碳源和乙醇调控雨生红球藻生长与虾青素积累

[目的]雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)生长速率和虾青素积累量决定着雨生红球藻商业化生产的经济效益。本文旨在建立提高雨生红球藻生长和虾青素积累的新方法。[方法]以BG-11为基础培养基,分别以乙酸钠和二氧化碳为碳源,添加少量乙醇,探讨乙醇和碳源对雨生红球藻生长及虾青素积累的效应。[结果]添加乙醇显著提高了雨生红球藻生长及虾青素积累。(BG-11+乙酸钠)+乙醇培养的雨生红球藻生长迅速,在第4天细胞密度上升到1.587×106 cells·mL~(-1),而对照组(BG-11+乙酸钠)在第8天细胞密度才上升到1.187×106 cells·mL~(-1)。(BG-11+乙酸钠)+乙醇培养的雨生红球藻在第14天生物量和虾青素含量分别达2.74g·L-1和3.51%(干重),分别是对照组的2.98倍和1.71倍,显著高于对照组。同样,(BG-11+CO2)+乙醇培养的雨生红球藻在第6天细胞密度上升到1.236×106cells·mL~(-1),在第14天生物量和虾青素含量分别达2.59g·L-1和3.1%(干重),均高于对照组(BG-11+CO2)的生物量(0.7g·L-1)和虾青素含量(1.43%,干重)。[结论]研究结果为建立基于添加乙醇提高雨生红球藻生长速率和虾青素积累量的简单易行规模化技术体系提供了科学参考。     

稀土元素钕对铜绿微囊藻生长和生理特性的影响

通过模拟培养试验,研究了不同Nd3+始浓度条件下铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)的生长及生理变化.结果表明,相对BG11培养基(Nd3+始浓度为0 mg·L-1),低初始Nd3+浓度(0.01、0.05、0.1、0.5、1 mg·L-1)条件下,随着Nd3+浓度的增加,藻细胞中叶绿素a含量、可溶性蛋白含量和过氧化氢酶(CAT)活性均呈增加趋势,促进了铜绿微囊藻生长;在Nd3+初始浓度为5 mg·L-1和10mg·L-1时,藻细胞丙二醛(MDA)含量急剧增加,CAT活性下降,藻细胞清除活性氧(ROS)能力下降,抗氧化防御体系被破坏,膜脂过氧化严重,严重抑制藻细胞生长,在初始Nd3+度50 mg·L-1胁迫下,铜绿微囊藻无法生长.藻细胞超微结构表明,过量的Nd3+破坏了藻细胞内的类囊体结构,胞内脂质体含量增加,细胞膜变粗糙甚至变形破碎,对藻细胞造成不可逆伤害.     

马兰茎尖培养及快速繁殖的研究

以马兰的茎尖为试验材料,进行了茎尖的萌发与分化、试管苗的生根、移栽与移植的快繁技术研究。结果表明:MS+BA 0.2 mg.L-1+IAA 0.5 mg.L-1+GA30.5 mg.L-1是生长点萌发生长的理想培养基;MS+NAA 0.1 mg.L-1+BA 1.0 mg.L-1是萌发生长芽分化培养的理想培养基;1/2MS+IAA 0.6 mg.L-1是不定芽生根培养和生根继代培养的理想培养基;在温室中河沙是试管苗移栽的理想基质;移植到山坡上的试管苗长势旺盛。     

多倍体金线莲一次性成苗及移栽

筛选多倍体金线莲一次性成苗的最佳培养基配方并探讨不同基质对移栽苗生长的影响.结果表明:MS+1.0 mg·L-16-BA+1.5 mg·L-1NAA+150 g·L-1土豆+3%蔗糖+0.65%琼脂+0.15%活性炭为最佳一次性成苗培养基配方;经120 d培养即可获得生长、生根同步完成的组培瓶苗,具有长势一致(株高5~7 cm),茎节多且粗(茎粗1.19 cm),根系发达(每株2~3条根)等优势;最佳移栽基质为:泥炭土∶碎松树皮=1∶1(体积比),移栽苗成活率(92%)最高,长势最好,植株增高(1.53 cm)、增重(0.43 g)均达到最大,折干率(13.31%)相对较高.     

6-BA浓度对库拉索芦荟试管苗生长的影响

以MS为基本培养基,研究了不同6-BA浓度对库拉索芦荟试管苗生长的影响,筛选出了有利于库拉索芦荟试管苗生长的最适6-BA浓度.结果表明,6-BA浓度为0.8 mg·L-1时,芦荟试管苗生长势最佳;培养基MS + 6-BA 3.0 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1适合芦荟试管苗的芽分化;培养基MS+6-BA 0.8 mg·L-1+NAA 0.2 mg·L-1适合芦荟试管苗的增殖.     

铜绿微囊藻对亚硝态氮的利用

通过室内培养,研究了不同亚硝态氮浓度对铜绿微囊藻(Microcystis aeruginosa)生长的影响和藻对亚硝态氮的利用,实验分析了水体中亚硝态氮、硝态氮和铵态氮浓度的变化,测定了铜绿微囊藻的生长曲线、藻细胞内亚硝态氮含量和藻亚硝酸氧化酶(NOR).结果显示,在10 mg NO-2-N·L-1的处理组中,培养基中亚硝态氮和硝态氮浓度同时减少,说明铜绿微囊藻可以同时利用亚硝态氮和硝态氮;在20和30 mg NO-2-N·L-1的处理组中,随着藻的生长培养基中亚硝态氮的浓度减少,硝态氮浓度增加,而且电泳实验显示此培养条件下铜绿微囊藻能产生亚硝酸氧化酶,表明培养基中的亚硝态氮被亚硝酸氧化酶氧化为硝态氮.本实验也表明高浓度的亚硝态氮(大于10 mg NO-2-N·L-1)能够抑制藻的生长.     

野生巨大口蘑1株新菌株ITS鉴定及菌丝培养基优化

【目的】鉴定1株巨大口蘑Tricholoma giganteum新的野生菌株,并优化其菌丝的最适培养基.【方法】以1株野生巨大口蘑为研究对象,采用组织分离法,从野生巨大口蘑子实体中分离纯化得到纯菌丝,利用分子生物学方法进行鉴定,通过测定菌丝生长速度、菌丝长势等指标对其进行培养条件研究,并运用均匀设计法对培养基进行优化,采用二次多项式逐步回归方法对试验结果进行分析.【结果和结论】该野生菌株经鉴定为巨大口蘑,Gene Bank编号为JX193694,命名为SCAU3,其菌丝生长的最适温度为30~32℃,最适p H为7~8,最佳碳源为麦芽糖,最佳氮源为酵母膏.经均匀设计法优化得到最适培养基组合:麦芽糖26 g·L-1,酵母膏2 g·L-1,Mg SO42.7 g·L-1,KH2PO41.8 g·L-1,维生素B1 16 mg·L-1,p H7.7.     

芒果炭疽病菌突变体和野生型的生物学特性分析

研究了芒果炭疽病菌的突变体和野生型在不同的温度、光照、营养条件下的菌丝生长、分生孢子萌发的情况,研究菌丝体的致死温度和时间,筛选抑制野生型生长的最适潮霉素B和抗除草剂PPT浓度范围。结果表明:糖量多的培养基有利于生长和产孢,菌丝体最适的生长温度为28℃,不同的光照条件下差异不明显,但光照对野生型和突变体的孢子萌发的差异显著。突变体和野生型的菌丝体致死温度为60℃下处理10 min。随着两种添加剂浓度的增加,炭疽菌丝体生长受到抑制,其中潮霉素B在50 mg/kg的浓度下可抑制野生型的生长,抗除草剂PPT在0.02%浓度下抑制生长。     

南方红豆杉愈伤组织诱导和继代培养体系的建立

以南方红豆杉为材料,建立了其愈伤组织诱导与保持的技术体系,主要为:(1)南方红豆杉侧芽是诱导愈伤组织的最佳外植体;(2)南方红豆杉愈伤组织诱导的最佳培养基为:B5+2.0 mg.L-12,4-D+1.0 mg.L-1NAA+0.2 mg.L-1IAA;(3)南方红豆杉愈伤组织增殖的培养基为:B5+4.0 mg.L-1NAA+0.5 mg.L-12,4-D+0.2 mg.L-1GA+500 mg.L-1AC+2000 mg.L-1LH.并在培养基中同时添加AC、LH和GA33种抗褐物质,取得较好的抗褐化效果.     

枸杞组织培养快速繁殖技术

以枸杞、新疆枸杞、宁夏枸杞的种子为外植体进行组织培养快速繁殖技术研究,结果表明：枸杞最适宜的初代培养基为MS＋6BA1.5 mg.L-1＋IBA0.2 mg.L-1,宁夏枸杞和新疆枸杞最适宜的初代培养基为MS＋6BA2.5 mg.L-1＋IBA0.2 mg.L-1;3种枸杞最佳的继代培养基均为MS＋6BA0.5 mg.L-1＋IBA1.0 mg.L-1,分化诱导率分别为60%、40%、44%,增殖倍数分别为4.5倍、3倍、3倍;在MS＋6BA0.5 mg.L-1＋IBA0.1 mg.L-1培养基上3种枸杞的幼苗生长均表现为粗壮;生根培养基以1/2 MS＋IBA0.1 mg.L-1效果最佳.以腐殖土、蛭石、河沙等量混合配制的移栽基质效果最佳,移栽成活率为96%.     

曼地亚红豆杉离体培养及植株再生

以红豆杉带侧芽茎段为外植体进行离体繁殖.结果表明:在WPM、MS、B53种基本培养基中,WPM为红豆杉离体培养最适的基本培养基;初代培养的最适培养基为WPM+4.0mg·L-12-ip+30.0mg·L-1Ad;芽继代增殖的最适培养基为WPM+4.0mg·L-12-ip+1.0mg·L-1IAA;生根壮苗的最适培养基为1/2WPM+0.5mg·L-1IBA+0.1mg·L-1NAA.     

杂种黄秋葵茎尖及试管苗培养的研究

采用茎尖和试管苗培养的方法,以黄秋葵生长点为材料,进行了生长点的生长、分化芽的生根和试管苗的生根继代增殖培养,以及试管苗的移栽与定植的研究。结果表明:1/2MS+ZT0.2mg·L-1+NAA0.3mg·L-1是生长点伸长生长的理想培养基;MS+6-BA0.7mg·L-1+AgNO30.8mg·L-1+NAA0.1mg·L-1是生长芽分化培养的理想培养基;1/3MS+ABT0.6mg·L-1+蔗糖10g·L-1+IAA0.4mg·L-1是分化芽生根培养和生根继代增殖培养的理想培养基。试管苗移栽成活率为94.7%;定植成活率为97.4%;定植的试管苗保持了杂种黄秋葵的杂种优势。     

红叶石楠组织培养工厂化扩繁技术研究

以红叶石楠的侧芽和顶芽为材料进行组织培养试验。结果表明：外植体用0．1%HgCl_2消毒10～12 min,诱导培养基以MS+0．05 mg．L~1 NAA+2．0 mg·L~1 6-BA为佳,芽增殖培养基以MS+1．0 mg·L~1BA+0．1 mg’L~1 6-BA为佳,壮苗培养基以MS+0．5 mg·L~1 NAA+0．5 mg·L~1 6-BA为佳,生根培养基以1/2MS+1．0 mg·L~1 IBA为佳,将生根苗移入温室的穴盘中,基质以蛭石：珍珠岩：泥炭土=5：3：2较好,控制好室内的温度、光照和湿度,成活率可达90%以上。     

芳樟离体快繁与离体保存试管苗再生植株培养

以芳樟嫩茎为外植体,进行离体培养快繁技术研究.结果表明:在改良MS+2mg·L-1 6 BA+ 0. 1mg·L-1 NAA固体培养基中诱导不定芽,诱导率高;用附加 0. 2mg·L-1 GA3 或无GA3 的改良MS+2mg·L-1 6 BA+0. 1mg·L-1 IBA固体培养基交替培养,芽苗可大量增殖,繁殖系数高达 10-20倍,而且可以避免褐变和玻璃化现象;保存 2a的试管苗仍然保持再生芽的能力;芽苗用 1 /2MS+0. 8mg·L-1 IBA+ 0. 2mg·L-1 NAA + 20g·L-1蔗糖固体培养基培养,生根、壮苗效果最好.     

百合愈伤组织的诱导及植株再生

试验以东方百合(Oriental hybrids)"bernini"的花柱、花丝、花瓣为外植体,利用组织培养技术,探讨不同外植体愈伤组织的诱导、胚状体发生及植株的再生状况。结果表明,三种外植体均能诱导愈伤组织,花柱和花瓣诱导的愈伤组织为绿色致密的非胚性组织,而花丝诱导的愈伤组织为黄色疏松的胚性组织,将胚性愈伤组织继续培养一个月可发生胚状体。花丝愈伤组织诱导率、分化率以及分化速度均高于花柱和花瓣。诱导愈伤组织的最佳培养基为改良MS(盐酸硫胺素的浓度为4mg·L~(-1))+2,4-D2mg·L~(-1)+水解乳蛋白300mg·L~(-1);最佳分化培养基为MS+KT0.1mg·L~(-1)+BA 0.5mg·L~(-1)+NAA 1mg·L~(-1);最佳生根培养基为MS+IBA 0.5mg·L~(-1)。     

黄花水仙和南日岛水仙的组培快繁

以黄花水仙和南日岛水仙为材料,对2个水仙品种的组培快繁技术进行了研究.结果表明:以低温处理1个月的带鳞茎盘基部的鳞片为外植体,接种于MS+0.5 mg.L-1BA+0.1 mg.L-12,4-D的诱导培养基和MS+1.0 mg.L-1BA+0.5或1.0 mg.L-12,4-D的继代增殖培养基中,诱导黄花水仙形成的小鳞茎数量多,增殖率高;南日岛水仙以MS+0.5 mg.L-1BA+2.0 mg.L-1NAA的诱导培养基和MS+1.0 mg.L-1BA+0.5或1.0 mg.L-12,4-D的增殖培养基效果较好.生根培养基为1/2MS+0.05 mg.L-1NAA,移栽后成活率很高.     

太子参茎尖脱毒培养及增产效果

取长约0.5 mm,带有1-2个叶原基太子参茎尖,接种在MS+0.5 mg.L-1NAA+0.5 mg.L-1BA+30 g.L-1蔗糖+6.5 g.L-1琼脂培养基上培养40 d,组培苗出苗率为86.7%;接种在1/2MS+1.5 mg.L-1IBA+0.5 mg.L-1IAA生根培养基,组培苗生根率最高,为93.3%;组培苗成活率为85.2%,定植成活率为100%.采用目测法和指示植物鉴定法检测,初步认为茎尖组培苗不带病毒.小区对比试验表明,茎尖脱毒苗单株产量比种根组培苗增产102.7%.     

柚杂交胚离体培养再生植株的研究

以王官溪蜜柚和度尾文旦柚互交产生的杂交种幼胚为材料,研究离体胚再生植株的技术.结果表明:幼胚在MT培养基上直接成苗质量最好;子叶在MT附加0.25mg·L-16-BA+0.5mg·L-1ZT+0.01mg·L-1NAA固体培养基中产生不定芽;带子叶胚轴在MT附加1mg·L-16-BA+0.2mg·L-1IAA+1mg·L-1GA3的固体培养基中可提高其萌芽率,繁殖系数扩大了20倍以上;分化的丛生芽是试管微芽嫁接的良好接穗材料,将芽苗转移到1/2MS+0.5mg·L-1IBA+0.5mg·L-1NAA的固体培养基中诱导生根壮苗最好.     

莲雾组织培养和快速繁殖技术

以莲雾未萌发带顶芽茎段为材料研究其组织培养和快速繁殖技术。结果表明:莲雾组织培养的基本培养基为WPM;带顶芽茎段诱导芽的适宜培养基为WPM+0.5 mg.L-16-BA+0.02 mg.L-1NAA;通过腋芽增殖途径的适宜培养基为WPM+0.8 mg.L-16-BA+0.4 mg.L-1IBA;壮苗适宜培养基为WPM+0.2 mg.L-16-BA+0.4 mg.L-1IBA;生根适宜培养基为1/2WPM+0.5 mg.L-1NAA+0.2 mg.L-1IAA。组培苗驯化移栽成活率达90%以上。剪取成活组培苗顶部枝梢进行嫩枝(幼态)扦插生根成苗,能提高繁殖率,降低成本。