山生柳SSR-PCR反应体系优化

本研究以祁连山4个海拔梯度的山生柳（Salix oritrepha）为材料,采用L9(34)正交试验设计和单因子试验,分析山生柳SSR技术中PCR体系的主要成分对扩增结果的影响,并对引物SHUK123的适宜退火温度进行优化。结果表明,PCR反应体系的最佳条件:20 μL体系中2.0 mmol·L-1 Mg2+ 1 μL,0.10 mmol·L-1 dNTPs 1.5 μL,0.5 U Taq酶用量为1 μL,20 ng·μL-1 DNA模板1 μL, 0.5 μmol·L-1的上下游引物各2 μL,10× Taq Buffer 2 μL,ddH2O加至20 μL。扩增反应程序：94 ℃高温预变性时间3 min,94 ℃变性45 s,Tm(不同退火温度)退火时间45 s,72 ℃延伸30 s,循环数30个,最后72 ℃后延伸时间5 min,4 ℃保温。适宜退火温度为56 ℃。以上结果表明,此反应体系在山生柳PCR扩增中的稳定性和可重复性较好。     

小叶锦鸡儿根瘤固氮活性的动态变化

对多年生小叶锦鸡儿不同生育期根瘤固氮能力、不同树龄小叶锦鸡儿根瘤固氮能力进行调查，结果表明：开花期固氮酶活性最高，此时土壤含氮量和植株含氮量最高；新瘤多发生于果后营养期，植株生物量的峰值出现在结实期；二年生和五年生植株的根瘤固氮能力强于三年、四年生植株，随生长年限的延长，植株生物量逐渐增大，含氮量呈小幅度下降趋势。     

小叶锦鸡儿饲用营养价值及青贮加工

小叶锦鸡儿是内蒙古自治区重点开发利用的非竞争性饲料资源之一,目前其产业化利用仍处于瓶颈期,探寻其适宜饲用加工技术已成为当务之急.因此本研究以科尔沁沙地区花期(A1)、果期(A2)和生长季末期(A3)小叶锦鸡儿为原材料,添加糖蜜[不添加(C0)、10 g·kg-1(C1)]和菌剂[不添加(B0)、0.02 g·kg-1(B1)、0.04 g·kg-1(B2)、0.06 g·kg-1(B3)],分期进行青贮加工,以青贮前各生育期样品作为对照(CK1、CK2、CK3).通过评价不同青贮小叶锦鸡儿营养价值的高低筛选出其最佳青贮加工技术.研究结果表明:除磷(P)含量外,小叶锦鸡儿青贮前的各营养成分含量均随生育期推移而变化显著;各生育期小叶锦鸡儿青贮前的营养价值大小排序为:生长季末期>花期>果期.菌剂在果期和生长季末期对青贮小叶锦鸡儿的营养成分影响较大,而糖蜜在花期影响较大,两者几乎不存在交互作用;小叶锦鸡儿青贮后的各营养成分含量在不同生育期之间无明显变化规律.最佳青贮加工技术为A2+B1+C0(果期、添加菌剂0.02 g·kg-1,但不添加糖蜜),各项营养成分指标的权重大小顺序为粗蛋白(CP)>粗纤维(CF)>粗灰分(Ash)>酸性洗涤木质素(ADL)>磷(P)>无氮浸出物(NFE)>粗脂肪(EE)>钙(Ca);经A2+B1+C0处理后,小叶锦鸡儿CP、EE、NFE和Ash含量较3个对照均有提高,分别为15.70％、1.79％、28.16％和5.59％,CF和ADL含量均有下降,分别为40.65％和11.83％.本研究可为我国北方干旱和半干旱地区锦鸡儿属非常规粗饲料的饲用青贮加工提供技术支持,对促进区域固沙植物资源化利用和养殖业的精致发展具有重要意义.     

正交设计优化崇明白山羊SSR-PCR反应体系

以崇明白山羊基因组DNA为模板,利用正交试验设计L16(45),对影响崇明白山羊SSR-PCR反应体系的5个因素(Taq酶、Mg2+、模板DNA、dNTP及引物的浓度)进行优化。结合单因素完全随机试验筛选各因素的最佳水平,针对MCB3224引物建立了崇明白山羊SSR-PCR的最佳反应体系。结果表明:在20μL的反应体系中,5个因素的最佳水平分别为Taq DNA聚合酶0.5 U、Mg2+2.5 mmol/L、模板DNA 30 ng、dNTP 0.20 mmol/L,引物0.8 mol/L;引物的最佳退火温度为57.3℃。利用16份崇明白山羊的DNA模板和2个微卫星引物验证此反应体系,聚丙烯酰胺凝胶电泳,结果显示该体系稳定可靠且普适性较好。     

内蒙古小叶锦鸡儿灌丛化草地

小叶锦鸡儿灌丛化草地,是内蒙古草地的重要组成部分之一。本文在简述了小叶锦鸡儿灌丛化草地演替过程及其在内蒙古草原区的主要演替类型的基础上,通过灌丛化与非灌丛化草地类型化学成分分析资料对比,说明小叶锦鸡儿灌丛化草地具有较高的放牧利用价值。强大的抗旱性能和有关生物学特性,揭示出在干旱草原区小叶锦鸡儿所特有的生态效益,是不容忽视的。     

小叶锦鸡儿根瘤固氮活性的动态变化

对多年生小叶锦鸡儿不同生育期根瘤固氮能力、不同树龄小叶锦鸡儿根瘤固氮能力进行调查,结果表明:开花期固氮酶活性最高,此时土壤含氮量和植株含氮量最高;新瘤多发生于果后营养期,植株生物量的峰值出现在结实期;二年生和五年生植株的根瘤固氮能力强于三年、四年生植株,随生长年限的延长,植株生物量逐渐增大,含氮量呈小幅度下降趋势。     

不同海拔梯度下小叶锦鸡儿的居群遗传多样性

以小叶锦鸡儿(Caragana microphylla)为研究对象,利用ISSR分子标记技术,对不同海拔梯度下小叶锦鸡儿6个居群遗传多样性进行分析。研究发现,8条ISSR扩增引物得到142条清晰的DNA条带,其中多态性条带为126条,多态位点百分率为88.73%。用POPGENE软件计算不同海拔梯度下各居群间和居群内的遗传参数,结果表明,Nei’s基因多样性为0.292 9,香农信息指数为0.441 7,表明在物种水平上小叶锦鸡儿居群具有较高的遗传多样性;低海拔区域居群的所有遗传多样性高于高海拔区域居群,表明海拔高度增加阻碍了居群间的基因交流,导致小叶锦鸡儿居群遗传多样性水平降低。     

北温带地区小叶锦鸡儿的地理分布模拟

在北温带地区收集了536个小叶锦鸡儿(Caragana microphylla)的地理分布数据,利用WorldClim V2.0提供的19个气候变量,通过主成分分析和5种模型(最大熵模型、随机森林模型、广义增强模型、人工神经网络模型和决策树模型)分析了小叶锦鸡儿的地理分布及其与气候因子的关系,并模拟了其分布格局.结果显...     

8种柱花草属牧草SSR-PCR反应体系优化及引物筛选

柱花草(Stylosanthes)是优良的豆科牧草, 叶片中含有大量的多糖多酚, 本研究利用改良CTAB法抽提柱花草叶片中总DNA。通过正交试验设计L16(45), 确立了柱花草SSR-PCR最佳反应体系:20 μL体系中1 μL 50 ng·μL-1模板DNA, 1.6 μL 5 μmol·L-1引物, 1.6 μL 10 mol·L-1dNTPs, 1.2 μL 25 mol·L-1 Mg2+, 0.3 μL 5 U·μL-1Taq聚合酶, 2 μL 10×PCR Buffer(Mg2+ free), 剩余用ddH2O补足。扩增反应程序为94 ℃变性40 s, Tm(不同退火温度)退火时间40 s, 72 ℃延伸45 s, 循环数35个。利用优化体系对来自7种柱花草的123对SSR引物在8个不同种柱花草中进行转移, 共筛选出44对引物在8种柱花草中都能有效扩增, 并从中筛选出26对在8个不同种柱花草中富含多态性引物, 为今后利用SSR标记对柱花草属的指纹图谱构建、遗传多样性分析、分子育种和品种鉴定与保护等工作提供重要依据。     

不同生长时期小叶锦鸡儿黄酮类化合物含量的变化动态

为研究小叶锦鸡儿(Caragana microphylla Lam.)各部位黄酮类化合物动态变化规律,确定其适宜采收的部位和时期,采用硝酸铝显色法测定了不同生长时期小叶锦鸡儿植株各部位的总黄酮含量。结果表明:一年生去叶枝及根中总黄酮含量于4月达到最高,分别为1.021%和0.249%,半年生去叶枝和二年生去叶枝于9月达到最高,分别为0.990%和0.868%。半年生枝、一年生枝和二年生枝上叶总黄酮含量分别在在9月、7月和6月达到最高,分别为2.669%,2.517%和2.223%。半年生枝和一年生枝上的花总黄酮含量在5月达到最高,分别为3.324%和3.368%,二年生枝上花在4月达到最高,为3.345%。半年生枝、一年生枝和二年生枝上种子总黄酮含量均在7月达到最高,分别为0.837%,0.840%和0.812%。总黄酮含量的高低顺序为花>复叶>去叶枝韧皮部>去叶枝>种子>去叶枝木质部>根韧皮部>根木质部。如以黄酮类物质的利用为目的,应重点采集花、复叶及枝条的韧皮部,并应在9月采集一年生和半年以内枝、叶,保留其地下部分,有望获得较高的得率。     

柠条饲料加工相关问题的探讨

从柠条Caragana饲料加工利用的角度出发,分析和探讨了柠条养分、饲料加工、饲喂方法等问题.从养分角度来看,柠条平茬间隔期越长,营养成分含量越低,反之则高;月季间养分差异很大,其中6月营养成分含量最高,钙磷比6月前基本平衡.从加工和营养角度综合考虑,选择以3年为一个平茬周期最好,提出了依靠压缩平茬周期来提高柠条饲料粉碎效率、营养成分和利用效果等观点.     

小叶锦鸡儿对牲畜啃食补偿效应的模拟试验研究

采用人工模拟和对比研究的方法,研究了沙地天然和人工小叶锦鸡儿被牲畜啃食后,枝条在生长上的反应.结果表明,小叶锦鸡儿对牲畜的啃食具有一定程度的补偿和超补偿能力,当啃食程度较轻时,可促进枝条的生长,增加其可食部分的生物量,即出现超补偿效应;随着啃食强度的增加,其补偿能力逐渐降低;密度较大的人工小叶锦鸡儿对牲畜啃食的补偿能力明显低于天然植株.建立了小叶锦鸡儿补偿效应模型,对补偿效应机制进行了探讨.     

用灰色关联法对柠条不同处理效果综合评价

对柠条Caragana microphylla采取不同处理,处理结果以氨化处理营养成分最好,粗蛋白(CP)含量高达12.03%,中性洗涤纤维(NDF)81.72%,酸性洗涤纤维(ADF)56.69%,木质素(ADL)含量最低,为21.02%;生化处理1 CP最低,为11.27,生化处理2 ADL含量最高,为21.95.氨化柠条瘤胃内降解率都高于其他不同处理,干物质(DMD)为29.36%,粗蛋白(CPD)为56.62%,比未处理高18.23个百分点,氨化柠条CP降解率最高,比对照组CP降解率提高了45.0%,ADL降解率为35.58.生化处理2降解效果在生化处理组中最好.在灰色系统下,对不同处理柠条营养成分、瘤胃降解率指标进行分析,建立处理效果评价模型,综合评价处理结果仍是氨化处理效果最好.     

小叶锦鸡儿灌丛地植被对沙源供给的响应

以阴山北麓东段附近的小叶锦鸡儿灌丛地为研究区,在坡积残积地（内源型供给）、洪积扇下风向和农耕地下风向（外源型供给）3个沙源供给有差异的样地,每个样地布设3个样区,每个样区设置3个样方（3个样地共计27个样方）,调查样方内小叶锦鸡儿沙堆和堆间地的植被,分析沙源量和沙物质差异供给下的小叶锦鸡儿灌丛地植物群落特征。结果表明：1）三类沙源供给的小叶锦鸡儿灌丛沙堆上群丛类型基本相同,均为小叶锦鸡儿-羊草群丛;2）三类沙源地的灌丛沙堆上物种数均高于堆间地,其中沙源量最大的洪积扇下风向物种数最多;样地间的物种相似度以洪积扇和农耕地下风向间的最高（38%~42%）,样地内灌丛沙堆和堆间地上的物种相似度以坡积残积地的最高（80%）;3）在三类沙源供给地的灌丛沙堆和堆间地上均出现的植物有6种,即克氏针茅、羊草、糙隐子草、冷蒿、细叶韭、刺沙蓬;4）顺风向随着沙源供给量的增加（坡积残积地）或减少（洪积扇和农耕地下风向）,三类样地的堆间地上物种数沿风向均呈现先增加后减少的趋势,灌丛沙丘上则是农耕地和洪积扇下风向靠近沙源区的物种数高于坡积残积地,随沙源量减少其物种数逐渐与坡积残积地的相近。综上,沙源供给量及供给方式对小叶锦鸡儿灌丛地的物种多样性影响较大,而群丛类型几乎不受影响。     

灌丛化草原小叶锦鸡儿灌丛地上生物量测量方法研究

灌丛化草原已经成为干旱半干旱区的一种重要植被景观类型,在我国以内蒙古草原的小叶锦鸡儿灌丛化现象最为典型。为探索小叶锦鸡儿灌丛地上生物量的最佳测量方法,本研究在锡林郭勒盟镶黄旗和正镶白旗内选取了17个典型样地,对比了“标准枝”和“标准样方”两种直接测量方法获取的地上生物量精度。同时,采用real-time kinematic(RTK)获取到的高度、不规则冠幅面积等4种直接易测因子和衍生的3种复合因子,研究了在无损条件下间接测量地上生物量的可能性,构建了用于研究区小叶锦鸡儿灌丛地上生物量的估测模型。研究结果表明：1）运用“标准枝”法（R=0.95,P<0.01）预测的生物量要比运用“标准样方”法（R=0.84,P<0.01）预测的生物量更精确且对灌丛的损害性更小。2）在易测因子相关性分析中,单因子冠幅、不规则冠幅面积、不规则冠幅周长之间关系紧密,相关性系数均大于0.98(P<0.01),可用于小叶锦鸡儿地上生物量的预测;高度与其他单因子关系一般,相关性系数为0.67～0.72(P<0.05),但是基于高度因子衍生表征体积的冠幅与高度乘积因子、冠幅周长与高度乘积因子、...