Dot—ELISA检测犬瘟热病毒抗原的研究

用建立的三抗体夹心法Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ检测犬瘟热病毒（ＣＤＶ）抗原,其抗原最低检出量为１．１５μｇ／ｍＬ（０．５７６２５ｎｇ／点）,经与常规ＥＬＩＳＡ对１０４份自然感染犬的血液白细胞样本,６０份眼结膜分泌物样本,７３份脾、肝、淋巴结等脏器样本进行检出的阳性率分别为９２．３１％、６６．６７％、８３．５６％和９０．７２％、６３．２９％、８１．８６％;两种方法检出的总阳性率分别为８３．５４％（１９８／２     

用Dot—ELISA检测鸡新城疫病毒的研究

本文建立了检测鸡新城疫病毒的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ法。用该法检测自然发病鸡群的粪便样品和脾组织匀浆各８２份,鸡新城疫病毒的检出率（５１．２％,７４．４％）高于血球凝集试验（３６．６％,６１．０％）,且两种方法具有良好的平行关系。该法操作简单,结果明显,直观,适用于基层检测鸡新城疫病毒。     

口蹄疫病毒Asia—I型灭活的研究

本研究将适应ＢＨＫ２１细胞培养的口蹄疫病毒（ＦＭＤＶ）亚洲Ｉ型（Ａｓｉｓａ－Ｉ）用胺类衍生物作灭活剂进行灭活试验。灭活毒经细胞连续传代检测未产生致细胞病病作用；经接种实验动物观察，无致细胞病作用且有良好的免疫原性。     

抗EDS—76病毒单克隆抗体的研究：Ⅰ.分泌抗ESD—76病毒单克隆抗体细…

建立了５株分泌抗ＥＤＳ－７６病毒的单克隆抗体细胞株，分别是Ｃ４＾１３，Ｃ１１＾１３，Ｃ１１＾１５，Ｅ７＾１５和Ｆ９＾１３，各株分泌抗体的能力均稳定，且者是抗ＥＤＳ－７６病毒的特异性抗体，不与其它多种禽病毒发生交叉反应。其中Ｃ４＾１３，Ｃ１１＾１５分泌的抗体是ＩｇＧ２ａ，Ｃ１１＾１３分泌的抗体是ＩｇＧ１。这５株细胞株所分泌的抗体都有较强的中和活性。     

用反转录—聚合酶链反应检测狐狸感染犬瘟热病毒的研究

应用反转录－聚合酶链反应技术成功地从发病银黑狐的脾脏中扩增出一条特异性的核酸带，为狐狸犬瘟热病的诊断提供了一个特异敏感的方法。     

Dot—ELISA检测减蛋综合征病毒的研究

将辣根过氧化物酶直接标记到ＭｃＡｂ上,建立了检测减蛋综合征病毒的Ｄｏ－ＥＬＩＳＡ方法,可敏感,特异,及早,快速地检测细胞培养物和实验感染难样品中的病毒抗原,某发病鸡场的泄殖腔拭子样品的阳性率为４３．３３％。     

用RT—PCR技术检测蓝乱病病毒的研究

蓝舌病病毒非结构蛋白ＮＳ１基因在各型中具有高同源性，可作为群特异检测的依据。采用ＮＳ１基因中２１０ｂｐ的区段作为ＰＣＲ扩增模板，经逆转录酶合成第一股ｃＤＮＡ后，再进行ＰＣＲ扩增。结果对ＢＴＶ可扩增出特异片段，而鹿流行性出血病病毒和茨城病病毒则不出现扩增。     

禽副黏病毒4型鸭/香港/D3/75株的分子特性及完整基因组序列

禽副黏病毒（APMVs）常常能从世界各地的家禽及野生鸟类中分离得到。除了禽流感,所有APMVs都归类为副黏病毒科腮腺炎病毒属。目前,腮腺炎病毒属的APMVs分为9个血清型（APMV 1~9）。新城疫病毒是禽副黏病毒1型的代表,也是各禽副黏病毒类型中特点最清楚的。对禽副黏病毒2~9（APMV2~9）的分子特性和致病性知之甚少。结果：作为了解APMV-4的分子遗传学及致病性第一步,笔者将APMV-4鸭/香港/D3/75株的完整基因组进行测序,并在含胚鸡蛋中检测其致病性。APMV-4的基因组全长是15054个核苷酸（nt）的长度,并与＂六规则＂一致。基因组包含6个非重叠的基因,按3′-NP/VMF-HN-L-5′的顺序排列。基因的两侧是高度保守的转录起始和停止信号,并有长度为9至42nt的间隔序列。基因组的3′端包含了一个55nt的前导区,5′尾端区长17nt,这在禽副黏病毒科中是最短的。分析从P基因转录得到的mRNAs表明,35%的转录子通过在编辑位点插入一个非模板G残基而编辑得到V mRNA。没有信号显示有两个非模板G残基的插入,这表明在W mR-NA在受APMV-4感染的细胞产生的效率很低。F蛋白的裂解位点（DIPQR↓F）与细胞内普遍存在的风铃蛋白酶的偏好性裂解位点不一致。然而,在细胞培养中,APMV-4的生长不需要外源蛋白酶,这表明裂解并依赖于风铃位点。结果表明,对副黏病毒科的五个属病毒的核酸序列进行系统进化分析,表明APMV-4与APMVs的亲缘关系高于其它副黏病毒,进一步证实副黏病毒科腮腺炎病毒属的所有APMVs的分类。     

对EDS—76病毒快速检测方法的研究

用平板红细胞凝集（ＨＡ）试验对鸡产蛋下降综合症（ＥＤＳ－７６）病毒进行了快速定性检测，并与微量ＨＡ试验进行了对比。结果表明，当病毒ＨＡ滴度在５×２＾１２及其以上时，在１０－２５℃范围内于半分钟可与１０％鸡红细胞（ＲＢＣ）发生极明显的大片凝集。当病毒ＨＡ滴度在５×２＾１０以下时，则凝集片明显较小，且反应时间在２分钟以上。这种凝集现象可被ＥＤＳ－７６阳性血清特异性抑制。此法可用于对大批量样品中高效价病     

用Dot—ELISA检测兔出血症病毒抗体的研究

建立了敏感、特异、稳定的检测兔出血症病毒抗体的Ｄｏｔ－ＥＬＩＳＡ，其敏感性比ＨＩ试验高１００倍以上。结果表明，当抗体效价在１：１６０时，攻毒保护率为５０％，在１：３２０以上时保护率为１００％。据母源抗体的动态检测结果，仔兔３０日龄时应进行首次免疫。     

抗犬细小病毒复方制剂的研究

对山茶叶、轮叶党参、卵叶芍药、苦味西葫芦、狼毒大戟 5种中草药的提取物进行体外抗犬细小病毒 (CPV)筛选 ,并对以山茶叶、黄芪等组成的复方进行抗病毒效果评价与药理作用研究。结果表明 ,山茶叶抗CPV作用较强 ,其对CPV的抑制率为 55 2 4 % ;由山茶叶组成复方对CPV的抑制率为 63 0 4 % ,抗病毒效果明显优于单方的山茶叶和药物对照黄连 ;对CPV 50 %抑制浓度 (IC50 )为 1∶587 5 ,提示有较强抗病毒作用。由山茶叶、黄芪等组成的复方药物对大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌有抑制作用 ,可明显增强机体免疫力。     

RT—PCR一步法检测鸡传染性支气管炎病毒的研究

根据已发表的ＩＢＶＳ基因核苷酸序列,自行设计合成了一对跨幅约０．９ｋｂ的引物。该区段包括了Ｓ１基因Ｃ末端的４００ｂｐ和Ｓ２基因Ｎ末端的５００ｂｐ。用该引物对５株ＩＢＶ参考毒株Ｇｒａｙ、Ｍ４１、Ｈ１２０、Ｈ５２和ＭＡ５进行ＲＴ－ＰＣＲ一步法扩增均获得预期的ＰＣＲ产物,该引物的ＲＴ－ＰＣＲ灵敏度检测结果表明,可以检测出０．１１２ｐｇ／μＬ的模板。用该引物对３０个地方分离株进行检测,１８株呈阳性,与鸡胚传代及电镜观察结果一致。     

应用反转录—聚合酶链技术快速检测猪瘟病毒RNA的研究

依据猪瘟病毒（ＣＳＦＶ）５′端非编码区休守序列设计一对ＰＣＲ引物,建立了检测ＣＳＦＶ的反转录－聚合酶链（ＲＴ－ＰＣＲ）技术,应用该技术从猪瘟免兔化毒感染兔的脾淋巴结,肾与肌肉等以及石门株强毒感染猪的脾与肌肉和湖北分离毒株感染猪组织匀浆液中均特异扩增出１条预期大小为１９４ｂｐ的片段,从实验感染兔和猪的血液中也特异扩增出了该片段,但对牛病毒性腹泻病毒（ＢＶＤＶ）和健康兔脾总ＲＮＡ以及健康猪的血液ＲＮＡ     

旱生、超旱生牧草植物的“生态耦合点”研究分析

以我国北方生态脆弱带为基础 ,通过对旱区、极旱区的气候、地域、生态三大指标 1 0项内容数据的布点采集 ,经过研究分析 ,提出了旱生、超旱生植物的“生态耦合点”新理念。这一理念的提出 ,对旱生、超旱生牧草植物的区别与划分 ,由定性化到定量化、一般理论到数字化 ,增强了可操作性和实用性 ,对指导以生态建设为主的生产实践和相关学术研究领域具有借鉴和参考价值。