的关系,并对酶解液进行了活性炭脱色效果的研究。通过单因素和正交试验（L16(45)）,[结果]确定了中性蛋白酶水解血红蛋白的适宜条件为 pH 7.0,温度 45℃,酶底物浓度比 4000 U/g 蛋白质液,底物浓度 5%,酶解时间 7 h。通过正交试验,确定酶解液的最佳脱色工艺条件为活性炭用量 4%,脱色温度 75℃,pH 5.0,脱色时间 60 min。     

利用抑菌率对羊骨酶解产物的制备中最佳用酶的筛选

利用碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶、动物蛋白酶、酸性蛋白酶和木瓜蛋白酶分别在各自最适条件下对羊骨进行酶解,以大肠杆菌、枯草杆菌和藤黄球菌为供试菌种,以抑菌性为指标,对7种酶作用下所得酶解产物的抑菌性进行评定,以选出水解最佳用酶。结果表明,在各自最适条件下,胃蛋白酶酶解产物(pH值为3.0,37℃,底物质量浓度0.2kg/L,酶添加浓度2000U/g,作用时间6h)的抑菌效果最佳。     

复合酶解脱盐咸蛋清的工艺优化

为了提高脱盐咸蛋清蛋白的酶解效率,采用胰蛋白酶、复合蛋白酶与风味蛋白酶对脱盐咸蛋清蛋白进行复合酶酶解。结果表明:在加酶量(胰蛋白酶∶复合蛋白酶∶风味蛋白酶=1∶2∶2)0.04%,料液比1∶3(g/m L)、pH值7.5、酶解温度50℃条件下酶解4 h,可获得水解液清亮、无苦味、具有较好的鸭蛋蛋清风味特征、感官品质评分88分、水解度为47.2%的蛋清酶解液。     

文蛤肉酶法水解条件的优化及最适蛋白酶的选择

以文蛤肉为原料,探讨了胰蛋白酶的加酶量、水解时间、水解温度、pH值及液固比对文蛤肉水解液总氨基氮含量和水解得率的影响规律,确定文蛤肉酶解的最优条件为酶解温度50℃,加酶量4000U/g原料,pH值为（8．00±0．05）,水解时间5h,液固比3：1。再以文蛤肉水解液的水解度、水解得率及风味评分值为指标对该酶解优化条件下获得的产品与精制中性蛋白酶水解优化条件下获得的产品进行比较。结果表明,胰蛋白酶为酶法水解文蛤肉最适宜的蛋白酶,其酶解所得文蛤肉水解液的水解度、水解得率及风味评分值分别为42．44％、82．86％及205．92。     

脱钙处理对鱼鳞蛋白酶解效果及其持钙能力的影响

研究了盐酸脱钙对鱼鳞蛋白酶解效果及其酶解产物持钙活性的影响。结果表明,浓度0.4 mol/L的HCl溶液,鱼鳞粉与盐酸的料液比为1∶30,脱钙时间30 min可显著提高鱼鳞蛋白溶出率与胶原蛋白溶出率,脱钙率达87.90%;采用胰蛋白酶、胃蛋白酶与风味蛋白酶分步酶解,酶解产物的持钙能力达13.93 mg(钙)/g(蛋白),是胰蛋白酶酶解产物持钙能力的5.32倍(p<0.01)。当酶解产物蛋白质量浓度为2 mg/mL时,酶解产物与钙离子螯合的最佳条件为:螯合反应温度50℃,pH值6.0,蛋白与CaCl2质量比为6∶1,螯合反应时间40 min。     

林蛙油酶解条件优化及多肽口服液的研制

对林蛙油酶解条件进行优化,筛选适合实际生产所用的蛋白酶,分析酶解产物分子量,开发一种多肽口服液产品。结果表明,中性蛋白酶和风味蛋白酶以1∶1的比例复合酶解林蛙油,水解度最高,酶解条件为温度50℃,pH值7,加酶量4%,料水比1∶100,酶解时间4 h;通过基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱仪分析表明,酶解液主要分子量分布在1 000~3 000 Da与5 000~7 000 Da;开发的多肽口服液性状稳定、风味良好。     

米糠蛋白酶酶解条件的优化研究

以膨化米糠为原料,采用蛋白酶进行酶解,研究单因素下加酶量、时间、温度和pH值对米糠蛋白的酶解效果,并对其条件进行优化,以可溶性蛋白为指标,通过正交试验确定最佳酶解条件:加酶量500IU/g,酶解时间为5h,酶解温度40℃,pH值为5.0,可溶性蛋白含量可达35.9%。     

马鲛鱼鱼头蛋白酶解工艺研究

马鲛鱼是闽南特色传统食品崇武鱼卷制作的主要原料,加工过程中会产生鱼头等大量高蛋白副产物,但其加工利用率低。以马鲛鱼鱼头为材料,比较不同蛋白酶类、料液比、酶的添加量、p H值、酶解时间和酶解温度等对马鲛鱼鱼头酶解度的影响。在此基础上,利用L_9(3~4)正交试验设计优化酶解工艺。结果表明,采用风味蛋白酶的酶解效果最佳;该酶最佳酶解工艺为料液比1∶2,酶添加量2 000 U/g,pH值7,酶解时间4 h,酶解温度50℃。在最佳酶解工艺条件下,马鲛鱼鱼头的酶解度为16.20%±0.42%。     

双酶法对大豆浓缩蛋白限制性酶解及其功能性质研究

为改善大豆浓缩蛋白(SPC)的功能性,使其更好地应用于各项领域,利用Alcalase和Flavourzyme 2种蛋白酶对SPC进行酶解。结果发现,在温度60℃,Alcalase酶活力1 000 U/g,p H值8.0的条件下,持续酶解50 min,得到水解度3.02%的一次酶解产物,并在此酶解产物的基础上用Flavourzyme控制酶活力100 U/g,温度50℃和p H值6.0的条件下,酶解1 h,得到氨基氮含量为0.036%的二次酶解产物。通过SDS-PAGE分析发现,Alcalase酶解之后,SPC的α亚基和β亚基都基本被酶解,α'亚基未全部酶解;Flavourzyme酶解后,α'亚基全部被酶解,并且2种酶修饰产物集中在31.0 k Da以下。比较2种酶解产物与未被酶解产品的功能性(溶解性、保水性、吸油性和乳化性)变化,结果发现经双酶酶解后SPC的溶解性有很大程度的提高,保水率、吸油率和乳化活性均有一定程度的提高。     

制备乳清抗氧化肽的水解条件优化

采用碱性蛋白酶、中性蛋白酶和胰蛋白酶3种酶对乳清蛋白进行酶水解试验,研究了不同酶解产物、水解时间、水解温度和pH值下的乳清抗氧化肽的水解度和TBARS值,确定了制备乳清抗氧化肽的最佳水解参数。结果表明,乳清蛋白水解物具有抗氧化活性,最佳复配条件是碱性蛋白酶的水解时间5 h,最佳水解温度为65℃,pH值8.5;胰蛋白酶的水解时间1 h,最佳水解温度为45℃,pH值8.0。当水解度达到32.28%时,乳清肽具有较强的抗氧化能力。     

黄粉虫蛋白质酶法提取的研究

黄粉虫是一种蛋白质含量丰富的优质昆虫蛋白资源,其蛋白不仅氨基酸种类齐全,而且具有独特的香味和鲜味。文章对酶法提取解黄粉虫蛋白进行了研究,结果显示复合蛋白酶与风味蛋白酶两者结合使用提取效果最好,其提取最佳条件先为复合蛋白酶1．4％、pH值7．5、酶解温度55℃、液固比（mL／g）6：1、提取时间30min,后为风味蛋白酶5％、pH值7．0、55℃、液固比（mL／g）6：1、提取时间8h。     

核桃粕组成测定及抗氧化多肽工艺优化的研究

核桃粕是核桃榨油后的产物,其蛋白质含量丰富,营养价值高。以经过低温压榨后的核桃粕为原料,首先对核桃粕的基本组成进行测定,然后重点对核桃粕酶解的酶种类进行筛选以及对制备核桃多肽的最佳工艺参数进行研究。结果表明,复合酶解核桃粕的最佳酶解比例为中性蛋白酶与植物蛋白酶按2∶1复配,其最佳酶解条件为加酶量8 000 U/g,pH值7.5,温度50℃,酶解时间3 h。在该试验条件下,多肽得率为85.87%,总抗氧化能力为91.73 U/mL。     

响应面法优化菜籽蛋白酶解条件

采用碱性蛋白酶水解菜籽蛋白,制备具有生物学功能特性的活性肽。选取pH值、温度和底物质量分数3个因素进行中心组合试验设计,利用响应面法对菜籽蛋白酶解条件进行优化研究。通过minitab15软件对水解度的分析表明,在酶解pH值9.5,温度50℃,底物质量分数为4%时,酶解产物水解度最高。该结果与实测值相符。     

酶法水解脱脂乳及其对嗜热链球菌增殖效果研究

脱脂奶粉含有丰富的营养成分,且具有许多功能特性。采用酶解脱脂乳乳蛋白的方法对其作用进行分析,以期选用合适的中性蛋白酶对其进行水解。通过阐述乳蛋白酶解原理及工艺,对加酶量、起始pH值、反应温度、酶解时间进行单因素试验,并在此基础上进行正交试验,得到酶解最佳的工艺为起始pH值6.5,加酶量180 U/mL,酶解温度55℃,酶解时间2 h。在此条件下,酶解产物促嗜热链球菌2017-a增殖效果最佳。     

响应面优化碱性蛋白酶酶解米糠球蛋白工艺的研究

以米糠为原料,参照Osborne连续提取法获得米糠球蛋白,为改善球蛋白的溶解性,用碱性蛋白酶进行酶解,并对工艺进行优化。以溶出率为评价指标,底物质量分数、酶解pH值、酶解温度和酶解时间为变量,通过Box-Behnken中心组合设计试验和响应面分析,得出最佳酶解条件为酶浓度20 000 U/g,底物质量分数4.42%,酶解pH值8.19,酶解温度52.08℃和酶解时间2.15 h;在此条件下获得米糠球蛋白水解产物的溶出率高达89.64%,比原米糠球蛋白的NSI值高出64.35%。