依普黄酮对骨质疏松症笼养蛋鸡OPG和RANKL表达的影响

选用200只24周龄健康海兰褐蛋鸡,随机分为4组:对照组(基础日粮中含钙3.55％)、低钙组(日粮合钙1.27％)、试验Ⅰ组(依普黄酮8 mg/kg,低钙日粮)和试验Ⅱ组(依普黄酮20 mg/kg,低钙日粮),观察依普黄酮对骨质疏松症笼养蛋鸡血清及骨骼骨保护素(Osteo protegerin,OPG)/核因子-相受体活化因子配体(Receptor activatorof NF-κB ligand,RANKL)表达的影响.结果显示:与低钙组相比,30 d时,试验Ⅰ组和Ⅱ组血清OPG分别显著升高33.12％和60.19％(P＜0.05)；60 d时,试验Ⅰ组和Ⅱ组血清OPG分别显著升高35.89％和61.59％ (P＜0.05)；30 d时,试验Ⅰ组和Ⅱ组血清RANKL分别极显著降低63.85％和70.87％(P＜0.01)；60 d时,试验Ⅰ组和Ⅱ组血清RANKL分别极显著降低69.98％和72.85％ (P＜0.01).与低钙组相比,试验Ⅰ组和Ⅱ组骨组织OPG平均光密度分别显著(P＜0.05)和极显著(P＜0.01)升高,试验Ⅰ组和Ⅱ组蛋鸡骨组织RANKL平均光密度极显著低于低钙组蛋鸡(P＜o.01).试验Ⅰ组和Ⅱ组OPG/RANKL值高于低钙组.结果表明,低钙日粮中添加依普黄酮对蛋鸡骨质疏松症可起到一定改善作用,这可能与OPG上调,RANKL下调,影响RANKL信号通路,使其骨量增加,骨结构改善密切相关.     

骨保护素和核因子κB受体活化因子配基对体外培养鸭破骨细胞的影响

探讨了核因子κB受体活化因子配基(Receptor activator of NF-κB ligand,RANKL)和不同浓度骨保护素(Os-teoprotegerin,OPG)对鸭破骨细胞(Osteoclasts,OC)生成和活化的影响.从7日龄内番鸭长骨骨髓分离破骨细胞,添加1,25-(OH)2D3进行诱导培养15 h后,更换含不同细胞因子的培养液(对照组:不加细胞因子;30 μg/LsRANKL组;30 μg/L sRANKL+10 μg/L OPG组;10μg/L OPG组;50 μg/L OPG组;100 μg/L OPG组),继续培养.倒王显微镜进行OC形态学观察,比较各组培养3 d后抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)阳性OC数量、培养7 d后扫描电镜观察象牙片吸收陷窝.结果表明:50 μg/L OPG组、100μg/L OPG组OC数均极显著少于10 μg/LOPG组(P<0.01);添加OPG组OC数均极显著少于30μg/L sRANKL组(P<0.01),象牙片吸收陷窝随OPG添加浓度的增加而减少,面积减小,陷窝深度变浅.RANKL能够促进OC的生成及活化,而OPG可与RANKL竞争性地结合RANK抑制OC的生成和活化,从而抑制OC的骨吸收.     

OPG/RANKL/RANK系统的研究进展

OPG/RANKL/RANK系统是近年来骨科研究领域中的重大突破,研究发现许多激素、细胞因子等均通过直接或间接的调节骨保护素(osteoprotegerin,OPG),核因子-κB受体活化因子配体(receptor activator ofNF-κB ligand,RANKL)的表达,调控OPG、RANKL和核因子-κB受体活化因子(recep-tor activator of NF-κB,RANK)之间的比例,从而介导破骨细胞的分化和功能而达到抗骨质疏松或致骨质疏松的作用。现就OPG/RANKL/RANK系统在骨质疏松中的作用做一综述。     

自噬在骨保护素对破骨细胞及其前体凋亡过程的调控机制

为了探讨骨保护素(osteoprotegerin,OPG)对破骨细胞及其前体自噬与凋亡的影响,本研究以RAW264.7细胞诱导分化形成的破骨细胞(osteoclasts,OCs)及其前体(osteoclast precursors,OCPs)为研究对象,通过自噬促进剂雷帕霉素(rapamycin,RAP)或自噬抑制剂氯喹(chloroquine,CQ)分别预处理1h和30 min后,再添加80ng·mL-1OPG作用细胞6h,试验分为对照组(Con)、OPG、CQ、CQ+OPG、RAP和RAP+OPG组,利用免疫印迹法(Western blot)检测细胞自噬相关蛋白;流式细胞术Annexin V-FITC/PI双标记法检测细胞凋亡率。结果显示,与对照组相比,OPG组OCPs的Atg5和Beclin-1水平极显著或显著上调(P0.01或P0.05),但LC3-Ⅱ无显著差异(P0.05);与OPG组相比,RAP+OPG组OCPs中的LC3-Ⅱ水平极显著上调(P0.01);与对照组相比,OPG组OCs中LC3-Ⅱ、Atg5和Beclin-1水平极显著下调(P0.01);与OPG组相比,RAP+OPG组OCs的Atg5和Beclin-1水平极显著下调(P0.01)。与对照组相比,OPG处理组和RAP+OPG组OCPs凋亡率极显著上升(P0.01),CQ+OPG组凋亡率无显著差异(P0.05);RAP+OPG比OPG组OCPs凋亡率极显著增加(P0.01);与对照组相比,OPG组OCs凋亡率极显著降低(P0.01),CQ+OPG组凋亡率极显著下降(P0.01),RAP+OPG组凋亡率极显著下降(P0.01)。表明OPG能够促进OCPs发生自噬,而自噬的激活促进了OCPs的凋亡;OPG抑制OCs自噬的发生,并且抑制和激活自噬都能抑制OCs的凋亡。     

鹿角盘不同提取部位对环磷酰胺致小鼠骨质疏松的防治作用

建立了环磷酰胺所致小鼠骨质疏松模型,利用空白对照组和葡萄糖酸钙阳性组做对比,以小鼠免疫器官脏器指数、股骨计量学、骨钙、磷、镁、骨羟脯氨酸含量为指标观察鹿角盘提取物对小鼠免疫功能、骨量的影响.结果:20mg/(kg·d)环磷酰胺可引起小鼠胸腺指数下降(P＜0.01),股骨干重、股骨横径减少(P＜0.01),股骨长减少(P＜0.05),骨钙、羟脯氨酸含量同时下降(P＜0.01),引起小鼠骨丢失;鹿角盘水提物和70％乙醇提取物均可增加小鼠股骨的干重和骨钙的含量,水提物高剂量组和70％乙醇提取物高低、高剂量组使骨羟脯氨酸含量显著提高.结果表明鹿角盘对以低转换型骨丢失为特征的骨质疏松具有一定的预防作用.     

TNF-α/IL-1α机制对破骨细胞形成和活化的影响

为了探讨肿瘤坏死因子α(TNF-α)/鼠重组白介素-1α(IL-1α)是否能独立于RANKL/RANK/ OPG机制之外直接刺激破骨细胞(OC)的形成和活化.提取4周龄C57雌性小鼠脾细胞,加入鼠巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)TNF-α(±IL-1α)进行体外培养,同时加入骨保护素(OPG)和可溶性NF-κB受体活化子配体(sRANKL)以区别RANKL/RANK/OPG机制.通过OC形态学观察、抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色、骨吸收陷窝方法鉴定OC的形成和活化水平.结果显示:TNF-α(±IL-1α)能诱导睥细胞融合产生TRAP阳性的多核细胞并在象牙片上产生吸收陷窝,加入OPG不能阻断其诱导破骨细胞形成和产生骨吸收陷窝.结果表明:在MCSF存在的情况下,TNF-α以一种独立于RANKL/RANK/OPG之外的机制诱导破骨细胞的形成和活化,而且IL-1α能显著促进TNF-α的诱导作用(P＜0.05).     

D-半乳糖联合低钙粮诱导小鼠骨量减少模型的构建

本研究用D-半乳糖联合低钙粮饲喂诱导小鼠，建立氧化应激伴骨量减少模型，为抗氧化、抗骨量减少药物的研究与开发提供依据。试验选取84只雌性昆明小鼠，随机分成空白对照组、低钙粮组、中钙粮组、D-半乳糖诱导组、D-半乳糖[6～10 g/(kg·d)]联合低钙粮组、D-半乳糖[2～10 g/(kg·d)]联合中钙粮组。按照不同方法处理各组小鼠20 d,取小鼠股骨测定骨干湿重、股骨系数与骨密度，取眼球血，分离血清测定SOD活力、MDA含量和OPG含量。结果显示，与空白对照组比较，中钙粮组和低钙粮组小鼠股骨系数、骨干湿比、血清SOD活力和OPG含量均显著降低(P<0.05);D-半乳糖诱导组、D-半乳糖联合低钙粮组及D-半乳糖联合中钙粮组小鼠骨干湿比、血清SOD活力与OPG含量均显著降低(P<0.05),但仅有D-半乳糖[10 g/(kg·d)]联合低钙粮组小鼠股骨密度显著降低(P<0.05),血清MDA含量显著升高(P<0.05)。结果提示，皮下注射D-半乳糖联合低钙粮饲喂，造模20 d后可成功构建小鼠骨量减少模型。     

低水平镉暴露对破骨细胞分化的影响

为研究低水平镉(Cd)暴露对破骨细胞(osteoclast,OC)分化的影响,试验以RAW264.7细胞(单核巨噬细胞系)为材料,在巨噬细胞集落刺激因子(M-CSF)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)存在的条件下,用不同浓度Cd处理4 d;利用CCK-8法检测破骨细胞及其前体细胞活性变化,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色试验观察破骨细胞生成,激光共聚焦显微镜观察破骨细胞形态变化,蛋白免疫印迹(Western blot)技术和荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测破骨细胞标志性蛋白及其mRNA水平。结果显示,随着Cd浓度升高,细胞活力受到明显的抑制(P<0.01),并呈浓度-效应关系;与对照组相比,破骨细胞产生的数目和面积均显著或极显著下降(P<0.05或P<0.01);2、5μmol·L^-1 Cd处理组破骨细胞封闭带的形成均受到抑制;2和5μmol·L^-1 Cd处理组破骨细胞特异性蛋白及其mRNA表达量均显著或极显著下降(P<0.05或P<0.01),并呈剂量依赖性。结果表明,低微摩尔水平镉暴露能够抑制破骨细胞的分化。     

饲粮不同磷水平和钙磷比对育成期水貂生长性能、营养物质消化率及氮、钙、磷代谢的影响

本试验旨在研究饲粮不同磷水平和钙磷比对育成期水貂生长性能、营养物质消化率及氮、钙、磷代谢的影响。选取70日龄体重相近的雌性水貂90只,随机分为9组,每组10个重复,每个重复1只。采用3×3双因子试验设计,设3个磷水平分别为1.0%、1.4%、1.8%,3个钙磷比分别为1.0、1.5、2.0,配制9种试验饲粮,9种试验饲粮的钙、磷水平实测值如下:1.02%钙、0.96%磷(Ⅰ组),1.49%钙、1.00%磷(Ⅱ组),1.98%钙、1.01%磷(Ⅲ组),1.47%钙、1.35%磷(Ⅳ组),2.11%钙、1.40%磷(Ⅴ组),2.81%钙、1.40%磷(Ⅵ组),1.83%钙、1.73%磷(Ⅶ组),2.70%钙、1.80%磷(Ⅷ组),3.59%钙、1.80%磷(Ⅸ组)。预试期7 d,正试期60 d。结果表明:1)饲粮磷水平对育成期水貂的末重、平均日增重有极显著影响(P0.01),对平均日采食量、料重比有显著影响(P0.05)。饲粮钙磷比只对育成期水貂的平均日增重有极显著影响(P0.01),对末重、平均日采食量和料重比的影响不显著(P0.05)。饲粮磷水平与钙磷比对育成期水貂的平均日增重有极显著交互作用(P0.01)。Ⅴ组的末重、平均日增重最大,料重比最小。2)育成期水貂蛋白质消化率差组间差异显著(P0.05),具体表现为Ⅴ、Ⅵ、Ⅷ组显著高于Ⅰ组(P0.05),同时Ⅴ、Ⅵ组还显著高于Ⅲ组(P0.05)。饲粮磷水平极显著影响育成期水貂的蛋白质消化率(P0.01)。饲粮钙磷比对育成期水貂各营养物质消化率的影响不显著(P0.05),但脂肪消化率有随饲粮钙磷比的升高呈先增加后降低的二次变化趋势。3)氮沉积表现为Ⅵ组显著高于Ⅰ和Ⅷ组(P0.05),净蛋白质利用率表现为Ⅵ、Ⅶ、Ⅸ组极显著高于Ⅱ和Ⅷ组(P0.01),蛋白质生物学价值以Ⅸ组最高,但与Ⅵ和Ⅶ组差异不显著(P0.05)。粪氮含量有随饲粮磷水平的升高而下降的趋势,净蛋白质利用率、蛋白质生物学价值有随饲粮磷水平的升高而增加的趋势。饲粮钙磷比对净蛋白质利用率、蛋白质生物学价值有极显著影响(P0.01)。4)粪钙、粪磷含量及钙、磷消化率组间存在极显著差异(P0.01),以Ⅸ组粪钙、粪磷含量最高,Ⅵ组钙消化率最高,Ⅶ组磷消化率最高。饲粮磷水平、钙磷比对育成期水貂粪钙、粪磷含量及钙、磷消化率有极显著影响(P0.01)。饲粮磷水平与钙磷比对育成期水貂的粪钙含量、钙消化率有极显著交互作用(P0.01),对粪磷含量有显著交互作用(P0.05)。综合各项指标,饲粮中磷水平在1.4%~1.8%、钙磷比在1.5~2.0时,育成期水貂可以获得较好的生长性能及较高的营养物质消化率。     

饲粮不同磷水平和钙磷比对冬毛期水貂生长性能、营养物质消化率及氮、钙、磷代谢的影响

本试验旨在研究饲粮不同磷水平和钙磷比对冬毛期水貂生长性能、营养物质消化率及氮、钙、磷代谢的影响。选取(130±10)日龄体重相近的健康雌性水貂90只,随机分为9组,每组10个重复,每个重复1只。采用3×3双因子试验设计,设3个磷水平分别为1.0%、1.4%、1.8%,3个钙磷比分别为1.0、1.5、2.0,配制9种试验饲粮,9种试验饲粮的钙、磷水平实测值如下:1.03%钙、0.97%磷(Ⅰ组),1.47%钙、0.98%磷(Ⅱ组),1.98%钙、0.99%磷(Ⅲ组),1.45%钙、1.37%磷(Ⅳ组),2.08%钙、1.38%磷(Ⅴ组),2.79%钙、1.38%磷(Ⅵ组),1.81%钙、1.75%磷(Ⅶ组),2.70%钙、1.79%磷(Ⅷ组),3.59%钙、1.80%磷(Ⅸ组)。预试期10 d,正试期67 d。结果表明:1)饲粮磷水平和钙磷比以及二者的交互作用极显著影响冬毛期水貂的末重、平均日增重(P0.01)。Ⅴ组的末重、平均日增重极显著高于其他组(P0.01)。2)干物质、蛋白质、脂肪消化率有随着饲粮钙磷比和磷水平的升高先增加后降低的趋势,且均在Ⅲ组达到最大值。3)饲粮磷水平和钙磷比以及二者的交互作用对冬毛期水貂食入氮、尿氮、粪氮、氮沉积、净蛋白质利用率、蛋白质生物学价值的影响不显著(P0.05)。4)随着饲粮磷水平的升高,粪钙含量随之增加,组间差异极显著(P0.01);Ⅷ、Ⅸ组粪钙含量显著或极显著高于除Ⅶ组外的其他各组(P0.05或P0.01)。随着饲粮磷水平的升高,粪磷含量随之增加,组间差异显著或极显著(P0.05或P0.01);饲粮钙磷比为2.0时粪磷含量最低,极显著低于饲粮钙磷比为1.0和1.5时(P0.01);Ⅷ、Ⅸ组粪磷含量显著或极显著高于除Ⅶ组外的其他各组(P0.05或P0.01)。饲粮磷水平和钙磷比极显著影响钙消化率(P0.01)。随着饲粮钙磷比的升高,钙消化率极显著升高(P0.01)。Ⅲ组钙消化率最高,极显著高于除Ⅵ和Ⅸ组外的其他各组(P0.01)。饲粮磷水平和钙磷比对磷消化率的影响不显著(P0.05),但二者的交互作用对磷消化率有显著影响(P0.05)。磷消化率以Ⅰ组最低,Ⅲ组最高。综合各项指标,从降低饲粮成本、保护环境和维持冬毛期水貂生长性能的角度出发,饲粮磷水平在1.4%、钙磷比在1.5~2.0时较为适宜。     

不同钙水平饲粮添加维生素D_3对产蛋后期蛋鸡生产性能、蛋品质、胫骨质量和血浆钙磷代谢的影响

本试验旨在研究不同钙水平饲粮添加维生素D_3对产蛋后期蛋鸡生产性能、蛋品质、胫骨质量和血浆钙磷代谢的影响。采用3×3因子设计,即3个钙水平(3.0%、3.5%和4.0%)和3个维生素D_3添加水平(0、2 500和5 000 IU/kg)。选取60周龄罗曼粉壳蛋鸡810只,随机分为9个组,每组6个重复,每个重复15只鸡。试验采用玉米-豆粕型饲粮,试验预试期1周,正试期6周。结果表明:1)与未添加维生素D_3组相比,添加维生素D_3组蛋鸡平均日采食量和产蛋率极显著升高(P0.01),料蛋比、破蛋率和软壳蛋率极显著降低(P0.01)。随着饲粮钙水平和维生素D_3添加水平的不断提高,鸡蛋的平均蛋重增加,脏蛋率减少,但差异不显著(P0.05)。2)与未添加维生素D_3组相比,添加维生素D_3组蛋壳强度、蛋壳重和蛋壳比重极显著升高(P0.01),蛋壳厚度显著提高(P0.05),蛋黄重显著降低(P0.05)。随着饲粮钙水平的升高,蛋壳强度呈现升高的趋势,但未达到显著水平(P0.05)。3)不同钙水平饲粮添加维生素D_3对蛋鸡胫骨强度有极显著影响(P0.01);与未添加维生素D_3组相比,添加维生素D_3组胫骨强度极显著升高(P0.01);随着饲粮钙水平的升高,胫骨钙含量有升高的趋势,但差异不显著(P0.05),而饲粮钙水平为4.0%时,胫骨强度显著高于饲粮钙水平为3.0%和3.5%时(P0.05)。4)与未添加维生素D_3组相比,添加维生素D_3组蛋鸡血浆碱性磷酸酶活性极显著降低(P0.01),血浆钙和磷含量极显著升高(P0.01);随着饲粮钙水平的升高,血浆钙和磷含量没有显著变化(P0.05),与3.0%钙组相比,4.0%钙组血浆碱性磷酸酶显著降低(P 0.05)。结果显示,产蛋后期适当提高饲粮钙水平有利于蛋鸡生产性能,但维生素D_3缺乏会降低生产性能,甚至引起停产;饲粮添加2 500 IU/kg维生素D_3既能满足产蛋后期蛋鸡对维生素D_3的需求,同时又不造成资源的浪费,节约成本。     

氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸对破骨细胞自噬和分化的影响

为了探究氨基咪唑-4-甲酰胺核苷酸(AICAR)对破骨细胞自噬及分化能力的影响,以BALB/c小鼠骨髓巨噬细胞诱导分化形成的破骨细胞为研究对象,添加0.5 mmol·mL~(-1)AICAR(AMPK激活剂)处理4 h后,抗酒石酸酸性磷酸酶(TRAP)染色鉴定破骨细胞;CCK-8法检测破骨细胞存活率;高内涵系统分析TRAP~+细胞比率、面积、荧光强度及圆度;蛋白免疫印迹(Western blot)和荧光定量聚合酶链式反应方法(qRT-PCR)检测AMPK、NFATc1、c-Fos、CTSK、TRAP、(LC3-Ⅱ)、ATG5、Beclin1、p62的mRNA和蛋白水平;激光共聚焦显微镜观察EGFP-pmCherry-LC3荧光聚点。结果显示,通过30 ng·mL~(-1)M-CSF和60 ng·mL~(-1)RANKL诱导分化4 d的细胞TRAP染色后大部分呈阳性且细胞核数目≥3。AICAR处理后,与对照组相比,细胞存活率无显著差异(P0.05),但细胞面积、TRAP~+(细胞核数目≥3)细胞率、TRAP荧光强度显著下降(P0.05)。AICAR组破骨细胞c-Fos、TRAP(P0.01)、p62(P0.05)的mRNA水平显著下降,LC3、ATG5的mRNA水平显著升高(P0.05)。AICAR处理致AMPKα蛋白磷酸化水平极显著升高(P0.01),NFATc1、c-Fos、CTSK、p62(P0.01)和TRAP(P0.05)蛋白表达量显著下调,LC3-Ⅱ、ATG5和Beclin1蛋白表达水平极显著上调(P0.01)。转染LC3质粒结果显示AICAR处理后LC3黄色及红色荧光聚点数目增多,绿色荧光聚点数目减少。结果表明0.5 mmol·mL~(-1)AICAR作用4 h可激活破骨细胞AMPKα,增强破骨细胞的自噬水平,但抑制了破骨细胞的分化。     

包被甜菜碱对奶牛产奶性能及血液生化指标的影响

本试验旨在通过在泌乳中期奶牛全混合日粮中添加包被甜菜碱,研究其对泌乳中期奶牛产奶性能及血清生化指标的影响。根据年龄、胎次、产奶量、泌乳期相近的原则选择30头泌乳中期奶牛,随机分为3组,每组10头,分别为对照组、试验I组和试验II组,在相同的条件下饲养。对照组饲喂牛场原配方配制的全混合日粮,试验I组和试验II组在此基础上分别添加6g/(头·d)和12g/(头·d)包被甜菜碱。结果表明,试验I、II组奶牛产奶量分别较对照组提高0.62kg/(头·d)和0.36kg/(头·d),但差异不显著(P0.05);试验I、II组的乳糖含量极显著高于对照组(P0.01),试验II组总固形物含量极显著高于对照组(P0.01),试验I、II组体细胞数显著低于对照组(P0.05),奶牛隐性乳房炎发病率极显著降低(P0.01);与对照组相比,试验组奶牛血清TC、HDL-C和LDL-C均极显著降低(P0.01),试验II组TG显著降低(P0.05);与对照组相比,试验I组血清MDA水平显著降低(P0.05),SOD水平极显著升高(P0.01),GSH-Px含量显著增加(P0.05)。试验证明,包被甜菜碱有提高奶牛产奶量、改善乳成分、促进脂肪代谢和提高奶牛抗氧化能力的作用。     

凡纳滨对虾幼虾饲料中适宜钙和磷添加水平

本试验旨在研究饲料不同钙、磷添加水平对凡纳滨对虾(Litopenaeus vannamei)幼虾的生长性能、体成分、组织钙和磷水平和血清指标的影响。采用双因素试验设计,在钙添加水平为0、0.50%、1.00%的条件下,分别添加0、0.40%、0.80%、1.20%、1.60%的磷,配制15种不同钙和磷水平的试验饲料。将1 800尾初始重为(0.38±0.01)g的对虾随机分为15组,每组投喂1种试验饲料,每组3重复,每重复40尾虾。养殖8周。结果表明:1)饲料钙添加水平及钙添加水平与磷添加水平的交互作用极显著影响对虾的增重率(WGR)、特定生长率(SGR)、蛋白质效率(PER)和饲料系数(FCR)(P0.01);饲料磷添加水平极显著影响对虾的WGR、SGR、PER、FCR和存活率(SR)(P0.01)。2)饲料钙添加水平极显著影响对虾的肌肉粗蛋白质(CP)、粗脂肪(CL)、粗灰分(Ash)的含量(P0.01),显著影响对虾的全虾CL、Ash的含量(P0.05);饲料磷添加水平极显著影响对虾全虾CP、CL含量,肌肉CP、CL、Ash含量(P0.01);饲料钙添加水平与磷添加水平的交互作用极显著影响对虾全虾CL含量,肌肉CP、CL、Ash含量(P0.01)。3)饲料钙添加水平和磷添加水平及二者的交互作用极显著影响对虾的全虾、肌肉、虾壳的钙和磷水平(P0.01)。4)饲料钙添加水平极显著影响对虾的血清碱性磷酸酶(ALP)、酚氧化酶(PO)活性,钙离子(Ca2+)含量(P0.01);饲料磷添加水平极显著的影响对虾血清ALP、PO的活性,胆固醇(CHOL)、甘油三酯(TG)、无机磷(IP)的含量(P0.01),显著影响对虾血清Ca2+的含量(P0.05);饲料钙添加水平与磷水平的交互作用极显著影响对虾的血清ALP活性,Ca2+、IP的含量(P0.01),显著影响对虾血清TG含量(P0.05)。在本试验条件下,以SGR为判断依据,通过二次回归曲线模型分析得出凡纳滨对虾幼虾饲料中钙和磷的适宜添加水平分别为1.00%和1.26%。     

IGF-1体外调控奶牛成骨细胞骨保护素和核因子κB受体活化因子配体的表达

为了研究胰岛素样生长因子-1(insulin-like growth factor,IGF-1)对奶牛成骨细胞骨重建相关因子表达的影响,探讨IGF-1对奶牛成骨细胞形成-吸收的作用,试验采用体外分离培养奶牛成骨细胞,用改良Gomori钙钴法染色鉴定,再以0,1,10,50,100 ng/mL人重组胰岛素样生长因子-1(recombinated human insulin-like growth factor-1,rhIGF-1)干预培养5 d后,半定量RT-PCR法检测成骨细胞骨保护素(osteoprotegerin,OPG)和核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nu-clear factor-κB ligand,RANKL)mRNA的表达,ELISA检测细胞培养上清液OPG蛋白水平。结果表明:1~100 ng/mL rhIGF-1干预5 d,OPG、RNAKL mRNA表达均较未干预组增加,10,50,100 ng/mL组OPG/β-actin、RANKL/β-actin比值显著高于未干预组(P0.05),且在1~100 ng/mL浓度范围内,rhIGF-1呈剂量依赖方式上调OPG蛋白表达,其中10,50,100 ng/mL干预组与未干预组差异显著(P0.05)。说明IGF-1调控奶牛成骨-破骨细胞介导的形成-吸收偶联,促进骨形成,这可能是IGF-1参与奶牛骨代谢性疾病的重要机制之一。     

肌肽锌对低钙性骨质疏松笼养蛋鸡AKP、BGP及E_2的影响

选用250只24周龄健康海兰褐蛋鸡,随机分为5组,每组50只。对照组饲喂基础日粮(含钙3.55%),低钙组饲喂低钙日粮(含钙1.95%),试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别于低钙日粮中添加10、30、50mg/kg肌肽锌,试验期60d,定期采集血样,观察肌肽锌对低钙性骨质疏松笼养蛋鸡碱性磷酸酶(AKP)、骨钙素(BGP)及雌二醇(E2)的影响。结果显示,AKP和BGP随肌肽锌添加剂量的增加而降低,20d和40d时,试验Ⅰ组血清中AKP和BGP显著低于低钙组(P0.05),试验Ⅱ、Ⅲ组血清中AKP和BGP均极显著低于低钙组(P0.01),试验Ⅲ组血清中AKP和BGP均极显著低于试验Ⅰ组(P0.01)、显著低于试验Ⅱ组(P0.05);60d时,试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组血清中AKP和BGP均极显著低于低钙组(P0.01),试验Ⅲ组血清中AKP和BGP均极显著低于试验Ⅰ组(P0.01),试验Ⅲ组血清中BGP显著低于试验Ⅱ组(P0.05);各组E2随日龄的增长而降低,整个试验期,低钙组血清中E2均显著低于对照组(P0.05),其余各组无显著差异(P0.05)。结果表明,在低钙日粮中添加50mg/kg肌肽锌能更好地改善低钙性骨质疏松笼养蛋鸡血清中骨代谢重要标志物和相关激素的水平,明显降低骨吸收,缓解笼养蛋鸡骨质疏松的程度。     

富硒益生菌对小鼠血液硒含量、总抗氧化水平、免疫能力及肠道菌群的影响

为了研究富硒益生菌对小鼠血液硒含量、总抗氧化水平(T-AOC)、体液免疫及肠道菌群的影响,试验选择KM小鼠(雌雄各半)60只,随机分为1组、2组和3组,每天分别灌胃纯化水、富硒益生菌和益生菌各0.5 m L,连续28 d。试验结束时测定全血硒含量、血浆T-AOC水平、白细胞介素2(IL-2)含量、空斑形成细胞溶血能力和肠道菌群数量。结果表明:2组小鼠全血硒含量和血浆TAOC水平均极显著高于1组和3组(P0.01);2组小鼠空斑形成细胞溶血能力极显著高于1组(P0.01),显著高于3组(P0.05),3组显著高于1组(P0.05);2组小鼠血浆IL-2含量极显著高于1组(P0.01),显著高于3组(P0.05);2组和3组小鼠肠道中葡萄球菌数量极显著低于1组(P0.01),2组小鼠肠道中肠球菌和肠杆菌数量显著低于1组(P0.05),3组小鼠肠道中肠球菌和肠杆菌数量极显著低于1组(P0.01);2组和3组小鼠肠道中乳酸菌数量极显著高于1组(P0.01);2组和3组小鼠肠道中葡萄球菌、肠球菌、肠杆菌、乳酸菌和双歧菌数量均无显著性差异(P0.05)。说明富硒益生菌可提高小鼠血液硒含量、总抗氧化水平和免疫能力,具有调节小鼠肠道菌群的作用。     

肌肽锌对低钙性骨质疏松笼养蛋鸡骨组织结构和形态计量学的影响

为了研究肌肽锌(Zn C)对低钙性骨质疏松笼养蛋鸡骨组织结构和形态计量学的影响,试验采用250只24周龄健康海兰褐蛋鸡,随机分为5组(每组50只),对照组饲喂基础日粮(含钙3.55%),低钙组饲喂低钙日粮(含钙1.95%),试验Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ组分别于低钙日粮中添加10,30,50 mg/kg Zn C,试验期60 d。试验结束后,每组剖杀10只鸡,取左胫骨中段作骨组织结构检查和形态计量学测定。结果表明:与对照组相比,低钙组中胫骨皮质骨上出现许多吸收腔,在吸收腔内和髓质骨小梁周围破骨细胞明显增多,骨吸收增强,导致骨质疏松;与低钙组相比,试验Ⅱ组中胫骨皮质骨上吸收腔减少,试验Ⅲ组中胫骨皮质骨上未见吸收腔,在试验Ⅱ组皮质骨外表面和吸收腔内及试验Ⅲ组皮质骨外表面均可见大量骨原细胞和成骨细胞,试验Ⅱ、Ⅲ组髓质骨小梁表面也可见大量成骨细胞,骨形成明显增强。与低钙组相比,试验Ⅱ、Ⅲ组的骨小梁面积、骨小梁面积百分比、骨小梁厚度均极显著增加(P0.01),骨小梁分离度极显著降低(P0.01);试验Ⅱ组的骨小梁周长、骨小梁数量高于低钙组,但差异不显著(P0.05),而试验Ⅲ组的骨小梁周长、骨小梁数量均极显著增加(P0.01)。说明在低钙日粮中添加50 mg/kg Zn C能有效改善低钙性骨质疏松笼养蛋鸡的骨组织结构和形态计量学指标,明显减少骨量流失,对笼养蛋鸡骨质疏松症产生积极的防治作用。     

添喂色氨酸、过瘤胃色氨酸对奶牛泌乳性能、血浆指标和乳中褪黑素含量的影响

本研究旨在探究在饲粮中添喂色氨酸(Trp)、过瘤胃色氨酸(RPTrp)对奶牛泌乳性能、血浆指标和乳中褪黑素(MLT)含量的影响。选取30头3~5岁、2~3胎次、泌乳天数为(180±46)d的健康荷斯坦奶牛,随机分为3组,分别为对照组、试验Ⅰ组和试验Ⅱ组,每组10头。对照组饲喂全混合日粮,试验Ⅰ、Ⅱ组在对照组基础上分别添喂100 g/(d·头)色氨酸和220 g/(d·头)过瘤胃色氨酸(L-色氨酸含量≥45%)。预试期7 d,正试期60 d。结果表明:1)试验Ⅰ、Ⅱ组产奶量相比于对照组分别提高了11.78%(P0.05)和17.19%(P0.01);试验Ⅰ、Ⅱ组乳糖产量极显著高于对照组(P0.01)。2)试验Ⅰ、Ⅱ组在14:00和22:00血浆中生长激素(GH)含量极显著高于对照组(P0.01);14:00时,试验Ⅱ组血浆色氨酸含量极显著高于对照组(P0.01),各组血浆褪黑素含量无显著差异(P0.05);22:00时试验Ⅱ组血浆色氨酸含量极显著高于对照组(P0.01),试验Ⅱ组血浆褪黑素含量显著高于对照组(P0.05);试验Ⅰ组在14:00和22:00血浆色氨酸、5-羟色胺(5-HT)和褪黑素的含量与对照组均无显著差异(P0.05)。3)05:00时试验Ⅱ组乳中褪黑素含量极显著高于对照组(P0.01);18:00时各组乳中褪黑素含量无显著差异(P0.05)。4)试验Ⅰ组血浆总抗氧化能力(T-AOC)极显著高于对照组(P0.01);试验Ⅱ组血浆谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性极显著高于对照组(P0.01);试验Ⅰ、Ⅱ组血浆超氧化物歧化酶(SOD)活性极显著高于对照组(P0.01);试验Ⅱ组血浆丙二醛(MDA)含量极显著低于对照组(P0.01)。结果提示,添喂色氨酸[100 g/(d·头)]、过瘤胃色氨酸[220 g/(d·头)]能够提高泌乳期奶牛产奶量、血浆GH含量及抗氧化能力,其中以添喂过瘤胃色氨酸效果较好;添喂过瘤胃色氨酸[220 g/(d·头)]可提高血浆色氨酸含量及夜间血浆褪黑素含量,从而提高夜间奶牛乳中褪黑素含量。     

灵芝多糖对长期运动大鼠巨噬细胞吞噬功能及NO和IL-1β表达的影响

探讨灵芝多糖(GLP)对长期运动大鼠巨噬细胞吞噬功能及NO、IL-1β表达的影响。分别用低剂量(4.5mg/mL)、中剂量(9mg/mL)、高剂量(18mg/mL)的GLP灌胃大鼠模型并给予持续30d游泳运动训练,正常组和对照组用生理盐水灌胃,正常组不进行运动训练。检测贴壁巨噬细胞分泌NO、IL-1β水平,Western blot检测巨噬细胞中iNOS水平,并检测巨噬细胞吞噬鸡红细胞能力及巨噬细胞活性。结果表明,对照组中NO含量和巨噬细胞吞噬率显著低于正常组(P0.05),中剂量组和高剂量组NO水平显著高于对照组(P0.05);对照组巨噬细胞iNOS水平极显著低于正常组(P0.01),低、中、高剂量组巨噬细胞iNOS水平极显著高于对照组(P0.01);低、中剂量组巨噬细胞吞噬率显著高于对照组(P0.05),高剂量组巨噬细胞吞噬率显著高于对照组(P0.01);中剂量组巨噬细胞吞噬指数极显著高于对照组(P0.01);对照组巨噬细胞活性极显著低于正常组(P0.01),低、中、高剂量组巨噬细胞活性均极显著高于对照组(P0.01)。说明GLP能促进巨噬细胞分泌NO、IL-1β,提高巨噬细胞吞噬功能和巨噬细胞活性。