自然发酵泡菜汁中植物乳杆菌的分离鉴定与体外益生特性研究

利用MRS固体培养基从自然发酵的泡菜汁中分离到1株优势乳酸菌,将其命名为菌株R1,经16S rRNA基因序列分析,并结合生理生化特性和糖发酵试验将其鉴定为植物乳杆菌(Lactobacillus plantarum)。菌株R1具有很强的产酸能力,24 h内可使MRS液体培养基p H从6.14降为3.59。菌株R1的发酵上清液对痢疾志贺氏菌、金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、鸡肠炎沙门氏菌、大肠埃希氏菌均有很好的抑制作用。体外益生试验表明,菌株R1能耐受0.3%的胆盐、p H 3.0的酸度以及60℃、30 min的热处理,对人工胃液和人工肠液也有很好的耐受性。菌株R1对头孢类和青霉素类抗生素较敏感,对诺氟沙星、卡那霉素、链霉素等抗生素不敏感。     

鸡消化道乳杆菌的分离及鉴定

用ＭＲＳ培养对４０日龄ＳＰＦ鸡及健康鸡的嗉囊,十二指肠,空肠,盲肠中的乳酸菌进行分离和计数。经过分离和纯化获得６种乳酸菌,一株为球菌,五株为杆菌,分别命名为ＣＸ００１,ＣＸ００２,ＣＸ００３,ＣＸ００４,ＣＸ００５和ＣＸ００６。根据生长速度,耐酸耐胆汁对肠膜粘附试验,我们筛选出两种乳杆蓖ＣＸ００４和ＣＸ００６,作为益生素候选菌种。     

鸡消化道乳杆菌的分离及鉴定

用ＭＲＳ 培养基对４０ 日龄ＳＰＦ 鸡及健康鸡的嗉囊、十二指肠、空肠、盲肠中的乳酸菌进行分离和计数。经过分离和纯化获得６ 种乳酸菌, 一株为球菌, 五株为杆菌, 分别命名为ＣＸ００１ 、ＣＸ００２ 、ＣＸ００３ 、ＣＸ００４ 、ＣＸ００５ 和ＣＸ００６ 。根据生长速度、耐酸耐胆汁对肠粘膜粘附试验,我们筛选出两种乳杆菌ＣＸ００４ 和ＣＸ００６ ,作为益生素候选菌种。经生化试验、Ｇ＋ Ｃｍｏ１ ％ 测定,初步鉴定ＣＸ００４ 为短乳杆菌,但ＣＸ００６ 的种类还不能确定。结果表明这两种乳杆菌可作为禽用益生素的优选菌株。     

鸡源卷曲乳杆菌Y68的分离鉴定及其体外益生特性评估

本试验旨在筛选研制畜禽微生态制剂——乳酸菌,探究卷曲乳杆菌Y68的益生特性。通过抑菌能力筛查、生长曲线测定、产酸性能、药敏试验、体外模拟胃肠道条件耐受试验、自凝集试验以及疏水性试验,评估了其益生特性。结果表明：卷曲乳杆菌Y68对鸡白痢沙门氏菌ATCC19945、金黄色葡萄球菌USA300均有较强的抑制作用,抑菌圈直径分别为（21.64±0.31） mm、（15.13±0.23） mm;卷曲乳杆菌Y68对数生长期为6～24 h;经培养48 h后菌液pH稳定在3.89;卷曲乳杆菌Y68对红霉素、青霉素、头孢菌素、氯霉素、万古霉素、克林霉素较为敏感,对诺氟沙星、氧氟沙星、四环素、庆大霉素、呋喃唑酮表现出耐药;卷曲乳杆菌Y68在pH 2.0环境下孵育3 h存活率为52.61%,在人工胃液环境下3 h存活率为65.92%,在人工肠液环境下10 h时存活率仍为86.23%,能够耐受0.3%的胆盐环境;卷曲乳杆菌Y68自聚集率在2、24 h时分别为（29.71±0.40）%、（97.23±0.76）%,疏水率为（89.59±0.63）%。综上所述,卷曲乳杆菌Y68具有较强的产酸能力、抑菌能力,对模拟...     

1株马乳酒样乳杆菌的分离鉴定及益生特性研究

【目的】从新疆克州地区传统发酵马奶酒中分离既有抗菌活性又有抗氧化活性的乳酸菌,继而获得能用于微生态制剂开发的优良菌株。【方法】采用MRS固体培养基进行乳酸菌分离培养,筛选优势菌株,观察菌体形态学特征,并通过16S rRNA基因序列分析进行分子鉴定。研究菌株的生长曲线、产酸能力、耐酸能力、耐胆盐能力和抑菌能力,通过检测菌株耐H₂O₂能力及菌株发酵液、无细胞提取物、菌体混悬液的DPPH自由基清除率、超氧阴离子清除能力、羟自由基清除能力等相关指标来评价菌株体外抗氧化功能,并通过药敏试验和小鼠饲喂试验评估菌株的安全性。【结果】试验筛选出1株菌落形态圆形、白色半透明、边缘不整齐的革兰氏阳性菌,将其命名为JK-24,经16S rRNA克隆测序鉴定该菌株为马乳酒样乳杆菌(Lactobacillus kefiranofaciens)。在6～18 h,D_{600 nm}值增长速度较快,进入对数生长期,JK-24发酵液pH下降明显;JK-24在pH 2.5～6.5范围内均能生长,能耐受0.3%胆盐;发酵液对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌圈直径分...     

鸡源益生嗜酸乳杆菌的分离及生物特性初报

从10日龄健康小鸡的小肠中成功分离筛选出有抑菌作用的嗜酸乳杆菌M16。颉颃病原菌试验表明,该菌株的代谢产物在体外具有抑制杀灭鸡大肠埃希氏菌O78、鸡白痢沙门氏菌O79和金黄色葡萄球菌C58000的作用,是微生态制剂可选用的优良菌株。     

一株鸡源植物乳杆菌益生性能的评价

为评价一株来源于鸡肠道内容物的植物乳杆菌DK106的益生性能,试验测定了该菌株的生长特点、抗逆性、药物敏感性、抗氧化能力和黏附性等。结果显示,该菌株在14?h进入生长稳定期|能耐受0.3%胆盐浓度|对氟苯尼考、头孢噻肟、头孢曲松和林可霉素敏感|DPPH自由基清除率高达90.79%|该菌株经二甲苯处理30?min后,其表面疏水率高达97.40%|自凝聚率在第5小时可达68.80%|与大肠杆菌、沙门菌、金黄色葡萄球菌的第2小时共凝聚率分别达到20.59%、16.37%和55.32%。综上所述,植物乳杆菌DK106具有良好的益生性能,可作为家禽微生物饲料添加剂的菌株来源。[关键词]鸡|植物乳杆菌|益生性能     

四株猪源乳杆菌的分离鉴定及生物学特性研究

本试验旨在筛选优质猪源乳杆菌,为养猪生产过程中微生态制剂的开发奠定基础。通过16S r RNA分析鉴定,本试验从健康成年猪粪中成功分离出四株猪源乳杆菌,并对这四株菌的生长性能、生理生化特性、耐酸、耐高温、耐胆盐和耐药性进行了综合测试。结果表明：ZLgz1227具有最优的综合性能,其耐胆盐性能最强,过胃存活率分别高于其他三种菌株110.56%、44.3%、4.98%。研究表明这四株菌都有制成益生菌制剂的潜能,为实际生产提供一些后备益生菌菌株参考。     

一株鸡源地衣芽孢杆菌的分离鉴定及其益生作用的初步研究

试验从健康AA肉鸡肠道分离出一株芽孢杆菌,对该菌株进行了培养特性观察、生化鉴定、16S rRNA序列分析,并研究了该菌株的安全性及其对鸡免疫器官的影响。结果表明,该菌株为地衣芽孢杆菌,命名为BL-C;该菌株对AA肉鸡不具有致病性,可显著加快雏鸡的生长、促进免疫器官的发育,为其进一步应用于畜禽养殖提供理论依据。     

一株新饲用乳杆菌的分离鉴定及益生性研究

从猪粪便中分离得到一株新饲用乳杆菌,对其16S rDNA基因进行了测序,该段基因序列已提交GenBank,登录号为HQ641209。将该菌株16S rDNA基因序列进行在线BLAST比对并与其他乳杆菌属菌株的16S rDNA序列建立系统发育树,结果显示该菌16S rDNA序列与NCBI公布的约氏乳杆菌Lactobacillus johnsonii (AB295648)的同源性为99.7%,因此该菌鉴定为约氏乳杆菌(Lactobacillus johnsonii),将其命名为"Lactobacillus johnsonii Sun001"。经测试,该菌株对E.coli K88、K99菌株的生长有抑制作用,在pH为2.5的模拟胃液中处理3 h存活率为68.8%,在0.3%胆盐浓度的模拟肠液中处理3 h存活率为21.4%。     

鸡源耐镉乳酸菌株的分离与鉴定

本试验旨在从鸡肠道中分离筛选出耐镉(Cd)的乳酸菌,为将其开发应用于防控家禽饲料重金属Cd污染提供理论基础。取鸡肠道内容物的样品进行乳酸菌分离,以耐受100 mg/L的Cd为标准筛选乳酸菌,采用分子生物学方法鉴定菌株。对筛选出的乳酸菌株进行生长性能、耐Cd性能及Cd吸附性能等测定。结果表明：本试验共筛选出5株耐Cd乳酸菌,分别为1株约氏乳杆菌Cd3-1和4株卷曲乳杆菌Cd1-1、Cd5-2、Cd4-5和Cd8-2。其中Cd3-1、Cd5-2和Cd8-2菌株最高可耐受1 000 mg/L的Cd,而Cd1-1和Cd4-5菌株最高可耐受400 mg/L的Cd。各菌株对50 mg/L Cd的吸附率随溶液pH的升高而增加,在pH为6.0和7.0时Cd的吸附率均显著高于pH为2.6时Cd的吸附率(P<0.05)。5株乳酸菌均可耐受0.3%的胆盐,且可抑制金黄色葡萄球菌的生长。综合上述结果,本试验从鸡肠道中分离筛选鉴定出5株耐Cd乳酸菌,包括1株约氏乳杆菌和4株卷曲乳杆菌,在pH接近中性的条件下,对Cd的吸附率可达30%。     

一株丁酸梭菌的分离鉴定及其益生特性研究

本研究探索了丁酸梭菌分离株的益生特性,旨在为其在仔猪日粮中的应用提供理论依据。利用常规方法分离丁酸梭菌并进行纯培养,经生化检测和16S rRNA基因测序,对分离菌株进行鉴定;采用活菌计数法和牛津杯法研究分离株培养上清对3种致病菌的抑制作用、分离株黏附猪小肠上皮细胞（IPEC-J2）的特性及其对致病菌黏附细胞的抑制作用;采用细胞计数法研究分离株对IPEC-J2生长的影响;采用ELISA检测分离株处理细胞后培养上清液中细胞因子水平。结果表明,本研究成功分离到一株丁酸梭菌。与对照组相比,丁酸梭菌培养上清对3种致病菌生长抑制效果均显著（P<0.05）;丁酸梭菌可黏附于IPEC-J2,并且黏附效果最佳的感染复数（MOI）为50,最适处理时长为3 h;丁酸梭菌对3种致病菌黏附IPEC-J2均具有显著抑制作用（P<0.05）;丁酸梭菌MOI为1、10和50时细胞生长正常、形态完好,MOI为100时IPEC-J2生长受到显著抑制,同时出现部分细胞死亡;MOI为1时细胞因子水平无差异,MOI为10、50和100时细胞因子水平均显著增高（P<0.05）。综上所述,本研究分离的一株丁酸梭菌具有较好的益生特性,为其在生产中的应用提供了理论依据。     

1株鲤鱼源植物乳杆菌的分离鉴定及其生物学特性分析

【目的】筛选具有优良益生特性的鲤源乳酸菌作为水产养殖用微生态制剂候选菌株。【方法】以鲤鱼肠道内容物及黏膜为菌株的分离来源,采用MRS培养基进行菌株分离纯化,经16S rRNA测序鉴定后,对分离菌株生长特性、产酸能力、耐酸、耐胆盐、抑菌特性、药物敏感性及安全性等生物学特性进行分析。【结果】试验成功分离到1株植物乳杆菌,将其命名为YY001,该分离株在MRS培养基上菌落形态为圆形、表面光滑、边缘整齐、呈乳白色,革兰氏染色为阳性、无芽孢、两端钝圆的短小杆菌;4 h后进入对数期生长,12 h后生长达到稳定期;具有较强的产酸能力,产酸曲线显示,0~12 h pH迅速下降,培养16 h的菌液pH达3.8;在pH 3.0和0.3%胆盐的条件下具有一定耐受性;该分离株对水产常见致病菌柱状黄杆菌、维气氏单胞菌和嗜水气单胞菌均具抑菌效果,且对柱状黄杆菌的抑菌效果最显著,抑菌圈直径达34.19 mm;药物敏感性试验结果显示,分离株对卡那霉素、链霉素和万古霉素耐药;每天一次连续1周灌胃10⁸CFU分离菌株对小鼠无毒害作用。【结论】本研究分离到的菌株YY001具有优良的生物学特性,可作为水产养殖用微生态制剂候选菌株,为后续制备鲤鱼用微生态制剂奠定基础。     

许昌地区鸡大肠杆菌分离鉴定和某些生物学特性研究

在许昌地区10个鸡群中,无菌采集临床上疑似大肠杆菌病的18只病死鸡的心、肝。经接种培养、细菌镜检、生化试验、动物试验,共分离出大肠杆菌15株,其中有13株能使雏鸡发病死亡,但各菌株之间毒力存在明显差异;药敏试验表明:多数大肠杆菌对环丙沙星、氧氟沙星、氯霉素、壮观霉素、庆大霉素敏感;经O因子血清试验发现,其中有10株为O78,1株为O54,1株为O5,1株暂未定型。     

鸡约氏乳杆菌的分离鉴定及进化分析

从3日龄健康小鸡肠道中分离到1株乳杆菌,用PCR方法从分离菌株扩增16S rRNA基因,获得大小为1340 bp的DNA片段,该片段的核酸序列已提交GenBank,登录号为EU290749。将分离株的16S rRNA基因核苷酸序列与GenBank上其它乳杆菌进行同源性分析并建立进化树。结果表明,分离株的16S rRNA基因核苷酸序列与NCBI公布的鼠约氏乳杆菌分离株(AB295648)的同源性为99.6%,因此该分离菌株被鉴定为鸡约氏乳杆菌(chicken Lactobacillus johnsonii),命名为HN/0711。     

短乳杆菌的分离鉴定及其对鸡肠粘膜SIgA分泌的影响

用RS培养基，从SPF鸡的消化道分离到1株乳酸杆菌。该菌生长速度快，耐酸，耐胆汗，对肠道粘膜有较强的粘附力，能提高鸡肠粘膜的SIgA滴度。对该菌的形态特征、培养特性、生理生化特性、药物的敏感性及G C等进行试验，证明该菌为短乳杆菌。该菌可作为禽用闪生素的候选菌株。     

不同来源乳酸菌的分离与鉴定

Six strains of Lactobacillus were isolated from traditional indigenous dairy products, piglet’s feces and chicken intestine, designated as LS, LT, LJ1, LJ2, LZ1 and LZ2， respectively. Identifications were done according to bacteria morphology, physiological and biochemical properties,16S rDNA sequence homology analysis, and their characteristics were researched. The results showed that LS, LT, LJ1 and LZ2 strains were Lactobacillus brevis, LJ2 strain was Enterococcus faecium, LZ1 strain was Lactobacillus acidophilus. All of the six strains had obvious bacteriostasis effect on Listeria monocytogenes, Salmonella typhimurium, Escherichia coli and Staphylococcus aureus.     

Isolation and Identification of Six Strains of Swine Bacillus and Their Probiotic Research

This study was aimed to separate Bacillus from healthy pig feces by high temperature treatment method and conventional anaerobic bacteria isolated method, and through the cultivation of traits, biochemical tests, PCR, bowel tolerance, antibacterial activity and vaccinated animals and other screening methods to identify stable properties and probiotic Bacillus. As a result, a total of six strains of Bacillus, which were one strain of huge Bacillus, one strain of Death Valley Bacillus, two strains of Bacillus amyloliquefaciens and two strains of Bacillus subtilis. Isolates were resistant to polymyxin and penicillin, were more sensitive to the other 12 kinds of commonly used drugs, and had better bacteriostatic action to pathogenic E.coli and Staphylococcus aureus. Four kinds of Bacillus were available under acidic, high temperature conditions and bile salts, in particular Bacillus megaterium and Bacillus subtilis were strong tolerance. Those isolated Bacillus were not pathogenic to mice, wherein Bacillus megaterium and Death Valley Bacillus had a more significant role in promoting the growth of animals. Finalized, the Bacillus megaterium and the Death Valley Bacillus could initially be as probiotic Bacillus choice.