银杏愈伤组织诱导与继代培养的研究

以银杏种子子叶、幼叶片、茎段为外植体,对银杏进行愈伤组织诱导及继代培育．结果表明：不同外植体的愈伤组织的诱导能力有差异,其诱导率高低顺序依次是子叶、叶片、茎段;愈伤组织质地、颜色、生长速度与基本培养基、外源激素及培养条件有很大关系,基本培养基以高含量无机盐的Ｍ Ｓ培养基为最好;最佳诱导培养基不适合继代保存,褐变极为严重;在培养基中附加抗氧化剂并调整激素种类,可以消除褐变现象,使细胞保持旺盛生长     

牡丹愈伤组织诱导和继代培养体系的建立

以牡丹为材料,研究了不同外植体、激素对愈伤组织诱导和继代增殖的影响,结果表明:①牡丹子叶、胚轴是诱导愈伤组织的最佳外植体;②牡丹子叶愈伤组织诱导的最佳培养基为:MS+Ca2+;③牡丹愈伤组织增殖的最佳培养基为:MS+2,4-D 0.5 mg.L-1+NAA 1.5 mg.L-1+Vc 500 mg.L-1;④在培养基中添加500 mg.L-1Vc或去除Cu2+,具有较好的抗褐化效果。     

野葛愈伤组织诱导与不定芽分化

采用MS为基本培养基，附加NAA、6-BA和IAA3种激素．诱导野葛不同外植体愈伤组织形成；再将愈伤组织接种在不同浓度6-BA的MS培养基上．分别在光照和黑暗条件下进行不定芽的诱导。结果表明．野葛幼叶、茎段和顶芽在适宜激素的诱导下均能形成愈伤组织，但不同激素组合其愈伤组织诱导率不同。幼叶愈伤组织诱导的最适培养基为MS NAA1．0mg／L 6-BA1．0mg/L．其诱导率为75％．茎段愈伤组织诱导的最适培养基为MS NAA1．0mg／L 6-BA3．0mg／L IAA0．2mg/L，其诱导率为70％。不同外植体形成的愈伤组织其不定芽的分化诱导率不同．茎段愈伤组织在不同浓度6-BA下均能诱导出不定芽；光照有利于芽的分化．在光培养条件下，茎段愈伤组织不定芽平均诱导率为66．7％。     

喜马拉雅红豆杉愈伤组织的诱导

采用喜马拉雅红豆杉的幼叶、幼嫩茎段、幼根为材料,比较不同外植体、基本培养基、植物生长调节剂的配比、抗氧化剂以及培养条件对愈伤组织诱导的影响。结果表明,幼叶做为外植体时,其诱导率高于幼嫩茎段和幼根,愈伤组织量大;MS、1/2MS、B5和WPM基本培养基上均能诱导出愈伤组织,其中MS基本培养基上诱导效果最好,显著高于其他的基本培养基;MS培养基上添加1 mg/L 6-BA和0.5 mg/L 2,4-D配合使用时,诱导率达到93.6%,愈伤组织生长也最旺盛;基本培养基MS中添加1 mg/L Vc时褐变现象得到极大抑制,愈伤组织生长较好;暗培养有利于愈伤组织的诱导,且诱导出的愈伤组织质量好。     

油茶胚组织离体培养实验

采用油茶上胚轴、下胚轴和子叶作外植体进行油茶组织离体培养诱导愈伤组织发生和不定芽分化的实验.实验结果表明,0.2％的HgCl2消毒处理油茶种胚外植体10 min效果较好;油茶上胚轴、下胚轴和子叶组织在MS+2,4-D2mg/L+KT0.5 mg/L的培养基上,愈伤组织诱导率分别为95.0％、66.7％和30.0％;在MS+6- BA2.5 mg/L+ KT0.1 mg/L+ NAA0.5 mg/L培养基上,不定芽诱导率分别是66.7％、33.3％和11.1％;以MS+6- BA 2 mg/L+ NAA 0.2 mg/L继代培养,上胚轴、下胚轴和子叶所形成愈伤组织芽增殖系数40天时为5.8、5.6和5.3.     

水曲柳不同外植体胚性愈伤组织诱导及植株再生

本研究以水曲柳不同外植体(无菌苗叶片和下胚轴、未成熟合子胚、成熟和未成熟合子胚子叶)为材料，在胚性愈伤组织诱导、胚性愈伤组织增殖、体胚形成、体胚萌发生根培养基上诱导分化。结果表明，附加了5.0 mg·L^-1 NAA和2.0 mg·L^-1 6-BA的激素配比的MS培养基，为诱导水曲柳胚性愈伤组织最适培养基；在5种不同的外植体中，成熟和未成熟合子胚子叶更适合作为诱导胚性愈伤组织的外植体；在诱导胚性愈伤组织中，成熟合子胚子叶诱导率为11.7%,未成熟合子胚子叶诱导率为9.7%;胚性愈伤组织在继代培养过程中，WPM为最佳基础培养基，附加0.1 mg·L^-1 6-BA和0.15 mg·L^-1 2,4-D的激素配比，胚性愈伤组织的增殖系数可达到1.54。在体胚成熟过程中，MS培养基内添加1.0 mg·L^-1 ABA时，体胚的诱导率最高，达到55%。在生根萌发的WPM基础培养基中附加1.0 mg·L^-1 IBA和1.0 mg·L^-1 IAA的激素配...     

光皮树的组织培养研究初探

以光皮树种子和嫩枝条为材料,探讨不同诱导途径对培养的影响:①分别以茎段、顶芽、叶片、带腋芽的茎段及无菌发芽的种子苗上的胚轴和子叶为外植体离体诱导出愈伤组织,然后再进行分化;②以带腋芽的茎段为外植体进行腋芽增殖.结果表明:70％酒精与0.1％升汞配合使用,消毒效果较好.其中,茎段消毒采用70％酒精浸泡30 s,0.1％升...     

板栗愈伤组织诱导及外植体褐化研究

以‘泰山1号’板栗新梢茎段为试材,采用正交试验设计和单因素试验法,研究了不同培养基、消毒时间、外植体、激素、蔗糖含量、抗氧化剂及光照条件对愈伤组织诱导及外植体褐化的影响。结果表明:‘泰山1号’板栗愈伤组织诱导的最佳培养基是WPM培养基;用0.1%Hg Cl2消毒13~15 min,外植体褐化率明显降低;以茎段(带顶芽)为外植体,蔗糖浓度为30 g·~(-1),愈伤组织诱导率最高;愈伤组织诱导最佳激素组合为:6-BA1.0mg·L~(-1)+NAA0.2 mg·L~(-1);100 mg·L~(-1)VC和6 g·L~(-1) PVP能有效抑制外植体褐化;先暗培养两周再进行光培养,可显著降低外植体褐化率。     

黑荆树不同外植体愈伤组织诱导与芽分化的研究

为建立高效的黑荆树快速繁殖体系,以黑荆树叶片、茎段和下胚轴为外植体,在添加不同植物生长调节剂的MS培养基上进行了愈伤组织的诱导和不定芽的分化研究。结果表明:综合最高诱导率结果和愈伤组织的生长状况,外植体的愈伤组织诱导能力顺序为叶片(44.83%)下胚轴(36.35%)茎段(30.05%);愈伤组织诱导最佳培养基为MS+1.5 mg/L 6-BA+0.005 mg/L TDZ+1.0 mg/L IBA。叶片和下胚轴所诱导的愈伤组织均可分化出不定芽,但芽诱导率差异达极显著水平;不定芽分化最佳培养基为MS+0.01 mg/L TDZ+0.2 mg/L IBA,叶片愈伤组织的芽分化率最高可达32.60%。     

薄壳山核桃愈伤组织诱导的影响因素

以薄壳山核桃品种马罕×波尼的杂交种子为材料,研究不同外植体来源、不同培养基成分及不同质量浓度的植物生长调节剂对愈伤组织诱导效率的影响。结果表明,MS较1/2 MS和WPM培养基更加有利于薄壳山核桃愈伤组织的诱导和继代培养;最佳植物生长调节剂组合为2.0 mg/L NAA+0.1 mg/L 6-BA;种子苗幼茎较胚根、胚轴、幼叶更适于作为愈伤组织诱导的起始外植体,愈伤诱导率为72.79%。     

红松成熟合子胚愈伤组织诱导的研究

以红松(Pinus koraiensis Sieb.et Zucc.)成熟合子胚为基准试验材料,对红松愈伤组织诱导的影响因素进行了初步研究。结果表明,不同的培养基对有效愈伤组织的诱导效果不同,初始诱导应选用LM培养基使外植体完全脱分化,反复继代后可以产生有效愈伤组织,供试的其他培养基继代后则极少产生有效愈伤组织;不同的激素组合和浓度配比对有效愈伤组织的诱导率影响不同,2,4-D是愈伤组织启动的不可或缺的植物生长调节剂,其作用远远大于NAA。在LM+2mg.L-1 2,4-D+0.5mg.L-16-BA的诱导培养基中加入0.5mg.L-1 KT或0.5mg.L-1 TDZ,可明显提高有效愈伤组织的诱导率(可达75.7%)。     

不同抗氧化剂对银杏愈伤组织褐变影响的研究

以银杏幼叶为外植体,对银杏进行愈伤组织诱导和继代培养.通过正交试验设计,研究了不同浓度的3种激素配合使用对银杏愈伤组织诱导的效果,筛选出诱导银杏愈伤组织的最佳培养基MS+3mg/LNAA+3mg/L6-BA.研究了在银杏愈伤组织继代过程中,不同浓度的4种抗氧化剂对褐变抑制的效果,筛选出最佳抗氧化剂及其浓度10 mg/LVc.4种抗氧化剂对抑制褐变的效果如下Vc>PVP>柠檬酸>Ac,其中,PVP的最佳浓度为1 g/L.继代过程中,光照条件对愈伤组织褐变程度有一定的影响.     

北乌头组培快繁技术体系初步研究

本文对北乌头组培快繁技术体系进行了初步研究,同时比较了不同外源激素组合对北乌头外植体诱导的影响,其结果表明:北乌头愈伤组织诱导最佳外植体为叶片,丛生芽诱导最佳外植体为带芽茎段及茎尖,愈伤组织诱导最佳培养基为MS+1.0mg/L6-BA+1.0mg/L2,4-D,丛生芽诱导最适合培养基为MS+1.0mg/L2,4-D+0.2mg/LNAA,继代培养以WPM+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LIBA效果最为显著,增殖率在4倍以上;北乌头生根最佳培养基为1/2MS+0.1mg/LNAA,生根率可到90%。     

枣树叶片愈伤组织培养与再生植株的研究

为探讨枣树组织培养育种及快繁技术,以木枣、骏枣和狗头枣组培苗叶片为外植体,通过诱导愈伤组织形成再分化出不定芽,从而建立高效的再生系统。试验结果表明,不同基因型或同一基因型的不同部位的材料其培养效果间有差异;试管枣苗茎尖倒数1～3片叶是合适的外植体材料;6-BA与2,4-D在枣树叶片愈伤组织诱导中有极显著的交互作用,二者的配比浓度水平影响愈伤组织的诱导增殖和质量;枣树叶片愈伤组织诱导和继代增殖培养适宜的培养基是3/4MS+6-BA0.2 mg.L-1+2,4-D 2.0 mg.L-1+琼脂0.55%+蔗糖3%。6-BAI、BA与TDZ在枣树愈伤组织分化培养中有显著的协同作用,不定芽诱导的适宜培养基是CYI+6-BA 1.0 mg.L-1+IBA 0.2 mg.L-1+TDZ 0.015 mg.L-1。     

Selection of culture conditions for callus induction and proliferation by somatic embryogenesis of Pinus koraiensis

The induction and proliferation of embryogenic callus are key steps for large-scale propagation of somatic embryogenesis pathway and long-term preservation of coniferous germplasm.Callus can be induced from immature embryos of Korean pine(Pinus koraiensis Sieb.et Zucc.;Pinaceae) as explants,but there are problems,such as low proliferation efficiency,loss of embryogenicity,poor vigor;thus,best conditions for proliferation and culture of immature embryos of Korean pine are not yet clear.To solve the problems with somatic embryogenesis of Korean pine and determine the best culture conditions for callus induction and proliferation,we varied hormone concentration,subculture cycle of proliferation and other plant growth regulators combinations in media to induce callus formation by megagametophytes of three Korean pine families at different developmental stages,then analyzed the effects on embryogenic callus retention and cell proliferation using a quadratic regression orthogonal rotation design.The results showed that the family origin and collection date of explants significantly affected callus induction(induction rate reached1.67%).Embryogenic maintenance and callus proliferation were best on DCR medium supplemented with 0.25 mg L~(-1)6-benzyl adenine,1 mg L~(-1) naphthaleneacetic acid,30 g L~(-1)sucrose,500 mg L~(-1),L-glutamine,500 mg L~(-1) casein hydrolysis and 6.5 g L~(-1) agar.In addition,the combination of 2,4-dichlorophenoxyacetic acid+6-benzyl adenine also had a better proliferative effect on callus.The effects of different combinations of growth regulators on callus proliferation efficiency were significantly different.Transfer to new medium every 13-15 days not only maintained robust callus vigor,but also yielded a larger proliferation coefficient.The techniques and conditions for embryogenic callus induction and proliferation of Korean determined here will serve as a foundation for establishing a large-scale system for somatic embryogenesis and propagation of Korean pine.     

松塔景天组织培养与快速繁殖的研究

以松塔景天幼嫩叶片作为外植体,利用含有不同浓度配比植物生长调节剂的培养基分别进行愈伤组织的诱导、不定芽的诱导、生根培养及驯化移栽,建立了松塔景天组织培养和快速繁殖体系。试验结果表明：诱导愈伤组织的最适培养基为MS＋6-BA 0．5 mg/L ＋NAA 0．05mg/L ,愈伤组织诱导率达87．78％;诱导不定芽的最适培养基为MS＋6-BA 1．0mg/L＋ NAA0．1 mg/L ,不定芽诱导率达88．89％;组培苗最佳生根培养基为1/2 M S＋IB A 0．3 m g/L ,生根率达91．33％;组培苗的移栽成活率达84％。     

地涌金莲组织培养中的褐化抑制

地涌金莲组织培养中的褐化问题一直是其优良品种选育及规模化生产的技术瓶颈。为解决这一问题,以地涌金莲未成熟雄花为试材,研究了外植体消毒方式、植物生长调节剂种类及配比和不同抗褐化剂对愈伤组织褐化的影响。结果表明,未经消毒的外植体其污染率为0%,且褐化率和褐化指数均显著低于消毒后的外植体;6-BA在地涌金莲愈伤组织诱导中起主要作用,浓度为2 mg·L-1、3 mg·L-1时有利于愈伤组织的诱导,能显著降低褐化指数;添加柠檬酸+抗坏血酸(VC)混合液、表面添加VC均对地涌金莲褐化未起到明显抑制作用,姜汁和阿魏酸对抑制愈伤组织褐化有较好的效果,48.5 mg·L-1的阿魏酸能显著降低愈伤组织的褐化,使愈伤组织分化率达17.9%,较对照的2.9%提高了15%。     

红松愈伤组织诱导的初步研究

以未成熟和成熟合子胚为外植体进行了红松愈伤组织的诱导,其结果表明,成熟胚的诱导效果明显好于幼胚;鉴于诱导产生褐化的主要部位来自胚根,所以外植体应选用子叶、胚轴或去除胚根的胚;诱导培养基采用LM＋2,4-D2．0mg／L＋6-BA0．5mg／L可诱导出较大量Ⅱ型有效愈伤组织,经组织学观察,可见早期原胚团,疑似胚性愈伤组织;继代增殖培养基可采用LM＋2．4-D0．5mg／L＋6-BA0．2mg,／L。