近江牡蛎膜分离联产制备多糖多肽及其功能特性研究

为了联产制备近江牡蛎Crassostrea rivularis多肽多糖,提高近江牡蛎高值化利用率,采用不同截留分子量的超滤膜对近江牡蛎酶解液进行分级分离,并将酶解液分成相对分子质量为0～8000(CRRS-A)、8000～200 000(CRRS-B)和200 000(CRRS-C)的3个组分,运用比色法、HPLC、UPLC-Q-Tof-MS/MS、傅立叶红外光谱法分别对3种组分的理化性质、体外抗氧化活性及其基本结构进行了分析。结果表明:CRRS-A组分主要由多肽组成,含量达到(87.26±1.65)%,相对分子量2000,由10种化合物组成,具有较高的体外抗氧化活性,DPPH自由基、羟基自由基清除能力均较高,超氧阴离子清除能力显著高于抗氧化剂还原型谷胱甘肽(GSH),为(116.67±3.22) U/g;CRRS-B组分含有多糖(75.82±0.28)%,还含有己糖醛酸(5.06±0.60)%、甲基戊糖(31.23±1.29)%、硫酸基(23.47±0.70)%、氨基己糖(2.29±0.04)%等糖基,相对分子质量为8300～150 000,为吡喃型多糖化合物,体外抗氧化能力总体优于2,6-二叔丁基-4-甲基苯酚(BHT),劣于抗氧化剂GSH;CRRS-C组分为吡喃型糖蛋白,相对分子质量为66 000～7 152 000,体外抗氧化活性较差。研究表明,膜分离方法能对近江牡蛎多肽及多糖进行有效的分离,且近江牡蛎酶解液分级膜分离组分CRRS-A具有较高的体外抗氧化活性,CRRS-B具有高于BHT的体外抗氧化活性,该结果可为近江牡蛎高值化利用提供理论依据。     

石榴皮多酚组成分析及其抗氧化活性

 【目的】分析和研究石榴皮多酚的组成及其抗氧化活性。【方法】采用HPLC法分析石榴皮多酚提取物的组成及含量;采用体外抗氧化活性法测定多酚的还原能力、超氧阴离子自由基清除能力、羟自由基清除能力、DPPH?自由基清除能力和抗脂质过氧化能力;利用灌胃法研究石榴皮多酚提取物对小白鼠的血液、肝脏和脑组织中抗氧化指标的影响,评价其体内抗氧化活性。【结果】从石榴皮多酚提取物中鉴定出了9种多酚类成分,其中主要成分为安石榴苷,其含量占石榴皮总酚含量的65.75%。体外抗氧化活性试验表明,石榴皮多酚具有较强的还原能力、自由基清除能力和抗脂质过氧化能力。体内试验表明,石榴皮多酚能提高小鼠血液、肝脏及脑组织中 SOD活性和小鼠血液、肝脏中CAT、GSH-Px活性,降低小鼠血液、肝脏及脑组织中MDA含量,表明石榴皮多酚具有提高体内抗氧化酶系统的活性,从而增强机体抗氧化能力。【结论】石榴皮多酚含量丰富,其主要成分为安石榴苷,具有较强的抗氧化生物活性,是具有良好开发前景的天然抗氧化剂和保健食品及生物药品基料。     

添加玉米秸秆对甜菜渣青贮品质和体外消化率的影响

以甜菜渣和玉米秸秆为青贮原料,按照不同质量比(鲜样)混合青贮,分析添加玉米秸秆对甜菜渣青贮饲料化学成分、发酵品质和体外消化率的影响。结果表明:甜菜渣直接青贮其乳酸含量较低(0.67%),乙酸含量较高,为乙酸发酵类型;添加玉米秸秆显著降低了青贮饲料的pH(P0.05),显著提高了青贮饲料的乳酸含量(P0.05),9∶1和8∶2处理组显著降低了氨态氮的生成量(P0.05),其发酵类型均为乳酸发酵型。通过flieg评分体系对不同组合进行评价,其等级均为良好。添加玉米秸秆后除9∶1处理组以外,其他处理均显著降低了青贮饲料粗蛋白含量,提高了中性洗涤纤维和酸性洗涤纤维含量,表明添加玉米秸秆降低了青贮饲料的营养成分;添加玉米秸秆后其体外干物质消化率均显著低于ck(P0.05),除9∶1处理组以外其体外中性洗涤纤维、酸性洗涤纤维和粗蛋白消化率均显著低于ck(P0.05)。综合各项指标,认为甜菜渣和玉米秸秆的最佳混合青贮比例为90%甜菜渣+10%玉米秸秆(9∶1)。     

不同地区紫薯的花青素含量与体外抗氧化活性比较

为研究不同生长环境对紫薯花青素含量和体外抗氧化活性的影响,分别选取同时在我国两大甘薯主产区山东省和湖北省种植的8个紫薯品种(系),测定其干物率、花青素含量和体外抗氧化能力,通过多重比较分析品种(系)和地区之间的差异。结果表明,2地区内参试样品间的干物率、花青素含量、总抗氧化能力和清除1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,简称DPPH)自由基能力的差异均较大;山东地区种植的紫薯品种(系),除龙紫薯4号外,干物率极显著低于湖北地区种植的紫薯品种(系)(P0.01);山东地区种植的紫薯品种(系),除漯紫薯1号外,花青素含量显著或极显著高于湖北地区种植的紫薯品种(系);总抗氧化能力和清除DPPH自由基能力与花青素含量呈极显著正相关关系(P0.01)。     

不同产地霸王花粗多糖的单糖组成及体外抗氧化活性

为明确不同来源霸王花粗多糖(Hylocereus undatus polysaccharides,HUP)的理化性质、单糖组成和体外抗氧化活性,采用水提醇沉法制备HUP,分别以苯酚-硫酸法、考马斯亮蓝法测定HUP的糖和蛋白质含量;柱前衍生化HPLC法分析HUP的单糖组成;以对羟基自由基、超氧阴离子和ABTS的清除作用为指标,评价HUP的体外抗氧化活性。结果表明,12个不同产地的HUP中糖含量为38%～62%,蛋白质含量为1.09%～3.68%;单糖组成上,最多的为半乳糖,其次为阿拉伯糖,最少的为葡萄糖醛酸;HUP具有显著的抗氧化活性,质量浓度为4 mg/mL时,对羟基自由基和ABTS自由基清除率可达到80%,质量浓度为2 mg/mL时,对超氧阴离子自由基清除率可达到80%。研究表明半乳糖和阿拉伯糖在HUP中的比例有望作为其质量控制的指标,HUP具有显著的抗氧化活性,显示其在食品和药品等领域具有良好的开发利用前景。     

树莓多糖组分RPP-6的分离、结构表征及其体外免疫和抗氧化活性研究

旨在对从树莓粗多糖中分离纯化出的树莓多糖组分RPP-6进行结构表征及体外免疫活性和抗氧化活性研究。采用DEAE-Sepharose Fast Flow和Sephadex G-200对树莓粗多糖进行分离纯化。结合高效凝胶渗透色谱法（High-Performance Gel Permeation Chromatography，HPGPC）、傅里叶红外光谱法（Fourier Transform Infrared Spectroscopy，FT-IR）、气相色谱-质谱联用（Gas Chromatography and Mass Spectrometry，GC-MS）和甲基化等方法对RPP-6的结构进行表征。利用小鼠巨噬细胞RAW264.7和自由基清除试验研究RPP-6的体外免疫与抗氧化活性。结果表明，RPP-6是一种酸性杂多糖，由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖、鼠李糖和甘露糖组成，摩尔比为37.8∶30.8∶21.4∶6.0∶3.9 。RPP-6的峰位分子质量为7.645 ku、重均分子质量为7.769 ku、数均分子质量为6.310 ku。RPP-6中存在15种单糖连接方式，其中Araf-(1→、→4,6)-Glcp- (1→、→4)-Galp-(1→和→4)-Xylp-(1→为主要连接方式，含量分别为20.64%、8.59%、24.04%和 16.92%。RPP-6能明显提高小鼠巨噬细胞RAW264.7的活力和吞噬能力，并促进细胞中TNF-α（Tumor Necrosis Factor，TNF）、IL-6（Interleukin-6，IL-6）、IL-1β（Interleukin-1β，IL-1β）和NO（Nitric Oxide，NO）释放。RPP-6对ABTS·⁺具有较高的清除作用，对DPPH·的清除作用不明显。表明RPP-6是一种多支链的均一酸性杂多糖，具有显著的免疫增强活性和一定的抗氧化活性。     

黑豆皮中花青素成分鉴定及细胞内抗氧化活性研究

以黑豆皮为研究材料,分析鉴定黑豆皮中所含花青素的成分及组成,并对纯化所得黑豆皮花青素(Black soybean coats anthocyanins,BSCA)的体内外抗氧化活性进行研究。高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)分析结果表明,BSCA的主要成分是矢车菊素-3-O-葡萄糖苷(C3G),占总样品含量的比例为64%,其含量为10.02 mg/g;所含其他成分分别是飞燕草素葡萄糖苷(D3G)占6.7%,矮牵牛素葡萄糖苷(Pt3G)占3.4%,矢车菊素占20.5%。体外化学方法检测结果表明,BSCA具有较强的DPPH与羟自由基的清除能力。细胞抗氧化活性(Cellular antioxidant activity,CAA)法研究表明,随着BSCA作用浓度的增加,Hep G2细胞内的荧光值降低,其抗氧化性增强,并且BSCA可不同程度的促进SOD,CAT,GSH-Px,GSH指标的升高和MDA含量的减少。MTT检测结果发现,BSCA对3种癌细胞都具有潜在的抗增殖作用,且呈一定的时间-剂量依赖性。可见黑豆皮花青素(BSCA)可作为抗氧化保健产品,对人体起到潜在的保护作用。     

不同干燥方式对金线莲黄酮体外活性影响的研究

采用真空冷冻干燥、恒温鼓风干燥两种方法,开展了其对金线莲黄酮体外抗氧化能力、抑制酪氨酸酶活性、抑制黑色素合成的影响研究。结果表明:两种干燥方式处理金线莲黄酮含量具有显著差异,冷冻干燥有利于提高金线莲黄酮含量和抑制黑色素、酪氨酸酶活性成分的保留,其黄酮含量高达24.55(±0.28)mg/g;体外抗氧化实验显示在0.2～5.0 mg/mL浓度范围内金线莲黄酮的抗氧化能力与浓度成正比,且真空冷冻干燥金线莲黄酮(FDAF)抗氧化能力均显著高于恒温鼓风干燥金线莲黄酮(ADAF),在5 mg/mL时其对DPPH清除率为60.16(±0.005)%,还原力为0.73(±0.015),总抗氧化能力为1.21(±0.006)mmol/mL(Fe2+);对人黑色素瘤A375细胞实验结果显示FDAF对酪氨酸酶活性抑制率显著高于ADAF,但对黑色素合成抑制作用显著低于ADAF,这可能与所含不同黄酮单体有关。两种干燥方式的金线莲干样黄酮提取率、体外抗氧化能力、及其对黑色素合成、酪氨酸酶活性的抑制作用均低于鲜样。研究结果对金线莲在功能食品、化妆品等领域开发应用提供理论依据。     

DON、ZEA联合染毒对体外培养鸡脾脏淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的影响

旨在研究DON、ZEA联合染毒对体外培养鸡脾脏淋巴细胞分泌IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ的影响。DON、ZEA联合染毒剂量为0.012 5μg·mL~(-1)和0.006 25μg·mL~(-1)、0.050μg·mL~(-1)和0.025μg·mL~(-1)、0.2μg·mL~(-1)和0.1μg·mL~(-1)、0.8μg·mL~(-1)和0.4μg·mL~(-1),进行DON、ZEA联合染毒48 h对鸡脾脏淋巴细胞上清液IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ含量及其mRNA表达的影响。结果表明,各染毒组细胞上清液IL-10和IFN-γ蛋白含量,细胞内IL-2、IL-4和IL-10 mRNA水平随毒素剂量的升高而增加(P0.01);各染毒组细胞上清液IL-2和IL-4蛋白含量均随毒素浓度的升高而降低(P0.01);细胞内IFN-γmRNA表达量均随毒素浓度的升高而先升高后降低(P0.01)。DON、ZEA联合染毒导致细胞因子IL-2、IL-4、IL-10和IFN-γ分泌失衡,且呈剂量依赖性;DON、ZEA联合染毒鸡脾淋巴细胞上调或下降促炎性细胞因子的水平;Th1和Th2细胞因子平衡失调,因此造成细胞免疫损伤,从而对细胞产生毒性。     

海参胶原蛋白的提取及其理化性质

胶原蛋白(PSC)是海参蛋白的主要组成,研究其理化性质为海参的进一步利用提供理论基础.以格皮氏海参为原料,采用胃蛋白酶促溶法提取海参胶原蛋白,并通过聚丙烯酰胺凝胶凝胶电泳、氨基酸分析以及傅立叶红外光谱对其理化性质进行研究.结果表明,海参胶原蛋白分子组成为(α1)3,α1的分子量约为150 kD;氨基酸组成以甘氨酸含量最高(6.01％),脯氨酸与羟脯氨酸含量为6.14％,符合水产胶原蛋白特征;傅立叶红外光谱分析结果表明其保持三螺旋结构.     

不同山体红松松籽油脂肪酸组成及抗氧化活性

对孟家岗林场6个山体红松松籽油的基本理化性质、脂肪酸组成和体外抗氧化活性进行研究,并比较它们之间的差异;测定红松松籽油碘值、酸值、皂化值,用气相色谱法测定脂肪酸组成,用1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(1,1-diphenyl-2-picrylhydrazyl,DPPH)实验、超氧阴离子自由基清除实验分析其体外抗氧化能力。结果表明:不同山体红松松籽油的基本特性之间存在显著差异,红松松籽油的碘值为1.45~1.48 g/g(以I2计),酸值为0.53~0.86 mg/g(以KOH计),皂化值为179~181 mg/g(以KOH计)。红松松籽油中的脂肪酸组成以亚油酸质量分数最高,为43.852%~46.577%;其次是油酸,为27.034%~30.363%;α-亚麻酸为13.686%~14.692%。其不饱和脂肪酸质量分数为88.660%~88.303%。6个山体的红松松籽均有较强的抗氧化活性,且随着样品质量浓度增大,清除能力增强。红松松籽油DPPH自由基的IC50为0.054~0.071 g/m L,超氧阴离子自由基IC50为0.061~0.081 g/m L。     

泥鳅多糖抗氧化活性的研究

为研究泥鳅多糖的抗氧化作用,采用生化试验检测泥鳅多糖的体外抗氧化能力。结果表明,泥鳅多糖对羟自由基、超氧阴离子和过氧化氢均具有清除能力,其中对羟自由基和过氧化氢的清除能力较强,最高分别达到73.38%和88.22%。对超氧阴离子的清除能力也达到57.99%,总抗氧化能力达到8.42U·mL~(-1),表明泥鳅多糖具有较强的抗氧化能力。     

猪外周血单核细胞来源的树突状细胞体外诱导培养

为建立猪外周血单核细胞来源的树突状细胞(Mo DC)体外培养模型,从猪外周新鲜血液中分离外周血单核细胞(PBMC),通过贴壁法获得树突状细胞前体细胞,采用重组猪的集落共刺激因子(rp GM-CSF)和白细胞介素4(rp IL-4)双因子诱导及脂多糖(LPS)刺激成熟法,收集不同时间段的细胞,利用扫描电子显微镜观察其形态,流式细胞分析仪检测表面分子表达率及其对FITC-dextran的吞噬能力,混合淋巴细胞反应检测细胞对同种异体T细胞的刺激能力。结果表明,经体外诱导的细胞具有典型的树突状形态;经脂多糖刺激的树突状细胞表型分子CD1a、CD80、CD86、SLAII、CD172a与未经刺激的树突状细胞有明显增高,其吞噬能力有所下降,刺激同种异体T淋巴细胞的能力增强。本研究成功建立了猪Mo DC的体外诱导培养方法,为进一步研究其在机体免疫调节和抗病毒感染中的作用奠定了基础。     

黑莓鲈的含肉率及营养价值评价

对黑莓鲈Pomoxis nigromacufatus含肉率及其营养成分和营养价值进行分析和综合评定。结果表明:黑莓鲈含肉率为(64.23±0.53)%,肌肉中蛋白质、脂肪、水分和灰分的含量分别为15.4%、0.8%、78.69%和1.26%;肌肉中水解氨基酸总量63.94%(以干物质计),其中7种必需氨基酸的含量为26.29%,占总氨基酸的41.12%,必需氨基酸与非必需氨基酸的比值为0.7,其必需氨基酸的构成比例完全符合FAO/WHO评价标准。黑莓鲈的第一限制性氨基酸为缬氨酸,第二限制性氨基酸为(苯丙氨酸+酪氨酸),必需氨基酸指数为79.14;4种鲜味氨基酸总量为25.39%,占氨基酸总量的39.71%;共检出5种脂肪酸,多不饱和脂肪酸总量(PUFA)和二十二碳六烯酸(DHA)含量分别为33.75%和17.5%。研究表明,黑莓鲈肉味鲜美,必需氨基酸含量高、组成均衡,多不饱和脂肪酸和DHA含量较高,具备较高的营养和食用价值,具有良好的开发利用前景。     

橡子壳色素抗氧化活性研究

本研究以常见的抗氧化剂Vc为对照,对橡子壳色素主要成分和体内外抗氧化活性进行了研究分析。结果表明,橡子壳色素中含丰富的多酚类和黄酮类物质,其中总多酚含量达到27.8%,总黄酮含量8.6%。体外抗氧化实验结果表明,橡子壳色素对DPPH·的清除能力和对Fe3+的还原能力均与其质量浓度呈正相关,其中对DPPH·清除率的半数有效剂量(IC₅₀=10 μg/mL)大于Vc组(IC₅₀=5 μg/mL),当橡子壳色素质量浓度在40 μg/mL时达到了Vc的清除能力;当橡子壳色素质量浓度为1 mg/mL时,橡子壳色素还原能力(A_{710 nm}为0.98)接近Vc的还原能力(A_{710 nm}为1.17)。体内抗氧化实验采用对除空白组外的各组实施60Coγ照射进行氧化损伤实验,分析各组的抗氧化能力。结果表明,模型组小鼠体质量和各器官质量与空白组相比显著下降(P＜0.05),并且辐照的各组小鼠都出现了食欲不振、精神萎靡等不良现象,表明氧化应激模型建立成功;橡子壳色素组的小鼠器官质量显著高于模型组(P＜0.05),低于空白组但无显著差异(P＞0.05),该结果表明橡子壳色素对经60Coγ射线照射的小鼠器官有一定的修复作用。实验小鼠血清中的抗氧化性相关酶以及氧化产物的测定结果进一步表明,橡子壳色素低、中、高剂量组均能显著提高小鼠血清中SOD和CAT的活性,并且显著降低MAD含量(P＜0.05),其中100 mg/(kg·d)剂量组橡子壳色素的作用效果最好,与同质量浓度Vc作用效果相当。橡子壳色素具有较好的体内和体外抗氧化活性,并且体内100 mg/(kg·d)剂量的橡子壳色素与同剂量下Vc的抗氧化效果相当,作为天然抗氧剂具有较好的应用前景。      

百香果树莓复合果酒的酿造工艺优化及其体外抗氧化性研究

为生产优质果酒,采用单因素结合响应面的方法,以酒体感官评价为指标开展百香果树莓复合果酒的酿造工艺优化研究并测定其多酚含量,之后通过考查复合果酒对DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基的清除率及其还原力开展百香果树莓复合果酒的体外抗氧化性研究。结果表明：复合果酒的最佳酿造工艺为百香果树莓果浆配比1:2（g·g^-1）、初始糖度22.4 Brix、料水比1:1（g·mL^-1）、发酵温度19 ℃、发酵时间11 d;与同多酚浓度的Vc相比,此果酒具有更高的羟基自由基和超氧阴离子清除能力,DPPH自由基、羟基自由基、超氧阴离子自由基清除率可达87.8%、66.9%和47.4%,还原力可达29.2%。按照优化的工艺酿造的复合果酒酒度为12.3%(vol),多酚含量为353.9 mg·L^-1,呈红宝石色,清澈透明无悬浮物、有典型的百香果和树莓香气、丰满爽口有新鲜感,具有良好的抗氧化性。     

能源草不同部位热解特性研究

为了更合理地利用生物质,本文研究了能源草不同部位(包括能源草秆、叶子、叶柄和全秆)的热解特性。结果发现,能源草不同部位的化学组成存在明显差异,其中能源草秆中纤维素、半纤维素和木质素含量均最高,分别为44.96%、21.48%和21.18%;叶子中半纤维素和木质素含量最低,分别为14.82%和17.02%;叶柄中纤维素的含量最低,为35.15%。这些化学组成的差异导致了其热解行为的不同,特别是第二阶段提取物的热解。而动力学分析结果也发现叶子的活化能最低为72.11k J.mol~(-1).k~(-1),秆的最高为95.02k J.mol~(-1).k~(-1),这些结果暗示能源草不同部位应该有各自最佳的利用方式。     

灵芝菌丝体多糖的提取与抗氧化活性研究

通过DEAE Sephacel柱层析得到灵芝菌丝体多糖M1、M2和M33个组分,其M1组分多糖含量最高(47.19%),其次为M2(31.18%)和M3(11.02%)。体外抗氧化活性试验结果显示:M1对羟基自由基和超氧阴离子自由基的清除能力最强,M2次之,M3最弱。     

白花蛇舌草总黄酮提取工艺及其抗氧化活性研究

研究白花蛇舌草(Hedyotis diffusa Willd)总黄酮的提取工艺及其体外抗氧化活性。以白花蛇舌草总黄酮提取率为评价参数,通过单因素试验、正交试验优化提取工艺;测定了总还原力及Fe2+螯合力、羟自由基和超氧阴离子清除能力研究白花蛇舌草总黄酮的抗氧化活性。结果表明,用95%乙醇与白花蛇舌草粉末按40∶1(m L∶g),在90℃下提取180 min,此时提取率最高,达(2.22±0.01)%。体外抗氧化活性结果显示白花蛇舌草总黄酮具有较强的总还原力,Fe2+螯合率最高为90%,羟自由基和超氧阴离子的清除率分别达79%、77%。白花蛇舌草总黄酮具有显著的体外抗氧化活性,具有进一步开发利用的价值。     

组胺对体外培养犊牛原代瘤胃上皮细胞炎性因子的影响

为探讨组胺对体外原代培养犊牛瘤胃上皮细胞炎性因子表达及含量的影响。体外培养犊牛瘤胃上皮细胞,在不同p H的培养液(p H 5.5和p H 7.2)中添加不同浓度的组胺(0,0.5,2.5,12.5,62.5μmol/L)。运用实时荧光定量PCR和ELISA方法,检测组胺对瘤胃上皮细胞炎性因子白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)m RNA表达及其含量的影响。结果表明:p H 5.5的培养液组,TNF-α、IL-1β和IL-6的m RNA表达水平均显著或极显著高于对照组(P0.05,P0.01);TNF-α、IL-6和IL-1β的含量在2.5,12.5,62.5μmol/L组胺处理组显著高于对照组(P0.05,P0.01)。p H 7.2的培养液组,TNF-α和IL-6 m RNA表达水平在2.5,12.5μmol/L组胺处理组显著高于对照组(P0.05,P0.01),IL-1βm RNA表达水平在2.5,12.5,62.5μmol/L组显著高于对照组(P0.05,P0.01);TNF-α含量在62.5μmol/L组极显著高于对照组(P0.01),IL-6在2.5,12.5,62.5μmol/L组显著高于对照组(P0.05,P0.01),IL-1β在12.5,62.5μmol/L组极显著高于对照组(P0.01)。在组胺各浓度组,TNF-α、IL-6和IL-1βm RNA表达水平在p H5.5条件下均显著高于p H 7.2(P0.05,P0.01),但含量差异不显著。低p H条件下,高浓度组胺能增加犊牛瘤胃上皮细胞炎性反应。