葡萄砧木抗旱性初步鉴定

供试16个葡萄砧木取材于沈阳农业大学葡萄试验园，进行盆栽试验。盆中基质由田园土、山坡土、腐熟鸡粪混合而成，试验开始时灌透水，以后进行干旱胁迫，从第6天开始调查，以后每隔3d（天）调查1次，第40天调查砧木的旱害指数和旱死率。通过聚类分析鉴定，结果表明，河岸3号、Teleki5A、Saltereek、河岸9号抗旱性极强，山河2号、河岸2号抗旱性强，     

葡萄砧木抗旱性初步鉴定

对16种葡萄砧木的抗旱性进行了鉴定分析．结果表明：河岸三号、Teleki5A、Saltcreck、河岸九号抗旱性极强,山河二号、河岸二号抗旱性强,山河四号、山河一号、Dogridge、河岸五号、自由、贝达抗旱性中等,山河三号、山美一号,河岸七号,柯德克1613抗旱性弱。     

葡萄砧木抗旱性评价

以22个葡萄砧木品种或杂种优株为试材,对1年生盆栽植株在不同干旱胁迫时间(0、6、12、18d)条件下的叶片相对含水量、电导率、脯氨酸、丙二醛及叶绿素含量等5项生理指标进行了测定,并利用隶属函数法综合评价了各砧木的抗旱性。结果表明:根据干旱胁迫第18天时各项指标的测定结果,按照平均隶属度的大小,将砧木材料分为3种抗旱类型:对照"燕山-1"和品种"抗砧3号"属于高抗类型;‘225Ru’‘110R’‘101-14’‘5C’"河岸-2"‘6-12-1’‘6-12-4’属于中抗类型;‘1103P’‘188-08’‘00-1-10’‘00-1-5’"贝达""狗脊"‘3309’‘5BB’‘1-1-6’‘6-12-6’‘SO4’"北醇"及对照"河岸葡萄(♀)"属于低抗类型。高抗品种"抗砧3号"和中抗品种‘225Ru’‘110R’‘101-14’‘5C’可用于干旱、半干旱地区葡萄生产,中抗杂种优株‘6-12-1’‘6-12-4’可用于进一步的抗逆性(如抗寒性、耐盐性等)筛选,为新品种选育奠定基础。     

葡萄砧木抗旱性的叶片解剖学研究

该试验采用组织解剖学调查法,对16种葡萄砧木的抗旱性与叶片解剖结构的关系进行了研究.结果表明:气孔密度、叶片组织紧密度、角质层厚度与抗旱性正相关,而气孔大小、叶片上表皮细胞大小与抗旱性负相关.     

葡萄砧木及品种抗旱鉴定初报

我国大部分葡萄园特别是酿酒葡萄基地建于干旱或半干旱地区,鉴定砧木和品种的抗旱性,对葡萄生产具有一定的借鉴作用.     

葡萄砧木杂种的抗旱性评价

以4个葡萄砧木杂交组合的32个杂种优株及对照品种‘红地球’‘5BB’盆栽植株为试材,进行干旱胁迫处理,在干旱胁迫第0、8、16、28 d后,分别调查各植株叶片的旱害严重度,并测定叶片相对含水量、叶绿素含量、相对电导率、丙二醛及脯氨酸含量5项生理指标,综合评价其抗旱性。结果表明:随干旱胁迫时间的延长,各株系旱害等级增加,叶片相对含水量与叶绿素含量总体呈降低趋势,相对电导率升高,丙二醛和游离脯氨酸含量增加;以旱害严重度作为主指标,参考5项生理指标的平均隶属函数值,将供试材料分为4种类型:HS-6、BBS-8、BBS-11、‘红地球’属于极抗旱类型,HS-1、HS-2、HS-3、HS-4、HS-8、HS-9、HS-12、TS-6、BBS-1、BBS-2、BBS-3、BBS-5、BBS-6、BBS-12、BBS-13、BBS-15属于强抗旱类型,HS-7、HS-10、HS-11、TS-1、BBS-4、BBS-10、‘5BB’属于中等抗旱类型,HS-5、TH-1、TH-2、TH-3、TS-3、BBS-7、BBS-9属于弱抗旱类型。     

部分梨砧木的叶片组织结构与抗旱性的关系

为了评价西南喀斯特山区常用梨砧木的抗旱力强弱,了解其叶片组织解剖结构和保水力参数与抗旱性的关系,以川梨(Pyrus pashia Buch.-Ham.)、滇梨(P.pseudopa shia Yu)、砂梨(P.pyrifolia Nakai)和杜梨(P.betulaefolia Bge.)为材料,采用测定旱害指数的方法鉴定其抗旱力强弱,分析几种梨砧木叶片组织解剖结构和保水力参数与抗旱性的关系。结果表明,供试梨砧木的实际抗旱力强弱顺序为杜梨>川梨和滇梨>砂梨。梨砧木叶片栅栏组织与海绵组织的厚度比、叶肉组织结构紧密度(CTR)和水分临界饱和亏的大小,与砧木种间的旱害指数呈极显著的负相关,与抗旱性呈极显著的正相关;叶肉组织结构疏松度(SR)和失水速率的大小,与旱害指数呈极显著的正相关,与抗旱性呈极显著的负相关。杜梨的抗旱力极强,川梨和滇梨抗旱力强,砂梨的抗旱力中等。用叶片组织解剖结构参数指标鉴定梨砧木抗旱性可靠性较强,用叶片失水速率和水分临界饱和亏等指标鉴定梨砧木抗旱性与实际抗旱性具有较高的吻合度。     

干旱胁迫对葡萄砧木110R、1103P和5BB叶片光合特性及抗氧化能力的影响

以葡萄抗旱砧木110R、1103P、5BB为试材,采用常规理化指标测定方法,研究干旱胁迫对葡萄砧木叶片光合特性和抗氧化能力的影响,以期对其进行抗旱性评价.结果表明:随着干旱胁迫的进行,3种葡萄砧木叶片气孔导度、蒸腾速率、光合速率呈降低趋势,胞间CO2浓度先下降后上升.砧木叶片PSⅡ最大光化学效率和PSⅡ实际光能转化效率呈下降趋势.其丙二醛含量呈上升趋势,且5BB的上升幅度最大,110R的上升幅度最小.游离脯氨酸含量呈上升趋势,且110R的上升幅度最大,5BB的上升幅度最小.3种葡萄砧木叶片的过氧化氢酶活性呈上升趋势,且110R的上升幅度最大,5BB的上升幅度最小.超氧化物歧化酶活性先升高后降低;砧木叶片的相对含水量和叶绿素含量均呈下降趋势,且在干旱胁迫第20天,砧木110R的叶片相对含水量高于砧木5BB的叶片相对含水量.综上所述,砧木抗旱性110R＞1103P＞5BB.     

樱桃砧木的抗旱性研究

以山樱桃、莱阳矮樱桃、中国樱桃和考特砧木的2年生盆栽极佳甜樱桃为试材,进行干旱处理,测定干旱胁迫下叶片的相对含水量(RWC)、超氧化物酶(SOD)活性、过氧化物酶(POD)活性、丙二醛(MDA)含量、光合速率(Pn)、蒸腾速率(Tr)和水分利用率(WUE)的变化,比较供试砧木的抗旱性。结果表明,山樱桃抗旱性最强,其次是考特,中国樱桃和莱阳矮樱桃抗旱性较差。     

不同苹果砧木组培苗抗旱性的比较研究

【目的】为了提供苹果耐旱育种及栽培材料,【方法】以5种苹果砧木组培苗为试材,PEG-6000作为胁迫剂,模拟室外干旱进行处理,运用模糊隶属函数抗旱性综合分析,比较了5个苹果砧木组培苗的耐旱性。【结果】结果表明,在PEG-6000胁迫条件下,不同苹果砧木的叶绿素含量总体均呈下降趋势,叶片的相对电导率和MDA含量随PEG-6000胁迫质量分数的升高逐渐升高。在整个胁迫过程中,各苹果砧木组培苗叶片内蛋白质含量随胁迫质量分数的升高而增大。SOD活性随PEG-6000胁迫质量分数的升高呈先升高后下降趋势,且在20%PEG-6000胁迫条件下SOD活性达到了最大。POD活性随胁迫质量分数的升高呈现出逐渐升高的趋势。【结论】5种苹果砧木的抗旱性顺序依次为:新疆野苹果>平邑甜茶>八棱海棠>‘M26’>‘M9’。     

中国野生葡萄抗葡萄根瘤蚜的特性鉴定

采用离体根系接种鉴定法对12份中国野生葡萄、4份砧木品种、2份栽培品种和1份葡萄属近缘植物进行了抗性鉴定,结果表明,供试的中国野生葡萄,仅有燕山葡萄与砧木品种沙地葡萄、SO4、5BB相同,对葡萄根瘤蚜表现为高抗,接种后葡萄根瘤蚜迅速死亡或停滞在1、2龄幼虫阶段;复叶葡萄对葡萄根瘤蚜表现为低抗,接种28 d时其平均单雌产卵量为6.5粒,种群增殖倍数为1.1;而其他中国野生葡萄与栽培品种赤霞珠、巨峰相同,对葡萄根瘤蚜均表现为易感,并且刺葡萄、葛藟、华东葡萄万县株系、华东葡萄福建株系更容易感染葡萄根瘤蚜,在接种28 d时总产卵量均超过293粒,平均单雌产卵量在15.0粒以上,种群增殖超过15.8倍。研究结果表明,多数原产中国的野生葡萄不抗葡萄根瘤蚜,但不同种类之间的抗性存在一定的差异,燕山葡萄表现为高抗,在抗葡萄根瘤蚜砧木育种中应重视使用原产美国的野生种和燕山葡萄。     

葡萄种质资源对叶片白腐病的抗性鉴定及评价

【目的】葡萄白腐病是葡萄生产中导致重大损失的主要原因之一,挖掘抗病种质,阐明抗病机制,以期为抗病育种提供种质资源储备。【方法】利用离体接种的方法系统评价了中国野生葡萄种质、欧亚种及部分杂交种对葡萄白腐病的抗性,并以葡萄抗病中的关键基因为指示基因,探讨抗病种质和感病种质的不同抗病模式。【结果】对78株葡萄属17个种进行离体接菌评价后,对不同来源的种质进行了抗性分类,其中刺葡萄♂(Vitis davidii)是最抗白腐病种质,欧亚种‘美人指’(Vitis vinifera‘Manicure Finger’)最为感病。5个WRKY基因已经验证在葡萄抗病中起作用,笔者以最抗病的刺葡萄和最感病的‘美人指’进行基因型表达分析。以WRKY基因为指示性基因,检测了其介导的抗性途径中的关键基因PR、NPR1等在抗性葡萄刺葡萄和感病葡萄‘美人指’中的表达,并探讨WRKY基因及关键基因对病原菌的响应机制。WRKY基因及病程相关基因在刺葡萄和‘美人指’分别受到葡萄白腐病病原菌侵染诱导后,具有不同的时空表达差异和量化差异,WRKY基因和相关基因在刺葡萄中表达迅速且上调倍数高,但在‘美人指’中表达迟缓,且上调程度低。【结论】经过系统的鉴定评价筛选到一批抗性种质,可作为潜在育种材料。通过抗病基因表达分析检测,发现抗病基因在刺葡萄中反应迅速,从而使刺葡萄具备高抗病性。     

桃砧木筑波4号和筑波5号抗根癌病鉴定评价

以当年实生筑波4号(Prunus persica‘tsukuba-4’)和筑波5号(Prunus persica‘tsuku-ba-5’)的新梢为材料,采用人工接种发根土壤杆菌(Agrobacterium rhizogenes)的方法研究了其对根癌病的抗性及其分离情况。结果表明,筑波4号实生群体中免疫、高度抗病、中度抗病、中度感病和高度感病类型分别占0.90%、1.80%、9.01%、18.92%和69.37%。筑波5号实生群体中免疫、高度抗病、中度抗病、中度感病和高度感病类型分别占1.01%、3.03%、8.08%、38.38%和49.49%。筑波4号和筑波5号对发根土壤杆菌的抗性存在显著分离现象,可从中筛选出抗性极强的植株。     

丛枝菌根真菌对葡萄幼苗抗旱性的影响研究

研究了丛枝菌根真菌(AMF)对葡萄幼苗水分代谢及抗旱性的影响,结果表明:正常供水条件和干旱条件下AMF都能影响葡萄苗的水分代谢,改善叶片水分状况,增强蒸腾作用,从而增强其抗旱能力;而干旱胁迫下AMF改善葡萄苗水分状况的作用明显强于正常供水条件下,表明AMF在逆境条件下作用更明显;通过对葡萄苗膜保护系统的影响研究,发现AMF能增强葡萄苗叶片膜保护酶活性,降低植株叶片膜脂过氧化程度,从而缓解干旱对质膜透性的破坏,增强葡萄植株的抗旱性。     

辣椒种质资源抗旱性鉴定与筛选

为了筛选到优良的辣椒抗旱资源,选用111个辣椒品系(种)为试验材料,在漂浮育苗条件下,采用反复干旱存活率对辣椒品系(种)苗期和成株期的抗旱性进行了鉴定。结果表明,苗期反复干旱存活率RDSR(Repeated drought survival rate)≥70.00%的品系(种)有9个,占供试品系(种)的8.11%;成株期RDSR≥70.00%的品系(种)有6个,占供试品系(种)的5.41%;苗期和成株期平均RDSR≥70.00%的品系(种)有5个,占供试品系(种)的4.50%。综合考虑苗期、成株期及这2个阶段平均反复干旱存活率的分析结果,筛选出‘gx2016-25’‘gc2016-33’和‘gc2016-69’共3个在苗期和成株期抗旱性均较强的品系(种)。     

多倍体与二倍体枇杷叶片特征及抗旱性初步分析

【目的】探讨多倍体与二倍体枇杷(Eriobotrya japonica Lindl.)叶片生理形态特征差异并进行抗旱性初步评价,为枇杷倍性鉴定及抗旱性评价提供参考。【方法】以4个系列18个不同倍性枇杷株系为试验材料,对各株系叶片的形态解剖结构、失水率(RWL)、营养元素含量、叶绿素(Chl)含量进行观察、测定和分析。通过隶属函数法,对其抗旱能力进行初步评价。【结果】枇杷叶片长度、宽度与倍性呈极显著正相关(p 0.01),叶形指数与倍性呈极显著负相关(p 0.01);10项枇杷叶片解剖结构指标与倍性关联度强弱排序依次为:下表皮、上角质层、海绵组织、叶片组织细胞结构疏松度(SR)、叶厚、叶片组织细胞结构紧密度(CTR)、下角质层、栅栏组织、栅栏组织细胞层数、上表皮,其中上角质层、下角质层、CTR与倍性呈负相关;在40℃下干旱处理6 h后,A系列、H系列、K系列失水率与倍性均呈负相关,在24 h后失水率与倍性呈显著负相关(p 0.05);氮(N)、磷(P)、钾(K)、铁(Fe)、叶绿素a(Chl.a)、叶绿素b(Chl.b)、总叶绿素含量Chl.(a+b)含量与倍性关联度强弱排序依次为:N、K、P、Chl.b、Chl.(a+b)、Fe、Chl.a,其中N、P、K含量与倍性呈负相关;参考枇杷叶片解剖结构与失水率进行抗旱性隶属函数分析‘:A313’(3x)‘、A322’(3x)‘、B350’(3x)‘、B431’(4x)‘、4X(2)’(4x)‘、H324’(3x)‘、K3’(3x)‘、K4’(4x)抗旱性均强于同系列二倍体。【结论】枇杷叶片生理形态指标可作为枇杷倍性鉴定的参考指标,抗旱性评价中的8个抗旱性强的多倍体枇杷材料可用于进一步抗旱性研究,培育多倍体可作为提高枇杷抗旱性的一种途径。     

抗病抗寒无核葡萄胚挽救研究

【目的】为了培育抗病抗寒无核葡萄新品种,【方法】以2个种子败育型无核品种‘波尔莱特’、‘红无籽露’作母本,以抗病抗寒的中国野生山葡萄株系‘黑龙江实生’、‘双优’及欧山杂种‘北醇’、‘00-1-10’(‘玫瑰香’ב黑龙江实生’)分别作父本杂交,授粉51 d后将胚珠分别接种于ER和MM4培养基上进行胚挽救,培养60 d后在WPM+BA 0.2 mg.L-1培养基上诱导成苗。【结果】结果表明,2个母本品种胚挽救的适宜培养基不同,‘波尔莱特’作母本适合于ER培养基,‘红无籽露’作母本适合于MM4培养基。2个母本基因型对胚珠的发育率和成苗率的影响差异不大,‘波尔莱特’略优于‘红无籽露’;但4个父本基因型对胚挽救效果影响较大,以欧山杂种‘00-1-10’和‘北醇’作父本的杂交组合胚株的发育率和成苗率明显高于山葡萄‘黑龙江实生’、‘双优’作父本的杂交组合。共获得无核葡萄胚挽救新种质50个株系。【结论】在胚挽救过程中,不同基因型的无核葡萄适宜于不同的基本培养基,欧山杂种比山葡萄更适宜于作杂交的父本。     

葡萄PYL基因家族的鉴定与表达分析

【目的】通过分析葡萄(Vitis vinifera L.)PYL基因在非生物胁迫条件下的响应情况,丰富PYR/PYL/RCAR(Pyrabactin Resistance/Pyr1-Like/Regulatory Components of ABA Receptor)在ABA信号和启动信号转导中的功能。【方法】利用生物信息学方法,筛选葡萄中的PYL基因,并对其进行生物信息学及非生物胁迫下的响应分析。【结果】从葡萄基因组中共鉴定出6个PYL基因,Vv PYL家族无染色体偏好性,Vv PYL5无内含子结构;除Vv PYL4外均富含酸性氨基酸,该家族成员主要定位于细胞质中,并有多个保守位点。10%(ω)PEG和100μmol·L~(-1)ABA处理6 h后,Vv PYL1和Vv PYL2表达水平与对照相比差异显著,分别为对照的1.3~1.8倍。50μmol·L~(-1)ABA处理6 h后,Vv PYL1表达水平与对照差异显著,为对照的1.5倍;400 mmol·L~(-1)Na Cl、10%PEG、50μmol·L~(-1)ABA和100μmol·L~(-1)ABA处理24 h后,Vv PYL1和Vv PYL2的表达水平显著高于对照,为对照的1.2~2.2倍,400 mmol·L~(-1)Na Cl处理24 h后,Vv PYL6的表达水平显著高于对照,为对照的1.6倍。【结论】克隆得到葡萄的6个PYL基因,高度保守,分为3个亚组;能够响应不同非生物胁迫。本研究为葡萄PYL基因在逆境应答中的功能研究提供了基础。     

葡萄NHX基因家族的鉴定和表达分析

【目的】探究葡萄NHX基因家族生物信息学特性及在非生物胁迫下的表达情况,以期筛选出与非生物胁迫相关的家族成员,从而为葡萄抗逆性研究提供理论依据。【方法】以拟南芥、水稻及胡扬NHX基因序列为基础,对葡萄NHX基因进行同源克隆、染色体定位、氨基酸组成成分、理化性质、motif、蛋白质二级结构以及基因芯片表达等分析,同时利用qRT-PCR技术分析葡萄NHX基因家族表达情况。【结果】葡萄NHXs可分为2个亚族,主要分布在第1、5、7、14、15、19号染色体上,其外显子数为12～23个;VvNHX06的氨基酸数最少,有291个,VvNHX07的氨基酸数最多,有1141个。Motif分析发现,N端含有典型的锌指结构,蛋白质二级结构以α-螺旋和无规则卷曲为主。亚细胞定位预测发现,葡萄NHX基因主要分布在细胞膜、内质网、线粒体、液泡和细胞质中。基因芯片表达显示,使用NaCl、ABA和PEG处理后,葡萄叶片中VvNHX02和VvNHX06基因表达量均呈上升趋势。qRT-PCR分析结果表明,在200 mmol·L~(-1)NaCl、100 mmol·L~(-1)ABA处理后的葡萄叶片中,VvNHX06表达量显著增加,分别是对照的30倍和60倍。用10%PEG处理实验材料6 h后,VvNHX05的表达量明显增加,是对照的5倍。【结论】VvNHX05和VvNHX06基因与植物耐盐和抗旱性有密切关系,可为葡萄的逆境胁迫机制研究提供参考。     

葡萄白腐病有益拮抗菌株YB9的分类鉴定研究

研究结果表明,防治葡萄白腐病有益拮抗菌株YB9培养菌落为淡乳白色,质地粘质状,革兰氏染色反应阳性。YB9菌体为棒杆或短杆状,菌体大小为0.6～0.8μm×1.3～1.6μm。端生或周生鞭毛,芽殖生长。通过对YB9菌株67项生理生化性状测定,确定YB9菌株为芽孢杆菌属的枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。