利用重组反转录病毒表达马立克氏病病毒Meq基因

为研究马立克氏病病毒Ｍｅｑ蛋白的生物学功能,应用磷酸钙与ＭＤＶ Ｍｅｑ基因重组的反转录病毒转染载体质粒ＲＣＡＳ－Ｍｅｑ的ＤＮＡ,转染于鸡胚成纤维细胞质ＤＦ１。经同间接免疫荧光技术研究表明,转染后第３天即开始有少量ＤＦ１细胞在细胞核表达Ｍｅｑ蛋白,以后阳性细胞增多,到转染后第７天阳性细菌最多,之后荧光即衰减,通过酶联免疫吸附试验检测,发现细胞培养上清中游离病毒在转染后第５天即可检出,直至第７天仍维持     

马立克氏病毒Meq基因的研究进展

随着致瘤基因Meq被发现,大量研究发现Meq基因在正常鸡细胞中没有表达,却在MD肿瘤中过度表达。Meq基因的表达不但可以转录活化某些致瘤相关基因,还可与转录辅助抑制因子结合成转录抑制复合物抑制目的基因转录,共同作用导致肿瘤发生。同时,Meq基因在不同毒株、不同血清型、不同病变组织中存在序列上的差异,他们是否存在着一定的规律也是研究人员十分重视的问题之一。本研究从Meq基因的基本特征入手,分析Meq基因与致瘤相关基因之间的关系分别进行阐述,总结相关的研究进展,为今后对肿瘤的深入研究提供参考。     

马立克病病毒致瘤相关基因的研究进展

从meq基因、pp38复合体、HSV ICP4的同源体、L开放阅读框（L ORF）、位于BamHI—H片段的基因和病毒类白细胞介素-8（vIL-8）等几个方面论述了马立克病病毒感染期间参与肿瘤形成的相关基因的生物学活性。     

鸡马立克氏病病毒广西株Meq基因的克隆与序列分析

为研究鸡马立克氏病病毒(MDV)广西流行株的遗传变异情况,本研究从广西发病鸡中分离鉴定了3株MDV。参照GenBank中MDV的核苷酸序列设计1对引物,利用PCR技术对分离毒株的Meq基因进行了克隆、序列测定,并与GenBank中发表的国内外参考毒株进行比对分析。结果显示, Meq基因序列全长为1020 bp,编码一条由339个氨基酸组成的多肽,分离株与国内外MDV参考毒株相比,不同MDV株的Meq基因序列相对较保守,它们之间核苷酸同源性为83.8%~99.9%,氨基酸同源性为88.4%~99.6%。3株MDV分离株Meq基因在相关报道中提到的与毒力相关的脯氨酸重复区存在点突变。3株分离株与国内参考株YL、GXY2关系较近,与参考株RB1B、GA、Md5、648A及疫苗株亲缘关系较远。该研究为中国MDV的流行、遗传变异及防控研究提供了材料。     

应用杆状病毒载体在昆虫细胞表达马立克氏病病毒Meq基因

将源于马立克氏病病毒 ( MDV) GA株的 Meq基因克隆到杆状病毒转移载体质粒 p Blu Bac4中强有力的多角化蛋白启动子 ( PPH)之后 ,经与线性化的 Bac-N-Blue TMDNA共转染于昆虫细胞系 SF9,获得了重组杆状病毒。使用重组痘病毒表达的 Meq制备的单抗 ,对重组杆状病毒感染的 SF9细胞及其裂解物分别进行间接免疫荧光试验、Western blotting和免疫沉淀试验 ,结果发现 :( 1 )本表达系统产生的 Meq可被原制备的单抗所识别 ;( 2 )在感染细胞中 ,Meq蛋白仅局限于细胞核内 ,而且随着感染后时间的增加 ,具有从核质向核仁和核膜转移的趋向 ;( 3 ) Western blotting和免疫沉淀试验均证实重组杆状病毒感染细胞裂解物中出现有 2条特异带 ( 60 0 0 0处 )。结果表明 ,杆状病毒 /昆虫细胞系统用于表达外源蛋白是可行有效的     

河南省3株马立克病病毒Meq基因的序列分析

根据GenBank收录的马立克病病毒(MDV)基因组序列的Meq基因设计1对特异性引物,用PCR方法从河南发病鸡群中检测出了3株MDV,将目的片段克隆,并进行测序,获得Meq基因全长序列,将3株MDV的Meq基因与GenBank上收录的不同类型毒株进行比较分析。3株MDV的Meq基因段长度均为1 020bp,核苷酸序列分析表明,河南株Meq基因与其他MDV核苷酸同源性为98.6%,氨基酸同源性为96.5%;Meq基因的氨基酸序列共有9个位点的氨基酸存在突变;遗传进化分析表明这些毒株有3个分支,其中Henan 1~3株、ZC2014株(KP144356.1)、YLO40920株(DQ174459.1)、HNXZ106株(HF546099.1)和vv+MDV毒株648A(AY362725.1)位于同一个分支,vMDV GA(AF147806.1)、vvMDV RBIB(AY243332.1)位于同一个分支,mMDV CVI988(AF493555.1)和中国疫苗株814(AF493551)位于同一个分支。     

马立克氏病病毒Meq基因缺失株的保护性免疫作用

马立克氏病病毒(MDV)的致病性一直在不断增强中,甚至已出现了能抵抗CV1988/Rispens疫苗的特超强株。本实验室用BAC克隆技术构建了MDV中国野毒株的Meq基因缺失株,显示出在抗马立克氏病方面具有与美国Meq基因缺失株同样有效的保护性免疫效果,而且其自身没有明显的免疫抑制作用。对美国和中国的两个MDV的Meg基因缺失株的优缺点做了比较。     

马立克氏病病毒肿瘤Meq基因缺失株的保护性免疫作用

马立克氏病病毒（MDV）的致病性一直在不断增强中,甚至已出现了能抵抗CV1988/Rispens疫苗的特超强株。本实验室用BAC克隆技术构建了MDV中国野毒株的Meq基因缺失株,显示出在抗马立克氏病方面具有与美国Meq基因缺失株同样有效的保护性免疫效果,而且其自身没有明显的免疫抑制作用。对美国和中国的两个MDV的Meg基因缺失株的优缺点做了比较。     

马立克氏病病毒致瘤基因meq功能研究的概述

马立克氏病病毒 (Ｍａｒｅｋ’ｓＤｉｓｅａｓｅＶｉｒｕｓ,ＭＤＶ)之众多已得到鉴定的基因中 ,目前有 3个基因即 132 ｂｐｒ、ｐｐ38、ｍｅｑ被认为可能与致瘤相关。其中 ,ｍｅｑ与 132 ｂｐｒ两个基因是ＭＤＶ 1所特有 ,已证实 132 ｂｐｒ的拷贝数与毒株的致弱程度有关 ,ｐｐ38则被证实可抑制机体的免疫应答。ｍｅｑ基因由于具有与致瘤基因ｊｕｎ/ ｆｏｓ家族类似的分子结构 ,因此 ,我们有理由认为ｍｅｑ基因在ＭＤＶ致病、致瘤中可能发挥重要的作用。本课题在国家自然科学基金和广西自然科学基金的资助下 ,历经 5年由三个单位共同攻关…     

马立克氏病病毒的致瘤性及马立克病疫苗的免疫机制

马立克氏病(MD)是由马立克氏病病毒(MDV)引起的高度传染性肿瘤性疾病,以引起T细胞淋巴瘤为特点.过去,MDV在分类上属于γ疱珍病毒亚科,但研究表明其DNA结构与α疱疹病毒亚科的病毒更相似.MDV编码的蛋白质不是与γ疱疹病毒亚科病毒蛋白质,而是与α疱疹病毒亚科病毒蛋白如单纯疱疹病毒Ⅰ型(HSV-工)和水痘带状病毒(VZV)编码的这些蛋白质显示了高度同源性[1].     

超强马立克氏病病毒的鉴定及病毒Meq基因序列的比较

对1例感染超强马立克氏病病毒的病例进行确诊,对感染病毒的Meq基因进行比较分析。采用病理解剖、PCR检测、病毒分离、动物试验和Meq基因序列分析,对感染病毒进行研究。病理解剖结果为病死鸡的肝脏、脾脏、腺胃、肌胃、十二指肠表现为肿瘤病变。PCR检测结果为病死鸡的组织病料感染马立克氏病病毒。病毒分离和动物试验结果证明该感染病毒是1株马立克氏病超强毒株,该病毒可以引起免疫过CVI988疫苗的鸡发病。Meq基因序列分析表明该病毒与7株马立克氏病病毒参考毒株的同源性为98.8%~99.6%,该病毒在Meq的第115、119和176位氨基酸突变同国内流行株,该检测病毒在Meq的第217位氨基酸突变同超超强马立克氏病毒株。结果表明,通过病理解剖、PCR检测、基因序列分析、病毒分离和动物试验,确诊病鸡感染超强马立克氏病病毒。     

鸡马立克病病毒康乐株meq基因的克隆与分析

为了解甘肃省鸡群马立克病病毒(MDV)的分子流行病学特征及meq基因的遗传演化规律,以甘肃省康乐县某鸡场马立克病的自然发病鸡为研究对象,采集9只病鸡肝脏组织,提取肝细胞基因组DNA,进行meq基因的PCR扩增、克隆及测序,将所得序列用BioEdit软件与GenBank上登录的参考毒株进行比较分析。结果显示,MDV meq基因在进化上存在某种地理位置上的相关性,国内毒株成为一个分支,国外毒株成为另一个分支。本研究所获9株康乐株与国内近几年分离株GXY2、0095亲缘关系很近,与国内近几年分离株的核苷酸同源性在99.3%以上,且第319位核苷酸由T突变成C,第502位核苷酸由C突变成G,这两处突变是近几年国内分离的野毒株特有的。此外,9株康乐株均在550位核苷酸由C突变成T,其中4株在304、306位核苷酸由G突变为A和C,这些突变是否与毒株致肿瘤性和毒力有关,有待探究。     

鸡马立克氏病病毒编码的miRNA体内表达特征分析

最新研究发现,鸡马立克氏病病毒(MDV)基因组编码的miRNAs在肿瘤发生发展中发挥了重要的调控作用.为阐明强弱毒株编码的miRNA差异表达与病毒复制的关系,本研究采用SYBR Green荧光定量PCR方法检测了MDV CVI988疫苗株和MDV GA强毒株编码的M4-5P、M8-3P和M12-3P 3种miRNAs在肝脏和胸腺中的动态表达特征.结果表明,强弱毒株编码的这3种miRNAs在病毒感染过程中具有明显的差异性,其中GA株编码的miRNAs表达量高于CVI988株,这是由于强弱毒株在体内的复制滴度差异造成的,表明在感染前期miRNAs的表达量与病毒载量有关.该研究为进一步研究miRNAs的功能提供了实验依据.     

鸡马立克氏病病毒的分子生物学研究

鸡马立克氏病（MD）,是由鸡马立克氏病病毒（MDV）引起的淋巴增生性疾病,病毒经空气传播,传染力很强,被感染鸡产生肿瘤和死亡,给养鸡业主造成了巨大的经济损失.在国外,MD已成20世纪50年代以来最受重视的鸡病之一.MDV感染可引起肿瘤，同时还能引起感染鸡的免疫抑制。MDV疫苗自20世纪60年代末用于生产后，已大大降低了本病所造成的损失一MDV是少数几种能在自然宿主中诱导产生肿瘤的疱疹病毒之一。     

鸡马立克氏病

鸡马立克氏病(Arian Marek's Diseasc,MD)于1907年由匈牙利学者马立克发现和报道,并因此得名。本病的特征是炎症性和肿瘤性病变,主要侵害神经系统,也侵害内脏和其他组织,是一种急性爆发型产瘤病。病原马立克氏病病毒(MDV)属疱疹病毒科丙疱疹病毒亚科,为24面体主体对称,直径100—150nm,内含分子量为54-92×10~6道尔顿的DNA双链,在氯化铯中浮密度为1.27—1.29克/毫升。病毒粒子可被氯仿、乙醚等灭活。本病毒是细胞结合性病毒,因此来自感染鸡组织的完整细胞必须用来作接种物,但来自羽毛囊的除外,因为病毒是从     

鸡马立克氏病

鸡马立克氏病是由马立克氏疱疹病毒引起的一种淋巴组织增生性疾病,以外周神经、性腺、虹膜、各种内脏器官、肌肉和皮肤单核细胞的浸润和肿瘤的形成为特征。近年来发现本病毒可损害小动脉的平滑肌细胞,引起小动脉硬化症。1流行病学鸡是最主要的自然宿主,除鹌鹑外其他动物的自然感染没有实际意义。     

鸡马立克病研究进展

鸡马立克病是由马立克病病毒引起的一种淋巴细胞增生性传染病,通常以外周神经和包括虹膜和皮肤在内的其他各种器官和组织的单核细胞浸润为特征.目前,仍然严重威胁着养禽业的发展,疫苗虽然可以预防马立克病的发生,但免疫失败时有发生,常常导致本病的局部暴发.论文对该病的病原、流行病学、临床症状、病理变化、发病机理、诊断及防控等方面进行了综述.     

鸡马立克氏病

鸡马立克氏病是由马立克氏疱疹病毒引起的一种淋巴组织增生性疾病,以外周神经、性腺、虹膜、各种内脏器官、肌肉和皮肤单核细胞的浸润和肿瘤的形成为特征。近年来发现本病毒可损害小动脉的平滑肌细胞,引起小动脉硬化症。1流行病学鸡是最主要的自然宿主,除鹌鹑外其他动物的自然感染没有实际意义。传染源是病鸡或带毒鸡,病鸡或带毒鸡的皮