应用微量血凝抑制试验和气管环中和试验检测传染性支气管炎抗体的研究

应用家兔Ａ型魏氏梭菌培养液处理的鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）作血凝抑制抗原，建立了血凝抑制（ＨＩ）试验方法，监测ＩＢ疫苗的免疫鸡血清ＨＩ效价，结果证明与气管环中和试验测得的中和抗体效价呈正相关，ｒ＝０．５２５，两组抗体效价ｔ检验差异极不显著（Ｐ＜０．０１）。用其监测卵黄抗体、灭活的血清抗体以及用高岭土处理的血清抗体，结果与相应未处理的血清抗体效价一致，用以对江苏、山东两省的７个未作ＩＢ疫苗免疫的鸡场２０个鸡群进行流行病学调查，结果有１８个鸡群ＴＢ阳性，阳性率达８３％。     

新城疫—传染性支气管炎—减蛋综合征三联油乳剂苗免疫对比试验

用血凝抑制试验（ＨＩ）监测自制ＮＤ－ＲＩＢ－ＥＤＳ，ＮＤ－ＫＩＢ－ＥＤＳ三联油剂灭活苗免疫鸡的抗体水平，并进行相应强毒攻击，同时以ＮＤ－ＥＤＳ二联，ＲＩＢ，ＫＩＢ等自制油苗和进口，ＮＤ－ＲＩＢ－ＥＤＳ三联油苗作对照，在此基础上，用自制三联苗免疫产物鸡４批共３８５２只，进行了田间免疫试验，结果表明：１．用各种疫苗免疫后，第２０天鸡体ＨＩ抗体达峰值，维持３个月左右，至免疫后３６０天，ＮＤ抗体仍维持在８     

新城疫-传染性支气管炎-减蛋综合征三联油乳剂苗免疫对比试验

用血凝抑制试验（ＨＩ）监测自制ＮＤＲＩＢＥＤＳ、ＮＤＫＩＢＥＤＳ三联油乳剂灭活苗免疫鸡的抗体水平,并进行相应强毒攻击,同时以ＮＤＥＤＳ二联、ＲＩＢ、ＫＩＢ等自制油苗和进口ＮＤＲＩＢＥＤＳ三联油苗作对照。在此基础上,用自制三联苗免疫产前鸡４批共３８５２只,进行了田间免疫试验。结果表明：１用各种疫苗免疫后,第２０天鸡体ＨＩ抗体达峰值,维持３个月左右,至免疫后３６０天,ＮＤ抗体仍维持在８０ｌｏｇ２以上,ＲＩＢ、ＫＩＢ和ＥＤＳ的ＨＩ抗体均在７０ｌｏｇ２以上。经检验不同疫苗免疫的鸡相应抗体在同时期内均无显著差异（Ｐ＞００５）。２攻毒试验也表明,自制苗和进口苗具有同等的免疫效果,均获良好的免疫保护。３田间免疫试验表明,自制三联苗免疫效果良好。     

鸡新城疫／传染性支气管炎二联油乳剂灭活疫苗试验研究报告（Ⅱ）：疫苗…

根据ＮＤＶ、ＩＢＶ二各病毒混合毒种的最适稀释比例，将混合毒种接种９－１０龄鸡胚尿囊腔内（简称同胚培养），使接种鸡胚９６ｈ二种病毒毒价同时达到高峰，０．０１ｍｌ尿囊液含：ＮＤＶ≥１０＾８ＥＩＤ５０、ＩＢＶ≥１０＾７ＥＩＤ５０。收获同胚培养的胚毒，制备同胚培养的胚毒，制备油乳剂灭活疫苗。用三批疫苗分别免疫１８日龄雏鸡，免疫后４周二联疫苗的有效抗体分别为：ＮＤ血凝抑制抗体（ＨＩ）≥１：１６、ＩＢ中和抗体     

母鸡血清、卵黄、雏鸡血清中新城疫抗体水平的比较试验

鸡新城疫是严重危害养鸡业的一种烈性传染病，可导致大批死亡，造成重大经济损失。为此，各大鸡场均对鸡新城疫进行免疫监测。新城疫免疫监测一般用血凝（ＨＡ）和血凝抑制（ＨＩ）试验，可测定血清或卵黄。由于卵黄易于收集，已广泛应用于ＨＩ试验。据报道，母鸡血清的ＨＩ效价与卵黄中的效价基本一致，相对高于雏鸡血清效价的１个滴度，为验证新城疫抗体在母鸡、卵黄、雏鸡中效价的这种关系，我们进行了母鸡血清、卵黄、雏鸡血清中新城疫抗体水平的比较试验。１　材料和方法１．１　新城疫凝集抗原　由浙江省农科院提供。１．２　试验用血…     

马动脉炎病毒血凝抑制试验研究及其应用

用马动脉炎病毒（EAV）免疫SPF豚鼠，4周后采血做血凝抑制试验（HI），其抗血清可以抑制血凝抗原对小鼠红细胞的凝集反应，抗原和抗血清在4℃感作24h后可以检测到最高的HI抗体效价，同时结果显示HI抗体与中和抗体产物呈正相关。对561份来自新西兰、吉尔吉斯、沙特阿拉伯及内蒙古、新疆的马血清用HI试验和微量血清中和试验（NT）进行EAV抗体检测，HI和NT阳性符合率为94．7％，血凝抑制抗体与中和抗体效价呈显著的正相关。     

用卵黄浸提液对三种鸡病抗体检测试验

本试验用卵黄聚乙二醇浸提液（卵黄液）进行鸡白痢（ＰＤ），传染性囊病（ＩＢＤ）和新城疫（ＮＤ）的抗体检测，并与相应血清进行对比试验。结果表明卵黄液ＰＤ琼脂扩散（ＡＧＰ）试验与血清试验结果符合率１００％，ＩＢＤ ＡＧＰ试验和ＮＤ血凝抑制（ＨＩ）试验与血清试验结果基本一致（差异显著性检验Ｐ＞０．０５），可以代替血清进行其抗体检测；且卵黄液制备方法简单，省时省力，有实际应用价值。     

鸡新城疫／传染性支气管炎二联油乳剂灭活疫苗试验研究报告（Ⅲ）

用同胚培养的含ＮＤＶ、ＩＢＶ胚液制备的二联油乳剂灭活苗，经免疫效力试验表明，用５０倍稀释的鸡二联灭活苗，０．５ｍｌ／只剂量免疫１８日龄鸡，４周后试验免疫鸡分别进行ＮＤＶ、ＩＢＶ强毒攻击，攻毒保护率在５０％以上，证明０．５ｍｌ剂量含有５０个半数保护量（５０个ＰＤ５０），ＮＤＨＩ抗体≥１：１６，ＩＢＶＮ抗体≥１：８便可保护。三批疫苗免疫１８日龄鸡，０．５ｍｌ／只组免疫鸡体现人有效抗体可维持１６周以上，     

热应激对鸡免疫应答的影响

用ＩＳＡ蛋雏研究２７～３８℃昼夜节律高温对新城疫（ＮＤ）疫苗和传染性法氏囊病（ＩＢＤ）疫苗活苗免疫后体液免疫反应的影响，结果表明：ＮＤ苗或ＩＢＤ苗免疫后立即产生热应激，不论ＮＤ的ＨＩ抗体水平还是ＥＬＩＳＡ抗ＩＢＤ抗体滴度在整个实验过程中均受到显著抑制（Ｐ＜０．０５）；应激后立即免疫ＮＤ疫苗或ＩＢＤ疫苗的鸡，ＨＩ抗体水平在免疫后第５和１４天和ＥＬＩＳＡ抗体滴度在免疫后第９天和１６天与对照组相比显著降低（Ｐ＜０．０５）；应激后２４小时免疫，或免疫后２４小时至若干天遭受高温应激的鸡，抗ＮＤ和ＩＢＤ抗体水平分别在免疫后第１４天和１６天均受到显著抑制（Ｐ＜０．０５）。试验组免疫器官与体重之比与对照组间无显著性差异，但免疫器官的组织学结构都有明显的坏死和萎缩性变化     

鸡新城疫—传染性法氏囊炎母源抗体的监测

应用血凝抑制试验（ＨＩ），琼脂扩散试验（ＡＧＰ）对１￣２５日龄肉用及蛋用雏鸡的血清和１￣２１日龄鸡胚中的卵黄提取液、胚体浸液、血清进行了鸡新城疫（ＮＤ）、传染性法氏囊炎（ＩＢＤ）母原性免疫抗体消长动态的监测。试验结果表明，雏鸡母源抗体的消长动态呈下山峰势；鸡胚中卵黄内ＮＤ抗体效价１￣１７日胚龄持续在６￣９（ｌｏｇ２）１８日胚龄其抗体水平开始下降，ＩＢＤ抗体效价１￣１７日胚龄持续在２￣３（ｌｏｇ２）     

鸡痘疫苗与新城疫疫苗免疫接种对新城疫血凝抑制抗体干 …

试验结果证明，鸡痘（ＦＰ）弱毒疫苗对新城疫（ＮＤ）弱毒疫苗血凝抑制（ＨＩ）抗体产生有严重的干扰作用，在ＦＰ疫苗接种后１５天内再接种ＮＤ疫苗，ＦＰ疫苗以 苗的ＨＩ抗体的产竽均膛同程度的干扰作用，其ＮＤ抗体平均效价低于单独用ＮＤ疫苗组０．１５￣１．３５个滴度。对雏鸡用ＦＰ弱毒疫苗和ＮＤ弱毒疫苗同时接种，或间隔１５天后再接种ＮＤ疫苗，其ＮＤ抗体平均值与单独用ＮＤ疫苗免疫组无明显差异。本实验观察结果表明，     

影响鸡新城疫HI试验结果的重要因素

影响鸡新城疫ＨＩ试验结果的重要因素余耀华（上海大江（集团）股份有限公司２０１３００）鸡新城疫（ＮＤ）血凝抑制试验（ＨＩ）抗体效价是衡量鸡群ＮＤ免疫水平的重要标志。ＮＤＨＩ抗体监测的准确性关系着养鸡生产的安全性。近十年的血清监测实践，在ＨＩ试验中，由于...     

几种常用鸡油乳剂灭活苗免疫抗体监测及比较

用血凝抑制试验（ＨＩ）监测鸡新城疫（ＮＤ）－减蛋综合症（ＥＤＳ）－传染性支气管炎（ＩＢ）三联、ＮＤ－ＥＤＳ二联及ＮＤ油乳剂灭活苗免疫抗体水平动态，结果表明，以上疫苗免疫鸡群后第１６天ＨＩ抗体达峰值，维持２个月，至免疫后一年ＮＤ抗体不低于８Ｌｏｇ２；ＥＤＳ不低于６Ｌｏｇ２，ＩＢ不低于８Ｌｏｇ２。经ｔ检验结果表明除ＥＤＳ有两组差异显著外，各组之间免疫后一年，ＮＤ、ＥＤＳ和ＩＢ血清抗体差异均极不显著     

新剂型兔瘟疫苗的研究

经血凝抑制和攻毒试验结果表明，在含有相同抗原量制备的疫苗，兔瘟油乳剂灭活疫苗比兔瘟组织灭活苗免疫后血清ＨＩ抗体效价高３．２５￣６．０ｌｏｇ２，即使油乳剂灭活疫苗仅为组织灭活苗四分之一的抗原量，免疫后血清ＨＩ抗体效价还高１ｌｏｇ２。油乳剂灭活苗免疫兔第５０天其血清ＨＩ抗体未见下降，而组织灭活苗免疫后第２６天已开始下降。虽然接种二种剂型的疫苗攻毒后均具有１００％的保护率，但血清ＨＩ抗体效价消长情况证明     

鸡传染性支气管炎血凝抑制试验方法标准化的研究

鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）抗体的血凝抑制（ＨＩ）试验方法经标准化后，检测ＳＰＦ鸡血清ＩＢＶ感染鸡血清以及野外样品的结果表明，具有快速，特异，敏感，稳定等优点。标准化的实现主要通过抗原冻干和鸡红细胞醛化，从而取得较为满意的结果。     

鸡传染性支气管炎血凝抑制试验方法标准化的研究

鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）抗体的血凝抑制（ＨＩ）试验方法经标准化后，检测ＳＰＦ鸡血清ＩＢＶ感染鸡血清以及野外样品的结果表明，具有快速、特异、敏感、稳定等优点。标准化的实现主要通过抗原冻干和鸡红细胞醛化，从而取得较为满意的结果。     

检测鸡慢性呼吸道病抗体ELISA方法的建立

用败血支原体（ＭＧ）Ａ５９６９株制备ＥＬＩＳＡ抗原,与抗鸡ＩＧ单抗ＩＢ７酶结合物建立了检测鸡血清抗体水平的间接ＥＬＩＳＡ方法,交叉试验、阻断试验、重复性试验等表明该方法重复性好、特异性强、灵敏度高。确立了将鸡血清６４倍稀释监测ＥＬＩＳＡ效价（ＥＴ）的回收方程ｙ＝１．３８３＋０．２２４ｘ,可用于定量测定,血凝抑制试验（ＨＩ）与ＥＬＩＳＡ比较试验表明,ＥＬＩＳＡ法比ＨＩ试验敏感性高４倍以上。     

同胚增殖鸡新城疫病毒和传染性支气管炎病毒的效果观察及免疫应答反应

鸡新城疫病毒（ＮＤＶ）和鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）混合在同一鸡胚中增殖,当ＮＤＶ和ＩＢＶ接种浓度控制在一定范围时,最佳收毒时间选择使ＮＤＶ有足够时间增殖到最佳滴度,且在这一时间内不至于因孵育时间过长而致ＩＢＶ毒力减弱。结果表明ＮＤＶＬａｓｏｔａ株经１０倍稀释分别与４株ＩＢＶ１０００倍稀释液等体积混合后接种,能在同一鸡胚中正常增殖,即９６ｈ收毒,血凝（ＨＡ）方法测定两种病毒的血凝价均能达到最佳滴度,其血凝价不低于各自单独增殖的滴度。４种ＩＢＶ株与ＮＤＶ同胚增殖的ＨＡ滴度进一步证实,在合适的条件下,ＩＢＶ均不对ＮＤＶ的复制产生干扰作用,４种ＩＢＶ的血凝价无明显差异。免疫试验中用同胚增殖两种病毒二联苗接种,鸡体血清中可产生抗两种病毒的ＨＩ抗体,与各自单独接种时的ＨＩ抗体水平几乎一致。本试验中制备的ＩＢ血凝抗原在４℃保存一个月,其血凝活性保持不变。ＩＢＶ微量血凝抑制（ＨＩ）试验特异性测定结果证实,用自制ＩＢＶ血凝抗原进行ＨＩ试验检测鸡ＩＢ阳性血清均能产生稳定的特异性反应,并且无交叉反应。说明ＨＩ试验是检测ＩＢＶ抗体水平的有效可行的方法。     

鸡产蛋下降综合症—新城疫—传染性支气管炎三联油乳剂灭活疫苗试制

近年来,随着养禽业的发展,多联灭活疫苗越来越受到广大用户的青睐。鸡产蛋下降综合征（ＥＤＳ７６）,鸡新城疫（ＮＤ）,鸡肾型传染性支气管炎（ＩＢ）,是严重危害养禽业的病毒性传染病。为了有效的预防这三种传染性疾病发生,减少免疫接种次数,我们研制了ＥＤＳ－ＮＤ－ＩＢ（肾型）三联油乳剂灭活苗。试制３批分别测定安全与效力,结果安全性良好;免疫鸡２１ｄ后攻击ＮＤＶ、ＩＢＶ强毒均获８／１０以上保护。对免疫鸡２１ｄ分别测定ＮＤ、ＥＤＳ７６血凝抑制（ＨＩ）抗体的几何平均滴度（ＧＭＴ）,测ＩＢＷ９３的血清中和抗体效价…     

鸡新城疫减蛋综合征和大肠杆菌病三联油佐剂苗免疫试验

应用鸡新城疫（ＮＤ）、减蛋综合征（ＥＤＳ－７６）、大肠杆菌病三联油佐剂灭活苗进行田间免疫试验，结果表明该三联苗免疫鸡不仅抗体水平高，而且免疫持续时间长，具有与单苗同样的免疫效果。被检血清中ＮＤ抗体ＨＩ平均效价比卵黄高１￣２个滴度；血清与卵黄中ＥＤＳ－７６抗体ＨＩ平均效价基本相同（Ｐ〉０．０５），可用卵黄代替血清作为血清学检验材料。卵黄中未检出大肠杆菌凝集抗体。