半仿生法提取细叶小檗总生物碱及抑菌性研究

目的本文通过对细叶小檗果实中生物碱的研究,为细叶小檗的有效合理利用提供参考。方法本实验以细叶小檗总生物碱提取量和抑菌圈直径为考察指标,用10%、20%、30%、40%、50%、60%、70%的乙醇作为溶剂提取细叶小檗中的总生物碱,得出27%乙醇为较好的提取溶剂。以27%乙醇为提取溶剂,进行液料比、温度和超声时间的单因素试验。在单因素试验基础上,采用Plackett-Burman设计、最速上升试验以及中心复合实验响应面设计建立数学模型。结果实验结果表明,最佳提取条件为:乙醇含量27%(V/V)、液料比32mL/g、温度52℃、超声功率800W,提取液的pH值为2.2时,对应提取时间为50min;提取液的pH值为7.6时,对应提取时间为25min;提取液的pH值为8.5时,对应提取时间为25min。在此条件下,细叶小檗中总生物碱的提取量为(16.24±0.54)mg/g,比单一超声波辅助法的提取量提高了1.31倍;抑菌圈直径为(91.21±0.37)mm。结论采用超声波辅助半仿生法比单一采用超声波法对细叶小檗中总生物碱的提取效果更好,提取量提高了1.31倍;抑菌效果提高了1.07倍。相比较国内目前对于小檗属植物小檗碱的平均提取量(16.6±0.6)mg/g相接近,在抑菌活性上有明显提高。      

曼陀罗种子生物碱提取物抑菌活性的研究

以野生植物曼陀罗种子干粉为原料,测定了曼陀罗种子生物碱提取物对几种常见致病菌和腐败菌的抑菌活性以及最小抑菌浓度（MIC）。结果表明,曼陀罗种子生物碱提取物对几种常见致病菌和腐败菌有明显的和广泛的抑制作用。其中对四叠球菌、金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等受试细菌具有良好的抑制效果。高温长时间处理和中低温长时间处理对提取物抑菌活性影响较大,但高温短时间处理对提取物的抑菌活性影响不大。     

小果博落回总生物碱的抑菌活性研究

【目的】获得抑菌活性更强的小果博落回的生物碱成分。【方法】采用4种亲核性溶剂(甲醇、乙醇、丙酮和饱和Na2CO3碱溶液)和1种非亲核性溶剂(四氢呋喃),分别从吸附了小果博落回总生物碱的D101树脂上洗脱生物碱,用薄层层析法(TLC)进行成分分析,以金黄色葡萄球菌、无乳链球菌、大肠杆菌、肠形点状产气单胞菌、嗜水气单胞菌、巴氏杆菌、蜡样芽孢杆菌和鳗弧菌等8种菌株为供试菌,采用药敏纸片法进行抑菌活性测定,研究小果博落回在不同溶剂处理下所得的总生物碱成分和抑菌活性的变化。【结果】TLC分析结果表明,经过乙醇、甲醇、碱溶液和丙酮作用后,所得总生物碱(分别为SEtOH、SMeOH、Sbase和Sacetone)与直接用酸提取的总生物碱(Saw)在成分上存在差异;5种总生物碱均具有抑菌活性,其抑菌活性依次表现为SMeOH>SEtOH≈Sacetone≈Sbase>Saw。【结论】提取过程中使用亲核性溶剂,可引起小果博落回总生物碱成分的变化和抑菌活性的改变,其中以甲醇提取的总生物碱的抑菌活性较强。     

魔芋飞粉生物碱的抑菌活性及抑菌机理研究

【目的】探究魔芋飞粉生物碱(Alkaloid from konjac powder,AKP)的抑菌作用及其对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的抑菌机理,为新型天然抑菌剂和防腐剂的开发提供理论依据。【方法】采用液体倍比稀释法,确定AKP对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌、鼠伤寒沙门氏菌4株供试菌的最小抑菌质量浓度(Minimum inhibitoryconcentration,MIC),并采用牛津杯法测定AKP对上述4株供试菌的抑菌圈大小;通过测定在AKP作用下,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长曲线、菌体培养液电导率及观察细胞膜完整性、细胞形态等,对AKP的抑菌作用及其机理进行分析。【结果】AKP对4株供试菌均有明显的抑制作用,对金黄色葡萄球菌的抑菌作用最强(MIC为10mg/mL),大肠杆菌次之(MIC为20mg/mL)。AKP对供试菌的抑菌圈直径依次为金黄色葡萄球菌大肠杆菌枯草芽孢杆菌鼠伤寒沙门氏菌。菌体生长曲线显示,AKP对大肠杆菌和金黄色葡萄球菌的生长有明显的抑制效果。AKP作用后,大肠杆菌和金黄色葡萄球菌细胞膜受损,存活率显著降低,菌体培养液电导率显著上升。电镜观察发现,AKP使菌体细胞膜出现破损,部分菌体出现空腔。【结论】AKP具有抑菌作用,其可能通过破坏细菌细胞膜结构而导致内容物外泄,进而影响细胞的生长代谢或造成细胞死亡,从而抑制其生长。     

白喉乌头总生物碱抑菌杀虫活性的初步研究

以平皿法和凹玻片法测定白喉乌头总生物碱提取物对稻瘟病菌、意大利青霉、甜瓜枯萎病菌、瓜类腐皮镰孢菌、黄瓜疫霉病菌5种植物病原菌的抑制作用;测定提取物对棉蚜的触杀活性、拒食活性和内吸活性.初步研究表明,白喉乌头总生物碱对5种植物病原菌的菌丝生长均有明显的抑制作用;对甜瓜枯萎病菌、瓜类腐皮镰孢菌、黄瓜疫霉病菌的孢子萌发也有较好的抑制作用,但对稻瘟病菌和意大利青霉无抑制作用.对棉蚜的触杀活性测定表明药后24、48和72 h LC50分别为14.30、9.30和7.84 mg/mL;100 mg/mL浓度下药后24和48 h拒食率分别为87.63;和93.81;;同时未观察到有内吸活性.     

瓜馥木总生物碱及3个阿朴菲类生物碱的抑菌活性研究

在室内用生长速率法测定了瓜馥木总生物碱及3个阿朴菲类生物碱对甘蔗凤梨病菌、西瓜枯萎病菌、柑橘疮痂病菌、香蕉炭疽病菌、梨黑斑病菌和梨褐斑病菌的抑菌活性。结果表明:在供试质量浓度为10g/L时,瓜馥木总生物碱对上述6种病原真菌具有很好的抑菌活性,它们的有效中浓度(EC50)分别为1.4535、1.3921、2.0200、1.9084、1.6413、2.7041g/L;从瓜馥木总生物碱分离得到的3个阿朴菲类生物碱对6种病菌均有较高的抑菌活性,其中1,2-亚甲二氧基-N-甲氧酰基-阿朴菲生物碱对6种病菌的EC50分别为0.1539、0.2334、0.1367、0.1735、0.4012、0.3168g/L。     

碎米莎草根部总生物碱的化感活性及抑菌活性的研究

以水稻等5种植物和水稻稻瘟病等6种植物病原真菌为试验对象,通过生物测定的方法对碎米莎草根部总生物碱的化感活性及抑菌活性进行初步研究.结果表明:在250～4 000 μg/mL质量浓度内,总生物碱对水稻和鳢肠种子的萌发无显著影响,对烟草幼苗的苗高产生显著抑制作用;只有在最高质量浓度达到4 000 tw/mL时,总生物碱对水稻幼苗的根长、苗高和鲜重以及鳢肠幼苗的苗高才有显著抑制作用,而在相对较低浓度下,总生物碱即对烟草、车前草和三叶鬼针草幼苗的鲜重、根长和苗高以及鳢肠幼苗的鲜重和根长产生显著抑制作用.在25～400 μg/mL,质量浓度内,碎米莎草根部总生物碱对小麦赤霉病病菌的生长无显著影响,在100～400 μg mL质量浓度范围内,对油菜茵核病病菌菌落的生长产生显著抑制作用,在200～400 μg/mL质量浓度内对水稻稻瘟病病菌、番茄早疫病病菌和苹果轮纹病病菌菌落的生长产生显著抑制作用,对杨树溃疡病病菌菌落的生长只有在400μg/mL的最高质量浓度下才产生显著抑制作用,在400 μg/mL质量浓度时,碎米莎草根部总生物碱对上述后5种病原真菌的抑菌率分别为40.10%、20.54%、30.63%、34.82%和12.08%.实验结果可以看出,碎米莎草根部总生物碱对水稻种子萌发和幼苗生长的抑制作用较弱,而对水稻稻瘟病病菌的生长具有一定的抑制作用,表明其具有开发为水稻田用生物源农药的潜力.     

小檗内生放线菌H21的鉴定及抑菌活性成分分析

【目的】从药用植物小檗（Berberis thunbergii）中筛选抗菌活性内生放线菌,对活性菌株的分类地位及抑菌活性进行研究,分离并鉴定候选菌株发酵液中活性成分的化学结构及其抑菌活性,为农用杀菌剂的创制提供依据。【方法】采用选择性培养基从小檗叶片分离内生放线菌,16S rDNA法进行菌株鉴定;采用管碟法测定发酵液对烟草青枯病菌 （Ralstonia solanacearum）等7种供试菌的抗细菌活性,采用抑制菌丝生长速率法测定发酵液对番茄灰霉病菌（Botrytis cinerea）等7种植物致病菌的抗真菌活性;依次采用大孔树脂吸附、硅胶柱层析及反相高效液相色谱（HPLC）等技术分离纯化活性组分;采用核磁共振波谱（NMR）和质谱（MS）技术对分离到的活性成分进行结构鉴定;采用微量肉汤稀释法测定化合物对烟草青枯病菌等7种细菌的最低抑菌浓度,抑制孢子萌发法和菌丝生长速率法测定化合物对番茄灰霉病菌的抗菌活性。【结果】分离到一株活性菌株H21,该菌株经16S rDNA序列分析鉴定为链霉菌（Streptomyces sp.）;除铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）外,H21菌株发酵液对烟草青枯病菌、猕猴桃溃疡病菌（Pseudomonas syringae pv. actinidiae）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）、蜡状芽孢杆菌（Bacillus cereus）、金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）、大肠埃希氏菌（Escherichia coli）等多种病原细菌有明显的抑菌活性;H21发酵液对番茄灰霉病菌表现出较强的抑制菌丝生长作用,对其他供试病原真菌无明显的抑菌活性;从H21菌株发酵液中分离鉴定了3个化合物,分别为N-乙酰基-2-(4-羟苯基)乙胺、环-（L-亮氨酸-L-精氨酸）和二硫吡咯类抗生素-全霉素;全霉素为广谱抗生素,其对烟草青枯病菌、猕猴桃溃疡病菌、蜡状芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、大肠埃希氏菌和金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度（MIC）分别为0.156、0.313、0.078、0.313、0.156和0.313 µg·mL^-1;对番茄灰霉病菌菌丝生长和孢子萌发的抑菌中浓度（IC₅₀）分别为13.56和7.89 µg·mL^-1。【结论】小檗内生菌放线菌H21可能是一种新的全霉素产生菌,其对植物致病细菌烟草青枯病菌和猕猴桃溃疡病菌有抗菌活性,全霉素对于开发针对致病细菌的农用杀菌剂具有重要的参考价值。     

2,6-二氟苄酰胺类生物碱的合成及抑菌活性研究

[目的]在苄基酰胺核心骨架上进行结构修饰,设计、合成新型辣椒碱类似物,并对其抑菌活性进行测定。[方法]以2,6-二氟苄胺为原料,通过N-酰化反应合成13个氟苄酰胺类生物碱(3a~3m),并通过质谱和核磁共振氢谱分析对其结构进行了表征。[结果]抑菌活性测定结果表明,化合物3a、3d、3e和3f对白菜软腐病菌具有明显的抑制作用,其抑菌圈直径分别为15、16、11和18 mm。[结论]苄基酰胺作为一种抑菌活性先导化合物,具有一定的潜力。     

黄连原小檗碱类生物碱快速制备及清除超氧阴离子活性研究

为建立两步法快速制备黄连原小檗碱类生物碱,并研究其体外清除超氧阴离子的活性,通过制备薄层色谱法分离黄连95％乙醇提取物,半制备型高效液相色谱纯化,快速得到6个主要的原小檗碱类生物碱.再以黄嘌呤-黄嘌呤氧化酶反应体系产生超氧阴离子,WST-1作为超氧阴离子的探针,采用微孔板法评价黄连原小檗碱类生物碱对超氧阴离子的体外清除...     

木鳖子生物碱部位提取物抗氧化活性研究

目的:研究木鳖子生物碱部位的抗氧化作用,为开发新的抗氧剂和进一步开发木鳖子药材提供实验依据。方法:使用试剂盒法测定木鳖子生物碱部位提取物总抗氧化能力(T-AOC)、羟基自由基清除能力、过氧化氢酶(CAT)活力。结果:提取物浓度在26.880 94.080μg·mL~(-1)范围内与T-AOC呈正相关,在1 344.0008 604.000μg·mL~(-1)范围内与羟基自由基清除率呈正相关,在2.688 9.408μg·mL~(-1)范围内CAT活力在5.376μg·mL~(-1)时最高。结论:首次证明木鳖子生物碱部位提取物具有一定的抗氧化活性。     

荷叶生物碱的提取及体外抑菌和凝血活性研究

本试验通过提取荷叶生物碱,探讨荷叶生物碱对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、酵母菌、黑曲霉的抑制能力以及体外凝血活性。实验结果表明,荷叶生物碱具有较强的抑菌活性,其浓度为9%的荷叶生物碱抑菌圈直径大小和最小抑菌浓度值分别为:大肠杆菌18.6mm、7%;金黄色葡萄球菌16.3mm、12%;酵母菌15.6mm、9%;黑曲霉8.5mm、21%;高、中、低浓度荷叶生物碱提取液与空白对照相比体外凝血时间缩短1.5%,凝血效果不显著。     

草珊瑚不同提取物抑菌活性研究

目的研究草珊瑚不同提取物的抑菌活性。方法以水作为溶剂,采用回流提取方式得到草珊瑚的水提液后, 依次采用石油醚（30℃~60℃）、乙酸乙酯、正丁醇等溶剂对草珊瑚水提液进行萃取得到不同草珊瑚提取液,旋转浓缩得 到相应浸膏,并用水复溶成不同浓度梯度溶液,利用琼脂平板打孔法评价不同草珊瑚提取物对小麦赤霉病菌、须癣毛 癣菌、炭疽病菌、红色毛癣菌、烟草赤霉病菌、白术根腐病菌、大肠杆菌以及金黄色葡萄球菌的抑菌活性。结果在供试 菌种中,草珊瑚水提液对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、须癣毛癣菌、烟草赤霉病菌表现出不同程度的抑制作用,进一步 对草珊瑚水提液进行萃取发现,不同草珊瑚提取物抑菌活性均有一定的抑制效果,且随着不同提取物的浓度增大其抑 菌效果也逐渐增强。其中,正丁醇和乙酸乙酯萃取物的抑菌活性较好,正丁醇萃取物对须癣毛癣菌最小抑菌浓度为 15 mg/mL,对金黄色葡萄球菌最小抑菌浓度为15 mg/mL,对大肠杆菌最小抑菌浓度为10 mg/mL;乙酸乙酯萃取物对 烟草赤霉病菌最小抑菌浓度为15 mg/mL。结论:草珊瑚提取物具有一定的抑菌活性,对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、 须癣毛癣菌、烟草赤霉病菌具有抑菌作用,采用正丁醇和乙酸乙酯对草珊瑚水提液进行萃取的得到的提取物抑菌效果 更好,草珊瑚可作为一种天然抑菌植物进一步进行开发。     

巴豆提取物抑菌活性初步研究

对巴豆果壳和种子提取物进行了化学成分预试和抑菌活性测定,探讨巴豆果实在植物病害控制方面的应用.结果表明,巴豆果实中含有生物碱、甾体、萜类、氨基酸和挥发油等化学成分;供试浓度为干样0.05g/mL时,巴豆果壳乙醇提取物对小麦全蚀病菌、小麦纹枯病菌和辣椒疫霉病菌的生长抑制效果较好,72 h检查的抑制率分别为97.53%、7...     

牧马豆生物碱抑菌抗炎作用研究

将牧马豆生物碱配制成不同的质量浓度,通过试管法测定其最小抑菌质量浓度.结果表明,牧马豆生物碱对大肠埃希氏菌、巴氏杆菌、链球菌、金黄色葡萄球菌均有一定的抑制作用.以小鼠为实验动物,选用不同质量浓度的牧马豆生物碱注射剂对二甲苯所致小鼠耳壳肿胀均有显著抑制作用.     

马铃薯糖苷生物碱的抑菌活性及其对菌体细胞膜透性的影响

【目的】通过探究马铃薯糖苷生物碱对几种经济林病原真菌的抑菌活性及其可能的作用机理,为其在植物病害的无公害防治应用中提供理论依据.【方法】采用生长速率法,测定其对3种常见经济林植物病原真菌:腐皮镰刀菌(Fusarium solani),核桃盘二孢(Marssonina juglands),煤炱菌(Capnodiume leaophilum)的抑菌活性,并以腐皮镰刀菌为试材,应用电导仪测定其对菌体细胞膜通透性的影响.【结果】当马铃薯糖苷生物碱质量浓度为2g/mL时的抑菌效果最好;其中对腐皮镰刀菌的抑菌活性最强,其EC50为0.268 0g/mL,煤炱菌次之,对核桃盘二孢(Marssonina juglands)抑菌活性最弱,EC50为1.490 7g/mL;通过菌体细胞液电导率的测定,发现马铃薯糖苷生物碱作用下,腐皮镰刀菌菌体的相对渗透率增加了25.2%.【结论】马铃薯糖苷生物碱提取液对3种供试真菌均具有一定的抑菌活性,以对腐皮镰刀菌的抑制效果最佳,并引起其菌体细胞膜透性的增强.     

7种中草药抑菌活性研究

采用生长速率法测定了7种中草药乙醇提取物对5种病原菌的离体抑菌活性.测定结果表明,在供试干样0.1 g/mL浓度下,鱼腥草、龙牙草、半边莲、丹参具有较好的抑菌活性,对多种供试菌种的抑制率达到100％;腺梗豨莶茎和叶的提取物的抑菌作用较差;接骨草茎和叶的提取物抑菌效果最差,对供试5种病菌的抑制作用均低于70％.     

川黄柏中盐酸小檗碱HPLC测定优化及其抑菌活性评价

为建立高效液相色谱（HPLC）测定川黄柏结晶物中盐酸小檗碱含量的优化方法,并评价川黄柏对耐药性细菌的抑制活性,对川黄柏提取物进行结晶处理后,通过对流动相及检测条件的优化确定最优检测方法;用结晶物对耐药性菌株进行体外抑菌试验评价抑制活性。结果表明,检测最佳条件：流动相为乙腈-0.1%磷酸溶液（50∶50）（0.1 g十二烷基硫酸钠每100 mL磷酸溶液）,检测波长为265 nm,流速1 mL·min-1,柱温30 ℃;当盐酸小檗碱浓度在103~515 mg·L-1之间时,与各自对应峰面积积分值呈较好的线性关系（R2=0.999 7）;对该条件下测定过程进行精密度、稳定性、重复性试验检测,RSD分别为0.49%、1.23%、0.29%,表明试验方法准确;平均加样回收率为97.84%~98.06%,RSD为0.44%~1.00%,说明检测方法准确有效。抑菌活性试验发现川黄柏结晶物对耐药性金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和铜绿假单胞菌(Pseudomonas aeruginosa)均有很好的抑制效果。优化方法安全、快速、精确、有效,可用于黄柏药材中盐酸小檗碱的分析测定;川黄柏中盐酸小檗碱具有很好地抑菌作用。研究拓宽了对抗耐药性细菌的天然产物种类,为其临床应用和科学研究奠定基础。     

臭常山喹啉生物碱化学成分及活性研究

从芸香科臭常山属臭常山（ Orixa japonica Thunb．）乙醇提取物中分离得到了5种喹啉生物碱,通过理化性质和波谱分析鉴定为：米利纽碱（ melineurine）、普拉迪斯碱（ platydesmine）、巴福酮（ balfourolone）、嘌度瑞叭啉碱（ pseudor-ibalinine）和青花椒碱（ schinifoline）,该5个化合物均首次从该属植物中分离得到。对这些化合物进行了鲍曼不动杆菌、大肠杆菌、肺炎克雷伯氏杆菌、萎蔫短小杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌和绿脓杆菌活性筛选试验,发现化合物巴福酮（ balfourolone）对肺炎克雷伯氏杆菌和金黄色葡萄球菌具有较好的抑制活性,且在50 mmol／mL浓度下抑制率分别达到50．1％、56．9％。     

蔷薇红景天提取物不同极性部位体外抗氧化活性研究

[目的]通过体外试验初步研究蔷薇红景天（RhodiolaroseaL.）提取物的抗氧化活性。[方法]采用有机溶剂萃取法将蔷薇红景天提取物分为乙酸乙酯相、正丁醇相和水相3个不同极性部位,以还原能力及清除羟自由基（.OH）、超氧阴离子自由基（O2-.）和亚硝酸根离子（NO2-）为评价指标初步研究其体外抗氧化活性。[结果]蔷薇红景天提取物的不同极性部位均有抗氧化活性,其抗氧化效果因反应体系不同而不同,且不同极性部位的抗氧化活性有差异。乙酸乙酯相和正丁醇相的还原能力及清除O2-.和.OH的能力均强于水相,而水相对NO2-的清除效果好于乙酸乙酯相和正丁醇相。[结论]蔷薇红景天提取物具有较强的抗氧化活性,可作为天然抗氧化剂的良好来源。