福州市猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)流行病学调查

对福州地区12个规模化养猪场的发病猪群进行了系统的流行病学调查，共采集64份组织病料。采用PCR方法进行圆环病毒Ⅱ型(PCV2)检测。现场调查发现共有7个场的猪群有圆环病毒Ⅱ型感染所致的特征性临床症状及病理变化；PCR检测31份病料呈阳性，阳性率46．9％；12个养殖场中7个为阳性．阳性率58．3％。根据临床及实验室检测结果证实福州市养猪场存在PCV2感染。     

广西猪圆环病毒2型及3型的流行病学初步调查

为了解广西近年来猪圆环病毒2型(PCV2)、圆环病毒3型(PCV3)的感染现状,本研究采集2020年-2022年来自广西养殖场、生猪屠宰场及无害化处理点的样品,采用实时荧光定量PCR方法进行检测。结果表明,1408份样品中,有731份PCV2阳性样品,阳性率为51.92%,471份PCV3阳性样品,阳性率为33.45%,有353份样品PCV2、PCV3均阳性,混合感染率25.07%。PCV2、PCV3普遍分布在广西14个地市,各地市感染程度存在较大差异。养殖场、屠宰场及无害化处理点PCV2、PCV3风险较高,风险由低到高依次是养殖场、屠宰场及无害化处理点。从不同类型样品携带病毒的情况来看,淋巴结和脾脏最高,脐带次之,精液未检测出阳性。这些结果可为我区PCV2、PCV3的流行情况分析、采样监测及防控提供依据。     

四川省部分地区猪圆环病毒2型流行病学调查

以四川省7个市县地区14个猪场为研究对象,采集疑似圆环病毒2型感染的死猪、病料、精液、血样等样品181份,进行PCR检测。结果显示:猪圆环病毒2型(PCV2)阳性有89份,阳性率49.2%;14个规模化猪场中均检测出了PCV2阳性。在死亡的43头猪中有21头PCV2阳性。病料中PCV2的阳性检出率54.0%。该病在春夏季节感染率最高,并存在病毒混合感染和继发细菌感染情况。根据临床症状和病理变化分析,大部分猪场因感染PCV2而致断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS),其中遂宁市和绵阳市的6个规模化猪场中检测到PCV2感染所引起的猪皮炎肾病综合征(PDNS)。结果表明,四川省部分地区的规模化猪场中已经广泛存在猪圆环病毒2型感染。     

PCV4 PCR检测方法的建立及河南地区PCV4的遗传进化分析

猪圆环病毒4型(PCV4)于2019年在我国湖南省患有猪呼吸道疾病、腹泻及皮炎肾病综合征的猪群中首次发现。为进一步了解该病毒在河南地区的流行和遗传演化情况,本研究根据GenBank中PCV4 Cap基因序列,设计了1对特异性引物,经反应条件优化,建立了检测PCV4的PCR方法。特异性试验结果显示,该方法仅对PCV4能扩增出约400 bp的目的条带,对PCV2、PCV3、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪伪狂犬病病毒、猪流行性腹泻病毒、猪细小病毒、猪瘟病毒、大肠杆菌、沙门氏菌及阴性对照均无该目的条带;对PCV4质粒标准品的检测限为54.8拷贝/μL;对来自不同地区的3份PCV4肺组织样品DNA于不同时间分别重复扩增3次,结果一致且均为阳性。表明该PCR方法具有良好的特异性,敏感性和重复性。采用该方法对河南省部分地区16个猪场137份组织样品进行检测,结果显示,PCV4阳性率为13.87%(19/137),有7个地区为PCV4阳性,且猪场阳性率为43.75%(7/16),表明PCV4已在河南地区流行。对PCV4的部分Cap基因进行克隆、测序及遗传进化分析。结果显示,成功克隆2份PCV4阳性样品的部分Cap基因(命名为XX和LY),与GenBank中PCV4参考株(PCV4 HNU-AHZ-2019)相应基因的同源性分别为99.2%和98.4%。Cap基因的系统发育分析显示,XX和LY与PCV4 HNU-AHZ-2019株相应基因同属于一个独特的分支,而与其他圆环病毒属相应基因处于不同的分支,表明XX和LY与PCV4 HNU-AHZ-2019株相应基因亲缘关系较近。本研究为PCV4感染的早期监测和该病的防控提供了有力的技术支持。     

福建莆田地区猪圆环病毒病的血清学调查

为了解莆田地区猪圆环病毒病的流行状况,2013—2014年间在莆田笏石、埭头、灵川、仙游地区等部分养猪场(户)共采集了322份未经PCV2疫苗免疫的猪血清样本,采用ELISA(酶联免疫吸附试验)方法对送检血清样品进行PCV2抗体水平检测。结果表明,322份被检血清中检出117份阳性血清,总阳性率为36.33%,其中以6~12周龄的小猪感染率最高,阳性率为55.56%。说明猪圆环病毒病在莆田市多数猪场中存在。     

吉林省部分地区猪圆环病毒2型感染的血清学调查

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对吉林省部分地区5个猪场的300份猪血清样品进行猪圆环病毒2型(PCV2)血清抗体的检测。检测结果,被检猪场中血清抗体总阳性率为51.67%,5个地区猪场均检测出阳性猪。其中30日龄内仔猪阳性率为12.77%;种公猪总阳性率为56.19%;经产母猪总阳性率为67.80%。结果证实,吉林省不同地区猪场均存在PCV2感染,且比较严重。     

青海贵德地区猪圆环病毒2型感染调查

为了解青海贵德地区猪群中猪圆环病毒2型(PCV2)的感染状况,本研究应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对采自该地区2个猪场的73份血清样品进行了PCV2抗体检测,采用荧光PCR技术对45份猪病料样品进行了PCV2病毒核酸检测。结果显示:PCV2抗体检测的平均阳性率为95.89%,猪病料PCV2病毒核酸检测的阳性率为100%。     

河北北部猪圆环病毒2型流行毒株的遗传变异分析

为了掌握河北北部地区猪圆环病毒2型(PCV2)流行病学特点和遗传变异情况,应用PCR检测方法对2015—2017年间收集的河北北部猪场86份临床病料进行PCV2检测,并对阳性毒株的全基因进行扩增、克隆和测序。结果显示,86份临床样品中,有38份样品为PCV2阳性,阳性率为44.19%,选取11株进行病毒全基因扩增,并利用序列比对软件进行遗传变异分析发现,11株病毒之间同源性为95.9%～99.9%,与各参考毒株之间同源性为93.5%～99.9%。在遗传进化关系上,11株病毒分别处于2个分支:PCV2b和PCV2d,表明河北北部地区PCV2流行比较广泛,并且以PCV2b和PCV2d毒株流行为主。本研究充实了河北北部地区PCV2流行病学调查资料,也为河北PCV2疫苗株的研发和选择提供了依据。     

酒泉市猪圆环病毒2型和3型的流行病学监测和分析

为掌握酒泉市五个农业县猪圆环病毒2型（PCV2）和3型(PCV3)流行情况,在辖区内不同区域、不同养殖规模、不同生长阶段的19个规模化养殖场、38个散养户、4家屠宰场采集血清样品230份、粪便样品250份、猪肺脏、扁桃体、颌下淋巴结等组织样品220份,进行PCV2和PCV3核酸检测,检出阳性样品138份,阳性率为21.23%,PCV2的阳性率为15.54%,PCV3的阳性率为5.69%,表明PCV2的流行比PCV3更普遍、阳性感染率更高,但在不同区域、不同规模猪场的危害程度和流行情况存在一定的差异。规模养殖场的总体阳性感染率明显低于散养户,保育猪的感染率高于其他生长阶段的生猪。本次实验对酒泉市猪场PCV感染综合防控提供技术支撑,为科学养猪产生积极影响。     

2008～2010年华东部分地区猪圆环病毒2型感染血清学调查

为了解华东地区近三年来猪圆环病毒病（porcine circovirus disease,PCVD）的流行状况,以便更好地控制该病的发生,2008年1月～2010年9月在华东地区5个省、直辖市及河南省的68个规模化猪场（均未免疫商品化猪圆环病毒疫苗）共收集1017份猪血清样品,应用商品化猪圆环病毒（Porcine circovirus,PCV）抗体诊断试剂盒（PCV2-ELISA）,对送检血清样品进行PCV2抗体水平检测。结果显示：送检猪血清中抗体阳性总数为609份,总阳性率为59.88%;2008、2009和2010年送检样品的阳性率分别为53.4%、35.33%和80.63%,PCV血清抗体阳性率呈先下降后上升的趋势;成年猪血清阳性率最高为81.40%,保育猪血清阳性率最低为41.48%,仔猪和育肥猪血清阳性率相近,分别为57.95%和52.20%,说明仔猪断奶后随母源抗体下降其抗体阳性率亦下降,但随猪龄的增长而感染逐渐加重后其抗体阳性率又升高,且不同生长阶段PCV毒抗体阳性率有明显差异。     

猪圆环病毒2型PCR检测方法的建立及应用

根据Genbank中PCV2全基因组序列设计了扩增片段大小为262bp的引物P1/P2,建立了检测猪圆环病毒2型PCR方法。引物对P1/P2从PCV2阳性病毒感染基因组中扩增出特异性条带的最低DNA含量为10-9ng/mL(约100个PCV2病毒)。用该方法对陕西和甘肃的103份临床发病猪的肺脏和淋巴结样品进行检测,结果有68份样品检测出阳性,阳性率为66%。     

2021—2022年南京市野猪中8种病毒感染情况及PCV2全基因组遗传进化分析

野猪是多种重要动物疫病的天然宿主,为了解2021—2022年期间南京市野猪疫病感染情况、基因型及遗传变异特征,为野猪疫病的防控提供科学依据,在江苏省南京市共采集30头野猪的76份样品,其中30份全血样品、30份血清样品、6份粪便样品和10份组织样品(心脏、肝脏、脾脏、肺脏和肾脏组织的混合样品)用于开展猪瘟病毒(CSFV)、非洲猪瘟病毒(ASFV)、猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)、伪狂犬病病毒(PRV)、口蹄疫病毒(FMDV)、猪流行性腹泻病毒(PEDV)、猪圆环病毒2型(PCV2)和猪圆环病毒3型(PCV3)的病毒核酸及抗体检测。不同样品PCR检测结果显示,30头野猪中有12头PCV3阳性,阳性率为40%;PCV2阳性率为6.7%;其余病原核酸检测均为阴性。在PCV2检测阳性的野猪样品中成功获得2条PCV2全基因组序列,且均属于PCV2d基因亚型。血清抗体检测结果显示,野猪PCV3、PCV2、PRV gB、PRRSV、PEDV和FMDV A型抗体阳性率分别为53%、30%、30%、3.3%、3.3%和6.7%;所有野猪CSFV、ASFV、PRV gE抗体和FMDV O型抗体检测均...     

西宁市猪圆环病毒2型感染的流行病学调查

用酶联免疫吸附试验（ELISA）检测了西宁市8个规模养殖场和部分散养户的161份猪血清样品的猪圆环病毒2型（PCV2）抗体。结果显示，所有被检猪场均有PCV2抗体阳性猪存在，161份血清样品中PCV2抗体阳性率为86．95％。从上述样品中随机抽取28份样品，用PCR方法检测了PCV2ORF1基因；结果，从13份血清中扩增到了特异性PCV2ORF1基因，阳性率为46．42％。证实，西宁市猪场和散养猪群中存在PCV2感染。     

PCV2、PRV、PPV多重PCR检测方法的建立及其应用

根据GenBank中已发表的猪圆环病毒2型(PCV2)、猪伪狂犬病毒(PRV)、猪细小病毒(PPV)有关基因序列,通过序列比对及参考相关文献,设计了3对特异性引物。通过优化,建立了可同时检测PCV2、PRV及PPV 3种病毒的多重PCR方法。结果表明,该方法能同时检测到PCV2、PRV及PPV的最低核酸量分别为40pg、72pg、46pg。对猪圆环病毒3型(PCV3)、猪细环病毒(TTSuV)、猪流行腹泻病毒(PEDV)、猪蓝耳病毒(PRRSV)、猪瘟病毒(CSFV)无扩增。应用该方法对87份临床样品进行检测,PCV2阳性检出率为28.7%(25/87),PRV野毒检出率为11.5%(10/87),PPV检出率为12.6%(11/87)。其中2种以上病毒混合感染阳性率为13.8%(12/87),3种病毒同时感染的阳性率为2.3%(2/87),其结果也与单一PCR结果一致。研究结果提示,该方法可用于PCV2、PRV、PPV三种病原的单一感染或混合感染的鉴别诊断。     

云南省新发猪圆环病毒3型感染状况调查与全基因进化分析

为了解猪圆环病毒3型(PCV3)在云南省不同地区猪群中的流行情况,针对PCV3基因保守区域设计特异性引物,优化反应条件,建立PCR快速检测方法,并采用该方法对采自云南省不同地市431份样品进行检测,将获得的部分毒株全基因序列进行遗传进化分析。结果显示:本研究成功建立了一种快速、特异和灵敏的PCV3检测方法;云南省12个地(市)29县(区)中,8个地(市)12个县(区)检测出阳性样品;431份样品中有43份PCV3阳性样品,阳性率为9.98%;获得的3株PCV3全基因组序列与参考毒株之间的核苷酸同源性为98.6%~99.5%,进化树显示3株云南毒株形成一个小的进化分支,属于PCV3a基因型。本研究结果表明,PCV3在云南省多个地区呈一定的流行趋势,流行毒株以PCV3a基因型为主,有必要进一步开展云南地区PCV3流行病学调查,并提出防控对策。     

猪圆环病毒2型感染的流行病学调查

应用ELISA方法对河北省及北京、天津地区部分规模猪场和散养猪群共398份猪血清样品进行猪圆环病毒2型(Porcine circovirus type 2,PCV2)抗体检测,结果抗体阳性率为90.9%,血清样品抗体总阳性率为84.2%,其中种母猪抗体阳性率86%,种公猪88.2%,育肥猪85.2%,断奶仔猪76.7%,初步表明PCV2感染在被检地区猪群中普遍存在。对阳性的血清样品中随机抽取14份,用PCR方法进行PCV2 ORF1基因的检测,结果从6份血清中扩增到了特异性目的基因片段,检出率为42.9%,进一步证实了PCV2感染在上述地区规模猪场和散养猪群中存在。     

广西田东县部分猪场四种疫病病原及三种疫病血清学的检测与分析

为了解广西田东县部分猪场猪瘟?高致病性猪繁殖与呼吸综合征(猪蓝耳病)、猪圆环病毒2型和猪伪狂犬病的流行情况，采用RT-PCR方法及PCR方法检测组织样品，对各猪场送检的162份组织样品进行猪瘟病毒(CSFV) 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒(HP-PRRSV)、猪圆环病毒2型(PCV-2)和猪伪狂犬病病毒(PRV)核酸检测。采用ELISA方法对送检临床健康猪群400份血清样品进行CSFV、HP-PRRSV、PRV-gE抗体检测。病原检测结果显示：病料CSFV核酸检测为阴性；HP-PRRSV、PCV2、PRV核酸总阳性率分别：6.79%、40.74%、1.23%;对不同猪群各种病原核酸阳性率分析发现，育肥猪HP-PRRSV阳性率最高，为11.53%,保育猪PCV2阳性率最高，为51.9%,种母猪PRV阳性率最高，为6.45%。抗体检测结果显示：CSFV抗体阳性率为87%,HP-PRRSV抗体阳性率77.5%,PRV-gE抗体阳生率为12.25%。本研究表明，CSFV免疫效果好，并有效地控制了该病在本区域的发生与流行。HP-PRRS、PCV2、PR这3种疫病仍在猪群中散发流行，需要加强防控...     

2005年河南省猪圆环病毒病血清学调查

应用酶联免疫吸附试验(ELISA)对猪圆环病毒Ⅱ型(PCV2)进行血清学抗体检测,血清样品来自河南省6个地区的15个发病猪场。结果显示其总体阳性率为20.3%,母猪阳性率12.9%,断奶仔猪阳性率28.6%;同时对仔猪来源不同的猪场进行调查,自繁自养的猪场阳性率明显较低,而从外购买仔猪的猪场阳性率高达47.1%。由此表明猪圆环病毒Ⅱ在河南省已普遍流行。     

河南地区猪圆环病毒2型感染的血清流行病学调查

为初步了解河南地区猪群中猪圆环病毒2型(PCV2)的感染情况,应用ELISA方法对河南12个地区的226份血样进行PCV2抗体检测,结果抗体阳性率为53.10%。其中母猪抗体阳性率为70.37%,公猪抗体阳性率为40.00%,育肥猪抗体阳性率为50.00%,仔猪抗体阳性率为46.67%。并对猪圆环病毒2型与其他病原混合感染情况做了调查,结果表明:与猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)混合感染的比例为26.67%;与猪瘟病毒(CSFV)混合感染的比例为35.83%;与猪伪狂犬病毒(PRV)混合感染的比例为16.67%;与猪传染性胸膜肺炎(APP)混合感染的比例为61.67%。调查分析初步表明:PCV2感染在河南地区普遍存在,并极易与其他病原混合感染。     

猪圆环病毒2型河南株全基因组的克隆与遗传进化分析

为了解近几年河南地区猪圆环病毒2型(PCV2)的遗传进化情况,本研究对采自2011年~2015年河南省13个地区的28份疑似患断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)猪的病料样品进行PCR检测,并将检出的阳性病料样品接种无PCV的PK-15细胞,分离PCV2,进而用IPMA进行鉴定。最后对所获分离株进行全基因组克隆和序列分析。结果显示,28份样品中阳性率为75%(21/28),并成功分离出21株PCV2,其全基因序列同源性为95.4%~99.9%;在遗传演化关系上,21株PCV2分离株分布于两个基因型(PCV2b和PCV2d),16株属于PCV2d,而其余5株属于PCV2b基因型,这也说明PCV2d逐渐成为河南地区的优势流行株。此外,通过对其Cap蛋白氨基酸序列的预测与分析,发现其主要抗原区存在12处位点明显变异,这可能影响其抗原性及免疫原性。本研究为河南地区PCV2的防控提供了依据。