黄连素对福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良的影响

为探讨黄连素(berberin)通过调控基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)又名CD147的表达对肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)的影响,将150只1日龄AA肉鸡随机均分为3组:对照组、TD发生组和黄连素组,对照组正常饲喂基础日粮;从第3天开始,TD发生组和黄连素组,在饲喂基础日粮的同时添加25 mg/kg的福美双诱导产生TD,黄连素组从第7天开始口腔灌服黄连素,剂量为15 mg/kg,连用7 d。于第14天剖杀全部雏鸡。观察记录各组雏鸡体质量变化、HE染色观察生长板结构及血管变化,real-time PCR和Western blot检测CD147基因和蛋白的表达差异。结果显示,TD发生组雏鸡体质量增长缓慢,生长板组织结构破坏严重,且CD147基因及蛋白表达量显著下降。黄连素组雏鸡体质量增长较快,TD症状缓解,生长板血管浸润较多,且CD147基因及蛋白表达量增加。由此推测,饲料中添加黄连素可以上调CD147基因和蛋白的表达量,从而促进TD病变区血管的生成和恢复,缓解TD症状,提高肉鸡产量。     

福美双对肉鸡胫骨软骨发育不良发生的影响

120羽1日龄健康AA肉鸡经1周预饲后随机分为2组,对照组饲以基础日粮,试验组饲以基础日粮并添加100mg/kg福美双,对肉鸡胫骨长度、生长板厚度、肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)指数及TD发病率等指标进行检测。结果表明,添加福美双使肉鸡TD发病率显著上升。患病鸡胫骨长度、生长板厚度和TD指数均有显著变化(P<0.01)。说明100mg/kg福美双可显著提高AA肉鸡TD发病率,具有应用该方法建立TD实验动物模型的潜力。     

雷公藤对福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良肉鸡肝功能的影响

120只1日龄AA肉鸡随机分为对照组、福美双组(50mg/kg福美双)、雷公藤治疗组(2mg/kg),每组4个重复,每个重复10只,试验进行14d。结果显示:饲料中添加福美双显著升高了血清AST、ALT、ALP活性和肝脏MDA水平(P0.05),显著降低了SOD、GSH-Px水平(P0.05),而治疗组翅静脉注射雷公藤显著降低了AST、ALT、ALP和肝脏MDA水平(P0.05),显著升高了SOD、GSH-Px水平(P0.05)。结果表明,雷公藤可以有效的降低福美双对肉鸡肝脏的抗氧化状态改变和减少肉鸡的肝脏功能损害,为肉鸡胫骨软骨发育不良的治疗提供了新的方法。     

福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良软骨细胞凋亡

为研究肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)软骨细胞的凋亡分布及凋亡相关基因的表达水平,将80羽1日龄健康AA肉鸡基础日粮饲养1周后,随机分为对照组和处理组,处理组饲喂添加100mg·kg-1福美双的日粮,采用HE染色和TUNEL法分别对肉鸡胫骨生长板软骨细胞的形态学和凋亡情况进行观察,同时采用Real-time PCR方法和免疫组化技术分别对软骨细胞中凋亡相关基因的mRNA转录水平及蛋白质表达水平进行检测。结果显示,福美双诱发TD后第1、2、4和6天,肉鸡生长板软骨栓形成逐渐增大,异常软骨细胞增加,TD病变区软骨细胞,尤其是肥大区软骨细胞凋亡程度明显增加。Real-time PCR检测结果显示,与对照组比较,TD生长板促凋亡基因Bax在试验第1、2、4和6天表达量极显著上调(P0.01);Caspase-3在第1、2和4天表达量极显著增加(P0.01);抗凋亡基因BAG-1表达下调,在试验第1和2天差异极显著(P0.01)。免疫组化结果显示,第1和4天处理组Bax的蛋白表达量明显高于对照组。本研究提示肉鸡TD生长板软骨细胞凋亡与促凋亡基因的表达增强和抗凋亡基因的表达下降有关。     

福美双和铜对肉鸡胫骨软骨发育不良的影响

本试验旨在研究福美双和铜对肉鸡胫骨软骨发育不良、血清相关酶活性和组织铜含量的影响。100羽1日龄AA肉鸡随机分为4组,从8日龄起分别给予基础日粮(对照组),福美双日粮(基础日粮+福美双100 mg/kg),福美双低铜日粮(基础日粮+福美双100 mg/kg+CuSO4.5H2O 50 mg/kg),福美双高铜日粮(基础日粮+福美双100 mg/kg+CuSO4.5H2O 100 mg/kg),试验期至21日龄。结果表明:(1)日粮中添加福美双(100 mg/kg)能显著增加肉鸡TD的发生率;添加铜能降低福美双的这种作用,两者之间存在明显的互作关系;(2)与对照组相比,福美双组和福美双高铜日粮组肉鸡血清钙、磷水平明显升高(P<0.05);血清ALT水平在各组之间无显著差异;血清ALP、AST水平,福美双高铜日粮组与其余各组相比明显升高,差异显著(P<0.05);(3)与对照组相比,其余各组肉鸡胫骨长度均显著下降(P<0.05);(4)日粮中铜添加可提高各组织中铜的沉积;添加福美双能提高肝脏、肾脏、胰腺中铜的沉积,同时降低铜在肾脏中的沉积,而铜的添加能够降低福美双所引起的肾脏铜的增加。提示福美双可能通过损伤肝、肾功能,影响机体组织对铜的生物利用从而诱导肉鸡胫骨软骨发育不良的发生。     

福美双对肉鸡生产性能、血清相关酶活性及胫骨软骨发育不良的影响

将120只1日龄AA肉鸡随机分为对照组、低浓度福美双组（50mg／kg福美双）、高浓度福美双组（100mg／kg福美双），试验进行28d。结果显示，饲料中添加福美双显著升高了血清AST、ALT和ALP水平（P〈0．05），提高了肉鸡胫骨软骨发育不良（TD）的发病率（P〈O．05），降低了肉鸡生产性能。表明福美双能通过损害肉鸡肝脏功能，影响骨代谢相关酶活性，而致发肉鸡TD。     

磷源对福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良及骨骼钙、磷代谢的影响

本试验旨在研究磷酸一二钙(MDCP)和磷酸氢钙(DCP)对福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)及骨骼钙、磷代谢的影响。选取1日龄科宝(Cobb)肉雏鸡120只,试验1～21 d采用2因子设计,按磷源的不同分为2个处理(磷源DCP和MDCP),每个处理60只鸡;试验22～42 d采用2×2因子设计,将每种磷源按福美双的添加水平不同再分为2个处理(福美双水平为0和100 mg/kg),每个处理3个重复,每个重复10只鸡。福美双组在基础饲粮中添加100mg/kg福美双,于22～28 d饲喂,然后换喂对应不含福美双饲粮。结果表明:1)MDCP组肉鸡第35天TD评分相对DCP组有降低的趋势(P=0.09),但磷源对肉鸡第28和42天TD评分影响差异不显著(P>0.05)。福美双显著升高了肉鸡第28、35和42天TD评分(P<0.05)。2)福美双和磷源对肉鸡第35天胫骨灰分、钙和磷含量交互效应显著(P<0.05)。福美双诱导条件下,MDCP组肉鸡第35天胫骨灰分、钙、磷含量显著高于DCP组(P<0.05)。3)DCP组第35天血清甲状旁腺素含量高于MDCP组(P=0.12)。由此可见,相对DCP,MDCP对福美双诱导的TD发生有一定减缓作用,且与肉鸡骨骼钙、磷代谢密切相关。2种磷源对肉鸡最终TD评分影响差异不显著。     

福美双诱发肉鸡胫骨软骨发育不良的组织病理学变化

120羽1日龄健康AA肉鸡预饲1周后随机分为2组,对照组饲以基础日粮,试验组饲以基础日粮添加100mg/kg福美双,进行了肉鸡胫骨长度、生长板厚度、肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)指数及TD发病率等指标的检测,并进行了形态学和组织病理学观察。结果显示,患病鸡胫骨长度、生长板厚度和TD指数均有显著变化(P<0.01),TD发病率显著上升(P<0.05);病鸡胫骨近端的纵切面有玉白色楔状软骨团块深入干骺端甚至骨髓腔,呈现典型的胫骨软骨发育不良病理学变化。结果提示,100 mg/kg福美双可显著提高AA肉鸡TD发病率,并引起相应的组织病理学变化,为TD分子机理的研究提供了一个理想的实验动物模型。     

表没食子儿茶素没食子酸酯对福美双诱导的肉鸡胫骨软骨发育不良的影响

旨在研究表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)通过调控热休克蛋白HSP90的表达对肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)的影响。试验将120羽1日龄健康AA肉鸡预饲1周后随机分成3组:对照组、TD发生组和EGCG处理组。通过向基础日粮中添加药物的方式,分别对TD发生组和EGCG处理组雏鸡饲喂25mg/kg的福美双,诱发TD。从第3日起,对EGCG处理组雏鸡每天腹腔注射10mg/kg的EGCG。14d后,全部扑杀试验鸡。形态学检查肉鸡胫骨生长板发育状况;HE染色法观察生长板软骨细胞分化和血管生成变化;Real-time PCR和Western blot法分别检测HSP90基因和蛋白表达差异。结果显示,TD发生组雏鸡TD症状明显,HSP90基因和蛋白表达量均明显上升。EGCG处理组雏鸡TD症状明显缓解,HSP90基因和蛋白表达量显著下降;生长板软骨细胞分化和血管浸润显著恢复。由此推测,EGCG可能通过下调HSP90基因和蛋白在TD肉鸡软骨细胞中的表达,恢复TD胫骨病变区软骨细胞分化和血管生成,抑制TD发生,提高肉鸡健康状况。     

福美双对肉鸡生长性能和胫骨软骨发育不良组织病理学变化的影响

用160羽1日龄健康AA肉鸡进行试验,研究福美双对肉鸡生长性能和胫骨软骨发育不良组织病理学变化的影响。将试验肉鸡预饲1周后随机分为2组。对照组饲以基础日粮;试验组饲以基础日粮添加福美双100mg/kg饲料,4 d后继续饲以基础日粮。试验期23 d。在试验的第4、9、16、23天,计算平均日增重（ADG）和料重比（F/G）;胫骨软骨发育不良（TD）评分,计算TD发病率,观察病理变化;并进行发病不同阶段组织病理学观察。结果表明,第4天试验组肉鸡TD发病率达到94.44%,料重比增加;第4和第9天肉鸡体增重显著下降,病理剖检症状典型。不同阶段组织病理学观察表明,福美双可促进软骨细胞极剧增殖,引起细胞大量死亡,挤压血管以致血管坏死,基质合成受阻,延缓软骨钙化,最终导致前肥大细胞大量聚集形成软骨栓。因此,对肉鸡短期饲喂福美双100mg/kg可显著影响AA肉鸡生长性能,提高TD发病率,引起与自然发生TD相同的形态学和组织病理学变化,是一个较为理想的研究TD发生发展、筛选各种微营养素预防TD的试验动物模型。     

福美双对肉仔鸡肝功能和胫骨软骨发育不良的影响

研究了福美双对肉鸡胫骨软骨发育不良、血清相关酶活性、肝脏SOD、MDA及增重的影响。120只1日龄AA肉仔鸡随机分为3组，对照组、低浓度福美双组（50mg／kg）、高浓度福美双组（100mg／kg）。每组40只鸡，每组4个重复，每个重复10只鸡，试验进行28d。结果表明，饲料中添加福美双可以显著提高肉鸡TD发病率（P〈0．05），升高血清中AST、ALT和ALP的水平和肝脏MDA的含量（P〈0．05），降低肝脏SOD水平和肉鸡的生产性能。福美双可能通过改变肝脏的抗氧化状态，损害肉仔鸡的肝脏功能，影响骨代谢的相关酶活性，导致肉仔鸡胫骨软骨发育不良的发生。     

影响肉鸡胫骨软骨发育不良的营养因素

胫骨软骨发育不良（Tibial Dyschondroplasia,TD)是在1965年由Leach和Nesheim首次发现，其特点是胫骨软骨发育异常，在近干骺端有一锥形未钙化的软骨，可能是肉鸡软胶原蛋白合成速度超过了降解速度所致，患胫骨软骨发良不良的病鸡运动不便，采食受限，生长发育受影响，增重明显下降，种禽生殖性能和商品肉禽的肉品持均下降，其发生与遗传，饲料饲养水平及Ca,P,Mg,Cl等含量及肉鸡体内阴阳离子失衡引起的酸碱代谢紊乱有关。     

影响肉鸡胫骨软骨发育不良的营养因素

胫骨软骨发育不良（Tibial Dyschondroplasia，TD）是在1965年由Leach和Nesheim首次发现。其特点是胫骨软骨发育异常。在近干骺端有一锥形未钙化的软骨，可能是肉鸡软胶原蛋白合成速度超过了降解速度所致。患胫骨软骨发育不良的病鸡运动不便，采食受限，生长发育受影响，增重明显下降，种禽生殖性能和商品肉禽的肉品质均下降。其发生与遗传、饲料饲养水平及Ca、P、Mg、Cl等含量及肉鸡体内阴阳离子失衡引起的酸碱代谢紊乱有关。 1 胫骨软骨发育不良的临床症状 胫骨软骨发育不良的临床症状是：鸡胫骨关节肿大，行走困难，随着症状严重程度增加，鸡常卧于笼内，活动量下降，严重者不能站立行走。     

含硫氨基酸与铜对肉鸡胫骨软骨发育不良的影响

研究日粮过量含硫氨基酸 （ 简称 Ｓ Ａ Ａ , 为推荐量的１５ 倍） 与高铜 （８８６６ ｍｇ／ｋｇ , 为推荐量的１０ 倍） 对肉鸡胫骨软骨发育不良 （ Ｔ Ｄ） 的影响。试验采用半纯合饲粮 （ 含 Ｃｕ ０６６ ｍｇ／ｋｇ） , 试验处理分为正常 Ｓ Ａ Ａ 与 Ｃｕ 组, 高 Ｓ Ａ Ａ 与正常 Ｃｕ 组, 正常 Ｓ Ａ Ａ 与高 Ｃｕ 组和高 Ｓ Ａ Ａ 与高 Ｃｕ 组,试验期２１ ｄ 。结果： 过量 Ｓ Ａ Ａ 降低肉鸡体重、饲料转化率、骨灰、肝 Ｃｕ 、胰 Ｃｕ （ Ｐ ＜ ００１ 或 Ｐ ＜ ００５） , 增加胫骨长度 （ Ｐ ＜ ００５） , 诱发 Ｔ Ｄ发病率升高 （ Ｐ ＜ ００１） , Ｔ Ｄ 指数显著上升 （ Ｐ ＜ ００５） 。高 Ｃｕ 日粮增加肝 Ｃｕ 、肾 Ｃｕ 沉积 （ Ｐ ＜ ００１ 或 Ｐ ＜ ００５） , 提高饲料转化率 （ Ｐ ＜００５） , 但不诱发肉鸡 Ｔ Ｄ 发病率增加。添加高 Ｃｕ 对过量 Ｓ Ａ Ａ 致肉鸡 Ｔ Ｄ 发病率上升无减缓作用, 适宜的 Ｓ Ａ Ａ 和 Ｃｕ 水平是促进肉鸡生长、降低肉鸡 Ｔ Ｄ 发病率的重要限制因素之一。     

单色光对肉鸡视网膜和松果体视蛋白基因转录的影响

为了研究单色光对肉鸡视网膜和松果体黑素视蛋白基因(OPN4-1和OPN4-2)、视网膜绿敏感锥体视蛋白基因(CHK-1)和蓝敏感锥体视蛋白基因(CHK-2)mRNA转录的影响,笔者选用刚出壳的雄性AA肉鸡40羽,分别饲养在白光(400～700 nm)、红光(660 nm)、绿光(540 nm)和监光(480 nm)下2周,单色光源采用冷LED灯,光照度为15 lx.于第14天分别取视网膜和松果体,提取总RNA,RT-PCR反转录后用上述4种肉鸡相关视蛋白基因的引物进行PCR扩增.结果显示:(1)视网膜和松果体蓝光组OPN4-1 mRNA的表达均显著较白光组高13.44%和16.77%(P<0.05),但视网膜中红光组和绿光组均分别显著较白光组低16.62%和10.94%(P<0.05),而松果体中绿光组与白光组差异不显著(P>0.05);(2)视网膜和松果体OPN4-2 mRNA表达均是红光组最高,其次是蓝光组,而绿光组均最低(P<0.05);(3)视网膜中4个光组CHK-1 mRNA表达均大于CHK-2 mR-NA表达(P(0.05),其中绿光组CHK-1 mRNA表达分别显著较红光和蓝光组高24.37%和9.94%(P<0.05),但与白光组差异不显著;蓝光组CHK-2 mRNA表达分别显著较红光和绿光组高40.90%和8.94(P<0.05),但与白光组差异不显著(P>0.05).以上结果表明,不同视蛋白具有不同的光色敏感性.与红光和绿光相比,蓝光促进视网膜和松果体OPN4-1的转录.     

细菌内毒素对鸡NLRC5信号通路相关基因转录的影响

通过LPS刺激鸡成纤维细胞系(DF-1),分别在0、2、4、6、8、12、18和24h等8个时间点采集细胞,提取总RNA,并设计相关引物,应用荧光定量PCR方法检测NLRC5信号通路相关基因(NLRC5、NF-κB、MHC-I、IL-6、IL-18、STAT1、STAT3和TLR4)mRNA表达变化规律。结果显示,LPS刺激后,NF-κB、MHC-I、IL-6、IL-18和STAT3的转录水平均呈现先显著下降(P0.05)后上升的趋势,NLRC5和TLR4先显著上升后下降的趋势(P0.05),STAT1的mRNA转录水平无显著性变化(P0.05)。研究表明LPS刺激能够引起鸡DF-1细胞产生免疫反应,鸡NLRC5对NF-κB的转录起负调控作用。     

REV感染对鸡NLRC5及其信号通路相关基因转录的影响

为探讨鸡NLRC5信号通路相关基因在禽网状内皮组织增生病病毒(REV)刺激后转录水平的变化,通过REV刺激鸡胚成纤维细胞(CEF),在刺激后7天采集细胞,提取总RNA,并设计相关引物,应用荧光定量PCR方法检测NLRC5信号通路相关基因(NLRC5、MHC-I、IL-6、IL-18、STAT1、STAT3、NF-κB)m RNA表达变化规律。结果表明:REV感染后MHC-I、IL-18、STAT1和STAT3的转录水平高于未刺激组,差异显著(P0.05),NLRC5、IL-6和NF-κB转录水平低于未刺激组,差异不显著(P0.05),研究初步证实REV刺激能够引起CEF产生免疫应答反应,且对NLRC5基因及其信号通路产生影响,REV可能通过抑制NLRC5基因表达来抑制机体先天性免疫。     

日粮硫、镁水平对肉鸡血液酸碱平衡和胫骨软骨发育不良的影响

在玉米 豆粕日粮中,添加３ 个水平的Ｍｇ０ 和（ＮＨ４）２ＳＯ４ ,使日粮中的硫、镁水平分别达到０ ．４０ ％ 、０ ．６５ ％ 、０ ．９０ ％ 和０ ．１７ ％ 、０ ．３７ ％ 、０ ．５７ ％ ,组成９ 个处理日粮,饲喂４０５ 只艾维茵肉用公雏,研究日粮电解质平衡对２１ 日龄肉鸡生长性能、胫骨软骨发育不良（ＴＤ） 发生、血液酸碱平衡的影响。在一定范围内日粮高硫具有诱食作用。日粮高镁同时降低了采食量、日增重和饲料效率（Ｐ＜ ０ ．０５） 。日粮高硫明显降低了ＴＤ 发生率和生长板厚度（Ｐ＜ ０ ．０５） ,高镁则起到相反的作用。日粮电解质平衡与肉鸡ＴＤ 发生率呈线性负相关（Ｒ＝ － ０ ．８２５） 。虽然日粮镁、硫水平对血液ｐＨ 影响不显著,但日粮高硫降低了碱超和碱贮（Ｐ＜ ０ ．０５） ,酸化了血液;日粮高镁则增加了碱超（Ｐ＜ ０ ．０５） ,起到了碱化作用。试验结果表明,由日粮硫、镁水平调节的电解质平衡可能通过改变血液酸碱平衡,成为影响肉鸡胫骨软骨发育的重要因素。     

酸化日粮对肉鸡胫骨软骨发育不良的影响及血液pH和血气的变化

酸化日粮对肉鸡胫骨软骨发育不良的影响及血液ｐＨ和血气的变化罗江培朱连德王统石卢正兴（中国农业大学动物医学院,北京海淀１０００９４）刘晓波董梅（中国人民解放军３０９医院检验科,北京海淀１０００９１）胫骨软骨发育不良（Ｔｉｂｉａｌｄｙｓｃｈｏｎ－ｃｈｏｐ...     

Ⅰ型胶原和热休克蛋白90在肉鸡胫骨软骨发育不良不同阶段的变化

应用免疫组织化学方法,研究了Ⅰ型胶原(Col Ⅰ)和热休克蛋白90(Hsp90)在肉鸡胫骨软骨发育不良(TD)不同阶段的变化.将80羽1日龄健康AA肉鸡预饲1周后分为2组.对照组饲以基础日粮;试验组在基础日粮中添加福美双100 mg·kg -1 ,4 d后继续饲以基础日粮.试验历时23 d.应用抗Col Ⅰ和Hsp90多克隆抗体对试验第4、9、16、23天的肉鸡胫骨生长板进行免疫组织化学研究.结果表明,在饲喂福美双后第4、第9天,Col Ⅰ和Hsp90的合成在生长板前肥大区和肥大区软骨细胞都明显增加,而第16、第23天时在TD损伤周边的前肥大区软骨细胞出现.由此推测,Col Ⅰ蛋白合成增加,可能是由于不能正常钙化的反馈调节所致;而上调表达的Hsp90可能在调节软骨细胞发育周期中发挥重要作用,为进一步认识TD提供了新的思路.