乳源黄嘌呤脱氢酶和黄嘌呤氧化酶的晶体结构研究概述

在全球范围内,高尿酸血症近年来发病率逐渐提高。黄嘌呤脱氢酶(XDH)、黄嘌呤氧化酶(XO)等是参与痛风发生与发展的关键酶,是开发抗痛风药物的重要靶标。通过抑制嘌呤代谢关键酶活性,可有效降低血浆尿酸水平。本文主要概述了在2.1-分辨率下牛乳来源的二聚XDH的晶体结构及在2.5-分辨率下XO的晶体结构,发现每个分子由一个含两铁硫中心的氨基端20 kDa域、一个中央40 kDa黄素腺嘌呤二核苷酸域和一个85 kDa钼喋呤结合域。此外,对黄嘌呤脱氢酶转化为黄嘌呤氧化酶的主要变化历程进行概述。     

氟中毒对犬血氟及黄嘌呤氧化酶活性的影响

挑选中国地方犬30头,随机分成3组,各组氟的添加水平依次为0(对照)、335(低氟组)、760 mg/kg(高氟组),试验期为70 d,分别在15、30、60、70 d采血,测血中氟离子浓度及黄嘌呤氧化酶(XOD活性。试验结果表明,血氟浓度随摄氟时间的延长而逐渐增大,黄嘌呤氧化酶活性出现先增大后减小的过程。     

水杨酸对大丽花多酚氧化酶的影响

目的探讨如何提高大丽花的抗病性．方法以大丽花为实验材料,使用水杨酸（SA）叶面喷施处理方式,分析在水杨酸处理其植株叶片后,随时间变化,不同浓度的水杨酸对PPO活性的影响,为研究大丽花的抗病性提供实验依据．结果本品种大丽花的PPO最适pH为5．8;SA对大丽花PPO有一定的影响．用低于0．5mmol／L的SA处理后的大丽花,PPO活性无显著影响;1～2mmol／L的SA对PPO活性起促进作用,并且于24h达到高峰;而3mmol／L的SA对PPO活性起明显的抑制作用．而用以上几组浓度的SA处理大丽花后,PPO活性在48～60h之后逐渐恢复到未处理状态．结论外源SA对大丽花进行处理后对PPO活性在一定时间内有诱导作用．     

高良姜不同提取物降尿酸及对黄嘌呤氧化酶抑制作用的实验研究

目的:探讨高良姜不同提取物对高尿酸血症小鼠的影响。方法:分别以高良姜不同提取物(3.12g/kg)、别嘌醇(40mg/kg)、苯溴马隆(20mg/kg)给小鼠灌胃,1次/d,连续8d,在最后一次给药后分别采用腹腔注射氧嗪酸钾(模型A)和次黄嘌呤(模型B)的方法建立两种小鼠急性高尿酸血症模型,检测小鼠血清尿酸(UA)、肝脏黄嘌呤氧化酶活性(XOD)。结果:高良姜水提物、醇提物及挥发油(3.12g/kg)均能显著降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平和XOD活性(P0.05),且高良姜挥发油(3.12g/kg)对尿酸排泄的促进作用最为明显(P0.01),高良姜55%醇提组(3.12g/kg)对尿酸生成的抑制作用最为明显。结论:高良姜水提物、醇提物及挥发油(3.12g/kg)均可通过促进尿酸排泄和抑制尿酸生成来达到减少尿酸的作用。     

钼对小鼠后代醛氧化酶和黄嘌呤氧化酶转录水平的影响

试验选用60只二月龄的清洁级ICR小鼠,随机分成4组,每组10只雌性和5只雄性小白鼠,雌雄分开饲养,饮水中加入不同剂量的钼,分别是空白对照组、低钼组(100 mg.L-1)、中钼组(200 mg.L-1)、高钼组(400mg.L-1),4周后雌雄合笼饲养。产仔后从每组仔鼠中随机雌性小白鼠30只和15只雄性小白鼠按原分组给予不同剂量的钼,8周后,再从每组中随机选取雌性小白鼠10只和5只雄性小白鼠合笼饲养,待其产仔。如此往复,使小鼠繁殖四代。以第三代(F2代)作为研究对象,应用实时荧光定量PCR的方法测定肝脏AOX和XO的转录水平。结果表明,与对照组相比F2代小鼠AOX和XO的转录水平随钼添加剂量的增加呈递增趋势,实验组与对照组差异显著(P<0.05)。可见长期钼暴露可提高小鼠后代AOX和XO的转录水平。     

高蛋白饲粮对肉鸡肾氧化损伤及黄嘌呤氧化酶基因mRNA表达量的影响

【目的】研究高蛋白饲粮对肉鸡肾氧化损伤及黄嘌呤氧化酶（xanthine oxidase,XOD）的影响。【方法】选取120羽20日龄健康白羽肉杂鸡,随机分为4组,每组5个重复,每个重复6羽。对照组饲喂基础饲粮（蛋白质含190 g/kg）,试验组饲喂在基础饲粮中添加豆粕使粗蛋白含量分别达到220,250,280 g/kg的饲粮。试验期为14 d。于试验第0,7和14天,分别从每组随机选取5羽鸡经翅下静脉采血,分离血清,用于肾功能（血清钙（Ca）、肌酐（CREA）、尿素氮（BUN）、尿酸（UA）、血清磷（P）、镁（Mg）含量）、脂质过氧化（血清丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）、羟自由基（·OH）含量和总抗氧力（T-AOC）、谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性）及XOD活性检测。试验结束时,每组选5羽鸡进行解剖,取肾脏组织,用于检测XOD基因mRNA的表达量。【结果】1）与对照组相比,各高蛋白饲粮组肉鸡血清Ca、CREA、BUN、UA含量显著或极显著上升（P＜0.05或P＜0.01）,血清P、Mg含量变化不显著（P＞0.05）。2）与对照组相比,各高蛋白饲粮组肉鸡血清MDA、NO、·OH含量显著或极显著升高（P＜0.05或P＜0.01）,T-AOC、GSH-Px、SOD活性显著或极显著降低（P＜0.05或P＜0.01）。3）与对照组相比,各高蛋白饲粮组XOD活性显著升高（P＜0.05）,肾组织XOD mRNA表达量显著增加（P＜0.05）。【结论】高蛋白饲粮可改变肉鸡肾功能与脂质过氧化,导致血清XOD活性以及肾组织XOD mRNA表达量升高,导致鸡肾脏损伤。     

桉叶提取物抑制黄嘌呤氧化酶活性成分的分离纯化及其动力学研究

为了对尾巨桉属广林9号品种桉叶提取物进行体外抑制黄嘌呤氧化酶（XOD）活性研究,并对其主要活性成分进行分离纯化、结构鉴定及抑制动力学研究。采用高效液相色谱法（HPLC）检测酶反应生成尿酸的量,以甲醇-K2HPO4缓冲液(50mmol/L,pH值7.5)(5：95)为流动相,检测波长为290nm,测定了桉叶的不同溶剂提取物及其萃取组分对XOD活性的抑制作用,确定了最佳提取条件,并采用Diaion HP-20大孔树脂、反相硅胶柱层析法和制备液相色谱仪进行分离纯化。确定桉叶中最高活性单体为鞣花酸、槲皮素-3-O-葡萄糖苷酸和五没食子酰葡萄糖,测得其IC50分别为22.51、32.96、31.75 μg/mL曰并通过酶抑制动力学试验比较了他们的抑制类型和Ki值,得出鞣花酸的Ki值最小、为1.048μg/mL,可知其抑制黄嘌呤氧化酶活性效果在3种活性单体中最优。     

小麦玉米黄质环氧化酶(ZEP)cDNA的克隆及序列分析

应用RT-PCR方法从小麦（Triticum aestivum L．cv．Chinese Spring）中克隆了玉米黄质环氧化酶（zeaxanthin epoxidase。ZEP）cDNA，其长度为1572bp，编码540个氨基酸，包含FAD结合位点区域及中心未知功能区域。聚类分析表明：该eDNA序列及预测的蛋白序列与水稻（Oryza sativa）有很高的同源性。保守引物的了RACERT-PCR实验结果显示出ZEP cDNA的3’末端在普通小麦及广泛应用于小麦染色体工程的小麦族近缘物种及其双二倍体、易位系等材料之间具有多样性。这为研究染色体组的互作对光合作用关键基因的调控奠定了基础。     

铜对牙鲆鳃组织抗氧化酶的影响

在实验室条件下,将牙鲆置于不同浓度的Cu2 溶液中,10 d后测定其鳃组织过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)和超氧化物歧化酶(SOD)的活性。结果表明,随着Cu2 浓度的增高,CAT、SOD、GSH-PX的活性均为低浓度诱导,高浓度抑制。对于低浓度铜的长期暴露,牙鲆鳃中的GST和GSH-PX较CAT和SOD敏感,可考虑作为水生生态系统中铜低浓度长期暴露的一种生物检测指标。     

黄瓜不同抗性品种感染黑星病菌后过氧化物酶和多酚氧化酶的变化

黄瓜不同抗性品种感染黑星病菌后过氧化物酶和多酚氧化酶的变化李保聚＊李凤云（辽宁省农业科学院植物保护研究所,沈阳１１０１６１）ＣｈａｎｇｅｓｉｎＡｃｔｉｖｉｔｉｅｓａｎｄＥｌｅｔｒｏｐｈｒｅｔｉｃＰａｔｅｒｎｓｏｆＰｅｒｏｘｉｄａｓｅａｎｄＰｏｌｙｐｈ...     

满江红多胺氧化酶的抽提与初步纯化

报告了满江红（Azollaimbricata）多胶氧化酶抽提条件与初步纯化的研究结果．以0．1mol／L磷酸缓冲液为介质抽提该酶时的最适pH约为6．5,添加0．10－0．15mol／LNaCl和2％－4％（质量体积比）PVP可改善抽提效果．用硫酸铵沉淀法、PEG－6000沉淀法和丙酮沉淀法分别对酶抽提液进行初步纯化,发现丙酮沉淀法纯化效果最优,用1．2倍（体积比）冷丙酮（－15℃）沉淀时可提纯该酶8．92倍,产率达74．6％．     

钼对小鼠黄嘌呤氧化酶活性的影响

钼是动植物必需的微量元素之一,摄入过多,会引起中毒,导致动植物的各种疾病。为探索长期钼暴露对动物血清中钼酶活性的影响,试验选取雌性小鼠40只和雄性小鼠20只(F_0代),适应5 d后,随机分成4组,将每组10只雌性和5只雄性小鼠雌雄分开饲养,自由采食基础日粮,饮水中加入不同剂量的钼(以Na_2MoO_4·2H_2O形式),分别是对照组(0 mg·L~(-1))、低钼组(100 mg·L~(-1))、中钼组(200 mg·L~(-1))、高钼组(400mg·L~(-1))。4周以后,雌雄合笼养,产仔后从每组仔鼠中随机选出雌性小白鼠30只和雄性小白鼠15只按原分组给予不同剂量的钼,8周后,再从每组中随机选取雌性小白鼠10只和5只雄性小白鼠合笼饲养。待其产仔,如此往复,使小鼠繁殖到第四代(F_3代)。对第三代(F_2代)、第四代(F_3代)小鼠进行眼球采血,采用紫外分光光度计测定血清中黄嘌呤氧化酶的吸光度值,采用SPSS 11.5统计学软件对数据进行统计分析,结果表明,钼暴露F_2代、F_3代小鼠与对照组相比黄嘌呤氧化酶活性显著降低(P0.05),且随钼暴露剂量的提高呈现递减趋势;同等剂量钼暴露下,黄嘌呤氧化酶活性呈现F_3代高于第F_2代的趋势,其中Mo-200组差异显著(P0.05)。     

棉花不同抗、感蚜虫品种的多酚氧化酶同工酶分析

棉花不同抗、感蚜性品种的幼嫩花蕾多酚氧化酶（ＰＰＯ）同工酶分析结果表明，感蚜品种酶带多，但弱带比例大。相反，抗蚜品种酶带少，且多为强带。ａ带（Ｒｆ０．０１）、ｂ带（Ｒｆ０．０８）和ｄ（Ｒｆ０．９６）是各品种共有带，其带的峰值大小与抗蚜性呈正相关。ＵＶＰ扫描分析结果显示，ｃ带（Ｒｆ０．５５）只存在于感蚜品种。本文结果可应用于棉花抗蚜性鉴定及其育种上。     

花生多胺氧化酶的组织化学定位及显微拍摄

报告了花生幼苗（苗龄为６ｄ）中多胺氧化酶的组织化学定位，并就该酶定位研究中的摄影问题提出了几点看法     

渍害对抽苔期油菜抗氧化酶的影响

本试验通过在抽苔期对两个油菜品种进行渍害处理,测定其SOD、POD、CAT的活性,以及MDA的含量,来研究渍害对油菜抗氧化酶的影响。结果表明,随着渍害处理天数的延长,两种油菜均呈现出SOD活性不断上升,POD、CAT活性表现出先增后降的变化,MDA含量呈现出不断上升的趋势。且蓉油11号的抗氧化酶均高于中乐油2号,丙二醛（MDA）的含量低于中乐油2号,说明蓉油11号的抗渍性高于中乐油2号。     

乐果急性、亚急性暴露对大鼠胆碱酯酶及细胞色素氧化酶影响的研究

对6周龄雄性SD大鼠分别单次灌胃给予50%(LD50)的乐果、连续5 d灌胃给予20%(LD50)的乐果,观察给药后至屠宰前大鼠的急性、亚急性毒性反应。采用丁酰硫代胆碱法测定红细胞、血清和脑组织中的胆碱酯酶;采用定量RT-PCR法测定试验大鼠肝脏中细胞色素氧化酶8个亚型的表达量。结果表明:供试大鼠用药后不同时间出现了呕吐、流泪、流涎、震颤等典型的有机磷药物中毒症状。红细胞、血清和脑组织中的胆碱酯酶均明显降低,以试验组和对照组脑组织中胆碱酯酶差异最为显著,急性暴露组大鼠脑组织中的胆碱酯酶降低80.12%,亚急性暴露组大鼠脑组织中的胆碱酯酶降低93.13%,试验组大鼠细胞色素氧化酶中CYP2B1/2亚型的表达量明显增加,为对照组大鼠表达量的4~8倍。     

小麦多酚氧化酶（PPO）活性的SSR标记筛选鉴定与验证

 小麦多酚氧化酶（PPO）活性是引起面条和面团储存期间颜色褐变的主要因素。发掘可应用于籽粒PPO活性辅助选择的分子标记，将有助于小麦面粉颜色性状的遗传改良。本研究选用来自全国不同麦区的203份冬小麦品种，验证SSR（simple sequence repeat）引物Xgwm312的PCR扩增片段大小与籽粒PPO活性的关系。结果表明，198bp扩增片段的有无同籽粒PPO活性大小密切相关，该片段的出现通常意味着籽粒PPO活性较高。Xgwm312可应用于籽粒PPO活性的分子标记辅助育种。     

不同抑制剂对石榴多酚氧化酶的影响

石榴叶片富含多酚物质,为抑制石榴叶片中多酚氧化酶(PPO)活性,以β-巯基乙醇(BME)、聚乙烯吡咯烷酮(PVP)、亚硫酸氢钠(NaHSO3)、四硼酸钠(Na2B4O7)为PPO抑制剂进行研究。结果表明:2%PVP+1%BME对石榴叶片中PPO活性的抑制率为26%,4%PVP+6%BME的抑制率为45%,4%PVP+1%BME+1.5×10-2 mol/L NaHSO3的抑制率为78%,4%PVP+1%BME+1.5×10-2 mol/L Na2B4O7的抑制率达100%。因此,4%PVP+1%BME+1.5×10-2 mol/L Na2B4O7为最佳PPO抑制剂组合。     

氧化应激对离体大鼠小肠上皮细胞的损伤及抗氧化研究

为了探讨氧化应激对动物小肠上皮细胞内抗氧化酶活性、细胞通透性和细胞增值的影响,并进一步研究GSH对离体小肠上皮细胞诱导型氧化损伤的保护作用。通过建立大鼠小肠上皮细胞X/XO体外氧化损伤模型,培养细胞随机分为7组,18个重复:对照组A加入蒸馏水,氧化损伤B、C、D各组加入黄嘌呤X(10μmol/L),并分别加入黄嘌呤氧化酶XO,(10,40,70 U/L),抗氧化E、F、G各组加入X(10μmol/L)和谷胱甘肽GSH(1.5μmol/ml),并分别加入XO(10,40,70U/L),应激培养24 h。研究发现:不同剂量的X/XO均可导致离体大鼠小肠上皮细胞氧化应激的发生。与对照组比较,显著降低了IEC增殖和CAT的活性,明显提高细胞内Ca2+浓度(P<0.05)。低活性XO(10U/L)提高了SOD活性(P>0.05),然而高活性XO(40,70 U/L)显著降低了细胞内SOD的活性(P<0.05),添加谷胱甘肽提高了抗氧化酶的活性和细胞增殖,显著降低了细胞内的Ca2+浓度。