百合鳞片薄层细胞培养高效再生体系的建立

为了建立适宜百合遗传转化的受体系统,以铁炮百合品种白天堂无菌苗的叶片和鳞片为外植体,薄层切割后接种于添加不同植物激素的培养基上,观察其植株再生情况,并对其建立的再生体系的遗传转化前景进行了分析比较.结果表明,叶片薄层细胞几乎没有再生能力;2,4-D和Piclofram均可诱导横向薄层鳞片细胞直接产生鳞茎芽,最适的培养基是MS+2,4-D 0.002 mg/L,在30 d内就可直接诱导出鳞茎芽,再生率达到100%,平均出芽数为2.38;MS+TDZ 0.4 mg/L+NAA 0.5 mg/L可以诱导横向薄层鳞片细胞产生愈伤.综合考虑,百合鳞片薄层培养以MS+2,4-D 0.002 mg/L诱导的直接再生体系为最佳的再生体系.     

菊花2个品种高效再生体系的建立

以地被菊花2个品种‘铺地金’和‘北林红’的叶片为外植体,以MS为基本培养基,以不同浓度配比的6-BA,NAA为生长调节物质进行离体培养,直接分化出不定芽获得再生植株.试验表明:‘铺地金’叶片外植体再生的最适培养基为MS 6-BA 2.0 mg/L NAA 1.0 mg/L,再生率高达96%,其叶柄在此培养基上的再生率为90%;‘北林红’再生的最适宜培养基为MS 6-BA 1 mg/L NAA 0.5 mg/L,再生率为96%,但其茎段和叶柄在此培养基上不能高效再生.‘铺地金’腋芽增殖的最佳培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.01 mg/L,每腋芽外植体平均增殖不定芽数达到5.5个.‘北林红’腋芽增殖的最佳培养基为MS 6-BA 0.5 mg/L NAA 0.05mg/L和MS 6-BA 0.5mg/L NAA 0.01mg/L,腋芽外植体平均增殖不定芽数达到6.3个和5.6个,二者之间的差异不显著.     

菊花叶片离体高效再生体系的建立

本文报道了以菊花叶片为外植体，诱导植株再生，建立高效植株再生体系。获得诱导愈伤组织、芽和根的最佳培养基。在有6-BA、NAA的MS培养基上获得较高的愈伤组织诱导率，在有2，4-D的培养基上其愈伤组织诱导率很低。带有愈伤组织的外植体转移到有6-BA、NAA的MS培养基上催化芽的产生，并筛选出能直接诱导芽再生的培养基(MS 6-BA(3mg／L) NAA(1mg／L))。AgNO3可明显提高芽的再生率。茎段在1／2MS和有IBA或NAA的1／2MS培养基上诱导生根。生根的小苗在温室里生长良好。     

菊花外植体再生体系的研究

以不同小菊品种的叶片、茎段、花瓣及子房为外植体进行再生培养。实验结果表明：不同品种、不同外植体对相同激素水平的反应是不同的。以叶片为外植体时,品种Rm 27-2的分化率高于Rm6-4;Rm27-2最适培养基为MS BA0．5mg/L NAA0．5mg/L和MS BA2．0mg/L NAA0．2mg/L,而品种Rm6-4为MS BA6．0mg/L NAA0．4mg／L;茎段分化率高于叶片,叶片基部分化率高于中上部。子房培养较适宜的培养基为MS BA1．0mg/L十NAA1．0mg／L和MS BA2．0mg／L NAA2．0mg/L;MS BA20mg／L NAA0．2mg/L培养基可有效诱导花瓣产生愈伤组织及芽的分化。并对细胞分裂素、生长素在再生中的作用及适宜浓度作了探讨。     

菊花花瓣与花托再生体系的建立

以蕾期立菊花瓣、花托为外植体,分别接种到附加不同激素及配比的MS培养基上,置于培养室中,合理调节温度、光照、湿度进行继代培养,获得了菊花高效再生体系。结果表明:菊花花瓣、花托对不同浓度激素水平的反应不同,以花瓣为外植体时,最佳培养基为MS+6-BA4.0mg/L+NAA0.05mg/L,而花托最佳培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.01mg/L,花瓣形成愈伤组织率可达95.5%,而花托可达100%,且分别接种在上述2种培养基上的外植体可一次成苗,其丛生芽诱导率、生根成苗率分别为98.5%、84.7%和98.4%、88.0%。使用培养室炼苗、温室炼苗法,炼苗大多都能成活,移栽成活最高可达98.75%。     

菊花茎叶外植体再生体系的研究

以地被菊‘矮黄’、‘玉龙’和传统菊花‘金背大红’的叶盘和茎段为外植体进行再生培养 .实验结果表明 ,不同品种对相同激素水平的反应是不同的 :传统的大菊‘金背大红’的愈伤诱导率和分化率都远远低于两种地被菊 ;在相同条件下以茎段为外植体诱导愈伤率高于叶盘 ,但是叶盘的直接分化率高于茎段 .‘玉龙’和‘矮黄’的最适再生培养基组成为MS +NAA 0 .1mg/L + 6 BA 1mg/L和MS +NAA 0 .2mg/L + 6 BA 2mg/L ,‘金背大红’为MS +NAA 1mg/L + 6 BA 5mg/L     

菊花9个品种叶片和茎段快速高效再生体系的建立

以9个菊花品种为试材，利用6种分化培养基和3种生根培养基，以叶片、茎段为外植体，研究不同基因型、激素组合以及附加不同浓度的AaNQ对高效、快速、经济的再生体系建立的影响。结果表明，最适分化培养基分别为：‘日本黄’：6—BAO．5mg／L NAA0．1mg/L或6—BA2．0mg/L NAA0．5mg/L;‘9718’、‘RH3’、‘寒紫’、‘寒黄’：6—BA2．0mg／L NAAO．5mg／L;‘日本白’：6—BAO．5mg/L NAA0．1mg/L；‘寒红’、‘抗白菊’：6-BA1．0mg/L NAA0.1mg／L;‘五九菊’：6-BA2．0mg/L NAA0．1mg/L。适宜生根培养基为1／2MS 0．1mg/L～0．2mg／L NAA、或0．2ng/L～0.4mg/LLAA、或0．4mg／L～0．6mg/LIBA。AgNO3对不定芽的分化有抑制作用。     

菊花花器官再生体系的建立

菊花Dendranthema morifolium为菊科菊属的多年生宿根花卉,为我国十大传统名花之一,也是世界著名的切花种类。盆栽立菊因其花色丰富,一株多头,观赏性好,历受人们的青睐。通过基因工程来改良盆,栽立菊的花色、花型,进一步提高观赏价值,是非常重要的育种方向。作为基因转化受体系统,菊花必须具有高效稳定的再生能力、充足的外植体来源及较高的遗传稳定性。     

开封菊花的部分品种的外植体再生体系的研究

以河南开封本地的菊花品种的叶片,茎段和茎尖为外植体,在配比不同浓度的生长调节素NAA和6-BA的MS基本培养基上诱导培养,通过外植体直接培养的途径获得再生植株,通过比较,获得了能够形成大量的,稳定的再生植株。通过不同品种的再生频率的比较,为基因转化建立了高效稳定的再生体系,为菊花基因工程奠定了基础。     

菊花离体叶片快繁体系的建立

以菊花叶片为外植体,诱导植株再生,建立高效植株再生体系。结果在MS 2mg/LBA 0.2mg/LNAA的培养基上诱导出愈伤组织,在MS 3mg/LBA 0.1mg/LNAA的培养基上诱导出芽,并在1/2MS 0.6mg/LNAA的培养基上诱导出根,从而获得再生完整植株,生根的小苗在温室生长良好。     

菊花脑离体培养再生植株研究

[目的]研究菊花脑离体培养再生植株技术。[方法]以菊花脑叶片、叶柄、茎段为外植体,以MS为基本培养基,研究了不同激素组合对其不定芽诱导率的影响。[结果]叶片外植体诱导率最高,叶柄次之,茎段最低。菊花脑叶片生芽的最佳培养基是MS＋1.0mg/L6-BA＋0.5mg/LNAA;叶柄生芽的最佳培养基为MS＋0.5mg/L6-BA＋0.5mg/LNAA;茎段生芽的最佳培养基是MS＋1.0mg/L6-BA＋0.5mg/LNAA。[结论]建立了菊花脑叶片、叶柄、茎段直接诱导不定芽的组织培养技术。     

地被菊‘北林黄’再生体系的建立及其抗生素敏感性研究

采用地被菊‘北林黄’叶片为外植体进行愈伤组织的诱导和植株再生,并对25 d苗龄的幼嫩叶片进行抗生素敏感性实验,结果表明,不同的激素配比影响叶片的再生能力,其中以MS+6-BA 1.5 mg/L+NAA 0.6 mg/L诱导叶片再生率最高。幼苗的最佳增殖培养基为1/2MS+NAA 0.05 mg/L。叶片对G418十分敏感,G418的适宜使用浓度以10 mg/L为宜,羧苄青霉素的浓度以250 mg/L为宜。     

薄层细胞培养在观赏植物再生和遗传转化上的应用

薄层细胞培养技术是20世纪70年代发展起来的,最早是通过对烟草茎段的纵向薄层培养来诱导它的生根、出芽以及体细胞胚。此后薄层细胞培养技术成功应用到观赏植物的组培快繁中,特别是那些用常规组培手段无法繁殖的植物种类中,该文对薄层细胞培养技术的基本原理以及在观赏植物再生和遗传转化中的应用进行了评述。     

不同激素对甘薯胚性细胞悬浮系植株再生的影响

以甘薯品种济薯21和徐薯18的茎尖为材料,采用不同激素配比,对甘薯胚性愈伤组织的诱导及高效植株再生进行了研究。结果表明,济薯21和徐薯18较适宜的茎尖胚性愈伤组织诱导培养基分别为MS+0.5 mg/L 6-BA+2.2 g/L KC l+2.0 mg/L 2,4-D和MS+2.0 mg/L 2,4-D;济薯21胚性细胞团在MS+1.0 mg/L ABA+1.0 mg/L GA3培养基上植株再生率最高,达到96%,徐薯18胚性细胞团在MS+1.0 mg/LABA培养基上的植株再生率最高,达到91%。     

花生胚小叶体细胞植株再生系统的建立

[目的]研究花生胚小叶体细胞植株再生体系,为利用胚小叶进行外源基因遗传转化提供试验依据。[方法]以花生品种四粒红和改良海花的胚小叶为外植体,2种外植体取材方式(预培养和直接取材)为培养背景,探讨了不同取材方式下各个培养要素(基因型、培养基等)与脱分化、再分化的关系,初步建立了花生胚小叶体细胞植株再生体系。[结果]在预培养取材条件下,预培养6d的四粒红外植体在2号培养基(MS+3mg/L6-BA+1mg/LNAA)上分化得最好,每愈伤组织再生芽2.34个,预培养5d的改良海花外植体在1号培养基(MS+5mg/L6-BA+3mg/LNAA)上分化最佳,每愈伤组织再生芽2.08个。直接取材条件下,改良海花在1号培养基上每愈伤组织出芽数为6个,而四粒红为3个。直接取材在诱导愈伤组织及器官分化方面都好于预培养取材。[结论]直接取材条件下,不同培养基对诱导愈伤组织及芽分化的作用差异较大,而基因型在诱导愈伤组织上的作用有显著差异,在出芽率上的作用差异并不显著。     

Establishing an in vitro regeneration system from hypoeotyls of Chrysanthemum lavandulifolium

以甘菊下胚轴为外植体,通过器官发生途径诱导不定芽分化,建立了甘菊下胚轴高效再生体系,为甘菊遗传转化体系的建立奠定了基础。结果表明：将甘菊种子播种于MS培养基上,置于黑暗条件下培养7d可以迅速获得大量下胚轴;下胚轴在MS＋1．0mg／L2,4-D＋0,5mtg／L6-BA的培养基上培养15d后,愈伤组织形成率最高为86．66％,愈伤组织呈淡黄色,大小一致;将愈伤组织转接到MS培养基中培养30d左右即可分化不定芽,不定芽分化率达25．50％,平均每个外植体产生不定芽数目为4．25个;不定芽在添加0．1ing／LNAA的1／2MS培养基中培养15d后,生根率达到100％。生根试管苗出瓶后,经过适宜培养,均可以获得健壮的开花植株。     

玉米原生质体培养再生植株

将玉米自交系“330”成熟胚诱导的愈伤组织,在附加2mg/L2,4—D的MSB培养基上继代、筛选,产生了三种类型的愈伤组织。用结构疏松,生长迅速的Ⅱ型胚性愈伤组织分离原生质体,在KPR或N_6ap培养基中以1×10~5/ml密度进行液体浅层培养,植板率为5.6%—7.4%。采用分步分化法得到了正常的绿苗,并经过壮根,炼苗后移栽成活。     

甘菊下胚轴离体再生体系的建立

以甘菊下胚轴为外植体,通过器官发生途径诱导不定芽分化,建立了甘菊下胚轴高效再生体系,为甘菊遗传转化体系的建立奠定了基础。结果表明:将甘菊种子播种于MS培养基上,置于黑暗条件下培养7 d可以迅速获得大量下胚轴;下胚轴在MS+1.0 mg/L 2, 4-D+0.5 mg/L 6-BA的培养基上培养15 d后,愈伤组织形成率最高为8666%,愈伤组织呈淡黄色,大小一致;将愈伤组织转接到MS培养基中培养30 d左右即可分化不定芽,不定芽分化率达25.50%,平均每个外植体产生不定芽数目为4.25个;不定芽在添加0.1 mg/L NAA的1/2 MS培养基中培养15 d后,生根率达到100%。生根试管苗出瓶后,经过适宜培养,均可以获得健壮的开花植株。      

马铃薯悬浮细胞原生质体培养及植株再生

试验所培养的 3个基因型的马铃薯悬浮细胞原生质体均获得再生植株。愈伤组织继代培养基、分化培养基及基因型对分化频率有显著影响