冷暴露下添加盐酸川芎嗪提高小鼠肝脏PGC-1α表达

试验探讨冷暴露条件下添加盐酸川芎嗪对小鼠肝脏产热蛋白PGC-1α的影响。试验选取C57BL/6雄性小鼠40只,预饲一周后,随机分为四组。常温对照组保持在26±2℃环境中饲养,冷暴露组和加药组每天置于4℃人工气候室中冷刺激3 h,加药组小鼠在冷暴露前进行相应的灌胃处理,四周后处死小鼠并采集肝脏组织。采用HE染色法观察肝脏组织是否有损伤;采用油红O染色法观察肝脏组织中脂滴数量;采用IHC法和Western Blot法对肝脏组织中PGC-1α表达量进行检测。结果显示,与对照组相比,添加盐酸川芎嗪后肝脏无损伤,脂滴数增加,PGC-1α的表达量显著提高。综上,冷暴露条件下盐酸川芎嗪可提高PGC-1α的表达量,促进小鼠肝脏产热。     

芒柄花黄素对实验小鼠免疫功能的影响

[目的]研究芒柄花黄素对实验小鼠免疫功能的影响。[方法]取SPF级雄性昆明小鼠40只,随机分为低、中、高剂量芒柄花黄素试验组和对照组,连续注射芒柄花黄素4周后检测各组小鼠巨噬细胞的吞噬功能、小鼠脾细胞凋亡率及转化率、小鼠血清中溶菌酶、IgG、IFN-γ及IL-4的含量。[结果]中、高剂量芒柄花黄素组小鼠巨噬细胞吞噬率及血清溶菌酶含量高于对照组及低剂量组,差异显著(P<0.05)。低、中、高剂量芒柄花黄素组小鼠脾细胞凋亡率低于对照组,差异显著(P<0.05)。中、高剂量组小鼠脾细胞转化率高于低剂量组及对照组,差异显著(P<0.05)。中、高剂量芒柄花黄素组小鼠血清IgG含量高于对照组及低剂量组,差异显著(P<0.05)。低、中、高剂量芒柄花黄素组小鼠血清中IL-4含量高于对照组,差异显著(P<0.05),而小鼠血清中IFN-γ含量在各组间差异不显著(P>0.05)。[结论]芒柄花黄素可以提高小鼠的固有免疫功能,抑制脾细胞凋亡并提高其转化率。     

黑枸杞花青素对C57BL/6小鼠白色脂肪棕色化干预作用研究

目的：观察黑枸杞花青素干预对C57BL/6小鼠白色脂肪棕色化的影响。方法：将21只C57BL/6小鼠随机分为3组,分别为室温组(23℃),冷刺激组(4℃),花青素组(23℃+PC,40mg/kg),冷刺激组小鼠每天早上10：00相应温度干预6 h,室温组与冷刺激组灌胃0.4ml生理盐水,花青素组灌胃0.4ml花青素,连续干预 8 周。试验结束后,通过观察研究前后各组小鼠体重、摄食量、血脂四项的变化以及采用形态学方法观察脂肪细胞形态的变化,蛋白免疫印迹法(Western blot)测定iWAT中 UCP-1、PGC-1α、FABP4和Leptin等因子蛋白水平的变化,结果：花青素可抑制小鼠体重的升高,降低摄食量,减少腹股沟脂肪的重量,花青素亦可降低T-CHO、TG、LDL-C、HDL-C,通过HE染色发现,白色脂肪具有棕色脂肪的特征,脂滴减小,细胞核不在边缘化;扫描电镜显示脂肪组织出现圆形或椭圆形,形状大小不一;western blot检测发现UCP-1、PGC-1α蛋白表达明显增加,FABP4、Leptin蛋白表达显著减小。结论：花青素可显著降低小鼠白色脂肪的堆积,增加产热,诱导白色脂肪棕色化的产生。     

PPAR基因在鹅肥肝形成中的可调节性表达

【目的】为了探讨填饲前和填饲后鹅PPAR的表达规律,测定心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、肌胃、十二指肠、全脑、胸肌、腿肌和腹脂中RT-PCR产物量,分析该基因表达量对肥肝重和腹脂重的影响。【方法】通过测定填饲前和填饲后鹅的各组织中PPAR的RT-PCR产物量,以GAPDH为参考,用Quantity One软件分析吸光值。【结果】填饲前鹅组织中PPAR-α表达量普遍较高;填饲后PPAR-α表达量在肺脏中显著增加,在腹脂中也有表达,在其它组织中表达量均下降。填饲前鹅组织中PPAR-γ表达量在肝脏、脾脏、肺、十二指肠和腹脂中较高,在其它组织中较低,填饲后PPAR-γ表达量在心脏、脾脏、肺、肌胃、肾脏中升高,在腹脂中下降,在其它组织中基本持平。【结论】PPAR的表达具有组织特异性,而且PPAR-α和PPAR-γ变化不一致,这可能与不同组织中PPAR亚型的功能差异性相适应的。     

饲喂埃及三叶草对荷斯坦母牛激素浓度和繁殖性能的影响

为研究在早期妊娠和生育的母牛饲料中添加苜蓿植物三叶草的异黄酮提取物对母牛激素平衡的影响,选取荷斯坦母牛26头,平均分到两组。试验1组饲料中添加三叶草异黄酮,试验2组饲喂玉米青贮饲料。检测两种饲料中的4种异黄酮苷配基含量(染料木素、大豆苷元、鹰嘴豆芽素A和刺芒柄花素)。试验持续约20周(5个月),2周采集1次血液样本以确定母牛的代谢情况。14 d使用双前列腺素F2α(PGF2α)刺激发情,12 h后检测人工授精的发情迹象。在人工授精当天检测血清中雌二醇(E2)和孕酮(P4)浓度,并计算P4与E2比值。试验结果表明,试验1组中异黄酮含量高于试验2组,且异黄酮含量最高是鹰嘴豆素A,最低的为刺芒柄花素。饲料的种类对代谢情况无显著影响(P0.05)。与试验2组相比,试验1组血清中E2、P4显著低于试验2组(P0.05)。在妊娠早期(人工授精后7~21 d),试验2组血清中P4含量增加,而试验1组无显著变化。结果表明,与试验1组相比,试验2组的P4、E2比例极显著增加(P0.001)。饲喂三叶草使荷斯坦母牛受胎率较低(P=0.054),发情比例提高(P=0.062)。因此,在妊娠早期饲喂三叶草明显扰乱荷尔蒙平衡,导致母牛生育率降低。     

蒲公英水提物对小鼠应激性肝损伤的保护作用研究

为探讨蒲公英水提物对猪源性大肠杆菌刺激小鼠肝脏损伤的保护作用,建立实验动物模型,分别设立蒲公英水提物低、中、高剂量组、空白、模型组。试验周期为7d,第8天取血和肝脏,测定各组小鼠肝组织中GSH、SOD活性及血清中炎性细胞因子TNF-α、IL-6、IL-1β、IFN-γ和IL-4的表达量。结果表明:各剂量的蒲公英水提物均能一定程度地提高应激性肝损伤小鼠肝组织中GSH和SOD的活性,降低炎症反应所致血清炎性因子TNF-α、IL-6、IL-1β、IFN-γ和IL-4的表达量。表明蒲公英水提物通过降低血清炎性因子的表达量、升高肝组织GSH和SOD活性以降低炎症反应,提高肝脏抗氧化能力,从而对肝脏起到保护作用。     

反相高效液相色谱法测定红车轴草提取物中异黄酮含量的研究

建立了二极管阵列检测器(DAD)测定红车轴草提取物中大豆黄素、染料木素、刺芒柄花素和鹰嘴豆芽素A的反相高效液相色谱分析方法,结果表明:大豆黄素、染料木素、刺芒柄花素和鹰嘴豆芽素A分别在0.0068～0.027、0.0145～0.058、0.021～0.084、0.008～0.032mg/ml与峰面积呈良好线性关系,加样回收率分别为96.3%、99.2%、100.1%、102.9%,RSD分别为3.7%、4.8%、4.3%、1.6%。该方法准确、快速、稳定、重现性好。     

PGC-1α基因在两种类型鸡骨骼肌间的表达差异

为了检测过氧化物体增殖物激活受体γ辅激活因子1-α(PGC-1α)基因mRNA在鸡骨骼肌组织中的分布以及在速生型隐性白羽鸡和慢生型清远麻鸡品种间的表达差异,采集不同周龄(0、2、4、6、8、10、12)隐性白羽鸡和清远麻鸡的胸肌和腓肠肌组织样,提取总RNA,以β-actin基因为内参基因,进行实时荧光定量PCR。对PGC-1α基因mRNA进行均一化处理,利用荧光阈值(Ct值)计算PGC-1α基因mRNA在不同骨骼肌组织以及速生型和慢生型鸡品种间的表达量。发现PGC-1α基因在鸡骨骼肌组织不同发育阶段广泛表达,在初生时表达量最高,并显著高于其他各周龄的表达量;相同周龄时,慢生型清远麻鸡骨骼肌中PGC-1α表达量大多高于速生型隐性白羽鸡。表明不同类型鸡骨骼肌PGC-1α mRNA表达具有特定的发育模式,并可能与鸡肉品质存在关联。     

BDE-47对小鼠肝肾和脑氧化应激及炎症反应的影响

主要探讨了持续性有机环境污染物2,2′,4,4′-四溴联苯醚(2,2′,4,4′-tetrabromodiphenyl ether,BDE-47)对小鼠肝肾和脑组织氧化应激及炎症反应的毒性效应。将C57BL/6J小鼠分为4组,即对照组小鼠灌胃玉米油,低剂量组、中剂量组和高剂量组为对小鼠分别灌胃10、20、40 mg/kg BDE-47,每天处理1次,4、6、8周后称肝肾和脑组织湿质量并计算脏器系数,测定染毒8周后的小鼠肝肾和脑组织活性氧水平及炎症因子IL-6和TNF-α的表达情况。结果发现,BDE-47可造成肝脏脏器系数增大,肾脏和脑脏器系数减小,BDE-47可促进肝肾和脑组织活性氧堆积,炎症因子IL-6和TNF-α表达增强,这可能是造成这些组织损伤的重要机制。     

染料木素对高脂诱导肥胖小鼠肝脏炎症及脂联素信号通路的影响

【目的】探讨染料木素对高脂饮食导致肥胖小鼠肝脏的治疗作用及其潜在机制。【方法】30只ICR雌性肥胖小鼠随机分为对照组(ND)、高脂组(HFD)和高脂染料木素组(HFD-G),每组各10只。对照组饲以普通饲料,高脂组饲以高脂饲料,高脂染料木素组饲以高脂-染料木素预混料。干预14周后测量小鼠肝脏重量、葡萄糖耐受情况,通过甘油三酯、总胆固醇测定试剂盒检测小鼠血清中甘油三酯(triglyceride,TG)、总胆固醇(total cholesterol,TC)含量;通过油红O染色观察肝脏的组织形态和脂滴沉积情况;qRT-PCR检测肝脏组织中炎症因子肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、脂联素(adiponectin,ADPN)、脂联素受体-1(adiponectin receptor 1,AdipoR1)以及脂联素受体-2(adiponectin receptor 2,AdipoR2)mRNA表达水平;ELISA法检测血清中TNF-α和IL-6的表达。【结果】饲喂14周后,高脂组体重、肝重显著高于对照组(P0.05),血清中的TG、TC含量极显著高于对照组(P0.01),ADPN、AdipoR1及AdipoR2的mRNA表达水平显著低于对照组(P0.05),炎症因子TNF-α、IL-6的mRNA表达水平以及ELISA结果显著高于对照组(P0.05),油红O染色结果显示,高脂组较对照组肝脏的脂质沉积情况显著加重(P0.05);高脂染料木素组体重、肝重显著低于高脂组(P0.05),血清中的TG、TC含量极显著低于高脂组(P0.01),ADPN、AdipoR1及AdipoR2的m RNA表达水平显著高于高脂组(P0.05),炎症因子TNF-α、IL-6的mRNA表达水平以及细胞因子分泌水平显著低于高脂组(P0.05),油红O染色结果显示,高脂染料木素组较高脂组肝脏的脂质沉积情况显著减轻(P0.05)。【结论】染料木素能够显著缓解由高脂饮食引起的肝脏病变,其机制可能是通过提高脂联素表达水平同时抑制肝脏中的炎性因子来实现的。     

异黄酮植物雌激素调控动物神经内分泌及生产性能的研究

本文综述了近10年来关于异黄酮类化合物(芒柄花素和大豆黄酮)对动物(大鼠、猪为主)一些生产性能的影响及神经内分泌参与的研究.建立了芒柄花素的放射免疫方法;经放免受体分析表明,异黄酮植物雌激素可与动物的乳腺、垂体、下丘脑的胞浆雌二醇受体竞争性结合,表现弱的雌激素样作用;诱发血中催乳素、生长激素和IGF-1水平升高,从而促进乳腺发育和泌乳量;使雄性动物血中辜酮水平升高,促使胎儿和产后生长加速;促进小鼠的体液免疫和细胞免疫功能,提高妊娠母猪的特异免疫反应和新生仔猪特异性抗体水平;对雌性动物抑制LH的释放;此外,对反刍动物研究表明,可直接影响瘤胃代谢.并对其神经内分泌机制进行了探讨.     

NRTUAs感染对小鼠的组织荷虫量及脾脏细胞因子转录水平的影响

为进一步研究非增殖型尿嘧啶营养缺陷型弓形虫（NRTUAs）对小鼠的致病性,本研究以NRTUAs和Δku80虫株分别感染小鼠,每日检测各组小鼠的组织荷虫量,并检测感染后1～3d脾脏相关细胞因子的转录水平。结果表明：1)NRTUAs感染的小鼠不能在7d内清除虫体,NRTUAs刺激小鼠脾脏上调IL-12、TNF-α和IL-10的表达,并诱导温和的炎症反应;2）Δku80虫株感染的小鼠在感染后6d内死亡,组织荷虫量平均水平高于NRTUAs感染的小鼠,Δku80虫株刺激小鼠脾脏上调IL-12、TNF-α、IL-1β、IL-6、IFN-γ和IL-10的表达,诱导剧烈的炎症反应而导致小鼠死亡。综上,NRTUAs对小鼠的致病性较低,NRTUAs组织荷虫量平均水平低于Δku80组,诱导机体的炎症反应显著轻于Δku80组,为NRTUAs作为畜禽免疫增强剂的开发提供研究基础。     

贯叶连翘提取物对流感病毒感染小鼠肺中IFN-γ·TNF-α的影响

[目的]研究贯叶连翘提取物(HPE)对流感病毒感染小鼠肺组织中肿瘤坏死因子(TNF-α)、γ-干扰素(IFN-γ)等细胞因子的影响。[方法]以流感病毒滴鼻感染小鼠,分别灌胃给药(贯叶连翘提取物高剂量组100 mg/kg、低剂量组50 mg/kg和病毒唑组10 mg/kg),0.2ml/次,2次/d,5 d后摘眼球放血处死动物,摘出全肺,低温条件下制成肺匀浆,离心后取上清采用双抗体夹心ELISA法观察小鼠治疗前后肺组织中IFN-γ、TNF-α的变化。[结果]与模型对照组相比,贯叶连翘提取物流感病毒感染小鼠肺组织中TNF-α显著降低(P<0.05),IFN-γ极显著升高(P<0.01)。[结论]贯叶连翘提取物对机体抗感染免疫有一定调节作用。     

高脂饲料中添加含硫氨基酸对大菱鲆脂肪代谢的影响

为了探究高脂饲料中添加蛋氨酸、半胱氨酸及牛磺酸对大菱鲆(Scophthalmus maximus)脂肪代谢的影响,在高脂(16%)基础饲料(对照组)中分别添加1.5%的蛋氨酸、半胱氨酸和牛磺酸制成4种等氮等脂饲料。试验选用平均初始体质量为(7.98±0.02)g的大菱鲆幼鱼为研究对象,每组饲料投喂3个重复桶,每桶30尾鱼,在室内流水系统中进行为期56 d的摄食生长试验。结果表明：全鱼和肌肉粗脂肪在各组间没有显著差异。肝脏粗脂肪含量在牛磺酸组最低,显著低于半胱氨酸组。血清甘油三酯和总胆固醇含量在牛磺酸组最高,显著高于其他组。饲料中含硫氨基酸的添加降低了鱼体EPA含量,牛磺酸升高了鱼体C18∶2n-6和C18∶3n-3含量。饲料中含硫氨基酸的添加显著影响了大菱鲆肝脏脂肪代谢基因表达,蛋氨酸升高了脂肪酸从头合成相关基因(FAS)的表达;半胱氨酸升高了甘油酯生成相关基因DGAT1的表达,而牛磺酸降低了脂肪合成相关基因(ACACβ、FAS、SREBP1、PPARα1、PPARγ和LXRα)的表达。生长方面,终末体质量在牛磺酸组显著高于其他各组,但各处理组间成活率、肥满度、肝体比和脏体比均无显著差...     

乙酰乙酸通过抑制Nrf2诱导奶牛乳腺上皮细胞线粒体损伤

为探究乙酰乙酸（Acetoacetic acid,ACAC）是否通过抑制核转录因子NF-E2相关因子2(Nuclear factor E2-reate d factor2,Nrf2)导致奶牛乳腺上皮细胞线粒体损伤。在奶牛乳腺上皮细胞系（MAC-T）中添加0、0.6、1.2或1.8 mmol·L-1ACAC处理24 h;用10μmol·L-1的萝卜硫素（Sulforaphane,SFN）预处理MAC-T 24 h后,加入1.2 mmol·L-1ACAC处理24 h。流式细胞术检测活性氧（Reactive oxygen species,ROS）;采用JC-1染色检测线粒体膜电位变化情况;通过q-PCR测定线粒体氧化磷酸化复合物Ⅰ-Ⅴ（Oxidative phosphorylation complexesⅠ-Ⅴ,COⅠ-Ⅴ）的基因表达情况以及线粒体生物合成调节因子Nrf2、过氧化物酶体增殖体激活受体γ-γ活化剂1-α(Peroxlsome proliferator-activated re ceptor-γ coac tlvator-1α,PGC-1α)、线粒体转录因子A (Mitoc ho...     

水动力转染鸡PPARγ基因在小鼠肝脏中的表达

采用水动力转染技术将含有家鸡PPARγ基因的真核表达质粒、表达该基因siRNA的干扰质粒注射到小鼠体内,并利用RT-PCR方法检测PPARγ基因在小鼠脏器中的表达情况,以建立检测重组质粒瞬时表达和筛选siRNA序列的有效方法。结果表明:注射重组质粒pcDNA3/PPARγ后家鸡PPARγ基因在小鼠的肝脏中高效表达;同时注射重组质粒pcDNA3/PPARγ和表达该基因siRNA序列的干扰质粒pGenesil-1/PPARγshRNA1后,家鸡PPARγ基因在小鼠肝脏中的表达明显地受到抑制。与传统的真核细胞转染技术相比,水动力转染技术具有快速、简单、方便、高效、安全、成本低等优点,可作为外源重组DNA表达的检测和siRNA的筛选等一种有效的方法。     

DHA对C2C12细胞成脂分化过程中相关基因表达的影响

采用胰岛素、地塞米松和3-异丁基-1-甲基黄嘌呤联合诱导C2C12细胞分化为脂肪细胞,诱导分化后加入100 mmol/L二十二碳六烯酸(Docosahexaenoic acid,DHA).DHA处理8d后,收集细胞,提取总RNA,采用实时荧光定量PCR方法检测脂肪分化相关基因PPARγ、C/EBPα和ADD1转录表达水平.结果表明,C2C12细胞成脂分化时添加DHA能显著上调PPARγ、C/EBPα和ADD1基因的表达,并且联合添加维生素E后效果更显著.     

梧桐籽油和罗格列酮对绵羊组织中脂代谢相关酶基因表达的影响

为研究饲粮中添加硬脂酰辅酶A去饱和酶(SCD)的抑制剂(梧桐籽油)和促进剂(罗格列酮)对育肥绵羊背最长肌及皮下脂肪中脂代谢关键调节因子和相关酶mRNA表达量的影响,选用18只平均体重为27.71±2.64kg、生理状况相似的杂交公羊(美利奴♂×小尾寒羊♀)随机分为3组,每组6只,进行单栏饲养(2.0m长×1.2m宽)。对照组(C组)饲喂含4.8%胡麻籽的饲粮,梧桐籽油组(W组)饲喂对照组饲粮+15g/d梧桐籽油,罗格列酮组(L组)饲喂对照组饲粮+8mg/d罗格列酮。试验期50d,其中过渡期10d,预饲期5d,正式试验期为35d。结果表明:1)与对照组相比,W组背最长肌和皮下脂肪中PPAR-γmRNA表达量分别上调了42%和28%,背最长肌中SREBP-1和SCD mRNA表达量分别下降了20%和24%(P0.05);2)与对照组相比,L组背最长肌中PPAR-γ和SREBP-1mRNA表达量均有不同程度的提高,分别提高了93%和35%(P0.05),FAS、LPL和SCD mRNA表达量分别提高了36%、56%和22%(P0.05),L组皮下脂肪中PPAR-γ和FAS mRNA的表达量分别提高了25%和32%(P0.05)。研究表明梧桐籽油可以提高背最长肌及皮下脂肪中PPAR-γmRNA的表达量,降低背最长肌中SREBP-1和SCD mRNA的表达量;罗格列酮可以提高背最长肌中PPAR-γ、SREBP-1、FAS、LPL和SCD mRNA的表达量,提高皮下脂肪中SREBP-1和FAS mRNA的表达量。     

IL-11对小鼠骨骼肌发育和能量代谢相关基因mRNA表达的影响

利用IL-11激活Janus蛋白酪氨酸激酶2(JAK2)/信号转导和转录激活子3(STAT3)信号通路,研究该通路对骨骼肌发育和能量代谢相关基因mRNA表达水平的影响。对雄性健康昆明小白鼠用IL-11连续皮下注射15 d,定期测量体质量和体温,小鼠处死后取腿肌提取总RNA,利用RT-PCR检测JAK2/STAT3信号通路关键因子JAK2和STAT3、骨骼肌发育相关基因成肌分化因子(MyoD)和生肌决定因子(Myf5)及能量代谢相关基因肝X受体(LXRα)和解偶联蛋白3(UCP3)mRNA表达。结果显示:处理组小鼠的体质量和腿部肌肉质量显著高于空白对照组(P0.05);两组小鼠体温均维持在正常浮动范围内。与空白对照组相比,处理组小鼠JAK2和STAT3 mRNA表达量上升(P0.05);骨骼肌发育相关基因MyoD和Myf5 mRNA表达量均上升(P0.05);能量代谢相关基因LXRαmRNA表达量不变(P0.05),UCP3 mRNA表达量上升(P0.05)。表明IL-11激活JAK2/STAT3信号通路后可通过提高骨骼肌发育和能量代谢相关基因的mR-NA表达而调节骨骼肌发育和能量代谢。