免疫亲和柱净化高效液相色谱法测定坚果中黄曲霉毒素

建立了免疫亲和柱净化高效液相色谱法测定坚果中黄曲霉毒素B1,B2,G1和G2总量。样品用甲醇—水提取,经免疫亲和色谱柱纯化,应用液相色谱法检测。试验结果表明:空白样品分别按照5.2,26,52μg/kg添加黄曲霉毒素,回收率为81.3%～96.0%,精密度<10%,黄曲霉毒素B1,B2,G1和G2的检测灵敏度分别为0.10,0.05,0.10,0.15μg/kg。免疫亲和柱净化高效液相色谱法测定坚果中黄曲霉毒素B1,B2,G1,G2总量,是一种简单、快速和准确的方法。     

胶体金免疫层析法快速检测赭曲霉毒素A的研究

应用胶体金免疫层析技术,建立了一种快速检测食品和饲料中赭曲霉毒素A的方法。采用柠檬酸三钠还原法制备胶体金颗粒,标记抗赭曲霉毒素A单克隆抗体,将标记的胶体金抗体喷涂于玻璃纤维上,赭曲霉毒素A偶联抗原OTA-OVA和二抗兔抗鼠IgG分别喷涂于硝酸纤维膜上,作为检测线和质控线,依次将样品垫、胶体金垫、硝酸纤维膜和吸水纸组装成试纸条并装卡。测试结果表明,赭曲霉毒素A快速检测试纸条的灵敏度为5ng/mL,检测时间为10min,批内和批间重复性为100%,假阳性率和假阴性率均为0。该法使用简单方便,非常适合现场快速检测赭曲霉毒素A。     

免疫层析法快速定量检测高粱中赭曲霉毒素A

以纳米金偶联特效抗体组装的免疫层析快检卡为基础,利用色差分析建立快速定量检测高粱中的赭曲霉毒素A的分析方法。检测方法的定量检出限为3.0μg/kg,相对标准偏差低于11.0%,回收率为88.0%~98.6%。该分析方法操作简单、试剂消耗量少,测试时间短,测定结果灵准确、重现性好,可以用于基层对不同种类高粱中赭曲霉毒素A进行快速定量的筛查检测。     

免疫层析法快速定量检测高粱中赭曲霉毒素A

以纳米金偶联特效抗体组装的免疫层析快检卡为基础,利用色差分析建立快速定量检测高粱中的赭曲霉毒素A的分析方法。检测方法的定量检出限为3.0μg/kg,相对标准偏差低于11.0%,回收率为88.0%~98.6%。该分析方法操作简单、试剂消耗量少,测试时间短,测定结果灵准确、重现性好,可以用于基层对不同种类高粱中赭曲霉毒素A进行快速定量的筛查检测。     

赭曲霉毒素A检测方法的研究进展

赭曲霉毒素A是由曲霉属和青霉属菌株产生的一种有毒真菌次级代谢产物。毒理学研究表明,赭曲霉毒素A具有很强的肝脏毒性和肾脏毒性,并有致畸、致突变和致癌作用。赭曲霉毒素A广泛存在于谷物及谷物产品、香料和咖啡豆等产品中,严重危害人类健康。许多国家建立了赭曲霉毒素A的限量标准,因此有必要研究准确、灵敏的赭曲霉毒素A的检测方法。综述了赭曲霉毒素A的理化性质及其检测分析方法的研究进展。     

测定玉米中伏马毒素的免疫亲和层析净化高效液相色谱法

伏马毒素(Fumonisins)是串珠镰刀菌繁殖产生的一类真菌毒素。玉米在生长和储存过程中极易受到伏马毒素的侵染。流行病学研究结果表明,受到伏马毒素污染的玉米及其制品可导致马白脑软化症、猪肺水肿综合症,还可诱发人类食管癌和胎儿神经管畸形等疾病。本研究建立了应用免疫亲和柱净化高效液相色谱测定玉米中伏马毒素B₁和B₂的方法,同时,运用统计学方法对该法进行了准确性和再现性评价。结果表明,FB₁和FB₂线性范围分别为0.06~5.00 μg mL^-1和0.04~2.50 μg mL^-1,回收率分别为76.6%~93.8%和77.9%~93.4%,FB₁和FB₂方法定量限分别为0.09 mg kg^-1、0.06 mg kg^-1,实验室内重复性测定的变异系数均低于5%,实验室间再现性测定的变异系数低于6%。上述结果说明该方法的线性、准确度、精密度、灵敏度及同一实验室重复性和多家实验室的再现性评价结果优良,适合作为伏马毒素的测定方法。应用该方法对310份玉米进行了伏马毒素的测定,结果表明,大田、存储玉米伏马毒素总量范围分别为0.20~9.06 mg kg^-1、0.21~6.10 mg kg^-1,建议应加强玉米中伏马毒素污染水平监控,保证人畜健康。     

液相色谱-串联质谱法测定葡萄干中赭曲霉毒素A含量

建立葡萄干中赭曲霉毒素A(OTA)的液相色谱-串联质谱测定方法。样品经甲醇超声提取,以乙腈-水(含0.1%甲酸)为流动相,进行梯度洗脱,正离子多反应监测模式(MRM)测定。结果表明,赭曲霉毒素A在1~50μg/L范围内有良好的线性,相关系数R20.999,方法回收率为79%~96%,相对标准偏差为3.1%~4.8%,定量限1.0μg/kg。该方法前处理快速简单,可用于对进出口葡萄干中赭曲霉毒素A的检测。     

免疫亲和柱—高效液相色谱法检测乳制品中的磺胺

建立了牛奶和奶粉中16种磺胺残留物的高效液相色谱—紫外快速测定方法。样品用乙酸乙酯提取,所得清液经免疫亲和柱净化富集,流动相为甲醇和1.1%乙酸—0.01 mol PBS溶液(梯度洗脱),应用液相色谱—紫外法检测。该方法的回收率为80%～110%,相对标准偏差小于10%;方法检测牛奶样品的灵敏度为0.5μg/L,奶粉样品的灵敏度为5.0μg/kg。     

全自动免疫磁珠法与免疫亲和柱法测定玉米粉中黄曲霉毒素B1的对比研究

采用全自动免疫磁珠净化与免疫亲和柱净化的前处理方法,结合超高效液相色谱法对玉米粉中黄曲霉毒素B₁进行定量检测,并对两种前处理方法结果准确性、加标回收率、检测时间进行了对比。结果表明：对玉米粉中添加不同量的黄曲霉毒素B₁标准物质,使用免疫亲和柱净化法的加标回收率在80.96%～100.42%之间,平均回收率为88.04%,标准偏差为0.052,变异系数为5.90%;使用全自动免疫磁珠净化法的加标回收率在90.00%～108.33%之间,平均回收率为100.20%,标准偏差为0.046,变异系数为4.57%。采用配对t检验评价两种净化方式对检测结果一致性的影响,结果显示t值小于理论t₍0.05(32))的值,P>0.05,结果显示这两种净化方法的差异在可接受范围内。两种方法在净化玉米粉中黄曲霉毒素B₁中可以满足实验要求。全自动免疫磁珠净化搭配使用真菌毒素全自动净化仪前处理方法可同时处理多个样品,平均一个样品净化时间小于3 min,处理时间短、实验效率更高。     

免疫亲合柱在小麦真菌毒素检测中的应用及毒素污染分析

利用真菌毒素特异性抗体制备的免疫亲合柱净化样品，检测了31个小麦样品中5种真菌毒素的污染情况。结果显示，31个样品污染毒素比较普遍，但污染水平低，小麦样品处于安全状态。具体情况是：AFB1，阳性率为74．19％，平均值为1．13μg／kg，中值为0．3μg／kg，最大值为11μg／kg；OTA，阳性率为100％，平均值为1．59μg／kg，中值为1μg／kg，最大值为3μg／kg；ZON，阳性率为100％，平均值为83μg／kg，中值为71μg／kg，最大值为330μg／kg；T-2，阳性率为22．58％，平均值为49μg／kg，中值为0，最大值为500μg／kg；DON，阳性率为6．45％，平均值为200μg／kg，中值为0，最大值为3800μg／kg。     

免疫亲和柱净化—HPLC法测定植物油中玉米赤霉烯酮

建立了免疫亲和柱净化—高效液相色谱荧光法检测植物油中玉米赤霉烯酮的分析方法。方法的定量检出限为9.5μg/kg,相对标准偏差低于7.2%,回收率为89.2%～111.5%。该方法简便快速、灵敏准确、重现性好,可以用于植物油中玉米赤霉烯酮的定量检测。     

免疫亲和柱净化—HPLC法测定植物油中玉米赤霉烯酮

建立了免疫亲和柱净化-高效液相色谱荧光法检测植物油中玉米赤霉烯酮的分析方法.方法的定量检出限为9.5μg/kg,相对标准偏差低于7.2％,回收率为89.2％～111.5％.该方法简便快速、灵敏准确、重现性好,可以用于植物油中玉米赤霉烯酮的定量检测.     

HPLC法测定不同品种鸡蛋中的胆固醇含量

采用高效液相色谱法测定鸡蛋中的胆固醇含量,以C18(5μm,250mm×4.6mm)为固定相,乙腈-异丙醇(4∶1)为流动相,流速为0.5mL/min,检测波长为210nm,测定结果是,胆固醇浓度在0.1￣0.8g/L范围内与色谱峰面积呈良好的线性关系。结果表明,不同鸡蛋品种中胆固醇含量差异较大。该方法快速,灵敏,简便易行,无须皂化便可直接定量。     

柱前衍生-高效液相色谱法测定饲料中牛磺酸的研究

为探讨GB 5413.26—2010 中丹磺酰氯柱前衍生HPLC法测定饲料中牛磺酸的可行性,以鸡配合饲料、猪配合饲料、水产配合饲料、浓缩饲料和预混合饲料五类代表性饲料样品为研究对象,通过梯度添加回收试验和基质效应影响的研究,确定了各类饲料的适宜称样量为猪鸡配合饲料2~4 g,其他饲料1 g。对方法的各项性能指标进行了考察,结果表明：在牛磺酸1~100 mg/L 范围,工作曲线线性良好,相关系数0.9990。该方法检测限为30 mg/kg,定量限100 mg/kg,添加回收率为78%~110%,精密度为1.98%~5.35%。该方法操作简单、灵敏、仪器普适通用,适宜于各种饲料基质中牛磺酸的测定。     

高效液相色谱法快速测定黑花生种皮中花色苷含量

黑花生花色苷具有很好的应用前景,为建立一个快速检测花生花色苷的方法,以黑花生和普通花生的种皮为材料,利用高效液相色谱测定了黑花生和普通花生种皮中花色苷的含量和主要成分。研究表明,黑花生种皮中花色苷的总含量为1.16 mg/g鲜重。在高效液相测定过程中,其主要成分在保留时间10.283 min和11.217 min 处有2个高吸收峰,它们的含量占总花色苷含量的98.3%。根据已有的研究结果,推断二者分别为矢车菊素-3-槐二糖、矢车菊素-3-接骨木二糖,其含量分别比普通花生高810倍和580倍。     

高效液相色谱法在蛋白质分离检测中的应用

综述高效液相色谱法在蛋白质分离检测中的应用,概括分析了反相分配色谱、亲和层析、离子交换色谱、分子排阻色谱和疏水色谱等几种常用的蛋白质色谱分离模式,以及相应的检测技术,并展望了该法在蛋白质分离分析方面的应用。     

Determination of Rutin and Quercetin Content in Yantai Bupleurum by HPLC

[Objective]To determine the content of rutin and quercetin in the whole plant of Yantai Bupleurum by HPLC. [Methods] An Agilent C18column( 250 mm × 4. 6 mm,5 μm) was applied with a mobile phase of acetonitrile- 0. 1% phosphoric acid solution,gradient elution was selected with the flow rate of 1. 0 mL / min,the UV detector was set at 360 nm. [Results]The average recovery rates of rutin and quercetin were 100. 47% and 99. 50%,the RSD were 1. 34% and 0. 41%. The average content of rutin and quercetin in the whole plant of Yantai Bupleurum reached 83. 00 and 102. 68 μg / g. [Conclusions]The method is fast,accurate and reliable. It is suitable for content determination of rutin and quercetin in the whole plant of Yantai Bupleurum.