卡拉胶降解菌M－2的筛选与产酶性质

从多种海藻表面分离筛选到具有较高卡拉胶降解活性的菌株M-2,对该菌株所产卡拉胶降解酶的部分酶学性质和酶解产物进行分析。研究表明,M-2所产卡拉胶降解酶为诱导酶,具有热不稳定性,反应的最适温度为32～38℃,而最适pH为6～8;酶的反应活性受多种离子的影响。经基体辅助激光解吸电离———飞行时间质谱测试,酶解卡拉胶终产物以四糖和六糖为主,该酶为κ-卡拉胶酶。     

细菌降解琼胶的研究进展

琼胶和琼胶糖广泛应用于生化、临床、医药、食品等领域。琼胶类硫酸多糖对Ｂ型流感病毒、腮腺炎及脑膜炎病毒等有抑制作用。在琼胶糖结构研究中 ,人们发现某些细菌的胞外酶能够使琼胶裂解成低分子的寡糖 ,经过分离、纯化 ,用纸色谱法、化学方法、核磁共振光谱法确定它们的聚合度、取代基的位置和糖单位的结合顺序[1] 。酶法降解条件温和 ,专一性强 ,水解产物不易被破坏 ,利于产物分析和回收 ,因而逐渐代替了传统的酸解法。琼胶作为微生物培养基的凝固剂 ,大多数微生物不能使琼胶液化。因此 ,寻找一种高效的琼胶降解菌成为研究琼胶降解的关键…     

一株高产琼胶酶菌株MA-B22的分子鉴定与产酶条件优化

琼胶酶在多糖降解应用中的作用日益重要,而从海洋微生物中筛选琼胶酶高产菌株成为一个重要途径。本研究从养殖的杂色鲍体内分离到一株高产琼胶酶的菌株MA-B22。该菌为革兰氏阴性菌,经16S rRNA序列鉴定表明,与Tamlana agarivorans sp. nov.具有99%同源性,因此初步定为Tamlana sp.。在2216E培养基中该菌株在培养时间60 h,温度25 ℃,起始pH为6.0条件下产酶活性最高。基于上述培养条件,通过单因素和正交实验确定了培养基的最佳基本组成：氮源为牛肉膏（其最适浓度为6.0 ‰）,碳源为琼脂（其最适浓度为2.5 ‰）,配制培养基的人工海水的最适盐度为25。经培养条件优化后,该菌胞外琼胶酶活力可达1021.79 U/mL,较优化前提高8.82倍。实验首次对Tamlana sp.属的琼胶酶活性进行确定并优化其产酶条件,为构建琼胶酶高产工程菌株提供了基础,并可能为今后鲍养殖提供潜在的益生菌。     

鲍琼胶酶高产细菌的筛选和鉴定

从江蓠中分离筛选出两株琼胶酶高产菌,均为革兰氏阴性菌,呈细杆状。通过API条带分析,它们除了在对柠檬酸盐的利用上存在差别外,其它的生理生化特征基本相同,鉴定为多食鞘氨醇杆菌(Sphingobacteriummultivorum),其可信度分别是98.7%和99.5%。     

3种改性方法对琼胶理化性质的影响

为丰富优质琼胶酶品类,充分利用海藻资源,实现功能性琼胶寡糖的高效制备,采用基因组挖矿技术挖掘得到一个来源于海洋细菌——淡黄色噬琼胶菌 (Agarivorans gilvus) WH0801的β-琼胶酶 (β-AGA酶),利用生物信息学分析对该酶的理化性质和结构特征进行预测,发现该酶为非分泌性蛋白。在此基础上,采用分子生物学手段引入信号肽,实现了该酶在大肠杆菌 (Escherichia coli) 中的胞外表达,并通过发酵调控策略优化提高其生产效率。结果表明,采用种龄5 h的种子培养液进行发酵,发酵出发培养基为TB (pH 7.0),碳源为6 g·L⁻¹的果糖,氮源为30 g·L⁻¹的酵母提取液Ⅱ,于25 ℃培养2 h后加入终浓度为0.025 mmol·L⁻¹的IPTG诱导48 h,此条件下发酵所得酶活为16.72 U·mL⁻¹,相比初始酶活提高了约5倍,证明β-AGA酶具有良好的工业应用潜力。     

海洋细菌DT-7产琼胶酶的培养基组分优化

以海洋细菌Brevundimonas sp. DT-7为实验菌株,通过单因子试验,确定了培养基主要成分的优化范围,再利用SAS8.2统计软件的筛选试验设计筛选出三个显著因子X1(琼脂粉),X4(CaCl2),X8(蛋白胨),然后采用响应面分析法进行实验设计,最后通过响应面回归过程进行数据分析,建立了二次响应面回归模型,得出优化后培养基组分(w/v)：琼脂粉 0.536%,氯化钠 2.5%,磷酸高铁 0.1%,氯化钙 0.052%,磷酸氢二钾 0.1%,七水硫酸亚铁 0.03%,酵母膏 1%,蛋白胨 0.484%;经培养基组分优化后,在250ml三角瓶装液量为50ml、初始pH 7.5、摇床转速为120r•min-1、培养温度为23±1℃、培养28h的条件下,菌株产酶活力从优化前的372.0 U•ml-1提高到503.3 U•ml-1,酶活力为前者的1.35倍,从而为进一步研究琼胶酶产生菌产业化提供了基础参数。     

产β-1,3-葡聚糖酶海洋细菌的筛选及其酶学性质研究

依据从海水中分离、筛选得到的β-1,3葡聚糖酶活较高的菌株SY-3之形态、生理及生化特性,初步鉴定为气单胞菌.该菌发酵产生的粗酶液经过硫酸铵沉淀、透析除盐后,对其酶学性质进行了初步研究.经测定,SY-3所产β-1,3葡聚糖酶的最适作用温度、pH分别为30 ℃、7.5.通过Lineweaver-Burk做图,得到其米氏常数(Km)为1.21 mg/ml.K+、Na+和Ca2+对酶促反应有促进作用,而Mg2+、Mn2+、Cu2+和Zn2+等有不同程度的抑制作用.     

微波法提取龙须菜琼胶及其理化性质的研究

为探究微波提取法在龙须菜琼胶提取中的提取条件以及对琼胶理化性质的影响,实验以山东威海地区养殖的龙须菜为研究对象,在实验室条件下利用微波提取法进行龙须菜琼胶的提取,重点研究了不同微波功率(160、480和800 W)和微波时间(2、4、6、8和10 min)对龙须菜出胶率、琼胶凝胶强度、硫酸基含量、3,6-内醚-L-半乳糖含量、凝固温度和熔化温度等理化性质的影响。结果显示,微波法提取琼胶的最佳条件为料液比1∶60(W/V),微波功率480 W、微波时间6 min,在此条件下出胶率为16.20%,凝胶强度为1003.6 g/cm~2。微波功率和微波时间对琼胶理化性质影响显著,随着功率的提高和时间的增加,龙须菜出胶率和凝胶强度均呈倒U型曲线关系变化,且在最佳提取条件下有最大值;3,6-内醚-L-半乳糖含量先增加后减少,而硫酸基含量则一直减少,且在一定范围内硫酸基含量和3,6-内醚-L-半乳糖含量呈负相关关系;凝固温度和熔化温度均呈现先上升后下降的趋势,在微波功率480 W的条件下提取6 min,二者出现最大值,分别为30.0和97.4°C。研究表明,微波功率及时间是龙须菜琼胶微波法提取的重要因素,且对琼胶理化性质具有显著的影响。     

褐藻酸降解菌的筛选及其生长条件

采用安藤芳明选择性培养基从自然发病明显的海带幼苗上分离出8株褐藻酸降解菌。研究表明，8株菌能够不同程度地降解褐藻酸钠，菌株A1和A2表现出较强的降解能力，接种1d后液体培养基即变清。温度是该菌大量繁殖的决定性因子，其生长的最适温度为20℃，最适pH7.5。褐藻酸钠质量分数为0.5％-0.6％时，不同氮源和碳源对菌体生长的影响不同，其中有机氮和铵态氮有利于菌体生长，尿素和硝酸钠抑制菌体生长；只有在培养基中含有褐藻酸钠时，菌体才能正常生长。     

虾池有机污染物降解细菌的筛选

在实验室条件下对612株海洋细菌和10株海水驯化淡水菌进行筛选,检测其快速降解水体中富营养有机物的能力。利用对虾饵料培养基、BOD仪、胞外酶检测等方法进行筛选,最后筛选到10株对富营养有机物具有 较高降解性能的细菌。所有的细菌均能产生明胶酶和脂酶（Tween-80),其中9株细菌能产生淀粉酶,8株产生卵磷脂酶,2株产生酪蛋白酶,1株产生褐藻胶酶。通过测量BOD来衡量10株细菌利用对虾饵料的效果,2天时能消化46.6%-59.5%的对虾饵料,5天时能消化50.8%-70.2%的对虾饵料。用常规生理生化方法将细菌鉴定到属,其中3株为弧菌属细菌（Vibrio spp.),3株为假单胞菌属细菌（Pseudomonas spp.),2株为发光杆菌属细菌（Photobacterium spp.),1株为气单胞菌属细菌（Aeromonas spp.),1株为枯草杆菌（Bacillus subtilis)。     

一株内循环流水养殖池塘光合细菌的分离鉴定及氮磷去除能力的研究

为提高内循环流水养殖池塘净化区域的净化能力,从重庆潼南区内循环流水养殖池塘的底泥中分离纯化得到一株光合细菌(命名为菌株GR01).通过形态学观察、生理生化鉴定、16S rDNA基因序列分析和扫描吸收光谱,对菌株进行分类鉴定.测定菌株GR01在不同温度、不同pH、不同盐度条件下的660 nm处的吸光度(A660),确定其...     

Body depth variation in crucian carp Carassius carassius: an experimental individual-based study

Abstract –  Induced morphological defences, where individuals develop morphological structures as a response to signals from sympatric predators, are common among invertebrates. Such defences have also been reported in a freshwater fish, the crucian carp Carassius carassius . In crucian carp, the presence of piscivorous fish presumably induces the development of a deep body as a defence mechanism. We tested how the growth rate (in body depth, length and mass) of individually tagged crucian carp responds to pike Esox lucius odours and control water. In general, crucian carp exposed to pike odour grew better (both in length and mass) than control fish. The treatment crucian carp also developed deeper bodies than control crucian carp. Further, there was a strong positive relationship between individual growth rate and the rate of change in body depth and this relationship did not differ between control and treatment fish.     

七带石斑鱼繁殖群体“突眼”症病原菌的分离与鉴定

2007~2008年间,对暴发"突眼"症的七带石斑鱼繁育群体,从细菌学、寄生虫学和病毒学等方面进行了全面的筛查和实验研究。从具有明显"突眼"症的七带石斑鱼病灶组织中分离出1株致病力极强的优势菌CB1008,经人工感染试验证实为此次七带石斑鱼"突眼"症的致病菌。该菌革兰氏染色呈阴性,电镜下观察菌体呈短杆状,极生单鞭毛。通过API-32E鉴定系统和菌体常规形态特征、培养特性和生理生化反应指标测定,以及16S rDNA测序分析等综合鉴定,菌株CB1008为弧菌属哈维氏弧菌Vibrio harveyi。药敏试验结果表明,该菌株对氯霉素、萘啶酸、四环素、氟哌酸和氟罗沙星等5种药物较为敏感。     

近江牡蛎肠道厌氧菌及其产酶能力的研究

为了解近江牡蛎肠道厌氧菌在食饵消化过程中的作用，为微生态饲用添加剂的开发研究打下基础，从近江牡蛎肠道中分离出8株厌氧菌，其中有5株为革兰氏阳性菌。并研究了它们蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶、纤维素酶的产酶能力，结果表明仅有3株菌具有产酶能力：2株菌能分泌脂肪酶，1株菌能分泌蛋白酶。由此可见．厌氧菌在分泌消化酶、消化食饵中所起的作用不大。     

浅海养殖环境复合生态净化菌群的筛选及其净化功能

本研究由浅海网箱区富营养沉积物经多步富集和筛选获得高效复合生态净化菌群,对浅海养殖区的有机物、氨氮和亚硝酸氮有明显去除效果.研究了不同条件对复合菌液去除养殖水体中氨氮、亚硝酸氮和有机物能力的影响,并确定了最佳净化条件.结果表明,复合菌添加量、葡萄糖添加量,处理时间、温度、pH和盐度对复合菌的去除效果均有影响,实验条件确定为复合菌的添加量为3%、处理时间为4 d、温度为30±2 ℃、pH值为8.1±0.2、葡萄糖添加量为2 g/L和盐度为(30±10) g/L 时,去除效果达到最佳,此时氨氮、亚硝酸氮和溶解有机物的去除率可分别达到79.1%、85.2%和88.7%.     

Identification of gut‐associated amylase,cellulase and protease‐producing bacteria in three species of Indian major carps

Isolation and enumeration of amylase, cellulase and protease‐producing autochthonous bacteria in the proximal intestine (PI) and distal intestine (DI) of three species of Indian major carps, catla (Catla catla), mrigal (Cirrhinus mrigala) and rohu (Labeo rohita), were investigated using the conventional culture‐based technique. Population levels of amylolytic strains were the highest in the PI of catla and the lowest in the DI of rohu. The highest viable count of cellulase and protease‐producing bacteria was recorded in the DI and PI of mrigal respectively. Among the bacteria isolated, 10 strains (five from PI and five from DI) were selected as potent enzyme producers according to a quantitative enzyme assay. The chosen strains were further identified by 16S rRNA gene sequence analysis. The five strains isolated from catla showed high similarity to Citrobacter sp. clone W2, Enterobacter sp. JA24, Bacillus coagulans strain TR, uncultured bacterial clone Hel3bc04 and Bacillus cereus strain UST2006‐BC004. The four strains isolated from mrigal were most closely related to Bacillus sp. KCd2, uncultured bacterial clone Hel3bd09, B. cereus strain BU040901‐020 and Citrobacter freundii strain YRL11, while the strain isolated from rohu probably belonged to Bacillus sp. GV.     

22味中草药对创伤弧菌和灿烂弧菌体外抑菌作用筛选

研究了22 味中草药对创伤弧菌(Vibrio vulnificus)和灿烂弧菌(V. splendidus)的体外抑菌作用.结果显示,22味中草药对其均有不同程度的抑制作用;其中,黄连和连翘对创伤弧菌的抑菌和杀菌效果最好,最小抑菌浓度分别为0.49 mg/mL和 1.95 mg/mL,最小杀菌浓度与最小抑菌浓度相同;黄连、黄芩、连翘和黄柏对灿烂弧菌的抑菌和杀菌效果较好,最小抑菌浓度分别为0.98、1.95、1.95和3.90 mg/mL,最小杀菌浓度分别为0.98、1.95、1.95和7.81 mg/mL.