芹菜素对小鼠急性肺损伤的保护作用

急性肺损伤是由创伤、感染、休克等诸多非心源性因素导致的一种急性、进行性呼吸障碍。该病的主要特点是出现顽固型低氧血症、促进呼吸频数升高、呼吸加重、呼吸困难、X线分析结果显示肺泡多出现弥漫性浸润等。本实验在构建LPS诱导的小鼠急性肺损伤模型的基础上,通过观察肺组织病理学变化、肺组织MPO活性变化及炎性细胞数量、促炎性细胞因子及NF-κB和MAPKs信号通路中关键接头蛋白分子磷酸化水平变化,探讨芹菜素对LPS诱导的小鼠急性肺损伤的保护作用。     

紫花地丁总黄酮体外抗炎活性研究

试验研究了紫花地丁总黄酮（TFV）对脂多糖（LPS）诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞活力、细胞中炎症介质含量以及相关基因表达的影响,以期探讨其体外抗炎活性的作用。试验采用MTT法筛选出TFV对小鼠RAW264.7巨噬细胞活力具有促进作用的最佳添加浓度;用酶联免疫吸附法（ELISA）检测了TFV对LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞释放到细胞培养液中NO、肿瘤坏死因子α（TNF-α）、白介素1β（IL-1β）、白介素6（IL-6）含量的影响;运用实时荧光定量PCR法检测了TFV对LPS诱导的炎性小鼠RAW264.7巨噬细胞TNF-α、诱导型一氧化氮合酶（iNOS）和环氧合酶2（COX-2）相对表达水平的影响;研究并分析了TFV的体外抗炎活性。试验结果表明,TFV在5~50 μg/mL浓度范围内能提高小鼠RAW264.7巨噬细胞的活力（P<0.05）;与LPS模型组比较,TFV能显著降低LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞产生NO、TNF-α、IL-6、IL-1β的含量,并能显著降低LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞内TNF-α、COX-2等炎症因子的mRNA表达量（P<0.05）。综上,TFV能显著下调LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞IL-1β、IL-6、TNF-α等细胞因子的释放量和下调TNF-α、COX-2 mRNA的表达量,说明抑制促炎性细胞因子基因的表达可能是实现其抗炎作用的原因之一。     

紫花地丁总黄酮体外抗炎活性研究

试验研究了紫花地丁总黄酮(TFV)对脂多糖(LPS)诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞活力、细胞中炎症介质含量以及相关基因表达的影响,以期探讨其体外抗炎活性的作用。试验采用MTT法筛选出TFV对小鼠RAW264.7巨噬细胞活力具有促进作用的最佳添加浓度;用酶联免疫吸附法(ELISA)检测了TFV对LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞释放到细胞培养液中NO、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)含量的影响;运用实时荧光定量PCR法检测了TFV对LPS诱导的炎性小鼠RAW264.7巨噬细胞TNF-α、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧合酶2(COX-2)相对表达水平的影响;研究并分析了TFV的体外抗炎活性。试验结果表明,TFV在5～50μg/mL浓度范围内能提高小鼠RAW264.7巨噬细胞的活力(P0.05);与LPS模型组比较,TFV能显著降低LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞产生NO、TNF-α、IL-6、IL-1β的含量,并能显著降低LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞内TNF-α、COX-2等炎症因子的mRNA表达量(P0.05)。综上,TFV能显著下调LPS诱导的小鼠RAW264.7巨噬细胞IL-1β、IL-6、TNF-α等细胞因子的释放量和下调TNF-α、COX-2 mRNA的表达量,说明抑制促炎性细胞因子基因的表达可能是实现其抗炎作用的原因之一。     

辣椒碱体外抗炎活性的研究

试验旨在体外应用脂多糖(LPS)诱导小鼠腹腔巨噬细胞建立炎症模型基础上,探讨辣椒碱的体外抗炎活性.选取150只8周龄SPF级Balb/c小鼠,采用细胞增殖-毒性检测法(CCK-8法)检测15、30、60、120和240 mg/L辣椒碱对辣椒碱增殖活力的影响.测定巨噬细胞的吞噬率、白细胞介素-1β(IL-1β)和白细胞介...     

金丝桃素的体外抗口蹄疫病毒活性

将体外培养的BHK21细胞感染FMDV后加入金丝桃素，日光灯下光活化1h，通过细胞病变观察、MTT法、透射电子显微镜观察、H^3-UR掺入试验，探讨了光活化金丝桃素对FMDV体外生长增殖的影响。结果表明，金丝桃素有明显的抑制FMDV致BHK21细胞病变效应，能抑制FMDV的增殖，抑制率可达61．82％。透射电镜观察，金丝桃素组与病毒对照组相比，BHK21细胞的FMDV颗粒明显减少。证实，金丝桃素在体外有明显的抑制FMDV增殖的作用。     

白杨素衍生物的抗氧化和抗炎活性研究进展

黄酮类化合物白杨素具有抗氧化、抗炎、抗癌和抗菌等多种药理活性,但因其不溶于水,生物利用度低等原因而无法成药。自上世纪八十年代以来,大量学者合成了多种白杨素衍生物, 以期筛选出能够用于临床的药物。由于已合成的白杨素衍生物数量众多,且其相关药理活性众多,本文将针对具有抗氧化和抗炎活性的白杨素衍生物进行综述,以期为白杨素衍生物在新兽药研发中的应用提供信息支持。     

桧烯抗弓形虫活性的体外评价

本研究旨在筛选具有抗弓形虫活性的萜类化合物,并进行体外活性评价。对26个萜类化合物进行体外抗弓形虫增殖作用的筛选,采用CCK-8法确定活性化合物对Vero细胞的毒性和安全浓度,Giemsa染色进一步确定对弓形虫的活性,通过细胞免疫荧光、Giemsa染色和生物化学发光法评价活性化合物对弓形虫的体外活性。结果表明,26个萜类化合物中,桧烯对弓形虫有显著的活性,桧烯对RH-2F的IC₅₀为90.76 μg·mL^-1,Giemsa染色和细胞免疫荧光的结果表明,桧烯对细胞内的两种弓形虫虫株都有显著的抗增殖作用,并且对弓形虫的入侵有极显著的抑制作用（P<0.001）。综上表明,桧烯对弓形虫的入侵和细胞内增殖具有显著的抑制作用,可作为潜在的抗弓形虫先导化合物。     

中药组方的抗炎、镇痛活性评价

采用炎症和疼痛动物模型,对10个中药组方的抗炎和镇痛作用进行评价。结果表明,与空白对照组相比,组方Ⅱ、Ⅲ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ、Ⅹ对二甲苯所致小鼠耳廓肿胀有显著抑制作用(P0.05);组方Ⅲ、Ⅴ、Ⅸ对醋酸所致小鼠毛细血管通透性有显著抑制作用(P0.05);组方Ⅲ、Ⅴ、Ⅶ、Ⅸ能显著抑制小鼠的扭体次数(P0.05);中药各组方对热刺激引发的小鼠疼痛反应时间无明显的延长,说明组方Ⅲ、Ⅴ、Ⅸ具有一定的抗炎和镇痛活性。     

西洋参茎叶体外抑制大肠杆菌增殖及抗炎活性的研究

为探讨西洋参茎叶不同提取部位对小鼠单核巨噬细胞RAW264.7抑菌效果及脂多糖（LPS）诱导的抗炎活性的影响,本试验用106 CFU/mL大肠杆菌菌液侵染RAW264.7细胞,分别以西洋参茎叶水提取和醇提取部位0.125、0.25、0.5 mg/mL作用细胞,CCK-8法检测不同提取物浓度对RAW264.7细胞增殖活性的影响,Hoechst染色法观察细胞被大肠杆菌侵染后的凋亡情况。LPS诱导细胞炎症反应,ELISA法检测细胞炎性因子IL-6、IL-1β、TNF-α的释放情况|实时荧光定量PCR法测定细胞中细胞炎性因子IL-6、IL-1β、TNF-α mRNA表达。结果表明：西洋参茎叶水提取部位和醇提取部位能抑制大肠杆菌诱导的细胞凋亡|西洋参茎叶水提取部位提取物浓度为0.25 mg/mL 时,细胞释放TNF-α、IL-1β和IL-6细胞炎症因子浓度分别降低了50.20%、22.21%、43.41%,对其mRNA基因表达量分别降低了12.31%、27.07%、29.01%|西洋参茎叶醇提取部位提取物浓度为0.25 mg/mL时,细胞释放TNF-α、IL-1β和IL-6细胞炎症因子浓度分别降低了59.70%、 30.24%、52.38%,对其mRNA基因表达量分别降低了21.54%、 29.84%、31.79%,且醇提取部位较水提取部位的抑制效果好。西洋参茎叶水提取部位和醇提取部位对大肠杆菌有抑制作用,能增强细胞抗炎活性,为西洋参茎叶作为中草药饲料添加剂进一步开发利用提供了理论依据。[关键词] 西洋参茎叶|中草药饲料添加剂|抑菌|抗炎     

银杏叶对小鼠抗炎镇痛作用的研究

目的：观察不同剂量银杏叶水煎醇沉液对小鼠的抗炎、镇痛作用。方法：采用二甲苯诱导小鼠耳壳肿胀法,50只小鼠随机均分5组,分别为银杏叶水煎醇沉液腹腔注射高（10.0 g/kg）、中（5.0 g/kg）、低（2.5 g/kg）剂量组,空白对照组腹腔注射等量生理盐水,阳性对照组腹腔注射地塞米松（10 mg/kg）,连续给药6 d,测定小鼠耳廓的肿胀率和肿胀抑制率;采用热板法测定小鼠的镇痛作用,取合格小鼠100只随机均分10组,分别为银杏叶水煎醇沉液腹腔注射和水煎液灌胃高（10.0 g/kg）、中（5.0 g/kg）、低（2.5 g/kg）剂量组,空白对照组腹腔注射和灌胃等量生理盐水,阳性对照组腹腔注射和灌胃安乃近（20 mg/kg）,给药后30 m in测定小鼠的痛阈值的变化。结果：腹腔注射银杏叶水煎醇沉液各剂量组小鼠耳廓肿胀率均低于生理盐水组（P〈0.01）,其肿胀抑制率以高剂量组最高;与生理盐水组比较,腹腔注射银杏叶水煎醇沉液各个剂量组痛阈值均明显提高（P〈0.01）;灌胃给药高剂量组有镇痛作用（P〈0.01）。结论：银杏叶水煎醇沉液腹腔注射对小鼠具有较强的抗炎和镇痛作用,灌胃给药镇痛效果相对较差。     

饲料用连翘叶不同提取物体外抗炎抑菌活性的比较研究

研究旨在比较饲料用连翘叶不同提取物的体外抗炎活性和抑菌活性。运用脂多糖诱导的小鼠单核巨噬细胞RAW264.7研究连翘叶水提取物、连翘叶40%乙醇提取物和连翘叶80%乙醇提取物的体外抗炎活性,并通过抑菌试验对3种连翘叶提取物进行了体外抑菌活性的比较研究。采用Griess法检测一氧化氮（NO）生成水平,酶联免疫分析法（ELISA）检测白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-6(IL-6)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的生成水平。并使用纸片扩散法和微量肉汤倍比稀释法测定抑菌活性、最低抑菌浓度和最低杀菌浓度,结果表明：3种连翘叶提取物均能抑制NO、IL-1β、IL-6和TNF-α的生成,抗炎活性80%乙醇提取物>40%乙醇提取物>水提取物。抑菌活性40%乙醇提取物>水提取物>80%乙醇提取物,3种连翘叶提取物对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强。饲料用连翘叶乙醇提取物具有较好的体外抗炎活性和抑菌作用,可作为新型饲料添加剂开发应用。     

生物表面活性素体外抗病毒活性

测定了表面活性素(Surfactin)的体外抗新城疫病毒(Newcastle disease virus,NDV)LaSota株、伪狂犬病病毒(Pseudorabies virus,PRV)作用,并对其可能的机理进行了初步的探讨.结果表明,生物表面活性素对鸡胚成纤维细胞(Chicken embryo fibroblasts,CEF)的TD50和TD0分别为62.5、16.125 mg/L;对猪肾(Porcine kidney,PK-15)细胞的TD50和TD0分别为31.25、4.03 mg/L;对NDV LaSota株、PRV株所致细胞病变效应有明显的抑制作用,可使细胞存活率显著升高;表面活性素可以直接作用于NDV LaSota株、PRV株,具有一定的抗病毒作用;同时还具有一定的预防NDV LaSota株感染及抑制其复制的作用.但对PRV病毒作用不显著.其抗病毒效果和相应的阳性对照抗病毒药物病毒唑(Ribavirin),无环鸟苷(Acyclovir,ACV)相当,并且由于其细胞毒性较弱,可作为一种抗病毒药物进行开发研究.     

藏红花素对小鼠卵母细胞体外成熟能力的影响

试验旨在探讨藏红花素（crocin）的抗氧化应激作用对小鼠卵母细胞体外成熟及后续胚胎发育能力的影响。在体外成熟（IVM）培养液中添加不同浓度藏红花素（0、5、10、15、20、25、30 μmol/L）,小鼠卵母细胞在体外成熟培养12 h后,检测卵母细胞第一极排出情况、卵母细胞胞质内活性氧（ROS）和谷胱甘肽（GSH）含量,并进行体外受精（IVF）;体外受精后6 h统计受精率,24 h统计卵裂率,96 h统计囊胚率。结果显示,与对照组相比,10、15 μmol/L藏红花素显著提高了卵母细胞第一极体排出率（P<0.05）;当藏红花素浓度继续增加时,卵母细胞的第一极体排出率下降,30 μmol/L藏红花素显著降低了卵母细胞第一极体排出率（P<0.05）;5、10、15 μmol/L藏红花素均显著降低了卵母细胞ROS含量（P<0.05）,10、15 μmol/L藏红花素均显著提高了卵母细胞GSH含量（P<0.05）。与对照组相比,10 μmol/L藏红花素组受精率、卵裂率、囊胚率差异均不显著（P>0.05）,15、20、25、30 μmol/L藏红花素均显著降低受精率和囊胚率（P<0.05）,对卵裂率影响不显著（P>0.05）。结果表明,在小鼠卵母细胞体外成熟培养液中添加10 μmol/L藏红花素可以显著增加第一极体排出率,显著降低卵母细胞ROS含量、提高卵母细胞GSH含量,但对受精后的胚胎发育无显著影响。     

鸡血藤总黄酮抗炎活性的研究

为了探讨鸡血藤总黄酮的抗炎活性,试验采用二甲苯所致小鼠耳肿胀模型和大肠杆菌脂多糖刺激RAW264.7细胞炎症模型,测定鸡血藤总黄酮对小鼠耳肿胀及RAW264.7细胞炎性因子分泌水平的抑制作用。结果表明:体内鸡血藤总黄酮高剂量(100 mg/kg)和中剂量(50 mg/kg)组小鼠耳肿胀率显著低于空白对照组(P0.05),体外鸡血藤总黄酮处理对LPS刺激RAW264.7细胞所致的一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)和白细胞介素6(IL-6)分泌水平的升高具有显著抑制作用(P0.05)。说明鸡血藤总黄酮在体内和体外均具有良好的抗炎效果。     

金英黄归汤抗炎活性的评价

为了评价金英黄归汤的抗炎活性,采用Bliss法测定小鼠的半数致死量(LD50)对其进行急性毒性评价,通过体内外试验分析评价其抗炎活性。建立二甲苯致小鼠耳廓肿胀炎症模型,测定小鼠耳廓肿胀度;建立冰醋酸致小鼠腹腔毛细血管通透性炎症模型,测定毛细血管通透性;利用金黄色葡萄球菌建立家兔试验性乳房炎炎症模型,ELISA方法检测乳腺组织和血清中TNF-α、IL-6的分泌量进行抗炎活性评价;利用LPS诱导小鼠乳腺上皮细胞(MECs)建立炎症模型,MTT法检测不同浓度金英黄归汤对MECs细胞活力影响;ELISA方法检测金英黄归汤对LPS诱导MECs的TNF-α、IL-6和IL-1β分泌的影响。结果显示,金英黄归汤灌胃给药对小鼠无明显急性毒性;能显著(P0.05)抑制小鼠耳廓肿胀,抑制率为25.42%,能显著(P0.05)抑制小鼠腹腔毛细血管通透性,抑制率为33.10%。金英黄归汤各剂量组均能极显著(P0.01)降低家兔实验性乳房炎乳腺组织和血清中的TNF-α、IL-6的分泌;金英黄归汤低、中、高(40、400、4000μg/m L)能不同程度的抑制LPS诱导MECs的TNF-α、IL-6和IL-1β的分泌。体内外试验结果表明,金英黄归汤能够对小鼠MECs具有较强的抗炎活性,其抗炎作用与抑制炎性因子的分泌有关。     

芹菜素通过NF-κB和MAPK通路抑制MAC-T细胞和小鼠乳腺的炎性反应

为揭示芹菜素对奶牛乳腺炎的抑制作用及其机制,本研究采用脂多糖(LPS)刺激MAC-T细胞,MTT方法检测芹菜素对奶牛乳腺上皮细胞MAC-T的毒性;real-time PCR和Western blot方法检测炎性因子白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及氧化应激因子诱生型一氧化氮合酶(iNOS)和环氧酶2(COX-2)的表达水平;Western blot检测核因子κB(NF-κB)和促分裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路关键蛋白的表达水平和磷酸化水平;免疫荧光检测NF-κB的核转移情况。结果表明：芹菜素(1,7,15 mg/L)显著降低了MAC-T细胞和小鼠乳腺中LPS诱导的COX-2、iNOS、IL-1β、IL-6的mRNA与蛋白质的表达水平(P<0.01)。而且,芹菜素显著降低了MAC-T细胞以及小鼠乳腺中LPS诱导的NF-κB(p65和IκBα)(P<0.05)和MAPK(p38、JNK1/2和ERK1/2)(P<0.01)的磷酸化水平,抑制了NF-κB p65的核转移。这些结果说明芹菜素通过抑制NF-κB和MAPK信号...     

金丝桃素体外抗H9N2亚型禽流感病毒活性研究

研究金丝桃素体外抗H9N2亚型禽流感病毒的活性。用MTT法观察金丝桃素预防、治疗、以及体外直接作用15 min 4种给药方式对感染H9N2亚型禽流感病毒的细胞的保护效果,以及用荧光酶标法测定金丝桃素对禽流感病毒神经氨酸酶的抑制活性。结果表明,金丝桃素的4种给药方式在体外对感染禽流感病毒的细胞的的保护率分别为6.43%、5.31%、39.89%、69.04%。金丝桃素对禽流感病毒神经氨酸酶活性的抑制,IC50为0.58 mg/mL。表明金丝桃素对感染H9N2亚型禽流感病毒的细胞有一定保护的作用,且对神经氨酸酶的活性有较显著的抑制作用。     

中药复方制剂的小鼠抗炎试验

子宫内膜炎是奶牛的常发病之一,给奶牛业造成了严重的经济损失。临床上抗生素的广泛和大量应用,使得耐药性增加,治疗成本不断上升,且带来药物残留问题,对乳及乳制品安全造成威胁。中草药治疗奶牛子宫内膜炎有独特的优点,也是当前研究的热点,因此,笔者等根据中兽医基本理论,研制出治疗奶牛子宫内膜炎的纯中药复方制剂。为进一步深入了解其抗炎作用类型,实验室以小白鼠为试验动物。设计了四组不同类型的炎症模型,从而为药物的临床应用提供理论依据。     

大叶桉叶挥发油的抗炎活性研究

大叶桉叶为双子叶植物桃金娘科大叶桉（Eucalyptus robusta Smith）之叶,味辛、苦,性凉,具有疏风发表、清热解毒、祛痰止咳、杀虫止痒之功效。大叶桉是华南地区民间常用中草药,其叶水煎剂具清热解毒、消炎止痛、防腐止痒的功效,其总挥发油可用于治疗流行性感冒、上呼吸道感染和皮肤病等疾病。