马铃薯块茎总RNA提取方法比较

以马铃薯普通栽培品种“米拉”块茎为材料,对Trizol法、改良Trizol法、Logeman法和改良异硫氰酸胍法提取的总RNA进行比较与分析.结果显示,Trizol法提取的总RNA含有轻微蛋白质污染,经过改良后可完全除去,但成本高适合小量快速提取;Logeman法和改良异硫氰酸胍法均可提取得到高质量的RNA,而且成本较低适合大量提取.     

两种马铃薯块茎总RNA提取方法的比较

以马铃薯普通栽培品种"大西洋"的试管薯为材料,针对马铃薯块茎富含多糖和酚类化合物的特点,分别采用Chan法和Trizol法提取马铃薯块茎总RNA。结果表明,Chan法比Trizol法更适宜提取马铃薯块茎总RNA,该法提取的总RNA的28S、18S和5S rRNA条带清晰可见,无降解现象,未被蛋白质、多糖、酚类物质以及残余试剂所污染,且通过RT-PCR技术可以成功扩增出马铃薯腺苷二磷酸葡萄糖焦磷酸化酶AGPase小亚基基因。     

辣椒叶片总RNA提取与质量分析

用3种不同方法提取辣椒叶片的总RNA,研究辣椒叶龄和基因型对总RNA提取的影响和筛选辣椒总RNA提取的最佳方法.结果表明,方法2为辣椒叶片总RNA提取的最佳方法;从新叶中提取的总RNA的亮度高,完整性最好,中龄叶次之,老叶最差;辣椒材料0860-1总RNA的28 S和18 S条带明亮,质量浓度最高,材料0876和08122的这些条带较暗,质量浓度低.     

栽培燕麦叶片总RNA提取与质量分析

为筛选出适合栽培燕麦叶片RNA提取方法,本试验利用三种方法提取两种栽培燕麦材料的总RNA。研究结果表明,方法一提取的总RNA经非变性琼脂糖凝胶电泳检测,28S和18S条带清晰,28S条带的亮度约是18S条带的2倍。紫外分光光度计分析显示OD260／OD230和OD260／OD280比值约为2．3和1．9,RNA质量较好,产率较高;并且该方法在两种栽培燕麦间的RNA提取效果稳定,使用范围比较广,是提取栽培燕麦总RNA较为理想的方法。     

马铃薯试管苗总RNA的提取及质量分析

以抗旱马铃薯品系H154的试管苗为材料,采用液氮研磨,用Trizol试剂提取马铃薯总RNA,并进行分析,电泳检测得到多条清晰的谱带,且28 S和18 S条带的亮度比例接近2∶1;OD260/OD280平均值为1.91,浓度平均值为4.65μg/μL。结果表明,总RNA完整性强、纯度高、含量高,为进行马铃薯抗旱相关基因的克隆和分析奠定了一定的研究基础。     

观赏山梨叶片总RNA的提取及质量分析

为了从富含多糖和多酚等物质的观赏山梨幼叶中提取和分离出高质量的RNA,利用Trizol法、改良的Trizol法、异硫氰酸胍法、硼砂-CTAB法和硼砂-SDS法提取观赏山梨叶片总RNA。通过RNA产率、纯度、电泳图谱和RT-PCR结果等分析来确立适用于观赏山梨RNA分离的方法。结果表明,硼砂-SDS法提取的RNA呈现出28S rRNA,18S rRNA和5S rRNA三条较清晰的条带,RNA的得率和纯度均较高、很少有降解。RT-PCR结果进一步证实了硼砂-SDS法提取的观赏山梨叶片总RNA可用于分子生物学的下游试验。此方法简便易行,成本也较低,适合于富含多糖、多酚植物材料RNA的提取。另外4种方法获得的RNA得率、纯度较低,降解严重,有较多小分子和盐存在,因此不适合用于观赏山梨总RNA的提取。     

棉花总RNA的快速提取方法

介绍了一种适合于棉花各种组织的RNA提取方法。它具有简便、快速等特点，且所提取的RNA样品质量较高，可直接用于cDNA合成、RNA dut blot等分子生物学操作。     

非洲菊不同组织总RNA提取

以非洲菊为材料,采用Trizol试剂法、改良的异硫氰酸胍法、CTAB法和尿素—氯化锂法,提取非洲菊的花、花蕾、叶、花梗和根的总RNA。所得RNA经1%琼脂糖凝胶电泳以及紫外分光光度计分析,结果表明Trizol法和改良的异硫氰酸胍法适用于花和根组织,尿素-氯化锂法对花蕾和叶组织RNA有较好的提取效果,而花梗组织RNA最好采用CTAB法。     

3种商品化Trizol试剂提取高质量马铃薯块茎总RNA的比较

针对马铃薯块茎含有多糖多酚的特点,选用3种快捷的商品化提取试剂提取马铃薯块茎总RNA.结果表明:3种商品化试剂均可不同程度的提取马铃薯块茎总RNA,提取的总RNA的28S、18S和5SrRNA条带清晰可见,但纯度和浓度存在较大差异;其中用Trizol裂解加柱吸附法提取的马铃薯块茎总RNA纯度较高,但浓度较低,经SMART PCR和LD-PCR检测可扩增出马铃薯块茎腺苷葡萄糖磷酸化酶小亚基(sAGP)基因和全长双链cDNA,可用于后续分子生物学试验.     

白菜总RNA的高效提取方法及常见问题分析

[目的]建立从白菜叶片组织中快速提取高质量RNA的方法,为进行LD—PCR、AnP、SRAP及其他分子生物学试验奠定基础。[方法]通过增加高速离心时间,用3％H2O2处理试验器皿等措施对Trizol试剂法进行优化,建立了一种简单、快捷、经济、高效的RNA提取方法。[结果]在1．5h左右可得到高质量的总RNA,经琼脂糖凝胶电泳、蛋白核酸分析仪检测,提取的总RNA具有清晰的28S、18S、5S3条带,且28S的宽度是18S的2倍左右,0D260／DD280比值为1．90—2．16。进一步以提取的总RNA为模板成功进行了单链cDNA的合成和LD—PCR。[结论]改良的Trizol试剂法所提取的RNA纯度和完整度极高,可用于LD—PCR、SRAP、基因克隆及表达分析等后续分子生物学试验。     

正交试验优化提取壮药马尾千金草生物碱

[目的]优化马尾千金草生物碱的提取条件。[方法]以马尾千金草的总生物碱含量为指标,运用正交试验设计对酸水浓度、料液比、浸提次数3个因素进行考查,优化最佳提取工艺。[结果]酸水浸泡提取的最佳条件为加入10倍的1%酸水液,浸泡提取3次,每次24 h,生物碱得率为0.0751%,马尾千金草生物碱含量为7.51 mg/g。[结论]该提取方法操作较简单、成本低、生物碱得率高,能有效提取马尾千金草总生物碱。     

草石蚕四倍体与二倍体的品质分析

[目的]分析草石蚕四倍体与二倍体的品质。[方法]对引进的草石蚕二倍体材料进行秋水仙素诱导处理,成功获得草石蚕的四倍体材料,然后将草石蚕二倍体和四倍体材料进行栽培试验,并分析草石蚕的干物质含量、可溶性蛋白质含量和可溶性糖含量3个重要品质指标。[结果]四倍体叶片中干物质含量、可溶性蛋白质含量和可溶性糖含量比二倍体分别增加了43.16%、9.46%和21.74%;而四倍体块茎中干物质含量、可溶性蛋白质含量和可溶性糖含量比二倍体分别增加了13.12%、21.89%和7.47%。[结论]四倍体的营养成分要比二倍体高,在经济价值上比二倍体更优越。     

陕西省地灵花叶病害的鉴定

利用寄主鉴定、介体鉴定、电镜观察和生理性病害鉴定等方法,对陕西省地灵花叶病害进行了系统 研究。结果表明,陕西地灵花叶病害不是由病原微生物引起的,而是由环境条件的改变引起的。     

重庆市药用植物草石蚕产业栽培现状分析

重庆市地处西南,生态条件适宜草石蚕生长。从重庆市草石蚕的生物学特性、总体栽培情况、栽培面积与分布、栽培方法与产量等方面进行论述,旨在为草石蚕栽培提供有价值的参考。     

草石蚕扦插繁殖技术研究

[目的]为草石蚕的科学栽培提供依据。[方法]分别在5月20日和10月15日取草石蚕绿苗期的幼嫩枝条进行扦插育苗,观察幼苗生根和生长情况并计算成活率及繁殖系数,寻找其扦插繁殖的最佳环境条件。[结果]在春季,草石蚕的扦插苗在20d后即可生根,生根率达95%,生根后成活率为100%,而繁殖系数达到23.75。而秋季扦插苗的生根率只有10%左右,繁殖系数为2.5。春季扦插苗在整个生育过程中生长良好,能正常越冬,次年正常萌发。[结论]草石蚕的扦插繁殖以春季(5月20日左右)为宜。     

扬子毛茛中总黄酮含量的测定

为了解扬子毛茛全草中的总黄酮含量,以槲皮素为对照品,采用盐酸-镁粉反应比色法测定其总黄酮含量.结果表明,样品中总黄酮在浓度0.006 25～0.037 5 mg/mL时与吸光度呈良好线性关系,样品中总黄酮平均含量为12.31 mg/g.回归方程为y＝1.175 0x+0.007 9(r=0.999 7),回收率为100.03%,RSD＝0.89%(n=5).说明,该方法准确,简便,可用于扬子毛茛中总黄酮的含量测定.     

三肽囊素(Bursin)同功单链抗体(ScFv)的构建研究——Ⅰ.鸡脾脏组织细胞总RNA提取方法研究

分离纯净、完整的细胞总RNA对于分子克隆的实验十分重要，但自然界中RNA酶广泛存在且稳定性很高，RNA极易被RNA酶污染而降解。快速提取RNA可以减少RNA酶污染的机会而成为RNA提取的首选方法。选用3种快速RNA提取法(方法Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)，发现方法Ⅲ最好，电泳可见3个RNA条带清晰无降解，纯度也最高；方法Ⅱ较差，虽然操作时间最短，但却易降解，而且电泳时多出一条明显的DNA条带；方法Ⅰ也能提取到较好的RNA，但纯度不如方法Ⅲ。     

脏器RNA提取方法的改进

以猪脏器为材料,应用TRIpure Reagent总RNA提取试剂盒提取脏器总RNA,发现直接按照试剂盒说明书操作提取的RNA效果不理想。通过反复试验,改进了提取过程中的部分操作步骤。结果表明:改进后与改进前相比,提取RNA的纯度和得率在0.01水平上有差异;改进后提取的RNA经RT-PCR扩增猪"βactin基因,电泳结果显示,扩增条带清晰、特异,说明提取的RNA完全满足后续分子生物学试验的要求。