铁皮石斛原球茎液体悬浮培养研究进展

铁皮石斛是我国传统的名贵中药,具有很高的药用价值。为了解决铁皮石斛组织培养中存在的组培苗生产成本高、移栽苗成活率低等问题,铁皮石斛原球茎悬浮培养的研究日益增多。从影响原球茎增殖和石斛多糖积累的因素及石斛多糖药理研究等方面阐述了关于铁皮石斛原球茎悬浮培养的研究概况。     

铁皮石斛原球茎富硒悬浮培养条件优化

通过对铁皮石斛原球茎富硒悬浮培养的生长指标及多糖、生物碱、总蛋白质、硒含量等指标进行评价,优化铁皮石斛富硒悬浮培养条件,为开发富硒铁皮石斛产品提供理论依据与物质基础.研究结果表明,优化的铁皮石斛原球茎富硒悬浮培养基为MS+2.0 mg·L-1 6-BA+0.50 mg·L-1 NAA+30 g·L-1蔗糖+0.05 m...     

铁皮石斛原球茎悬浮培养及其多糖积累的研究

将利用铁皮石斛种子诱导的原球茎在液体条件下培养,研究植物激素和有机添加物对原球茎增殖以及多糖积累的影响。结果表明,在N6液体培养基中附加1.0mg/L NAA+1.0mg/LKT+5%香蕉汁提取物+5%土豆汁提取物,最有利于铁皮石斛原球茎增殖和多糖积累,培养30d时,原球茎鲜质量达到122.9g/L,多糖含量在25d时达到24.2%。结果提示,利用液体培养规模化生产铁皮石斛原球茎是可行的,是铁皮石斛大田传统栽培方式的重要替代途径。     

铁皮石斛原球茎固体培养和液体悬浮培养动力学研究

为筛选适合铁皮石斛原球茎的最佳培养方式，采用固体培养和液体悬浮培养两种培养方式，并研究液体悬浮培养的营养消耗变化规律，同时考察了液体培养液中pH值和电导率的变化。结果表明：原球茎在固体培养条件下，培养60d后干重达到最大，为13．40g／L，多糖产量最大值为2412．5mg／L；在液体悬浮培养条件下，干重仅需要50d可达到17．64g／L，多糖产量最大值为3081．2mg／L。液体培养在生物量、多糖产量上均优于固体培养；原球茎生长与碳源、氮源和磷的消耗存在着密切关系，培养基电导率变化与原球茎的生物量积累呈线性关系。     

沼肥对铁皮石斛原球茎增殖培养的影响

以铁皮石斛无菌原球茎作为外植体,研究沼肥以不同比例替换铁皮石斛原球茎增殖培养基中部分营养成分后对铁皮石斛原球茎增殖的影响。结果表明,沼肥按一定比例替代培养基中的部分营养成分后可以促进原球茎增殖。当沼肥以10%的替代比例替代大量元素时,铁皮石斛原球茎增殖情况最好,原球茎呈深绿色,分布紧密,仅有少量分化。表明在铁皮石斛组培过程中,可以按一定的比例用沼肥替代部分营养成分,从而达到提高产量、降低生产成本以及资源合理化利用的目的。     

不同培养条件对铁皮石斛原球茎增殖的影响

[目的]为了找到适合原球茎增殖的培养条件,为工厂化育苗提供技术支撑。[方法]以铁皮石斛茎段诱导出的原球茎为实验材料,研究了不同基本培养基、不同碳源、不同浓度的脱落酸(ABA)和培养方式对其增殖的影响。[结果]在5种培养基中,原球茎增殖倍数均呈上升的趋势,其中改良MS的增殖倍数明显高于其他培养基;在低浓度的条件下,随ABA浓度的增加,原球茎的增殖速度加快,当浓度为0.5 mg/L时,增殖最大;蔗糖为碳源时原球茎增殖的效果比葡萄糖、果糖好;固体培养和液体振荡培养时原球茎增殖倍数最高。[结论]在改良MS中加入30 mg/L蔗糖和0.5 mg/L ABA,进行固体培养或液体振荡培养,铁皮石斛原球茎增殖的效果好。     

蔗糖对铁皮石斛原球茎生长与多糖积累的影响

在确定合适碳源的基础上,研究比较不同蔗糖浓度下铁皮石斛原球茎生长和多糖的积累情况.结果表明,在葡萄糖、果糖、蔗糖、乳糖4种碳源中,蔗糖和葡萄糖对原球茎生长和多糖积累的影响优于乳糖和果糖.在蔗糖浓度为30～60g/L时,浓度越高,原球茎生长受到抑制越大,而且生长周期延长,但多糖含量增加越快,多糖含量越高;当蔗糖浓度超过60g/L时,蔗糖表现出明显的抑制效应;适合多糖积累的蔗糖起始浓度为30 g/L时,有利于原球茎的生长,最大干重量为17.93g/L,多糖最高含量为208.7mg/g,培养40 d时,其产量为3 679.6 mg/L.     

铁皮石斛原球茎的增殖培养研究

为探索最适宜铁皮石斛原球茎增殖的固体培养基配方,以获得高质量的组培苗,为工厂化育苗提供技术支撑,在相同的实验室培养条件下,把同一阶段的原球茎接种于不同激素比的4种培养基中,培养周期为60 d,每隔15 d取样检测1次,对不同生长状况的试验结果进行分析研究.结果表明,在基本培养基1/2 MS中加入浓度为1.0 mg/L的6-BA、0.5 mg/L的NAA和浓度为20%的马铃薯提取液进行固体培养,铁皮石斛原球茎的增殖效果好.     

培养基渗透压对铁皮石斛原球茎生长和多糖含量的影响

以无菌铁皮石斛原球茎为材料,于培养液中分别添加不同浓度的甘露醇以调节其渗透压,研究不同甘露醇浓度对铁皮石斛原球茎生长及多糖含量的影响。结果表明:添加低浓度的甘露醇可促进铁皮石斛原球茎生长及增加多糖含量,添加高浓度的甘露醇能明显抑制铁皮石斛原球茎生长及降低多糖含量。在不同的培养时间,当甘露醇质量浓度为0~20g·L~(-1)时,原球茎活力、生长量、多糖含量和多糖产量总体呈上升趋势,当甘露醇质量浓度超过20g·L~(-1),原球茎活力、生长量、多糖含量和多糖产量呈下降趋势。培养后35d,各处理的原球茎干重、多糖含量和多糖产量均达最大值,且甘露醇质量浓度为20g·L~(-1)的处理其干重、多糖含量和多糖产量均高于对照和其他处理,分别为17.30g·L~(-1)、361.52mg·g~(-1)和6 255.38mg·L~(-1)。     

外源一氧化氮对铁皮石斛原球茎生长和多糖积累的影响

以硝普钠（SNP）为一氧化氮（NO）供体,研究了不同浓度的外源NO对铁皮石斛原球茎生长、叶绿素含量、蔗糖合成酶（SS）活性和多糖积累的影响。结果总体表现为低浓度的SNP有利于铁皮石斛原球茎的生长,而高浓度的SNP可以促进多糖的合成。在添加0.50 mmol·L-1SNP的培养基中培养28 d时其干质量比对照高36.9％,总叶绿素含量在14 d时为对照的1.33倍;在添加1.00 mmol·L-1 SNP的培养基中培养7 d时其多糖含量为对照的1.59倍,同时SS活性显著升高。综合多糖产量来看,0.50 mmol·L-1SNP效果最佳,在处理期间显著高于其他处理,且对其干质量、叶绿素含量、SS活性和多糖积累均有促进作用。添加NO清除剂（cPTIO）后,铁皮石斛原球茎的生长、SS活性和多糖合成受到抑制。     

不同磁处理方法对铁皮石斛原球茎增殖生长的影响

研究了直接磁处理和磁处理水2种方法对铁皮石斛原球茎增殖生长的影响.结果表明,这2种磁处理方法在适宜条件下对铁皮石斛原球茎的增殖生长均具有促进作用,其中促进铁皮石斛原球茎增殖生长的最佳条件是:直接磁处理为25 mT/80 min,磁处理水为0.8T.     

铁皮石斛原球茎组织培养研究进展

铁皮石斛是我国传统的名贵中药材,具有很高的药用价值,其所含的主要成分为石斛多糖和生物碱。由于长期的采挖,自然资源日益枯竭,现阶段铁皮石斛的种苗主要通过组织培养方法获得,但在培养过程中存在诸多问题如出苗的成本过高,幼苗移栽成活率低,工厂化生产效率低等。鉴于以上问题,对于铁皮石斛原球茎的研究日益广泛,原球茎中含有同石斛苗相同的药用成分,通过大规模培养来提取,同样可以满足药材市场对石斛的需求。本文通过对相关文献的查阅,阐述了有关铁皮石斛原球茎的组织培养方面的研究概况。     

几种因素对铁皮石斛原球茎生长和多糖积累的影响

通过探讨几种不同因素对铁皮石斛原球茎生长和多糖积累的影响,结果表明,MS、1/2MS、B5、N6和White培养基对原球茎的生长和多糖积累有不同的影响;其中,1/2MS和N6培养基适合原球茎生长和多糖积累.当氮源浓度为30～60mmol/L、NO3-/NH4 分子比为40∶20、30∶30时,有利于原球茎生长和多糖积累.通过二次回归正交组合设计,优化拟合得到激素6-BA和NAA的正交回归模型;寻优定量结果表明,6-B A为1.25mg/L、NAA为0.52mg/L时,原球茎最大干重可达14.68g/L;当6-BA与NAA组合的最佳浓度配比为1.41mg/L、0 36mg/L时,原球茎最高多糖含量为274.2mg/g·DW.在以转速、接种量、pH 3因素4水平的L16(43)正交试验中,对原球茎生长影响最大的因子是pH,其次是转速,接种量影响最小;当初始培养液pH为7.0、摇床转速为110r/min、接种量为30g·FW/L时,适合原球茎生长.各因子对原球茎多糖积累的影响程度依次为转速、pH、接种量,当初始培养液pH为5.0、摇床转速为110r/min、接种量为50g·FW/L时,有利于多糖积累     

培养环境对铁皮石斛组培苗生长的影响

对影响铁皮石斛组培苗生长的环境因子进行了研究,结果表明,光照时间是影响铁皮石斛组培苗增殖及品质的最大影响因子,12 h·d-1为最佳的光照时间。而不同培养基、培养温度及光照强度对铁皮石斛组培苗生长的影响差异不显著。从组培苗质量和生产成本考虑,适宜的铁皮石斛组培苗规模化生产的环境条件为光照时间12 h·d-1,光照强度30 μmol·m-2·s-1,培养温度25 ℃左右。     

电刺激对铁皮石斛原球茎中石斛碱含量的影响

[目的]探讨电刺激对铁皮石斛原球茎中石斛碱含量的影响。[方法]采用铁皮石斛原球茎培养基扩增培养铁皮石斛原球茎,并将扩增所得原球茎随机分为试验组和对照组,其中试验组给予不同时间电刺激(25 V),对照组不做处理,正常培养15 d后,以氯仿热回流法提取原球茎中的石斛碱,紫外分光光度法测定石斛碱含量。[结果]与对照组相比,经电刺激(25 V)1和2 h的试验组铁皮石斛原球茎石斛碱含量显著增加(P0.05),而经电刺激(25 V)3 h的试验组铁皮石斛原球茎石斛碱含量下降(P0.05)。[结论]25 V电刺激1、2 h能够促进铁皮石斛原球茎中的石斛碱积累,这可能与电刺激能改变原球茎中细胞的渗透性、增强对培养基中各种成分的吸收,导致内源次生代谢物增加有关。     

Fe3O4和磁场处理对铁皮石斛原球茎生长的影响

在培养基中添加不同浓度的Fe3O4 (0.2％、0.4％、0.6％、0.8％、1.0％),研究不同磁感应强度(6、12、17、25 mT)与不同磁处理时间(1、5、10 h)的组合条件对铁皮石斛原球茎生长的影响.结果表明,不同Fe3O4浓度与不同磁处理条件组合对铁皮石斛原球茎生长的影响不同；合适的处理组合能促进铁皮石斛原球茎的生长,其中0.6％Fe3O4,磁感应强度12 mT,磁处理1h为最佳处理组合,对铁皮石斛原球茎生长的促进作用最好,促进率为205.25％.     

铁皮石斛类原球茎液体悬浮培养增殖体系构建

以铁皮石斛(Dendrobium officinale)类圆球茎为研究材料,系统地研究了影响其液体悬浮培养增殖的诸多因素,如不同质量浓度的MS基本培养基、NAA、蔗糖、椰乳以及培养基pH值和接种量,旨在构建铁皮石斛类圆球茎液体悬浮培养增殖体系。研究结果表明:在液体悬浮培养条件下,最有利于铁皮石斛类原球茎的生长增殖的培养基为1/2MS基本培养基中添加1.0 mg/L NAA,50 g/L椰乳,蔗糖30 g/L;接种量为40 g/L。     

铁皮石斛种子液体悬浮培养的研究

[目的]研究铁皮石斛种子的液体悬浮培养方法。[方法]以MS为基础培养基,设计了不同浓度的基础培养基、激素、天然附加物、pH、蔗糖等5个影响因子的15种培养液配方,筛选出铁皮石斛最适的液体培养条件。[结果]适中的无机盐浓度,NAA、较低的pH值、较高的蔗糖浓度以及适量的土豆汁都有利于铁皮石斛种子的萌发;试验优选出的相对适合种子萌发的培养基为1/2MS+0.5 mg/LNAA+80 g/L土豆汁+45 g/L蔗糖。[结论]筛选出了相对较合适的培养基配方,为铁皮石斛栽培种植提供了理论依据。     

铁皮石斛无菌悬浮培养育苗工艺开发

为降低铁皮石斛育苗成本,压缩生产周期,提高种苗市场竞争力,借助发酵罐液体悬浮培养各参数的实时可控特性,应用于铁皮石斛无菌育苗生产,并延伸开发与之配套的种源无菌处理、光照调控、液态播种入瓶等工艺,实现铁皮石斛种胚球茎阶段在悬浮培养状态下的快速高倍数扩增,提升种苗规格一致性,提高商品苗质量.同时通过中试规模生产实践验证,降...