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伪狂犬病基因缺失疫苗株(SA215)某些生物学特性研究 总被引:3,自引:0,他引:3
本试验测定了伪狂犬病gE-/gI-/ TK-/ LacZ+基因缺失疫苗株(SA215)的致细胞病变效应、安全性、免疫原性和免疫期等生物学特性。试验结果显示,该疫苗株能在Vero细胞上适应生长,并形成典型的蚀斑。其对1日龄仔猪、怀孕母猪、牛、羊以及家兔安全,无不良接种反应,接种动物不向体外散毒。SA215疫苗接种猪能抵御高剂量(107PFU)Fa株强毒感染,攻毒后试验猪的发热期、增重受阻天数、散毒滴度均低于Bartha株疫苗接种猪,远远低于对照组猪。SA215接种猪能维持长时间的高水平中和抗体滴度,免疫期可达半年以上。试验结果表明,SA215株是一株安全、免疫原性好、免疫期长的疫苗株。 相似文献
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伪狂犬病是由伪狂犬病病毒引起的家畜及野生动物的急性传染病,其特征为发热、奇痒及脑脊髓炎。本病广泛分布于世界各国。近年来,猪、牛及绵羊发生本病逐年增加,我国不少省区也有本病发生,尤其是猪的发病有扩大蔓延趋势。 许多西方发达国家早在20世纪80年代就制定和启动了猪伪狂犬病的根除计划,并通过广泛使用基因缺 相似文献
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伪狂犬病基因缺失疫苗株(SA215)生物学特性研究 总被引:5,自引:0,他引:5
测定了伪狂犬病gE^-/gI^-/TK^-/LacZ^ 基因缺失疫苗株(SA215)的致细胞病变效应、安全性、免疫原性和接种动物抗体消长规律等生物学特性。试验结果显示,该疫苗株能在Vero细胞上适应生长,并形成典型的蚀斑。其对1日龄仔猪、妊娠母猪、牛、羊以及家兔安全,无不良接种反应,接种动物不向外散毒。SA215疫苗接种猪能抵御高剂量(10’PFU)Fa株强毒感染,攻毒后试验猪的发热期、增重受阻天数、散毒滴度略低于Bartha株疫苗接种猪,低于对照组猪。SA215接种猪能维持长时间的高水平中和抗体滴度。试验结果表明,SA215株是一株安全、免疫原性好的疫苗株。 相似文献
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四川农业大学动物生物技术中心1999年通过分子流行病学调查从四川分离鉴定了SW和SL两株伪狂犬病毒株,并通过基因缺失获得了PRV TK/gl/gp63/Lac I三个基因缺失株,在此基础上,SA215成了我国第一株自行研制的伪狂犬病基因缺失疫苗,该疫苗完全克服了常规疫苗的不足而且具有安全、高效等特点,其推广应用对于养殖业发展具有重要意义。笔者提出通过数据库中存贮的微生物基因序列信息查找有价值的候选疫苗株,研制基因疫苗来克服残留强毒或弱毒返强等问题;采用DNA质粒做载体,插入多种编码目的抗原的外源性基因,研制多价苗(即NDA疫苗)来实现对同一种传染病的病原(病毒、细菌和寄生虫等)多种变型的有效防治;同时必须加强致病基因库的管理和基因工程疫苗的安全性试验,在投入市场进行规模化工厂化生产前,必须按照严格的管理过程取得部颁新兽药证书。 相似文献
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<正>伪狂犬病(Pseudorabies,PR)又名奇痒症、奥叶基氏病(Aujeszky's disease,AD),是由疱疹病毒科猪疱疹病毒型的伪狂犬病病毒(PRV)引起的动物传染病。该病感染猪后,可引起种猪大量流产、死 相似文献
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伪狂犬病基因缺失疫苗的研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
伪狂犬病(PR)是一种可引起多种家畜以发热、奇痒及脑脊髓炎为主症的急性传染病,是严重危害我国及世界其他各国养猪业的主要疫病之一。疫苗免疫接种是有效防治和根除伪狂犬病的根本措施。此文就伪狂犬病主要的毒力基因,以及不同的基因缺失苗的特性进行了综述,并对今后的发展进行了展望。 相似文献
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伪狂犬病病毒3基因缺失株(SA215)的遗传稳定性研究 总被引:4,自引:3,他引:4
测定了伪狂犬病病毒Fa株3基因缺失株(SA215)在鸡胚成纤维细胞上连续传代15代次,在非免疫仔猪体内连续传代5代次后,病毒毒价及对易感动物的安全性变化。并以核酸杂交、核酸酶切和gE-ELISA检测技术分别研究了缺失株(SA215)传代后不同代次病毒的外源插入基因(LacZ)、缺失基因(TK、gE、gI)遗传变异情况。结果表明缺失株(SA215)毒价及对易感动物安全性未发生变化,外源插入基因得到稳定遗传,缺失基因未见回复突变,证明缺失株(SA215)具有良好遗传稳定性。 相似文献
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伪狂犬病病毒Min-A株gD基因的克隆及其真核表达质粒的构建 总被引:1,自引:0,他引:1
参考GeneBank收录的伪狂犬病病毒gD基因的序列设计了一对引物,对PRV Min-A株进行了PCR扩增,扩增产物克隆于pGEM-T Easy载体.对重组质粒PGTE-gD进行限制性内切酶分析和基因测序,证实了克隆片段的可靠性.测序结果表明目的片段包含一个1203bp的开放性阅读框(ORF),编码400个氨基酸组成的多肽.将gD基因亚克隆至真核表达载体pcDVA3.1-的CMV启动子下游,构建了真核表达质粒pcDNA-gD,为下一步基因免疫奠定了基础. 相似文献
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自测12条PRV不同毒株的gD全序列连同GeneBank中登录的9条gD基因全序列共21条基因序列,使用生物软件对它们的基因序列的同源性、突变区域的定位、遗传进化关系、酶切位点的差异、密码子偏爱性,氨基酸序列的同源性、蛋白质亲水性、抗原表位分析、三级结构预测等生物信息学的内容进行预测和分析.结果表明:PRV-gD基因的开放阅读框的核苷酸长度在1 197~1 215 nt之间,氨基酸长度在399~405个之间,核酸同源性在97.3%~100%之间,氨基酸的同源性在89.8%~98.8%之间,在核酸820~837位有个高变重复区,不同毒株基因均对GC极为偏爱.在遗传进化关系上将我国PRV流行分为四川、华北、东南3个区域.毒株间基因内酶切位点、蛋白质亲水性、抗原表位和蛋白质高级结构预测等内容的分析结果十分相似,说明PRV-gD基因具有很高的保守性. 相似文献
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为研究猫疱疹病毒1型(FHV-1)的分子流行病学特征,对2016年-2017年从洛阳及天津地区多家宠物医院收集的具有上呼吸道感染症状的病猫眼鼻拭子样品,用FK-81细胞进行病毒分离,通过间接免疫荧光试验、电镜形态观察和gD基因测序分析等方法鉴定所分离的病毒,并进行病毒体外生长动力学研究。结果显示,病料在FK-81细胞上接种后24 h^36 h呈现变圆、融合、局灶性堆积聚团和脱落等细胞病变;分离毒株可被FHV-1单克隆抗体特异性识别;电镜下可观察到病毒粒子呈圆形、有囊膜、直径约130 nm,具有疱疹病毒科的典型形态特征,将所分离到的5株FHV-1分别命名为2016TJ1株、2016TJ2株、2017LY1株、2017LY2株和2017LY3株;病毒一步生长曲线测定结果显示,接种后12 h^36 h病毒快速增殖,40 h^60 h病毒滴度达到高峰,72 h病毒滴度开始下降;5株FHV-1 gD基因序列之间的同源性为100%,核酸序列高度保守且与国内外流行株及疫苗株的同源性极高。研究结果为我国宠物猫群中FHV-1的病原分离、分子流行病学调查等研究积累了资料。 相似文献
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鸡传染性喉气管炎病毒王岗株gC和gD基因的克隆及序列分析 总被引:4,自引:0,他引:4
根据已发表的传染性喉气管炎病毒(ILTV)SA-2株的核酸序列,设计了1对引物,以ILTV-中国王岗株DNA为模板,PCR法扩增出1条1.39kb的基因片段,将扩增产物插入到真核表达质粒pCR^TM3-Uni,得到重组质粒pTA-gD,另将克隆到pBluescript SK质料中的gC基因酶毁后,插入到pCR^TM3-Uni载体,得到重组质粒pTA-gC,经电泳分析、酶分、PCR鉴定后,进行序列测 相似文献
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运用PCR技术扩增出伪狂犬病病毒糖蛋白gD基因,将该基因定向克隆于真核表达载体pcDNA3.1+、pCI-neo中,命名重组质粒为pcD-gD、pCI-gD.以小鼠为动物模型,对构建的基因疫苗进行免疫原性的初步评价.为了证明细胞因子是否能增强基因疫苗的免疫效力,本试验用IL-15的表达质粒联合pcD-gD、pCI-gD免疫.结果表明,重组质粒组主要提高细胞免疫水平,特别是联合组中的CD8~+相对其他组别较高.重组质粒在体液免疫方面没有表现出优势,抗体滴度达不到阳性对照组的水平,但是整个抗体水平相对稳定,提示DNA疫苗诱导的抗体维持时间较长. 相似文献
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对牛传染性鼻气管炎病毒(IBRV)内蒙古分离株gB、gC、gD基因进行克隆和序列测定,结果表明IBRV内蒙古分离株gB、gC、gD基因序列分别为2 850、1 723、1 559bp,编码933、508、417个氨基酸组成的完整开放阅读框。序列比较和系统进化树分析结果显示:内蒙古分离株与其他毒株gB、gC、gD基因核苷酸序列的相似性为94.9%~99.9%,其推导的氨基酸相似性在90.3%~99.7%,不同IBRV毒株gB、gC、gD基因在核苷酸和氨基酸水平上高度保守。在系统进化树中内蒙古分离株与瑞典毒株亲缘关系较近,属于同一个分支。 相似文献