不同能量摄入对围产期奶牛脂肪组织胰岛素受体mRNA丰度的影响

将年龄、胎次相同,年产奶量大于5000kg的围产期健康奶牛30头随机分为3组,每组10头。按照中国奶牛饲养标准(2000),低能组饲喂减少20%日粮(能量摄入80%组),对照组饲喂标准日粮(能量摄入100%组),高能组饲喂增加20%日粮(能量摄入120%组),试验从产前14天开始至产后28天结束,产后各组奶牛均饲喂标准日粮。采用半定量RTPCR方法检测了不同能量摄入对围产期奶牛脂肪组织胰岛素受体(InsR)mRNA丰度的影响。结果表明:各组脂肪InsRmRNA相对表达量从产前14天至产后28天均呈现先升高后降低的趋势,产后14天达到最大值,且产后高于产前;低能组产前InsRmRNA相对表达量低于高能组和正常组,产后1天至产后28天高于高能组和正常组,产后14天显著高于高能组(P<0.01)。可见,干乳期低能饲喂奶牛,产后脂肪InsRmRNA表达增加,提示产前适当降低能量摄入水平,有利于胰岛素抑制泌乳初期脂肪动员作用的发挥。     

不同能量摄入水平对围产期奶牛肝MTP mRNA丰度的影响

将年龄、胎次相同，年产奶量大于7000kg的围产期荷斯坦奶牛30头随机分为3组，每组10头，低能量组（Ⅰ组）按中国奶牛营养标准2000年版减少20％日粮（能量摄入80％），高能量组（Ⅱ组）则按此标准增加20％日粮（能量摄入120％），对照组（Ⅲ组）按标准日粮（能量摄入100％）饲喂，试验从产前28d到产后56d结束，分娩后各组均按标准配制相同的泌乳日粮。分别于产前28、14d及产后1、14、28、56d采取肝活体组织。应用内对照RT—PCR方法检测肝脏组织MTPmRNA丰度。结果显示，各组奶牛肝MTPmRNA丰度均呈现先升高后降低的趋势。产后均高于产前，且产后1～28d差异显著（P〈0．01或P〈0．05），而后回降，至56d趋于平稳（P〉0．05）；Ⅲ组肝MTP mRNA丰度在产后1d达到峰值，而Ⅰ组和Ⅱ组在产后14d达到最大值（P〈0．01）；Ⅱ组产后1～28d显著高于I组。产后14d显著高于Ⅲ组（P〈0．01）；Ⅲ组产后1d和28d显著高于Ⅰ组（P〈0．01或P〈0．05）。这些结果表明，围产期奶牛能量摄入水平对肝MTP mRNA丰度有显著影响。     

不同能量摄入水平对围产期奶牛肝载脂蛋白E mRNA丰度的影响

将年龄、胎次相同，年产奶量大于5000kg的围产期健康奶牛30头随机分为3组，每组10头。低能组饲喂中国奶牛饲养标准（2000）减少20％日粮（能量摄入80％组）、对照组饲喂中国奶牛饲养标准（2000）日粮（能量摄入100％组）和高能组饲喂中国奶牛饲养标准（2000）增加20％日粮（能量摄入120％组），试验从产前28d开始至产后56d结束，产后各组奶牛均饲喂标准日粮。采用内对照RT-PCR方法检测了不同能量摄入围产期奶牛肝组织载脂蛋白E（apolipoprotein E，apoE）mRNA丰度。结果表明：apoE mRNA相对表达量从产前28d至产后56d各组均呈现先升高后降低的趋势，各组apoE mRNA水平均在产后一天达到最大值（P〈0．01），且产后均高于产前（产后56d除外）；产前14d至产后28d低能组apoE mRNA相对表达量均高于其他两组（P〈0．05或P〈0．01），高能组在产后28d和56d高于对照组（P〈0．01）。可见，围产期奶牛能量摄入水平对肝组织载脂蛋白E mRNA丰度有显著影响。     

不同能量摄入水平对围产期健康奶牛生产性能及脂肪代谢的影响

将健康的30头围产期奶牛随机分为3组，分别于产前28天开始饲喂NRC标准日粮、NRC标准增加20％的日粮和NRG标准减少20％的日粮，产后各组奶牛均饲喂标准日粮，至产后56天结束。观察干奶期不同能量摄入水平对产后奶牛干物质摄入量、泌乳量及脂肪代谢的的影响。试验结果表明：围产期是机体生理状况处于剧烈变化的时期，奶牛产后的脂肪代谢活动较产前明显增强，但健康奶牛均能通过调整糖代谢、脂代谢和蛋白质代谢，促进能量与营养物质间的相互转化，适应机体的各种生理变化。     

干奶期不同能量摄入对围产期奶牛糖异生的影响

将围产期健康奶牛30头随机分为三组,分别于产前第28d开始饲喂标准日粮(能量摄入100%组)、标准日粮增加20%日粮(能量摄入120%组)和标准日粮减少20%日粮(能量摄入80%组),产后各组奶牛均饲喂标准泌乳日粮,至产后第56d结束,观察干奶期不同能量摄入水平对围产期健康奶牛糖异生的影响。结果表明,产前低能饲喂可以增加围产期奶牛血浆葡萄糖(GLU)浓度,肝脏丙酮酸羧化酶(PC)和磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶(PEPCK)基因表达升高。说明干奶期低能饲喂奶牛,可以增强围产期奶牛的肝糖异生能力。     

干奶期奶牛不同能量摄入对其肝脏胰岛素受体mRNA表达的影响

将健康围产期奶牛30头随机分为3组,预产前28 d分别饲喂奶牛标准日粮（能量摄入100%组）、标准日粮增加20%日粮（能量摄入120%组）和标准日粮减少20%日粮（能量摄入80%组）,产后各组奶牛均饲喂标准的产奶日粮,至产后56d结束,采用半定量RT-PCR方法,观测干奶期不同能量摄入水平对围产期健康奶牛肝脏胰岛素受体（IR）基因表达的影响.试验结果表明,干奶期低能饲喂奶牛,产后肝脏IR mRNA表达增加,提示低能饲喂有利于调节奶牛产后血糖平衡.     

不同能量摄入水平对奶牛产乳性能及血液中Leptin和NPY浓度的影响研究

将30头围产期健康奶牛随机分为3组,每组均为10头,其中Ⅰ组为对照组,Ⅱ组和Ⅲ组为试验组;Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别于产前第28d开始饲喂标准日粮(能量摄入100%组)、标准日粮增加20%能量(能量摄入120%组)和标准日粮减少20%能量(能量摄入80%组),产后各组奶牛均饲喂标准泌乳日粮,至产后第56d结束,观察不同能量摄入水平对产后奶牛产乳性能及血液中瘦素(Leptin)和神经肽Y(NPY)浓度的影响。试验结果表明,产前饲喂低能日粮不仅提高了产后奶牛产乳性能,而且提高了产后奶牛血液中Leptin和NPY浓度。可见,奶牛不同能量摄入水平与产奶量及血液中Leptin和NPY浓度之间存在着密切的关系。     

干奶期不同能量摄入水平对奶牛产后能量负平衡的影响

选择围产期健康奶牛30头,随机分为三组,产前第28d开始,饲喂不同能量日粮,即对照组(C组)、高能量组(H组)和低能量组(L组);产后各组奶牛均饲喂标准泌乳日粮,至产后56d结束。研究干奶期不同能量摄入水平对产后奶牛能量负平衡的影响。结果表明:低能量组奶牛产后干物质摄入量显著高于其它两组、体重消耗较低,能量负平衡状态缓解。     

能量摄入水平对围产期奶牛生产性能的影响

将健康围产期奶牛24头随机分为3组,分别于产前28天开始饲喂NRC标准日粮(能量摄入100%组)、NRC标准增加20%日粮(能量摄入120%组)和NRC标准减少20%日粮(能量摄入80%组),产后各组奶牛均饲喂标准日粮,至产后56天结束,观察干奶期不同能量摄入水平对产后奶牛生产性能的影响。结果表明,高能量组奶牛产后干物质采食量和产奶量均显著低于其它2组,并且体重消耗明显,各组间乳成分的变化差异不显著。因此,干奶期能量摄入水平是影响和调节产后干物质摄入量﹑产乳量和能量平衡状态的重要因素。     

不同能量摄入水平对围产期奶牛生产性能及血浆瘦素浓度影响的研究

将健康的围产期奶牛30头随机分为3组, 每组10头。其中Ⅱ组为对照组, Ⅰ组和Ⅲ组分别为试验组。Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组均于产前28d开始分别饲喂NRC标准减少20%日粮(能量摄入80%组)、NRC标准日粮(能量摄入100%组)、NRC标准增加20%日粮(能量摄入120%组), 产后各组奶牛均饲喂标准日粮, 至产后56d结束。观察妊娠后期奶牛不同能量水平对干物质摄入量、产奶量、乳成分及体重等生产性能和血浆瘦素浓度的影响。试验结果表明: 奶牛产后干物质摄入量、产奶量、乳中蛋白质、乳脂率和非固体物质为Ⅰ组高于Ⅱ组、Ⅱ组又高于Ⅲ组(P>0 05 ); 同时血浆瘦素浓度为Ⅰ组高于Ⅱ组、Ⅱ组又高于Ⅲ组, 经统计分析组间差异极显著(P<0 01) 或差异显著(P<0 05); 但产前28~14d瘦素浓度组间差异均不显著(P>0 05 ), 此后Ⅰ组和Ⅲ组差异显著(P<0 05 )。此外, Ⅰ组体重消耗最小, Ⅲ组体重消耗最大, 各组间差异极显著(P<0 01)。可见, 围产期健康奶牛不同能量水平与干物质摄入量、产奶量、乳成分、体重等生产性能及血浆瘦素浓度之间存在着密切的关系。     

瘦蛋白(Leptin)对体外培养新生牛脂肪细胞Leptin、HSL基因表达的影响

取单层生长良好的脂肪细胞,采用单因素重复试验,分别添加0、2.5、5、10、50、100μg/L的外源牛重组瘦蛋白(Leptin),培养12h后提取总RNA,每个处理3个重复(孔),应用半定量PCR方法检测外源Leptin对脂肪细胞Leptin mRNA和HSL mRNA水平的影响.结果表明,Leptin对脂肪细胞内Leptin mRNA表达具有抑制作用,但一定浓度的Leptin能提高脂肪细胞内HSL mRNA水平,其中以5μg/L Leptin的作用最为明显;当Leptin的质量浓度超过5μg/L,HSL mRNA表达水平呈下降趋势.     

健康奶牛围产期脂肪组织ADPN mRNA和HSLmRNA丰度

为探讨脂联素(ADPN)与激素敏感脂肪酶(HSL)对围产期奶牛脂肪动员的影响及其相互关系,随机选取围产期健康奶牛10头,分别于产前28天、产前14天、产后1天、产后14天和产后28天,应用荧光定量RT-PCR法检测其脂肪组织ADPN mRNA和HSL mRNA丰度。结果表明:在围产期,随着分娩日龄的临近,其脂肪组织的HSL mRNA水平随着ADPN mRNA丰度的降低而下降,产后则随其升高而上升,初步推测脂联素可能是通过调控脂肪HSL mRNA的表达和分泌来调节围产期奶牛脂肪的。     

胰岛素、胰高血糖素对体外培养的牛脂肪细胞HSL mRNA和ADPN mRNA丰度的影响

试验在单层培养的新生犊牛脂肪细胞中,分别添加胰岛素（INS）与胰高血糖素（GN）,每个激素设置6个梯度3个重复,通过荧光定量PCR技术,观测2种激素对ADPN mRNA与HSL mRNA丰度的影响。结果表明,胰岛素抑制了脂肪细胞ADPN mRNA与HSL mRNA的表达,胰高血糖素促进了ADPN mRNA与HSL mRNA的表达,且ADPNmRNA与HSL mRNA存在相关性。     

摄入不同能量的围产期乳牛肝低密度脂蛋白受体mRNA丰度的比较

将30头健康、经产、处于围产期的黑白花乳牛随机分为3组，每组10头。从产前28d开始，低能量组乳牛饲喂《中国奶牛饲养标准（2000）》减少20％日粮（能量摄入80％），对照组乳牛饲喂《标准》日粮（能量摄入100％），高能量组乳牛饲喂《标准》增加20％日粮（能量摄入120％），产后各组乳牛均饲喂标准日粮。至产后第56d结束试验；采用内对照RT-PCR方法检测摄入不同能量的围产期乳牛肝活体组织低密度脂蛋白受体（LDLR）mRNA丰度。结果，不同能量组乳牛肝LDLR mRNA丰度产前至产后均呈现先升高后降低的趋势。100％和120％能量组肝LDLR mRNA丰度在产后14d达最大值，且产后均高于产前（产后56d除外，P〈0．01或P〈0．05）；而80％能量组产后1d即达到最大值，产前14d至产后14d，LDLR mRNA相对表达量显著高于100％和120％能量组；产后28～56d，120％能量组显著高于80％和100％能量组（P〈0．01）。表明围产期乳牛能量摄入水平对肝LDLR mRNA丰度有显著影响。     

地塞米松、油酸、乳酸对体外培养脂肪细胞HSL mRNA表达的影响

取体外培养生长良好脂肪细胞,培养介质中分别添加0、10、20、40、80、160mg/L地塞米松,0、0.5、1.0、1.5、2.0、2.5mmol/L油酸,0、10、20、30、40、50mg/L乳酸,培养24h后提取总RNA,每个处理3个重复,分别采用荧光定量PCR法检测地塞米松、油酸、乳酸对脂肪细胞HSL mRNA丰度的影响。结果表明油酸、乳酸抑制脂肪细胞内HSL mRNA表达,抑制作用随浓度增加而增强;地塞米松促进脂肪细胞内HSL mRNA表达,是剂量依赖性。     

日粮类型对猪肌肉组织HSL mRNA和Obese mRNA基因表达的影响

选用20 kg左右的"杜×长×大"外三元杂交仔猪20头,随机分为2组,分别饲喂豆粕型和杂粕(双低菜籽粕+豆粕)型2种不同类型的日粮,饲养猪至体重达到100 kg左右时屠宰测定瘦肉率,取背最长肌肌肉组织,采用RT-PCR技术检测分析HSL mRNA和Obese mRNA表达情况,以探索出日粮类型与基因表达的关系。结果显示,杂粕日粮较豆粕日粮可显著增加HSL mRNA表达量、减少Obese mRNA表达量(P<0.05),2种日粮类型虽对猪瘦肉率无显著性影响,但是从实际值来看,杂粕日粮表现出提高趋势,较豆粕日粮提高3.5%(P>0.05)。     

Serum leptin levels during the periparturient period in cows

Serum leptin concentrations were measured in antenatal and postnatal cows housed at two different locations. The mean serum leptin concentration was 9.2 +/- 0.6 ng/m l (n=22) in one group, and was slightly lower in the other (7.4 +/- 0.4 ng/ml, n=54), probably because of the different nutritional conditions between the two groups. There was no consistent variation in relation to the menstrual cycle and the periparturient period in both groups. Moreover, serum leptin concentrations during the periparturient period were independent of the number of delivery and the incidence of mastitis and milk fever. These results are quite different from those in rodents and human, suggesting the different regulatory mechanism of circulating leptin concentration in cows.     

地塞米松、油酸、乳酸对体外培养脂肪细胞HSL mRNA表达的影响

为了研究地塞米松、油酸、乳酸对HSL mRNA表达的影响,试验采用实时荧光定量方法检测脂肪细胞中HSL mRNA的表达量。结果表明:油酸、乳酸抑制脂肪细胞内HSL mRNA表达,抑制作用随着浓度增加而增强;地塞米松促进脂肪细胞内HSL mRNA表达,促进作用存在剂量依赖性。