固氮菌及其突变株生理特性的研究

本文对经过筛选培育出的固氮能力较强的固氮菌突变株UV07N及抗高温、耐酸碱菌株pHt04N的生理特性进行了研究.最佳碳源为甘露醇,最佳碳源浓度为20%.金属盐类,培养温度,pH,气/液比等也对突变株的生长有一定影响.其结果可作为选定工业化条件的参考.     

胶质芽胞杆菌及其突变株生理特性的初步研究

本文对经过筛选培育出的分解硅酸盐能力较强的胶质芽胞杆菌突变株 UV0 9K及抗高温、耐酸碱菌株 p Ht10 K的生理特性进行了研究。其中 ,最佳氮源为麦麸汁 ,与出发菌株相比 ,分解硅酸盐能力分别提高 164%、12 .7%。最佳碳源为葡萄糖 ,与出发菌株相比 ,产酸能力分别提高2 60 %、155%。金属离子、培养温度、p H、气 /液比等也对突变株的生长有一定影响。其结果可作为选定工业化条件的参考。     

胶质芽胞杆菌及其突变株生理特性的初步研究

本文对经过筛选培育出的分解硅酸盐能力较强的胶质芽胞杆菌突变株UV09K及抗高浊`恩赐乔石工力朱PHt10K的生理特性进行了研究。其中，最佳氮源为麦麸汁，民出发菌株相比，分解硅酸盐能力分别提高164％、12．7％。最佳碳源为葡萄糖、与出发菌株相比，产酸能力分别提高260％、155％，金属离子培养温度、PH，气／液比等对突变株的生长有一定影响。其结果可作为选定工作化条件的参考。     

磷细菌突变株的诱变选育

以有机P(ACCC1008)为出发菌株,经紫外线、硫酸二甲酯单独处理和复合处理,获得一株P细菌高产菌株D017P,该菌株具有稳定的遗传性能,其解P能力达到95.45mg/mlP2O5,是原始出发菌株的3.2倍。同时通过酸碱和温度处理,获得了一株抗性变异株,其解P能力达34.43mg/mlP2O5,较出发菌株提高53.17%。     

马铃薯内生固氮菌的分离及其促生特性研究

内生固氮菌是一类重要的植物促生菌,占据着植物组织内有利于营养供应和微环境适宜的生态位,能更好的发挥促生功能,促生机制包括固氮、解磷、产植物生长素、产ACC脱氨酶、产铁载体及拮抗病害等。本文从连作3年马铃薯根筛选获得8株内生固氮菌,其中短芽孢杆菌属(Brevibacterium)3株,芽孢杆菌属(Bacillus)3株和泛菌属(Pantoea)2株。促生特性研究发现:菌株Brevibacterium sp.GWR4具有较高固氮酶活性[16.206nmol C2H4/(mg蛋白质·h)],与圆褐固氮菌的固氮酶活性具有极显著性差异(P0.01);菌株Pantoea spp.GWR2、GWR3具有极高的产IAA能力,分别为186.07、162.21μg/m L,GWR2兼具产ACC脱氨酶活性[3.74μmol/(mg蛋白质·h)],GWR3兼具溶解无机磷的能力;菌株Brevibacterium sp.GWR5可以拮抗尖孢镰刀菌MLSOF(Fusarium xysporum)和茄病镰刀菌MLS-QB(Fusarium solani),兼具溶解有机磷和产IAA能力;Bacillus spp.GWR7、GWR8兼具固氮和产IAA能力。盆栽试验显示,分别接种Pantoea sp.GWR3,Brevibacterium spp.GWR4、GWR5和Bacillus spp.GWR7、GWR8后小白菜鲜重显著高于未接菌对照处理。可见,这5株菌兼具多种促生特性且对小白菜具有较好的促生效果,有望进一步研究开发成为微生物肥料生产菌种。     

甘蔗内生固氮菌研究

对甘蔗内生固氮的分布特点、生理学特性、生物学特性、遗传学特点及应用前景等方面的研究进展进行了全面的概述.     

利用γ射线照射选育梨树抗黑斑病突变株

日本梨的黑斑病是由链格孢菌引起的，是日本簟最严重的病害之一。１９８７－１９９０年，日本对“新水”和超二十世纪“梨的估眠接穗用γ射线进行照射。剂量率为２．５ｇｙｈ＾－１，总剂量为６０和８０Ｇｙ。将照射的接穗嫁接到日本鸟取县园艺实验场的“八云”和“八幸”品种成年树上，结果“新水”和超二十世纪“之间的成活率和生长速度不同，同一品种不同照射剂量，接穗成活率也不同，但成活后生长速度相同。     

菠菜内生固氮菌的分离及其功能特性研究

内生固氮菌具有促生、病原菌的防治及生物固氮等作用,并且占据着植物组织内有利于营养供应和微环境适宜的生态位,是重要的微生物菌种资源。从菠菜根内分离筛选优势内生固氮菌7株,其中假单胞菌属(Pseudomonas)5株,红球菌属(Rhodococcus)和黄杆菌属(Flavobacterium)各1株。菌株Pseudomonas sp.BCE6和Pseudomonas sp.BC-E8固氮酶活性较高,分别为(13.19±0.32)和(12.11±0.96)C2H4nmol/(mg protein·h),与圆褐固氮菌(ACCC11103)的固氮酶活性具有极显著性差异(P0.01);菌株Pseudomonas sp.BC-E7具有固氮酶活性[(8.42±0.03)C2H4nmol/(mg protein·h)]、产IAA能力[(59.58±4.15)μg/m L]、ACC脱氨酶活性[(5.067±0.376)μmol/(mg protein·h)],拮抗立枯丝核菌ACCC36124(Rhizoctonia solani)、麦类赤霉病ACCC36272(Gibberella zeae)等4种常见土传病害。菠菜内生固氮菌Pseudomonas sp.BC-E7是一株多功能内生菌,具有较好的生产应用前景。     

利用薄层色谱法快速筛选法夫酵母突变株

法夫酵母（Phaffia rhodozyma）是一种极具产业化前景的天然虾青素资源（Johnson,2003）.本实验从溶剂极性、溶剂组成等方面优选法夫酵母类胡萝卜素薄层分析的溶剂,并对薄层色谱在法夫酵母类胡萝卜素突变株筛选中的应用进行了研究.     

混合固氮菌剂-水稻联合体系的固氮特性

应用＾１５Ｎ示踪技术研究敢南京土壤条件下混合固氮菌剂－水稻联合体系的固氮特性。结果表明，紫香糯稻接种混合菌剂后，稻株利用的固氮量为１．０３ｋｇ／６６６．７ｍ＾２，固氮率６．７％；拔节期－齐穗期是固氮高峰期，日平均固氮量达２４．３１ｍｇ／ｍ＾２·ｄ，这阶段固氮量占整个生育期固氮量的４０．９％；拔节期－成熟期的固氮量占整个生育期固氮量的７０％以上；节肥能力为每６６６．７ｍ＾２ １１３．３ｋｇ硫铵；稻谷     

一个酿酒酵母呼吸突变株在高糖胁迫下的生理特性研究

MF11a为甘蔗糖蜜乙醇发酵野生型高产菌株MF1002的呼吸突变体,对糖分的利用能力显著高于MF1002。本文研究了这两菌株应激高糖胁迫的生理特性变化。结果表明,高糖培养条件下,MF11a菌株的生长和乙醇发酵受抑制的程度均明显低于MF1002,培养基的葡萄糖浓度为30％和40％时,其最大菌体密度、最高出芽率和乙醇浓度等已显著高于MF1002,表明MF11a较MF1002具有更强的高糖耐受能力。在30％葡萄糖的胁迫培养条件下,两菌株胞内的总超氧化物歧化酶（SOD）活力、过氧化氢酶活力、过氧化物酶活力,及它们细胞质和线粒体的ATP酶活力均显著上升,说明这五种酶均参与了两菌株的高糖胁迫反应。其中,MF11a的胞内过氧化氢酶活性、过氧化物酶活力、细胞质ATP酶活力在高糖胁迫下的上升幅度显著高于MF1002,表明这三种酶活力可能与MF11a菌株的高糖耐受能力有关,可作为该菌株进一步改造的指导指标。     

嗜水气单胞菌转录调控蛋白基因(ahyR)突变株的构建及特性分析

根据GenBank公布的嗜水气单胞菌(Aeromonashydrophila,Ah)转录调控蛋白基因ahyR序列设计1对特异性引物,利用PCR方法扩增AhJ-1株ahyR的部分片段。PCR产物克隆入pMD18-T载体,经序列测定后定向连接入含有卡那霉素抗性(Kanr)基因的自杀性质粒pJP5603中,构建重组质粒pJP-ahyR。将鉴定为阳性的重组质粒转化嗜水气单胞菌J-1株感受态细胞,获得1突变株细菌。PCR方法鉴定该突变株为J-1株ahyR基因同源突变株,命名为J-1△ahyR。与J-1株相比,突变株的外膜蛋白图谱和部分生化特性发生改变;胞外蛋白酶、淀粉酶、DNA酶、溶血素等几种主要毒力因子同时丧失;致病力明显降低,对小白鼠的半数致死量大于1.0×108CFU(colonyformingunits)。该研究为ahyR基因功能的探讨及嗜水气单胞菌弱毒疫苗的研制奠定了基础。     

固氮粪产碱菌（Alcaligenes faecalis）胞外多糖突变株的筛选及特性

应用Ｔｎ５转座子对粪产碱菌野生型菌株Ａ１５０１进行诱变处理，用荧光增白剂及ＴＴＣ为标记筛选，分别获得胞外多糖缺陷型和丰富型突变株。激光共聚焦观察证实，ＥＰＳ突变株确实具有与野生型不同的表面特性，贴根试验表明，突变株贴根菌数均少于野生型，胞外多糖生成过多或过少均影响菌体与根表的有效结合。     

青枯雷尔氏菌Tn5转座子无致病力突变株构建及其生物学特性

青枯雷尔氏菌(Ralstonia solanacearum)是植物细菌性青枯病的病原菌,为研制植物疫苗菌剂提供遗传稳定且突变位点明确的青枯雷尔氏菌无致病力菌株,本研究利用EZ-Tn5转座子随机插入青枯雷尔氏菌(Rs91)构建青枯雷尔氏菌无致病力突变体库,通过电击转化,筛选获得13株具有无致病力菌株形态的突变株。研究了其中5株突变株的插入位点和生物学特性,结果表明,其插入位点分别位于phcA和pchS基因,其生长速率和相对胞外多糖含量显著低于Rs91,而最适pH值和温度未改变。其发酵液经分光光度计扫描,结果显示,突变株在同一波长下的光吸收值均大于Rs91,经聚类分析,显示它们与Rs91可聚为不同的3类,即Rs91为第Ⅰ类,phcA基因突变株为第Ⅱ类,phcS基因突变株为第Ⅲ类。经番茄(Lycopersicon esculentum)盆栽苗致病力检测,15d后均未发病,确定为无致病力青枯雷尔氏菌。本研究为研制防治青枯病的植物疫苗菌剂提供了基础资料。     

固氮菌在污泥中培养研究

通过室内培养试验,研究观察了固氮菌在污水厂污泥和城市垃圾中的生长毓情况,探讨了利用这些污泥和垃圾作为生产微生物肥料的载体和基质,开辟了生产微生物肥料和处理污泥的新途径。     

抗春雷霉素大豆根瘤菌突变株的诱变及其生物固氮特性的分析

根瘤菌与豆科植物共生可以固定大量的氮。根瘤菌剂接种豆科作物是一项普遍推广应用、有效的农业技术。但由于大量土著根瘤菌的存在，产生竞争障碍，降低了接种菌剂的占瘤率。大多数的土著根瘤菌对春雷霉素敏感，因此接种抗春雷霉素的高效结瘤固氮根瘤菌，并用春雷霉素处理种子，可抑制土著根瘤菌，提高接种菌剂的占瘤率，从而达到高结瘤、高固氮和提高产量的目的。本文将探讨诱变对根瘤菌抗春雷霉素突变的作用，并对获得的抗性突变株的生物固氮特性进行分析。