兴义鸭MEF2A基因mRNA在组织中表达研究

运用RT-PCR和qRT-PCR对兴义鸭NEF2A基因在不同组织中的表达量进行探究。结果表明,心、肝、肺、肾、十二指肠、大脑、胸肌、腿肌、肌胃、腺胃共10个组织中均检测到了MEF2A基因mRNA的表达,说明该基因属于广谱表达基因;同时,还发现该基因呈依赖性组织表达,大脑中的表达量最高,消化器官中表达量相对最低,如肌胃和腺胃。研究结果为兴义鸭组织表达谱构建奠定了基础。     

鸭CD36基因多态与血清生化指标及肉质的关联分析

本研究旨在筛查鸭CD6基因CDS区的SNPs位点及其与血清生化指标和肉质的关联性:随机抽取同日出雏、健康无病、同等管理条件下饲喂10周龄的100只樱桃谷鸭、133只三穗鸭和51只兴义鸭,屠宰采血,测定血清生化指标和肉质,提取DNA,以PCR-SSCP结合直接测序法筛查CD36基因的SNPs位点,分析其与血清生化指标及肉质的关联性。结果表明:仅在樱桃谷鸭CD36基因外显子9中检测到1个SNP位点(g.476593 TC),表现为3种基因型MM、MN、NN,其中优势基因型MM、优势等位基因M的频率分别为0.453和0.643,位点杂合性较高(H=0.459),呈中度多态(0.25PIC0.5),基因型分布严重偏离Hardy-Weinberg平衡(x~2=65.41),在三穗鸭和兴义鸭中未检测到SNPs;进行关联分析发现,突变基因型NN群体除甘油三酯外所有被测血清生化指标均显著高于野生型MM群体(P0.05),NN基因型群体肌内脂肪显著低于MM型群体(P0.05),故推测g.476593 TC突变可能会影响CD36基因的表达活性,使得脂质分解代谢加强,这对今后选育优质低脂肪鸭品种具有重要意义。本研究首次研究了鸭CD36与血清生化指标和肉质的关联性,对今后家禽CD36基因的研究提供重要的参考依据。     

兴义鸭肌肉生长抑制素基因多态性与屠宰性状的相关性分析

为了解兴义鸭肌肉生长抑制素(myostatin,MSTN)基因SNPs与屠宰性状的相关性,本研究采用基因克隆及PCR产物直接测序的方法,将MSTN基因作为鸭屠宰性状的候选基因,对兴义鸭的MSTN基因外显子进行多态性检测.结果表明,在60个兴义鸭个体中筛选出8个SNPs,其中,第1外显子有5个突变位点:SNP1(G77A)、SNP2(A91G)、SNP3(G130A)、SNP4(C325T)和SNP5(C331T);在第2外显子中并未发现突变位点;第3外显子有3个突变位点:SNP6(C206T)、SNP7(A235G)和SNP8(C256A);对这8个SNPs与屠宰性状进行关联性分析,结果并未达到显著水平(P>0.05).本研究结果可丰富MSTN基因的研究数据,为鸭的育种提供参考.     

新型鸭肝炎病毒感染雏鸭血液生化指标的动态变化

用新型鸭肝炎病毒人工感染9日龄健康樱桃谷雏鸭。对感染雏鸭的临床症状、病理变化进行观察。并测定了感染雏鸭在接种后12、24、48、96、168h和14d时血糖、谷草转氨酶、谷丙转氨酶等13项血液生化指标。结果表明：血清葡萄糖含量（Glu）、总蛋白（TP）、白蛋白（ALB）、球蛋白（GLB）均降低。仅总蛋白在接毒后24h有一过性升高；血清谷草转氨酶（AST／GOT）、谷丙转氨酶（ALT／GPT）的活性升高；胆碱酯酶（CHE）仅在接毒后12h明显升高。碱性磷酸酶（ALP）在接毒后12、24和96h表现出明显变化，其中接毒后12h和96h呈降低状态。接毒后24h升高。血清尿酸（UA）的浓度在接毒后168h降至最低值。以后便恢复正常。血清肌酐（CRE）的含量在接毒后12h降低。随后在24h升高。其他时间无变化。血清钙（Ca）、磷（P）变化无明显规律。血清α-淀粉酶（α-Amylase）活性在整个试验期间无明显变化。说明新型鸭肝炎病毒感染雏鸭血清葡萄糖、总蛋白、白蛋白含量和谷丙转氨酶、谷草转氨酶活性的变化规律与患1型鸭肝炎雏鸭的变化规律相一致。     

马生长激素基因多态性与体尺指标之间的关联性分析

为研究广西德保矮马、百色马和新疆伊犁马的生长激素(GH)基因多态性与体尺指标之间的相关性,本实验利用PCR-SSCP技术分析3个品种277匹马GH基因5′侧翼区、第3外显子、第4外显子、第5外显子的遗传多态性。结果表明:只有GH基因第5外显子出现多态性,表现为AA、BB和AB 3种基因型,其他片段未发现多态性。群体遗传学分析表明,等位基因A和B的基因频率相等;Hardy-Weinberg平衡检验显示,3个品种马均处于非平衡状态;它们的多态信息含量均为中度多态。统计分析表明,GH基因第5外显子的基因型与3个品种马体尺指标之间无显著相关性。     

岩羊血清生化指标的测定

对青海省１３只岩羊的１２项血清生化指标进行了测定。结果：①岩羊的血清钠特别高，为２１７．３３ｍｍｏｌ／Ｌ，其它指标与家养的山羊和绵羊大致相同；②野生岩羊的ＧＯＴ非常显著地高于动物园岩羊（Ｐ〈０．０１），血清氯显著低于动物园岩羊（Ｐ〈０．０５）。     

兴义矮脚鸡GH基因的多态性研究

兴义矮脚鸡为贵州特有的地方品种鸡.本研究对兴义矮脚鸡GH基因上第一外显子和部分第一内含子序列直接测序进行多态性分析.结果表明,在扩增出来的777 bp序列中,A、T、G、C碱基的平均含量分别为28.1%、23.9%、24.9%和23.1%.A+T的含量(52%)略高于G+C的含量(48%);总共发现10个变异位点,占分析位点总数的1.287%,这些变异位点分别为C124T、T319G、T321C、G333A、A364G、A464C、A507C、C508A、T541C和T630C,其中C124T突变点位于5'端调控区,其余突变点都集中在第一内含子上,均为转换,表现较高的转换偏向.     

雏鸭人工感染鸭肝炎病毒后血液生化指标的测定

用Ⅰ型鸭肝炎病毒人工感染3日龄健康金定鸭,对接种后48 h后血清中血糖、谷丙转氨酶、谷草转氨酶等9项血液生化指标进行测定。结果显示,谷丙转氨酶含量较对照组极显著升高(P＜0.01);尿素氮含量显著升高(P＜0.05);葡萄糖、IgG含量与对照组相比有一定量的下降,但差异不显著(P＞0.05);谷草转氨酶、甘油三酯、尿酸、IgA和IgM含量在发病时略微升高(P＞0.05)。上述结果提示,雏鸭感染鸭病毒性肝炎后,肝脏和肾脏受到不同程度的损伤。     

5个鸭品种MyoD基因外显子1的多态性及其与屠宰性状的关联分析

本实验采用PCR-SSCP方法研究了5个鸭品种(奥白星分割型肉鸭、北京鸭、金丽鸭、樱桃谷鸭SM3型、奥白星76型肉鸭)共148个个体MyoD基因外显子1的多态性,并分析基因位点多态性与鸭屠宰性状的相关性。结果表明:有1对引物检测到多态,在外显子1编码区内检测到1个突变位点C 201G,该位点C→G的突变引起组氨酸/谷氨酰胺的改变;检测到M M、M N 2种基因型,M M型为优势基因型,但5个群体均处于Hardy-Weinberg平衡状态;不同基因型对鸭的腿肌率性状的影响差异极显著(P<0.01),5个品种鸭M N型个体的腿肌生长速度相对M M型个体更为迅速,表明M N基因型可作为腿肌选择的分子标记。     

雏鸭人工感染鸭肝炎病毒后血液生化指标的变化

鸭病毒性肝炎是由鸭肝炎病毒引起雏鸭的一种高死亡率传染病。为探究该病的致病机理,本实验用患鸭病毒性肝炎死亡的鸭肝脏制成病毒组织液,并用该组织液人工感染3日龄健康雏鸭。对感染雏鸭的临床症状、发病情况进行观察,并测定了部分健康雏鸭和濒临死亡时的感染雏鸭的血糖、谷草转氨酶、谷丙转氨酶等13项血液生化指标。结果表明：血液葡萄糖、血液淀粉酶、胆碱脂酶含量在病发后显著下降;谷草转氨酶、谷丙转氨酶、肌酐、尿酸、碱性磷酸酶的含量显著升高;总蛋白、白蛋白、球蛋白含量在病发时略微下降。上述的试验结果提示：雏鸭患鸭病毒性肝炎后肝脏受损最明显,同时胰腺、肾脏也受损严重。     

樱桃谷鸭SREBP1基因变异对脂肪含量及血清生化指标的关联性研究

SREBP1基因在畜禽脂肪沉积过程中起着重要的调控作用,为探究SREBP1基因变异对鸭脂肪含量及血清生化指标的遗传效应,本研究选取10周龄的樱桃谷鸭100只(♂58,♀42)为研究对象,利用DNA直接测序法检测基因的SNP_S位点,一般线性模型分析基因变异与脂肪含量及血清生化指标的关联性。结果表明:在樱桃谷鸭SREBP1基因CDS区第999位碱基发生C/G突变,导致第333个密码子CTC转变成CTG,编码的亮氨酸(L)没有发生改变;第1 124位碱基发生A/G突变,导致第375个密码子GAC转变成GGC,编码的天冬氨酸(D)改变成甘氨酸(G);2个SNPs位点共产生6种基因型:AA、AB、BB、BC、CC、AC,3个等位基因A、B、C,等位基因A为优势等位基因,其频率为0.42,杂合度和多态信息含量分别为0.66和0.58,属于高度多态,χ~2检验表明,樱桃谷鸭群体中该多态座位基因型分布处于Hardy-Weinberg平衡状态(P0.05)。关联分析显示, BB基因型的甘油三酯和肌内脂肪含量最高,显著高于其他5种基因型(P0.05)。结果揭示BB基因型是脂肪沉积的有利基因型,等位基因B是有利等位基因,可用于选择高脂的樱桃谷鸭品系。     

硬脂酰辅酶A去饱和酶-1基因表达及其与鸭肉质和血清生化指标的相关性分析

试验分别在基础日粮中添加含4%亚油酸和4%二十碳五烯酸(EPA)对樱桃谷鸭进行饲养,检测4、6、8和10周龄樱桃谷鸭硬脂酰辅酶A去饱和酶-1(SCD-1)基因mRNA表达丰度,分析其表达与10周龄鸭肉质和血清生化指标的相关性。实时荧光定量PCR结果显示,亚油酸和二十碳五烯酸均能显著降低各周龄SCD-1基因在鸭肝脏、脂肪和胸肌中的mRNA表达水平(P0.05),说明亚油酸和二十碳五烯酸均具有抑制SCD-1基因转录的功能,亚油酸组鸭SCD-1基因mRNA表达水平与二十碳五烯酸组相比未达到显著差异(P0.05);相关性分析结果显示,鸭SCD-1基因mRNA表达丰度与10周龄鸭血清中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TCHO)、高密度脂蛋白(HDL)和低密度脂蛋白(LDL)呈显著正相关(P0.05),与各常规肉质指标的相关性未达到显著水平(P0.05),表明SCD-1基因在鸭的脂质代谢过程中发挥着重要的调控作用。     

兴义矮脚鸡GH基因的多态性研究

兴义矮脚鸡为贵州特有的地方品种鸡。本研究对兴义矮脚鸡GH基因上第一外显子和部分第一内含子序列直接测序进行多态性分析。结果表明,在扩增出来的777 bp序列中,A、T、G、C碱基的平均含量分别为28.1%、23.9%、24.9%和23.1%。A+T的含量(52%)略高于G+C的含量(48%);总共发现10个变异位点,占分析位点总数的1.287%,这些变异位点分别为C124T、T319G、T321C、G333A、A364G、A464C、A507C、C508A、T541C和T630C,其中C124T突变点位于5′端调控区,其余突变点都集中在第一内含子上,均为转换,表现较高的转换偏向。     

兴义鸭体尺性状及屠宰性能的相关性分析

本研究对10周龄兴义鸭进行体尺性状和屠宰性能测定,并对所测指标进行显著性检验及相关性分析,结果表明,公、母鸭各体尺指标间的差异均达到了显著水平(P<0.05),屠宰指标除瘦肉率显著低于母鸭(P<0.05),腿骨重和肌胃重显著高于母鸭(P<0.05)外,其他指标未达到显著性差异水平(P>0.05);相关分析显示,兴义鸭各体尺指标间的相关性均达到了显著水平(P<0.05),多数屠宰指标间呈现显著相关(P<0.05),其中肺脏与其他指标间的相关性最小;多数体尺性状和屠宰性状间都达到了显著相关水平(P<0.05);胸肌重与胫长、胫围呈显著偏负相关(P<0.05),肌胃重与半潜水长、龙骨长、胫围呈显著偏正相关(P<0.05).以上结果将为兴义鸭今后的研究提供基础数据,为兴义鸭的进一步选育提供重要的理论参考依据.     

鸭催乳素基因外显子5多态性与就巢性状的关联分析

将番鸭不同就巢群体(就巢1月群、就巢2月群、就巢3月群)、番鸭非就巢群和白改鸭群体作为试验材料,采用PCR-SSCP技术研究番鸭不同就巢群体、番鸭非就巢群和白改鸭5个群体250个个体催乳素(PRL)基因第5外显子多态性及其与就巢性状之间的相关性。结果表明:外显子5片段编码区发现3个SNP位点,位于5871bp(G/A)、5926bp(A/G)和6029bp(C/T)处,其中5871bp(G/A)与5926bp(A/G)处氨基酸序列均改变,分别为I→V和R→K。统计多态片段的基因型频率和基因频率,并对5个试验鸭群间基因频率作差异进行显著性分析,番鸭非就巢群体与各就巢群体间差异显著(P<0.05),同时番鸭与白改鸭差异极显著(P<0.01)。     

番鸭CYP7A1基因多态性对肉质和血清生化指标的效应研究

CYP7A1是催化动物肝脏胆固醇转变成胆汁酸的限速酶。本研究采用PCR-SSCP法和DNA直接测序相结合筛查白羽番鸭CYP7A1基因多态性,分析其与肉质和血清生化指标的相关性。结果表明:在CYP7A1基因外显子2检测到沉默突变c.294.AG,产生3种基因型从、AG和GG,AG和A分别为优势基因型和优势等位基因,其频率分别为0.5517和0.6107;在外显子3检测到沉默突变c.759.TA,TT和T分别为优势基因型和优势等位基因,其频率分别为0.6552和0.7931;2个SNP均为中度多态位点,且基因型分布均未偏离Hardy-Weinberg平衡。关联分析显示,c.294.AG突变对肉质和血清生化指标没有产生显著影响;c.759.TA突变对血清总胆固醇、总蛋白和白蛋白有显著效应,A为低血清总胆固醇的有利等位基因,可能作为降低番鸭胆固醇的一个标记性辅助选择位点。     

鸭A-FABP基因内含子1多态性与肌内脂肪和血清甘油三酯含量相关研究

本研究旨在探讨鸭脂肪型脂肪酸结合蛋白(Adipocyte Fatty Acid-Binding Protein,A-FABP)基因部分序列多态与鸭肌内脂肪和血清甘油三酯含量关系。根据鸭A-FABPmRNA序列和鸡A-FABP基因组序列设计1对引物扩增鸭A-FABP基因内含子1序列。同时根据扩增产物设计4对引物,利用PCR-SSCP对鸭A-FABP基因部分序列进行多态性研究并探究序列多态性与鸭肌内脂肪和血清甘油三酯含量的关系。结果表明:克隆序列包含鸭A-FABP基因外显子1、2部分序列和完整的内含子1序列,与鸡A-FABP基因内含子1同源性为75.1%;经SS-CP检测,发现引物P1扩增片段有3处碱基突变,引物P3有6处碱基突变,这些突变分别产生了3种和8种基因型。在P1位点樱桃谷鸭和苏牧麻鸭偏离了Hardy-Weinberg平衡(P0.01),金定鸭基因型分布符合Hardy-Weinberg平衡(P0.05),在P3位点3个群体均符合Hardy-Weinberg平衡(P0.05)。同时,这些基因型在不同群体中分布存在显著或极显著差异(P0.05或P0.01)。最小二乘分析显示,肌内脂肪和血清甘油三酯含量在各群体中有显著差异(P0.05),P1和P3位点各基因型对肌内脂肪含量无显著影响(P0.05),仅在P3位点CD基因型个体血清甘油三酯含量显著高于其他基因型个体(P0.05)。结果提示,鸭A-FABP基因内含子1多态对血清甘油三酯含量有一定影响,但是否影响鸭肌内脂肪沉积,还需进一步研究。     

祁边马鹿血清生化指标的测定

对祁连县养鹿场围栏放牧的３７～４０头马鹿的１２项血清生化指标进行了测定。结果为：Ｋ＾＋５．３５±０．６４ｍｍｏｌ／Ｌ,Ｎａ＾２＋１４０．１９±４．４７ｎｍｏｌ／Ｌ,Ｃａ＾＋＋２．３６±０．１９ｍｍｏｌ／Ｌ,Ｐ２．４５±０．４２ｍｍｏｌ／Ｌ,Ｃｌ＾－１０１．４８±５．５４ｍｍｏｌ／Ｌ,总蛋白８６．２４±５．４９ｇ／Ｌ,白蛋白５５．２０±５．６３ｇ／Ｌ,球蛋白３１．０４±４．５７ｇ／Ｌ,Ａ／Ｇ１．８３     

鸭IFIT5基因(544G>A)多态性与部分免疫指标的关联分析

探索IFIT5基因作为抗性性状的候选标记的可能性,为家禽抗病育种提供一些参考依据。以樱桃谷北京鸭、苏牧麻鸭(樱桃谷鸭×金定鸭)、金定鸭、白羽番鸭为试验材料,利用DNA直接测序技术扫描IFIT5基因单核苷酸多态性(SNP),并分析其与部分免疫指标的关联性。结果表明:仅在IFIT5基因外显子2上检测到一个错义突变(G544A),产生2种等位基因,2种基因型(GG、GA),未发现有AA基因型。经χ2检验,4个鸭群体只有金定鸭和苏牧麻鸭处于Hardy-Weinberg平衡状态。关联分析结果显示:樱桃谷鸭体内H5含量GG型显著高于GA型(P0.05),而Ig M含量GG型显著低于GA型(P0.05),其余免疫指标均无显著差异(P0.05);苏牧麻鸭体内H5含量GG型极显著高于GA型(P0.01),其余免疫指标均无显著差异(P0.05);金定鸭不同基因型各免疫指标均无显著差异(P0.05)。白羽番鸭在+544位点均为GG纯合基因型。由此可以看出,IFIT5(544GA)可作为樱桃谷鸭体内H5含量的候选分子标记。